本發(fā)明涉及新穎式(i)羥烷基哌嗪衍生物，及其作為藥劑的用途。本發(fā)明亦涉及相關(guān)方面，包括用于制備化合物、含有一或多種式(i)化合物的醫(yī)藥組合物的方法，及尤其地其作為cxcr3受體調(diào)節(jié)劑的用途。
背景技術(shù)：
：趨化細(xì)胞素受體為一組以高親和力結(jié)合肽趨化細(xì)胞素配體的g-蛋白質(zhì)偶聯(lián)受體(gpcr)。趨化細(xì)胞素受體的主要功能為在靜息條件下以及在發(fā)炎期間引導(dǎo)白血球運至淋巴器官及組織，但某些趨化細(xì)胞素受體對非造血細(xì)胞及其祖細(xì)胞的作用亦已經(jīng)鑒別。趨化細(xì)胞素受體cxcr3為的g-蛋白質(zhì)偶聯(lián)受體，其結(jié)合至發(fā)炎趨化細(xì)胞素cxcl9(最初稱為mig，藉由干擾素-γ[inf-γ]誘導(dǎo)的單核球激素)、cxcl10(ip-10，inf-γ-誘導(dǎo)性蛋白質(zhì)10)及cxcl11(i-tac，inf-γ-誘導(dǎo)性t細(xì)胞α化學(xué)引誘劑)。cxcr3主要在活化t輔助1型(th1)淋巴細(xì)胞上表達(dá)，但亦存在于自然殺傷細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞及一小類b淋巴細(xì)胞上。三種cxcr3配體主要在發(fā)炎病狀下表達(dá)，健康組織中的表達(dá)極低?？衫缭谄芈队诎l(fā)炎性細(xì)胞激素(諸如干擾素-γ或tnf-α)后表達(dá)cxcr3配體的細(xì)胞包括不同的基質(zhì)細(xì)胞，諸如內(nèi)皮細(xì)胞、纖維母細(xì)胞、上皮細(xì)胞、角質(zhì)細(xì)胞但亦包括造血細(xì)胞，諸如巨噬細(xì)胞及單核細(xì)胞。cxcr3與其配體(此后稱為cxcr3軸)的相互作用涉及將攜帶受體的細(xì)胞引導(dǎo)至體內(nèi)特定位置，特定言之引導(dǎo)至發(fā)炎、免疫損傷及免疫功能障礙的部位，且亦與組織損害、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞生長，及血管停滯的誘導(dǎo)相關(guān)。cxcr3及其配體在不同的病理情形中上調(diào)且高度表達(dá)，該等不同病理性情形包括自體免疫病癥、發(fā)炎、感染、移植排斥、纖維化、神經(jīng)退化及癌癥。cxcr3軸在自體免疫病癥中的作用藉由若干臨床前及臨床觀測結(jié)果證實?；颊叩陌l(fā)炎病灶或血清水平的組織學(xué)分析揭示cxcr3配體水平較高或cxcr3陽性細(xì)胞數(shù)目增加的自體免疫病癥包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(ra)、全身性紅斑性狼瘡癥(sle)、狼瘡腎炎、多發(fā)性硬化(ms)、發(fā)炎性腸道疾病(ibd；包含克羅恩氏病(crohn'sdisease)及潰瘍性結(jié)腸炎)及i型糖尿病(groom,j.r.及l(fā)uster,a.d.immunolcellbiol2011,89,207；groom,j.r.及l(fā)uster,a.d.expcellres2011,317,620；lacotte,s.,brun,s.,muller,s.及dumortier,h.annnyacadsci2009,1173,310)。因為cxcr3配體在健康組織中的表達(dá)極低，因此上文所引用的相關(guān)跡象強有力地表明cxcr3在人類自體免疫疾病中的作用。使用cxcr3缺陷型小鼠(該小鼠缺乏一種cxcr3配體)或使用阻斷cxcr3或一種其配體的功能的抗體進(jìn)行的臨床前疾病模型進(jìn)一步證實cxcr3軸在免疫病變中的作用。舉例而言，已展示缺乏cxcr3或cxcr3配體cxcl9的小鼠在用于狼瘡腎炎的模型中展示減少的病變(menke,j.等人jamsocnephrol2008,19,1177)。在用于另一形式腎部發(fā)炎-間質(zhì)性膀胱炎-的動物模型中，投與阻斷cxcl10功能的抗體展示減少環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)的膀胱炎的病變(sakthivel,s.k.等人jimmunebasedthervaccines2008,6,6)。類似地，用抗體阻斷cxcl10減少了類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的大鼠模型中的病變(mohan,k.及issekutz,t.b.jimmunol2007,179,8463)。類似地，在發(fā)炎性腸道疾病的鼠模型中，針對cxcl10的阻斷抗體可預(yù)防治療情況中的病變(singh,u.p.等人jinterferoncytokineres2008,28,31)。此外，使用來自cxcr3缺陷型小鼠的組織進(jìn)行的實驗表明cxcr3在乳糜瀉-另一自體免疫型病癥-中的作用(lammers,k.m.等人gastroenterology2008,135,194)。與cxcr3軸的較高表達(dá)相關(guān)的發(fā)炎疾病包括慢性阻塞性肺部病癥(copd)、哮喘、類肉瘤病、動脈粥樣硬化及心肌炎(groom,j.r.及l(fā)uster,a.d.immunolcellbiol2011,89,207；groom,j.r.及l(fā)uster,a.d.expcellres2011,317,620)。一個研究已展示與健康個體相比，在具有copd的吸煙者的肺中cxcr3陽性細(xì)胞增加，且在具有copd的吸煙者的支氣管上皮細(xì)胞中存在針對cxcr3-配體cxcl10的免疫反應(yīng)性，但在吸煙及未吸煙對照個體的支氣管上皮細(xì)胞中不存在(saetta,m.等人amjrespircritcaremed2002,165,1404)。此等結(jié)果表明cxcr3軸可能涉及發(fā)生于具有copd的吸煙者的外周氣管中的免疫細(xì)胞募集。與此等觀測結(jié)果一致，copd的臨床前研究揭示cxcr3缺陷型小鼠中藉由煙霧誘導(dǎo)的急性肺炎的減弱(nie,l.等人respirres2008,9,82)。在一個動脈粥樣硬化研究中，在人類動脈粥樣硬化病灶內(nèi)的t細(xì)胞上發(fā)現(xiàn)cxcr3表達(dá)。在動脈粥樣化形成期間在血管壁病灶內(nèi)觀測，在與彼等病灶相關(guān)的內(nèi)皮及平滑肌細(xì)胞中均發(fā)現(xiàn)cxcr3配體cxcl9、cxcl10及cxcl11，表明其涉及cxcr3陽性細(xì)胞、特定言之活化t淋巴細(xì)胞的募集及滯留(mach,f.等人jclininvest1999,104,1041)。臨床前研究進(jìn)一步支持cxcr3在動脈粥樣硬化發(fā)展中的作用。不具有apoe的小鼠中的cxcr3基因缺失導(dǎo)致腹主動脈內(nèi)的顯著降低的動脈粥樣硬化病灶發(fā)展(veillard,n.r.等人circulation2005,112,870)。cxcr3軸的關(guān)鍵作用亦已在器官移植及骨髓移植相關(guān)毒性后的排斥反應(yīng)中表明(groom,j.r.及l(fā)uster,a.d.expcellres2011,317,620)。臨床前，cxcr3缺陷型小鼠展示對同種異體移植排斥反應(yīng)的顯著抗性(hancock,w.w.等人jexpmed2000,192,1515)。cxcr3配體血漿濃度亦與人類中的包括肝硬化及纖維化的不同肝臟病變正相關(guān)(tacke,f.,等人liverint2011,31,840)。在腫瘤學(xué)領(lǐng)域中，已提出阻斷cxcr3軸有助于限制癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移擴(kuò)散。舉例而言，投與小分子cxcr3受體拮抗劑amg487可限制腫瘤細(xì)胞癌轉(zhuǎn)移至肺(pradelli,e.等人intjcancer2009,125,2586)。cxcr3在調(diào)節(jié)b細(xì)胞慢性淋巴球性白血病(cll)中的作用的功能跡象由trentin及同事報導(dǎo)(trentin,l.等人jclininvest1999,104,115)。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中，阻斷cxcr3軸可具有有益作用且預(yù)防神經(jīng)退化。已在局部缺血、阿茲海默氏病(alzheimer'sdisease)、多發(fā)性硬化(ms)及人類免疫缺陷病毒(hiv)-腦炎中顯示cxcl10在cns中的增加表達(dá)。舉例而言，活體外實驗展示當(dāng)與源自野生型小鼠的組織相比時，源自cxcr3或cxcl10缺陷型小鼠的組織在神經(jīng)毒性nmda處理后神經(jīng)元細(xì)胞死亡減少(vanweering,h.r.等人hippocampus2011,21,220)。在謀求識別在用于亨廷頓氏病(huntington'sdisease)的模型中提供針對htt碎片誘導(dǎo)的神經(jīng)退化的神經(jīng)保護(hù)的藥物類分子的研究中，兩種cxcr3受體拮抗劑經(jīng)識別(reinhart,p.h.等人neurobioldis2011,43,248.)。已在wo2007/064553及wo2007/070433中揭示作為cxcr3受體調(diào)節(jié)劑的4-噻唑基-哌啶衍生物。已于wo2007/100610、wo2010/126811、wo2013/114332、wo2015/011099、wo2015/145322中及公告展示上揭示作為cxcr3受體調(diào)節(jié)劑的不同1-(哌嗪-1-基)-2-雜芳基-乙酮衍生物(a.prokopowicz等人,optimizationofabiarylseriesofcxcr3antagonists,第244屆美國化學(xué)會年會(244thacsnationalmeeting),philadelphia,us,2012年8月19-23日)。技術(shù)實現(xiàn)要素：現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)式(i)的羥烷基哌嗪衍生物為強效cxcr3調(diào)節(jié)劑，其可適用于治療經(jīng)由cxcr3軸介導(dǎo)或持續(xù)的疾病，包括自體免疫病癥(例如，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、發(fā)炎性腸道疾病、全身性紅斑性狼瘡癥、狼瘡腎炎、間質(zhì)性膀胱炎、乳糜瀉)、發(fā)炎病癥(例如，哮喘、copd、動脈粥樣硬化、心肌炎、類肉瘤病)、移植排斥反應(yīng)、纖維化(例如肝硬化)、神經(jīng)退化及涉及神經(jīng)元死亡的病狀(例如，阿茲海默氏病、亨廷頓氏病)及癌癥。1)在第一實施例中，本發(fā)明涉及式(i)化合物其中n表示整數(shù)1或2；x表示n或ch；r1表示雜芳基，其中雜芳基為含有1、2或3個獨立地選自氧、氮及硫(優(yōu)選氮)的雜原子的5至10元單環(huán)或雙環(huán)芳族環(huán)，且其中雜芳基獨立地未經(jīng)取代或經(jīng)單取代或二取代，其中取代基獨立地選自由以下組成的群：(c1-4)烷基；(c3-6)環(huán)烷基；(c1-4)烷氧基；(c1-2)烷氧基-(c1-2)烷基；(c1-2)烷基-羰基；羥基-(c1-4)烷基；鹵素；(c1-2)氟烷基；苯基；及雜芳基，其中該雜芳基為含有1、2或3個獨立地選自氧、氮及硫(優(yōu)選氧及氮)的雜原子的5或6元單環(huán)芳族環(huán)，且其中該雜芳基獨立地未經(jīng)取代或經(jīng)(c1-4)烷基單取代；且r2表示(c3-6)環(huán)烷基、(c1-4)烷氧基或(c1-2)氟烷基；及關(guān)于該等化合物的鹽(詳言之醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽)。除非另外明確陳述的定義提供較寬或較窄定義，否則在說明書及權(quán)利要求書中，本文中所提供的定義意欲一致地適用于如實施例1)至24)中任一項中所定義的式(i)、(ita)、(ist1)及(ist2)的化合物，且細(xì)節(jié)上作必要修改。咸理解，術(shù)語的定義或優(yōu)選定義與如本文所定義的任何或所有其他術(shù)語的任何定義或優(yōu)選定義分別獨立定義(及與其組合)且可置換各別術(shù)語。如實施例1)至24)中任一項中所定義的式(i)化合物可能含有一或多個立體中心或不對稱中心，諸如一或多個不對稱碳原子。式(i)化合物可能因此呈立體異構(gòu)體的混合物形式或呈立體異構(gòu)性富集形式，優(yōu)選呈純立體異構(gòu)體形式存在?？梢辣绢I(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的方式分離立體異構(gòu)體混合物。術(shù)語“富集”(例如當(dāng)用于對映異構(gòu)體的上下文中時)在本發(fā)明的上下文中理解為尤其意謂各別對映異構(gòu)體相對于各別其他對映異構(gòu)體以至少70:30的比率(細(xì)節(jié)上作必要修改：純度)，且尤其以至少90:10(細(xì)節(jié)上作必要修改：70％/90％的純度)存在。優(yōu)選地，該術(shù)語系指基本上純的各別對映異構(gòu)體。術(shù)語“基本上”(例如當(dāng)用于諸如“基本上純的”的術(shù)語中時)在本發(fā)明的上下文中理解為尤其意謂各別立體異構(gòu)體/組合物/化合物等等以按各別純立體異構(gòu)體/組合物/化合物等等的重量計至少90％，尤其至少95％且尤其至少99％的量存在。術(shù)語“鹵素”意謂氟、氯、溴或碘。倘若“鹵素”為以“r1”表示的“雜芳基”的取代基，則術(shù)語“鹵素”優(yōu)選意謂氟或氯，且更優(yōu)選為氟。單獨或組合使用的術(shù)語“烷基”系指含有一至四個碳原子的直鏈或分支鏈飽和烴鏈。術(shù)語“(cx-y)烷基”(x及y各自為整數(shù))系指含有x至y個碳原子的如先前所定義的烷基。舉例而言，(c1-4)烷基含有一至四個碳原子。(c1-4)烷基的實例為甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基及叔丁基。(c1-3)烷基的實例為甲基、乙基、正丙基及異丙基。(c1-2)烷基的實例為甲基及乙基。倘若“(cx-y)烷基”為以“r1”表示的“雜芳基”的取代基，則術(shù)語“(cx-y)烷基”意謂甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基及叔丁基且優(yōu)選為甲基、乙基、異丙基及叔丁基。倘若“(cx-y)烷基”為自以“r1”表示的“雜芳基”的取代基本身的“雜芳基”的取代基(或倘若“(cx-y)烷基”為以“r1a”表示的“雜芳基”的取代基)，則術(shù)語“(cx-y)烷基”意謂甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基及叔丁基，且優(yōu)選為甲基。倘若r1a表示“(cx-y)烷基”，則術(shù)語意謂甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基及叔丁基；優(yōu)選甲基、乙基、異丙基及叔丁基；且更優(yōu)選為甲基、乙基及異丙基。倘若r1b表示“(cx-y)烷基”，則術(shù)語意謂甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基及叔丁基；優(yōu)選為甲基及乙基；且更優(yōu)選為甲基。單獨或組合使用的術(shù)語“烷氧基”系指烷基如先前所定義的烷基-o-基團(tuán)。術(shù)語“(cx-y)烷氧基”(x及y各自為整數(shù))系指含有x至y個碳原子的如先前所定義的烷氧基。舉例而言，(c1-4)烷氧基意謂式(c1-4)烷基-o-的基團(tuán)，其中術(shù)語“(c1-4)烷基”具有先前給出的意義。(c1-4)烷氧基的實例為甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、仲丁氧基及叔丁氧基。(c1-2)烷氧基的實例為甲氧基及乙氧基。倘若“(cx-y)烷氧基”為表示“r1”的“雜芳基”的取代基，則術(shù)語“(cx-y)烷氧基”意謂甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、仲丁氧基及叔丁氧基，且優(yōu)選為甲氧基。倘若r2表示“(cx-y)烷氧基”，則術(shù)語意謂甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、仲丁氧基及叔丁氧基，且優(yōu)選為乙氧基。單獨或組合使用的術(shù)語“羥基-(c1-4)烷基”系指含有一至四個碳原子的如先前所定義的烷基，其中一個氫原子已經(jīng)羥基置換。該等基團(tuán)的實例為羥基-甲基、1-羥基-乙基、2-羥基-乙基、1-羥基-丙-1-基、2-羥基-丙-1-基、3-羥基-丙-1-基、1-羥基-丙-2-基、2-羥基-丙-2-基、1-羥基-丁-1-基、2-羥基-丁-1-基、3-羥基-丁-1-基、4-羥基-丁-1-基、1-羥基-丁-2-基、2-羥基-丁-2-基、3-羥基-丁-2-基、4-羥基-丁-2-基、1-羥基-2-甲基-丙-1-基、2-羥基-2-甲基-丙-1-基、3-羥基-2-甲基-丙-1-基及2-羥基-1,1-二甲基-乙-1-基。倘若“羥基-(c1-4)烷基”為表示“r1”的“雜芳基”的取代基(或倘若“r1a”表示“羥基-(c1-4)烷基”)，則術(shù)語“羥基-(c1-4)烷基”意謂羥基-甲基、1-羥基-乙基、2-羥基-乙基、1-羥基-丙-1-基、2-羥基-丙-1-基、3-羥基-丙-1-基、1-羥基-丙-2-基、2-羥基-丙-2-基、1-羥基-丁-1-基、2-羥基-丁-1-基、3-羥基-丁-1-基、4-羥基-丁-1-基、1-羥基-丁-2-基、2-羥基-丁-2-基、3-羥基-丁-2-基、4-羥基-丁-2-基、1-羥基-2-甲基-丙-1-基、2-羥基-2-甲基-丙-1-基、3-羥基-2-甲基-丙-1-基及2-羥基-1,1-二甲基-乙-1-基。優(yōu)選為羥基-甲基及1-羥基-乙基且更優(yōu)選為1-羥基-乙基。術(shù)語“(cxa-ya)烷氧基-(cx-y)烷基”(x、xa、y及ya各自為整數(shù))系指含有x至y個碳原子的如先前所定義的烷基，其中一個氫原子已經(jīng)含有xa至ya個碳原子的如先前所定義的(cxa-ya)烷氧基置換。舉例而言，“(c1-2)烷氧基-(c1-2)烷基”系指含有一或兩個碳原子的如先前所定義的(c1-2)烷基，其中一個氫原子已經(jīng)含有一或兩個碳原子的如先前所定義的(c1-2)烷氧基置換。(c1-2)烷氧基-(c1-2)烷基的實例為甲氧基-甲基、1-甲氧基-乙基、2-甲氧基-乙基、乙氧基-甲基、1-乙氧基-乙基及2-乙氧基-乙基。倘若“(c1-2)烷氧基-(c1-2)烷基”為表示“r1”的“雜芳基”的取代基(或倘若“r1a”表示“(c1-2)烷氧基-(c1-2)烷基”)，則術(shù)語“(c1-2)烷氧基-(c1-2)烷基”意謂甲氧基-甲基、1-甲氧基-乙基、2-甲氧基-乙基、乙氧基-甲基、1-乙氧基-乙基及2-乙氧基-乙基，且優(yōu)選為甲氧基-甲基。術(shù)語“氟烷基”系指含有一或兩個碳原子的如先前所定義的烷基，其中一或多個(且可能所有)氫原子已經(jīng)氟置換。術(shù)語“(cx-y)氟烷基”(x及y各自為整數(shù))系指含有x至y個碳原子的如先前所定義的氟烷基。舉例而言，(c1-2)氟烷基含有一或兩個碳原子，其中一至五個氫原子已經(jīng)氟置換。(c1-2)氟烷基的代表性實例包括氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、1-氟乙基、1,1-二氟乙基、2-氟乙基、2,2-二氟乙基及2,2,2-三氟乙基。倘若“(cx-y)氟烷基”為表示“r1”的“雜芳基”的取代基(或倘若“r1a”表示“(cx-y)氟烷基)”，則術(shù)語“(cx-y)氟烷基”優(yōu)選意謂氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、1-氟乙基、1,1-二氟乙基、2-氟乙基、2,2-二氟乙基及2,2,2-三氟乙基，且更優(yōu)選為二氟甲基及三氟甲基。倘若r2表示“(cx-y)氟烷基”，則術(shù)語優(yōu)選意謂氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、1-氟乙基、1,1-二氟乙基、2-氟乙基、2,2-二氟乙基及2,2,2-三氟乙基，且更優(yōu)選為三氟甲基。術(shù)語“(cx-y)烷基-羰基”(x及y各自為整數(shù))系指經(jīng)由羰基連接至分子的其余部分的含有x至y個碳原子的如先前所定義的烷基。舉例而言，(c1-2)烷基-羰基在烷基部分中含有一或兩個碳原子且經(jīng)由羰基連接至分子的其余部分。“(c1-2)烷基-羰基”的實例為甲基-羰基及乙基-羰基。倘若“(c1-2)烷基-羰基”為表示“r1”的“雜芳基”的取代基(或倘若“r1a”表示“(c1-2)烷基-羰基”)，則術(shù)語“(c1-2)烷基-羰基”意謂甲基-羰基及乙基-羰基，且優(yōu)選為甲基-羰基(乙?；?。單獨或組合使用的術(shù)語“環(huán)烷基”系指含有三至六個碳原子的飽和碳環(huán)。術(shù)語“(cx-y)環(huán)烷基”(x及y各自為整數(shù))系指含有x至y個碳原子的如先前所定義的環(huán)烷基。舉例而言，(c3-6)環(huán)烷基含有三至六個碳原子。(c3-6)環(huán)烷基的實例為環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基及環(huán)己基。倘若“(c3-6)環(huán)烷基”為表示“r1”的“雜芳基”的取代基(或倘若“r1a”表示“(c3-6)環(huán)烷基”)，則術(shù)語“(c3-6)環(huán)烷基”意謂環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基及環(huán)己基，優(yōu)選環(huán)丙基及環(huán)丁基且更優(yōu)選環(huán)丙基。倘若“r2”表示“(c3-6)環(huán)烷基”，則術(shù)語意謂環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基及環(huán)己基且優(yōu)選為環(huán)丙基。單獨或組合使用的術(shù)語“雜芳基”系指基團(tuán)可如所特定定義未經(jīng)取代或經(jīng)取代的如所特定定義的雜芳基?！半s芳基，其中雜芳基為含有1、2或3個獨立地選自氧、氮及硫的雜原子的5至10元元單環(huán)或雙環(huán)芳族環(huán)”的實例為呋喃基、噁唑基、異噁唑基、噁二唑基、噻吩基、噻唑基、異噻唑基、噻二唑基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、三唑基、吡啶基、嘧啶基、噠嗪基、吡嗪基、三嗪基、吲哚基、異吲哚基、苯并呋喃基、異苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并異噁唑基、苯并噻唑基、苯并異噻唑基、苯并三唑基、苯并噁二唑基、苯并噻二唑基、喹啉基、異喹啉基、萘啶基、噌啉基、喹唑啉基、喹喔啉基、酞嗪基、吡咯并吡啶基、吡唑并吡啶基及咪唑并吡啶基。在雜芳基具有更受限的定義的情況下，實例的列表可藉由考慮各別限制自前述清單解釋。舉例而言，“雜芳基，其中雜芳基為含有1、2或3個獨立地選自氧、氮及硫的雜原子的5或6元單環(huán)芳族環(huán)”的實例為呋喃基、噁唑基、異噁唑基、噁二唑基、噻吩基、噻唑基、異噻唑基、噻二唑基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、三唑基、吡啶基、嘧啶基、噠嗪基、吡嗪基及三嗪基。表示“r1”的“雜芳基”的優(yōu)選實例為吡唑基(尤其吡唑-1-基)、三唑基(尤其[1,2,4]三唑-1-基)、吲哚基(尤其吲哚-1-基)、苯并咪唑基(尤其苯并咪唑-1-基)及咪唑并[4,5-b]吡啶基(尤其咪唑并[4,5-b]吡啶-3-基)，且最優(yōu)選為[1,2,4]三唑-1-基；雜芳基可如所特定定義未經(jīng)取代或經(jīng)取代；表示“r1”的“未經(jīng)取代或經(jīng)取代的雜芳基”的優(yōu)選實例為3-甲基-吡唑-1-基、3-甲基-[1,2,4]三唑-1-基、3-乙基-[1,2,4]三唑-1-基、3-異丙基-[1,2,4]三唑-1-基、3-叔丁基-[1,2,4]三唑-1-基、3-環(huán)丙基-[1,2,4]三唑-1-基、3-環(huán)丁基-[1,2,4]三唑-1-基、3-甲氧基甲基-[1,2,4]三唑-1-基、3-乙?；?[1,2,4]三唑-1-基、3-(1-羥基-乙基)-[1,2,4]三唑-1-基、3-二氟甲基-[1,2,4]三唑-1-基、3-三氟甲基-[1,2,4]三唑-1-基、3-苯基-[1,2,4]三唑-1-基、3-(5-甲基-[1,2,4]噁二唑-3-基)-[1,2,4]三唑-1-基、3-(吡啶-2-基)-[1,2,4]三唑-1-基、5-甲基-[1,2,4]三唑-1-基、5-乙基-[1,2,4]三唑-1-基、3,5-二甲基-[1,2,4]三唑-1-基、3-乙基-5-甲基-[1,2,4]三唑-1-基、5-乙基-3-甲基-[1,2,4]三唑-1-基、5-甲氧基-吲哚-1-基、5-氟-吲哚-1-基、苯并咪唑-1-基及咪唑并[4,5-b]吡啶-3-基。其他實例為3-乙基-吡唑-1-基及3-環(huán)丙基-吡唑-1-基。為表示“r1”的雜芳基的取代基的“雜芳基”(或表示“r1a”的“雜芳基”)的優(yōu)選實例為噁二唑基(尤其[1,2,4]噁二唑-3-基)及吡啶基(尤其吡啶-2-基)；雜芳基可如所特定定義未經(jīng)取代或經(jīng)取代；為表示“r1”的雜芳基的取代基的“未經(jīng)取代或經(jīng)取代的雜芳基”(或表示“r1a”的“未經(jīng)取代或經(jīng)取代的雜芳基”)的優(yōu)選實例為5-甲基-[1,2,4]噁二唑-3-基及吡啶-2-基。2)本發(fā)明的另一實施例涉及如實施例1)的式(i)化合物，其中n表示整數(shù)1或2；x表示n；r1表示雜芳基，其中雜芳基為含有1、2或3個氮原子的5至10元單環(huán)或雙環(huán)芳族環(huán)，且其中雜芳基獨立地未經(jīng)取代或經(jīng)單取代或二取代，其中取代基獨立地選自由以下組成的群：(c1-4)烷基；(c3-6)環(huán)烷基；(c1-4)烷氧基；(c1-2)烷氧基-(c1-2)烷基；(c1-2)烷基-羰基；羥基-(c1-4)烷基；鹵素；及(c1-2)氟烷基；且r2表示(c3-6)環(huán)烷基、(c1-4)烷氧基或(c1-2)氟烷基；及關(guān)于該等化合物的鹽(詳言之醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽)。3)本發(fā)明的另一實施例涉及如實施例1)的式(i)化合物，其中n表示整數(shù)1或2；x表示n；r1表示獨立地經(jīng)單取代或二取代的含有2或3個氮原子的5元單環(huán)雜芳基，其中取代基獨立地選自由以下組成的群：(c1-4)烷基、(c3-6)環(huán)烷基、(c1-2)烷氧基-(c1-2)烷基、羥基-(c1-4)烷基及(c1-2)氟烷基；或未經(jīng)取代或經(jīng)(c1-4)烷氧基或鹵素單取代的含有1、2或3個氮原子的9元雙環(huán)芳族環(huán)；且r2表示(c3-6)環(huán)烷基、(c1-4)烷氧基或三氟甲基；及關(guān)于該等化合物的鹽(詳言之醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽)。4)本發(fā)明的另一實施例涉及如實施例1)至3)中任一項的式(i)化合物，其中n表示整數(shù)1；及關(guān)于該等化合物的鹽(詳言之醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽)。5)本發(fā)明的另一實施例涉及如實施例1)至3)中任一項的式(i)化合物，其中n表示整數(shù)2；及關(guān)于該等化合物的鹽(詳言之醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽)。6)本發(fā)明的另一實施例涉及如實施例1)至5)中任一項的式(i)化合物，其中r1表示獨立地經(jīng)單取代或二取代的含有2或3個氮原子的5元單環(huán)雜芳基，其中取代基獨立地選自由以下組成的群：(c1-4)烷基、(c3-6)環(huán)烷基及(c1-2)氟烷基；及關(guān)于該等化合物的鹽(詳言之醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽)。7)本發(fā)明的另一實施例涉及如實施例1)至6)中任一項的式(i)化合物，其中r2表示三氟甲基；及關(guān)于該等化合物的鹽(詳言之醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽)。8)本發(fā)明的另一實施例涉及如實施例1)的式(i)化合物，其亦為式(ita)化合物其中n表示整數(shù)1或2；r1a表示氫、(c1-4)烷基、(c3-6)環(huán)烷基、(c1-2)烷氧基-(c1-2)烷基、(c1-2)烷基-羰基、羥基-(c1-4)烷基、(c1-2)氟烷基、苯基或雜芳基，其中雜芳基為含有1、2或3個獨立地選自氧、氮及硫(優(yōu)選氧及氮)的雜原子的5或6元單環(huán)芳族環(huán)，且其中雜芳基獨立地未經(jīng)取代或經(jīng)(c1-4)烷基單取代；r1b表示氫或(c1-4)烷基；且r2表示(c3-6)環(huán)烷基、(c1-4)烷氧基或(c1-2)氟烷基；及關(guān)于該等化合物的鹽(詳言之醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽)。9)本發(fā)明的另一實施例涉及如實施例8)的式(ita)化合物，其中n表示整數(shù)1或2；r1a表示(c1-4)烷基、(c3-6)環(huán)烷基、(c1-2)烷氧基-(c1-2)烷基、(c1-2)烷基-羰基、羥基-(c1-4)烷基或(c1-2)氟烷基；且r1b表示氫或(c1-4)烷基；或r1a表示氫且r1b表示(c1-4)烷基；且r2表示(c3-6)環(huán)烷基、(c1-4)烷氧基或(c1-2)氟烷基；及關(guān)于該等化合物的鹽(詳言之醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽)。10)本發(fā)明的另一實施例涉及如實施例8)的式(ita)化合物，其中n表示整數(shù)1或2；r1a表示(c1-4)烷基或(c3-6)環(huán)烷基；r1b表示氫或(c1-4)烷基；且r2表示環(huán)丙基、乙氧基或三氟甲基；及關(guān)于該等化合物的鹽(詳言之醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽)。11)本發(fā)明的另一實施例涉及如實施例8)至10)中任一項的式(ita)化合物，其中n表示整數(shù)1；及關(guān)于該等化合物的鹽(詳言之醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽)。12)本發(fā)明的另一實施例涉及如實施例8)至10)中任一項的式(ita)化合物，其中n表示整數(shù)2；及關(guān)于該等化合物的鹽(詳言之醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽)。13)本發(fā)明的另一實施例涉及如實施例8)、9)、11)或12)中任一項的式(ita)化合物，其中r1a表示(c1-4)烷基、(c3-6)環(huán)烷基、(c1-2)烷氧基-(c1-2)烷基、羥基-(c1-4)烷基或(c1-2)氟烷基；及關(guān)于該等化合物的鹽(詳言之醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽)。14)本發(fā)明的另一實施例涉及如實施例8)、9)、11)或12)中任一項的式(ita)化合物，其中r1a表示(c1-4)烷基或(c3-6)環(huán)烷基；及關(guān)于該等化合物的鹽(詳言之醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽)。15)本發(fā)明的另一實施例涉及如實施例8)至12)中任一項的式(ita)化合物，其中r1a表示甲基、乙基、異丙基或環(huán)丙基；及關(guān)于該等化合物的鹽(詳言之醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽)。16)本發(fā)明的另一實施例涉及如實施例8)至15)中任一項的式(ita)化合物，其中r1b表示氫；及關(guān)于該等化合物的鹽(詳言之醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽)。17)本發(fā)明的另一實施例涉及如實施例8)至15)中任一項的式(ita)化合物，其中r1b表示甲基；及關(guān)于該等化合物的鹽(詳言之醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽)。18)本發(fā)明的另一實施例涉及如實施例8)、9)或11)至17)中任一項的式(ita)化合物，其中r2表示(c1-4)烷氧基或(c1-2)氟烷基；及關(guān)于該等化合物的鹽(詳言之醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽)。19)本發(fā)明的另一實施例涉及如實施例8)至17)中任一項的式(ita)化合物，其中r2表示三氟甲基；及關(guān)于該等化合物的鹽(詳言之醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽)。20)本發(fā)明的另一實施例涉及如實施例1)至19)中任一項的化合物，其中立體對稱中心的絕對構(gòu)型如式(ist1)中所描繪及關(guān)于該等化合物的鹽(詳言之醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽)。22)如實施例1)中所定義的式(i)化合物的實例系選自由以下組成的群：2-(3-叔丁基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(s)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮；2-(3,5-二甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(s)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮；2-(3-環(huán)丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(s)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮；1-{(s)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(3-異丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮；1-{(s)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(3-三氟甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮；1-{(s)-4-[4-(2-乙氧基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-羥甲基-哌嗪-1-基}-2-(3-三氟甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮；2-(3,5-二甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(s)-4-[4-(2-乙氧基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-羥甲基-哌嗪-1-基}-乙酮；1-{(s)-4-[4-(2-環(huán)丙基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-羥甲基-哌嗪-1-基}-2-(3,5-二甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮；1-{(s)-4-[4-(2-環(huán)丙基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-羥甲基-哌嗪-1-基}-2-(3-三氟甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮；1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(6-三氟甲基-吡啶-3-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(3-異丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮；1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(3-異丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮；2-(3,5-二甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮；2-苯并咪唑-1-基-1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮；2-(5-氟-吲哚-1-基)-1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮；1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(5-甲氧基-吲哚-1-基)-乙酮；1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(3-甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮；1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(3-甲氧基甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮；1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-[3-(5-甲基-[1,2,4]噁二唑-3-基)-[1,2,4]三唑-1-基]-乙酮；1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(3-苯基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮；2-(3-乙?；?[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮；2-[3-(1-羥基-乙基)-[1,2,4]三唑-1-基]-1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮；1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(3-甲基-吡唑-1-基)-乙酮；1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(3-吡啶-2-基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮；2-(3-乙基-5-甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮；2-(5-乙基-3-甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮；1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-咪唑并[4,5-b]吡啶-3-基-乙酮；2-(3,5-二甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-(2-羥基-乙基)-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮；1-{(r)-2-(2-羥基-乙基)-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(3-三氟甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮；2-(3-環(huán)丁基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-(2-羥基-乙基)-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮；2-(3-叔丁基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-(2-羥基-乙基)-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮；2-(3-環(huán)丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-(2-羥基-乙基)-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮；2-(3-乙基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-(2-羥基-乙基)-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮；2-(5-乙基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-(2-羥基-乙基)-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮；1-{(r)-2-(2-羥基-乙基)-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(3-異丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮；1-{(r)-2-(2-羥基-乙基)-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(3-甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮；1-{(r)-2-(2-羥基-乙基)-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(5-甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮；1-{(r)-2-(2-羥基-乙基)-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(3-甲氧基甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮；及2-(3-二氟甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮；或該等化合物的鹽(詳言之醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽)。23)如實施例1)中所定義的式(i)化合物的其他實例選自由以下組成的群：1-{(r)-2-(2-羥基-乙基)-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(3-甲基-吡唑-1-基)-乙酮；2-(3-乙基-吡唑-1-基)-1-{(r)-2-(2-羥基-乙基)-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮；2-(3-環(huán)丙基-吡唑-1-基)-1-{(r)-2-(2-羥基-乙基)-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮；1-{(s)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(3-甲基-吡唑-1-基)-乙酮；2-(3-乙基-吡唑-1-基)-1-{(s)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮；及2-(3-環(huán)丙基-吡唑-1-基)-1-{(s)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮；或該等化合物的鹽(詳言之醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽)。24)本發(fā)明因此涉及如實施例1)中所定義的式(i)化合物、如實施例8)中所定義的式(ita)化合物、如實施例20)中所定義的式(ist1)化合物、如實施例21)中所定義的式(ist2)化合物及關(guān)于進(jìn)一步藉由實施例2)至7)、9)至19)、22)及23)中任一項的特性限制的該等化合物，所有化合物考慮其各別相依性；關(guān)于其醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽；及關(guān)于該等化合物作為藥劑尤其在治療與cxcr3受體功能障礙或經(jīng)由cxcr3信號傳導(dǎo)的配體功能障礙相關(guān)的病癥中的用途，該等病癥尤其諸如自體免疫病癥、發(fā)炎疾病、感染性疾病、移植排斥反應(yīng)、纖維化、神經(jīng)退化病癥及癌癥。尤其地與式(i)、(ita)、(ist1)及(ist2)的化合物相關(guān)的以下實施例因此為可能且預(yù)期的，且特此以個別化形式具體揭示：1、2+1、3+1、4+1、4+2+1、4+3+1、5+1、5+2+1、5+3+1、6+1、6+2+1、6+3+1、6+4+1、6+4+2+1、6+4+3+1、6+5+1、6+5+2+1、6+5+3+1、7+1、7+2+1、7+3+1、7+4+1、7+4+2+1、7+4+3+1、7+5+1、7+5+2+1、7+5+3+1、7+6+1、7+6+2+1、7+6+3+1、7+6+4+1、7+6+4+2+1、7+6+4+3+1、7+6+5+1、7+6+5+2+1、7+6+5+3+1、8+1、9+8+1、10+8+1、11+8+1、11+9+8+1、11+10+8+1、12+8+1、12+9+8+1、12+10+8+1、13+8+1、13+9+8+1、13+11+8+1、13+11+9+8+1、13+11+10+8+1、13+12+8+1、13+12+9+8+1、13+12+10+8+1、14+8+1、14+9+8+1、14+11+8+1、14+11+9+8+1、14+11+10+8+1、14+12+8+1、14+12+9+8+1、14+12+10+8+1、15+8+1、15+9+8+1、15+10+8+1、15+11+8+1、15+11+9+8+1、15+11+10+8+1、15+12+8+1、15+12+9+8+1、15+12+10+8+1、16+8+1、16+9+8+1、16+10+8+1、16+11+8+1、16+11+9+8+1、16+11+10+8+1、16+12+8+1、16+12+9+8+1、16+12+10+8+1、16+13+8+1、16+13+9+8+1、16+13+11+8+1、16+13+11+9+8+1、16+13+11+10+8+1、16+13+12+8+1、16+13+12+9+8+1、16+13+12+10+8+1、16+14+8+1、16+14+9+8+1、16+14+11+8+1、16+14+11+9+8+1、16+14+11+10+8+1、16+14+12+8+1、16+14+12+9+8+1、16+14+12+10+8+1、16+15+8+1、16+15+9+8+1、16+15+10+8+1、16+15+11+8+1、16+15+11+9+8+1、16+15+11+10+8+1、16+15+12+8+1、16+15+12+9+8+1、16+15+12+10+8+1、17+8+1、17+9+8+1、17+10+8+1、17+11+8+1、17+11+9+8+1、17+11+10+8+1、17+12+8+1、17+12+9+8+1、17+12+10+8+1、17+13+8+1、17+13+9+8+1、17+13+11+8+1、17+13+11+9+8+1、17+13+11+10+8+1、17+13+12+8+1、17+13+12+9+8+1、17+13+12+10+8+1、17+14+8+1、17+14+9+8+1、17+14+11+8+1、17+14+11+9+8+1、17+14+11+10+8+1、17+14+12+8+1、17+14+12+9+8+1、17+14+12+10+8+1、17+15+8+1、17+15+9+8+1、17+15+10+8+1、17+15+11+8+1、17+15+11+9+8+1、17+15+11+10+8+1、17+15+12+8+1、17+15+12+9+8+1、17+15+12+10+8+1、18+8+1、18+9+8+1、18+11+8+1、18+11+9+8+1、18+11+10+8+1、18+12+8+1、18+12+9+8+1、18+12+10+8+1、18+13+8+1、18+13+9+8+1、18+13+11+8+1、18+13+11+9+8+1、18+13+11+10+8+1、18+13+12+8+1、18+13+12+9+8+1、18+13+12+10+8+1、18+14+8+1、18+14+9+8+1、18+14+11+8+1、18+14+11+9+8+1、18+14+11+10+8+1、18+14+12+8+1、18+14+12+9+8+1、18+14+12+10+8+1、18+15+8+1、18+15+9+8+1、18+15+10+8+1、18+15+11+8+1、18+15+11+9+8+1、18+15+11+10+8+1、18+15+12+8+1、18+15+12+9+8+1、18+15+12+10+8+1、18+16+8+1、18+16+9+8+1、18+16+10+8+1、18+16+11+8+1、18+16+11+9+8+1、18+16+11+10+8+1、18+16+12+8+1、18+16+12+9+8+1、18+16+12+10+8+1、18+16+13+8+1、18+16+13+9+8+1、18+16+13+11+8+1、18+16+13+11+9+8+1、18+16+13+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+13+12+9+8+1、21+18+13+12+10+8+1、21+18+14+8+1、21+18+14+9+8+1、21+18+14+11+8+1、21+18+14+11+9+8+1、21+18+14+11+10+8+1、21+18+14+12+8+1、21+18+14+12+9+8+1、21+18+14+12+10+8+1、21+18+15+8+1、21+18+15+9+8+1、21+18+15+10+8+1、21+18+15+11+8+1、21+18+15+11+9+8+1、21+18+15+11+10+8+1、21+18+15+12+8+1、21+18+15+12+9+8+1、21+18+15+12+10+8+1、21+18+16+8+1、21+18+16+9+8+1、21+18+16+10+8+1、21+18+16+11+8+1、21+18+16+11+9+8+1、21+18+16+11+10+8+1、21+18+16+12+8+1、21+18+16+12+9+8+1、21+18+16+12+10+8+1、21+18+16+13+8+1、21+18+16+13+9+8+1、21+18+16+13+11+8+1、21+18+16+13+11+9+8+1、21+18+16+13+11+10+8+1、21+18+16+13+12+8+1、21+18+16+13+12+9+8+1、21+18+16+13+12+10+8+1、21+18+16+14+8+1、21+18+16+14+9+8+1、21+18+16+14+11+8+1、21+18+16+14+11+9+8+1、21+18+16+14+11+10+8+1、21+18+16+14+12+8+1、21+18+16+14+12+9+8+1、21+18+16+14+12+10+8+1、21+18+16+15+8+1、21+18+16+15+9+8+1、21+18+16+15+10+8+1、21+18+16+15+11+8+1、21+18+16+15+11+9+8+1、21+18+16+15+11+10+8+1、21+18+16+15+12+8+1、21+18+16+15+12+9+8+1、21+18+16+15+12+10+8+1、21+18+17+8+1、21+18+17+9+8+1、21+18+17+10+8+1、21+18+17+11+8+1、21+18+17+11+9+8+1、21+18+17+11+10+8+1、21+18+17+12+8+1、21+18+17+12+9+8+1、21+18+17+12+10+8+1、21+18+17+13+8+1、21+18+17+13+9+8+1、21+18+17+13+11+8+1、21+18+17+13+11+9+8+1、21+18+17+13+11+10+8+1、21+18+17+13+12+8+1、21+18+17+13+12+9+8+1、21+18+17+13+12+10+8+1、21+18+17+14+8+1、21+18+17+14+9+8+1、21+18+17+14+11+8+1、21+18+17+14+11+9+8+1、21+18+17+14+11+10+8+1、21+18+17+14+12+8+1、21+18+17+14+12+9+8+1、21+18+17+14+12+10+8+1、21+18+17+15+8+1、21+18+17+15+9+8+1、21+18+17+15+10+8+1、21+18+17+15+11+8+1、21+18+17+15+11+9+8+1、21+18+17+15+11+10+8+1、21+18+17+15+12+8+1、21+18+17+15+12+9+8+1、21+18+17+15+12+10+8+1、21+19+8+1、21+19+9+8+1、21+19+10+8+1、21+19+11+8+1、21+19+11+9+8+1、21+19+11+10+8+1、21+19+12+8+1、21+19+12+9+8+1、21+19+12+10+8+1、21+19+13+8+1、21+19+13+9+8+1、21+19+13+11+8+1、21+19+13+11+9+8+1、21+19+13+11+10+8+1、21+19+13+12+8+1、21+19+13+12+9+8+1、21+19+13+12+10+8+1、21+19+14+8+1、21+19+14+9+8+1、21+19+14+11+8+1、21+19+14+11+9+8+1、21+19+14+11+10+8+1、21+19+14+12+8+1、21+19+14+12+9+8+1、21+19+14+12+10+8+1、21+19+15+8+1、21+19+15+9+8+1、21+19+15+10+8+1、21+19+15+11+8+1、21+19+15+11+9+8+1、21+19+15+11+10+8+1、21+19+15+12+8+1、21+19+15+12+9+8+1、21+19+15+12+10+8+1、21+19+16+8+1、21+19+16+9+8+1、21+19+16+10+8+1、21+19+16+11+8+1、21+19+16+11+9+8+1、21+19+16+11+10+8+1、21+19+16+12+8+1、21+19+16+12+9+8+1、21+19+16+12+10+8+1、21+19+16+13+8+1、21+19+16+13+9+8+1、21+19+16+13+11+8+1、21+19+16+13+11+9+8+1、21+19+16+13+11+10+8+1、21+19+16+13+12+8+1、21+19+16+13+12+9+8+1、21+19+16+13+12+10+8+1、21+19+16+14+8+1、21+19+16+14+9+8+1、21+19+16+14+11+8+1、21+19+16+14+11+9+8+1、21+19+16+14+11+10+8+1、21+19+16+14+12+8+1、21+19+16+14+12+9+8+1、21+19+16+14+12+10+8+1、21+19+16+15+8+1、21+19+16+15+9+8+1、21+19+16+15+10+8+1、21+19+16+15+11+8+1、21+19+16+15+11+9+8+1、21+19+16+15+11+10+8+1、21+19+16+15+12+8+1、21+19+16+15+12+9+8+1、21+19+16+15+12+10+8+1、21+19+17+8+1、21+19+17+9+8+1、21+19+17+10+8+1、21+19+17+11+8+1、21+19+17+11+9+8+1、21+19+17+11+10+8+1、21+19+17+12+8+1、21+19+17+12+9+8+1、21+19+17+12+10+8+1、21+19+17+13+8+1、21+19+17+13+9+8+1、21+19+17+13+11+8+1、21+19+17+13+11+9+8+1、21+19+17+13+11+10+8+1、21+19+17+13+12+8+1、21+19+17+13+12+9+8+1、21+19+17+13+12+10+8+1、21+19+17+14+8+1、21+19+17+14+9+8+1、21+19+17+14+11+8+1、21+19+17+14+11+9+8+1、21+19+17+14+11+10+8+1、21+19+17+14+12+8+1、21+19+17+14+12+9+8+1、21+19+17+14+12+10+8+1、21+19+17+15+8+1、21+19+17+15+9+8+1、21+19+17+15+10+8+1、21+19+17+15+11+8+1、21+19+17+15+11+9+8+1、21+19+17+15+11+10+8+1、21+19+17+15+12+8+1、21+19+17+15+12+9+8+1、21+19+17+15+12+10+8+1、22+1及23+1；在以上列表中，數(shù)字系指根據(jù)上文所提供實施例編號而定的實施例，而“+”指示與另一實施例的相依性。不同個別化實施例藉由頓號分離。換言之，舉例而言，“4+2+1”系指實施例4)依附于實施例2)、依附于實施例1)，亦即實施例“4+2+1”對應(yīng)于進(jìn)一步由實施例2)及4)的特征限制的實施例1)的化合物。當(dāng)復(fù)數(shù)形式用于化合物、鹽、醫(yī)藥組合物、疾病或其類似物時，此亦欲意謂單一化合物、鹽、醫(yī)藥組合物、疾病或其類似物。適當(dāng)且有利時，對如實施例1)至24)中任一項所定義的式(i)化合物的任何提及應(yīng)理解為亦提及該等化合物的鹽(且尤其醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽)。術(shù)語“醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽”系指保持本發(fā)明化合物的所需生物活性且呈現(xiàn)最小非所需毒理學(xué)作用的鹽。視本發(fā)明化合物中堿性及/或酸性基團(tuán)的存在而定，該等鹽包括無機(jī)或有機(jī)酸及/或堿加成鹽。關(guān)于參考文獻(xiàn)，參看例如『handbookofpharmaceuticalsalts.properties,selectionanduse.』,p.heinrichstahl,camilleg.wermuth(編),wiley-vch,2008及『pharmaceuticalsaltsandco-crystals』,johanwouters及l(fā)ucquéré(編),rscpublishing,2012。本發(fā)明亦包括同位素標(biāo)記、尤其2h(氘)標(biāo)記的式(i)化合物，該等化合物除了一或多個原子已各經(jīng)具有相同原子序數(shù)但原子質(zhì)量與自然界中通常所見的原子質(zhì)量不同的原子置換之外，與式(i)化合物相同。經(jīng)同位素標(biāo)記、尤其經(jīng)2h(氘)標(biāo)記的式(i)化合物及其鹽在本發(fā)明范疇之內(nèi)。用較重同位素2h(氘)取代氫可產(chǎn)生較大代謝穩(wěn)定性，從而例如延長活體內(nèi)半衰期或降低劑量需求，或可導(dǎo)致對細(xì)胞色素p450酶的抑制降低，從而例如改良安全概況。在本發(fā)明的一個實施例中，式(i)化合物未經(jīng)同位素標(biāo)記或其僅用一或多個氘原子標(biāo)記。在一子實施例中，式(i)化合物完全未經(jīng)同位素標(biāo)記。同位素標(biāo)記的式(i)化合物可以類似于下文所描述的方法，但使用適合試劑或起始物質(zhì)的適當(dāng)同位素變體來制備。每當(dāng)使用字語“之間”來描述數(shù)值范圍時，應(yīng)理解所指示范圍的端點明確地包括在范圍內(nèi)。舉例而言：若溫度范圍描述為在40℃與80℃之間，則此意謂在該范圍內(nèi)包括端點40℃及80℃；或若定義變量為1與4之間的一整數(shù)，則此意謂該變數(shù)為整數(shù)1、2、3或4。除非關(guān)于溫度使用，否則置放在數(shù)值“x”之前的術(shù)語“約”(或者“大約”)在本申請案中系指一自x減10％x延伸至x加10％x的區(qū)間，且優(yōu)選指一自x減5％x延伸至x加5％x的區(qū)間。在溫度的特殊情況中，置放在溫度“y”之前的術(shù)語“約”(或者“大約”)在本申請案中系指一自溫度y減10℃延伸至y加10℃的區(qū)間，且優(yōu)選指一自y減5℃延伸至y加5℃的區(qū)間。此外，如本文所使用的術(shù)語“室溫”系指約25℃的溫度。如實施例1)至24)中任一項所定義的式(i)化合物及其醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽可例如以醫(yī)藥組合物形式用作藥劑，以用于經(jīng)腸(該尤其口服)或非經(jīng)腸(包括局部施用或吸入)投藥。可以任何本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所熟悉的方式(參見例如remington,thescienceandpracticeofpharmacy,第21版(2005),第5部分,“pharmaceuticalmanufacturing”[由lippincottwilliams&wilkins出版])，藉由將所描述式(i)化合物或其醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽(視情況與其他有治療價值的物質(zhì)組合)與適合的無毒惰性治療兼容的固體或液體載劑材料及(必要時)常用醫(yī)藥佐劑一起制成蓋倫投藥劑型(galenicaladministrationform)來實現(xiàn)醫(yī)藥組合物的制備。本發(fā)明亦關(guān)于一種預(yù)防或治療本文中提及的疾病或病癥的方法，其包含向個體投與醫(yī)藥活性量的如實施例1)至24)中任一項所定義的式(i)化合物。在本發(fā)明的一優(yōu)選實施例中，包含每天1mg與1000mg之間，特定言之每天5mg與500mg之間，更特定言之每天25mg與400mg之間，尤其為每天50mg與200mg之間的投與量。為避免任何疑慮，若化合物描述為適用于預(yù)防或治療某些疾病，則該等化合物同樣適用于制備用于預(yù)防或治療該等疾病的藥劑。本發(fā)明的另一方面涉及一種預(yù)防或治療患者中的如下文所提及的疾病或病癥的方法，其包含向該患者投與醫(yī)藥活性量的如實施例1)至24)中任一項所定義的式(i)化合物或其醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽。如實施例1)至24)中任一項所定義的根據(jù)式(i)的化合物或其醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽適用于預(yù)防或治療與cxcr3受體功能障礙或經(jīng)由cxcr3信號傳導(dǎo)的配體功能障礙相關(guān)的病癥。與cxcr3受體或其配體功能障礙相關(guān)的該等病癥為需要人類cxcr3受體調(diào)節(jié)劑的疾病或病癥。上文所提及的病癥可詳言之定義為包含自體免疫病癥、發(fā)炎疾病、感染性疾病、移植排斥反應(yīng)、纖維化、神經(jīng)退化病癥及癌癥。自體免疫病癥可定義為包含類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(ra)；多發(fā)性硬化(ms)；發(fā)炎性腸道疾病(ibd；包含克羅恩氏病及潰瘍性結(jié)腸炎)；全身性紅斑性狼瘡癥(sle)；牛皮癬；牛皮癬性關(guān)節(jié)炎；狼瘡腎炎；間質(zhì)性膀胱炎；乳糜瀉；抗磷脂癥候群；諸如橋本氏病甲狀腺炎(hashimoto'sthyroiditis)的甲狀腺炎；淋巴球性甲狀腺炎；重癥肌無力；i型糖尿??；葡萄膜炎；上鞏膜炎；鞏膜炎；川崎氏病(kawasaki'sdisease)；葡萄膜-視網(wǎng)膜炎；后葡萄膜炎；與白塞氏病(behcet'sdisease)相關(guān)的葡萄膜炎；眼色素膜腦膜炎癥候群；過敏性腦脊髓炎；異位性疾病，諸如鼻炎、結(jié)膜炎、皮膚炎；及后感染性自體免疫疾病，包括風(fēng)濕熱及后感染性絲球體腎炎。發(fā)炎疾病可定義為包含哮喘；copd；動脈粥樣硬化；心肌炎；干眼癥候群(包含休格連氏干眼癥候群(dryeyesyndrome))；肌病(包含發(fā)炎肌病)；類肉瘤??；肺部動脈高血壓，其尤其與類肉瘤病相關(guān)；及肥胖。感染性疾病可定義為包含由各種感染性劑介導(dǎo)的疾病及由此所致的并發(fā)癥；諸如瘧疾、腦瘧疾、麻風(fēng)、肺結(jié)核、流感、剛地弓形蟲(toxoplasmagondii)、登革熱(dengue)、b型及c型肝炎、單純皰疹、利什曼原蟲(leishmania)、沙眼披衣菌(chlamydiatrachomatis)、萊姆病(lymedisease)、西尼羅河病毒(westnilevirus)。移植排斥反應(yīng)可定義為包含移植器官(諸如腎臟、肝臟、心臟、肺、胰臟、角膜及皮膚)的排斥反應(yīng)；移植物抗宿主疾病；及慢性同種異體移植血管病變。纖維化可定義為包含肝硬化(包含原發(fā)性膽汁性肝硬化(pbc)及自體免疫肝炎)、特發(fā)性肺部纖維化、腎纖維化、心內(nèi)膜心肌纖維化、全身性硬化癥及關(guān)節(jié)纖維化。神經(jīng)退化病癥可定義為包含神經(jīng)退化及涉及神經(jīng)元死亡的病狀，諸如多發(fā)性硬化(包括復(fù)發(fā)緩解型多發(fā)性硬化及漸進(jìn)多發(fā)性硬化)、阿茲海默氏病、帕金森氏病(parkinson'sdisease)、亨廷頓氏舞蹈癥、hiv相關(guān)的癡呆、朊病毒介導(dǎo)的神經(jīng)退化、癲癇、中風(fēng)、腦缺血、腦麻痹、視神經(jīng)脊髓炎、臨床單一癥候群、阿爾珀氏病(alpers'disease)、肌萎縮性側(cè)索硬化(als)、老年癡呆、路易體癡呆(dementiawithlewybodies)、瑞特氏癥候群(rettsyndrome)、脊髓創(chuàng)傷、創(chuàng)傷性腦損傷、三叉神經(jīng)痛、慢性炎性脫髓鞘性多發(fā)性神經(jīng)病、格-巴二氏癥候群(guillain-barrésyndrome)、發(fā)作性睡病、舌咽神經(jīng)痛、輕度認(rèn)知下降、認(rèn)知下降、脊髓性肌萎縮及腦瘧疾。癌癥可定義為包含所有類型的癌癥，諸如大腸癌、直腸癌、乳癌、肺癌、非小細(xì)胞肺癌、前列腺癌、食道癌、胃癌、肝癌、膽管癌、脾癌、腎癌、膀胱癌、子宮癌、卵巢癌、宮頸癌、睪丸癌、甲狀腺癌、胰臟癌、大腦腫瘤、血液腫瘤、嗜堿性血球腺瘤、促乳素瘤、高促乳素血癥、腺瘤、子宮內(nèi)膜癌、結(jié)腸癌；慢性淋巴球性白血病(cll)；及尤其彼等癌癥的轉(zhuǎn)移性擴(kuò)散。如實施例1)至24)中任一項的式(i)化合物或其醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽尤其適用于預(yù)防或治療選自以下疾病及病癥的群中的一種、若干種或所有的疾?。?)選自類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(ra)；多發(fā)性硬化(ms)；發(fā)炎性腸道疾病(ibd；包含克羅恩氏病及潰瘍性結(jié)腸炎)；全身性紅斑性狼瘡癥(sle)；牛皮癬；狼瘡腎炎；及i型糖尿病的自體免疫病癥；2)選自copd；干眼癥候群(包含休格連氏干眼癥候群)；肌病(包含發(fā)炎肌病)及類肉瘤病的發(fā)炎疾??；3)選自移植物抗宿主疾病的移植排斥反應(yīng)；4)選自肝硬化(包含原發(fā)性膽汁性肝硬化(pbc)及自體免疫肝炎)的纖維化；及5)選自格-巴二氏癥候群的神經(jīng)退化病癥。如實施例1)至24)中任一項的式(i)化合物或其醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽最優(yōu)選適用于治療選自以下各者的疾?。侯愶L(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、視神經(jīng)脊髓炎、發(fā)炎性腸道疾病、克羅恩氏病、潰瘍性結(jié)腸炎、全身性紅斑性狼瘡癥、牛皮癬、牛皮癬性關(guān)節(jié)炎、狼瘡腎炎、間質(zhì)性膀胱炎、乳糜瀉、重癥肌無力、i型糖尿病、葡萄膜炎、哮喘、慢性阻塞性肺部病癥、動脈粥樣硬化、心肌炎、發(fā)炎肌病、干眼病、類肉瘤病、流感、腦瘧疾、移植排斥反應(yīng)、肝硬化、全身性硬化癥、肺部動脈高血壓、神經(jīng)退化、阿茲海默氏病、hiv相關(guān)的癡呆、亨廷頓氏舞蹈癥、格-巴二氏癥候群、慢性炎性脫髓鞘性多發(fā)性神經(jīng)病、大腦腫瘤、結(jié)腸癌、乳癌或癌癥的轉(zhuǎn)移性擴(kuò)散。制備式(i)化合物本發(fā)明的另一方面為一種用于制備式(i)化合物的方法?？筛鶕?jù)實驗部分中所描述的方法藉由類似方法或根據(jù)下文所概述的反應(yīng)物(其中n、x、r1及r2如對于式(i)所定義)的一般順序由市售或熟知起始物質(zhì)來制備根據(jù)本發(fā)明的式(i)的化合物。本文中所使用的其他縮寫經(jīng)明確定義或如實驗部分中所定義。在一些情況下，通用基團(tuán)r1及r2可能與下文流程中所說明的組合不兼容且因此將需要使用保護(hù)基團(tuán)(pg)。使用保護(hù)基團(tuán)為在此項技術(shù)中熟知的(參見例如“protectivegroupsinorganicsynthesis”,t.w.greene,p.g.m.wuts,wiley-interscience,1999)。出于此論述的目的，將假定該等保護(hù)基團(tuán)視需要存在于適當(dāng)位置上。所獲得的化合物亦可以本身已知的方式轉(zhuǎn)化成鹽，尤其其醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽。一般制備途徑：流程1可以標(biāo)準(zhǔn)條件(例如meoh中的naoh水溶液)下皂化的中間物(1)為起始物質(zhì)制備式(i)化合物，以得到結(jié)構(gòu)(2)的化合物(流程1)。使用thf中的(二(乙酰氧)碘基)苯及l(fā)ibr在室溫下將結(jié)構(gòu)(2)的化合物中的羧酸基團(tuán)轉(zhuǎn)化成相應(yīng)溴(3)?？墒褂媒Y(jié)構(gòu)(4)(其中r表示氫或(c1-4)烷基))的偶合搭配物使用鈴木反應(yīng)(suzukireaction)的標(biāo)準(zhǔn)條件，如使用適合堿(諸如na2co3水溶液)、適合鈀催化劑(諸如pd(pph3)2cl2)及適合溶劑(諸如mecn)，優(yōu)選在大約80℃溫度下進(jìn)行鈴木偶合。隨后可在酸性條件下優(yōu)選使用適合溶劑(諸如二氧六環(huán))中的hcl且在約rt溫度下裂解所獲得中間物(5)的boc保護(hù)基團(tuán)，得到結(jié)構(gòu)(6)的化合物?？稍谧罱K步驟中藉由與羧酸衍生物(7)偶合的酰胺使用標(biāo)準(zhǔn)肽偶合方法(諸如hatu)、在適合堿(諸如dipea或net3)存在下且在適合溶劑(諸如dcm或dmf)中、優(yōu)選在約室溫溫度下獲得式(i)化合物。流程2可遵循流程2中所概述的反應(yīng)順序合成結(jié)構(gòu)(1)的化合物。使用thf中的正丁基鋰及溴在大約-78℃溫度下處理市售2-(三氟甲基)噻唑-4-甲酸?？墒褂胢eoh中的濃硫酸且在大約70℃溫度下加熱來使所得溴化化合物酯化。使用市售哌嗪衍生物(8)在適合堿(諸如dipea)存在下在適合溶劑(諸如mecn)中且在大約80℃溫度下的親核芳族取代提供結(jié)構(gòu)(1)的化合物。式(7)化合物可自市售商品取得或可遵循流程3中所示的途徑合成。流程3可使用式x-ch2-coo(pg)(其中x為離去基團(tuán)，諸如溴，且pg為適用于酸官能的保護(hù)基團(tuán)(例如苯甲基))的乙酸衍生物，在堿(諸如cs2co3或nah)存在下在適合溶劑(諸如mecn或thf)中，且分別在大約室溫或0℃溫度下使結(jié)構(gòu)(9)的化合物烷基化。在h2下使用pd/c作為催化劑及etoh作為溶劑在大約室溫溫度下脫除中間物(10)的保護(hù)基(諸如脫除苯甲基保護(hù)基)，產(chǎn)生結(jié)構(gòu)(7)的化合物?；蛘?，可藉由在大約室溫溫度下用含二氧六環(huán)的hcl處理來移除作為中間物(10)中的保護(hù)基團(tuán)pg的叔丁基。其他適合酸官能保護(hù)基團(tuán)及保護(hù)及脫除保護(hù)基方法為本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所熟知(尤其參見“protectivegroupsinorganicsynthesis”,greenet.w.及wutsp.g.m.,wiley-interscience,1999)。若無法取得市售商品，則可藉由縮合酰亞胺酯(例如乙酰亞胺酸乙酯)與羧酸酰肼(例如丙酸肼)制備結(jié)構(gòu)(9)的化合物(其中r1表示二取代1h-1,2,4-三唑衍生物，諸如例如3-乙基-5-甲基-1h-[1,2,4]三唑)。結(jié)構(gòu)(4)的化合物可自市售商品取得或可類似于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的方法制備，該等方法諸如：由5-溴-嘧啶或3-溴-吡啶衍生物分別與硼酸三異丙酯及n-buli，在thf及甲苯中，于大約-78℃溫度下反應(yīng)。每當(dāng)以對映異構(gòu)體的混合物形式獲得式(i)化合物，可使用本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的方法分離對映異構(gòu)體：例如藉由形成且分離非對映異構(gòu)鹽或藉由手性固定相(諸如daicelchiralpakic(5μm)管柱)進(jìn)行的hplc。手性hplc的典型條件為洗脫劑a(etoh或iproh，存在或不存在諸如net3或dea的胺)與洗脫劑b(己烷或mecn)的等度(isocratic)溶劑混合物，流動速率0.8至16ml/min。實驗部分：縮寫(如本文及上文說明書中所使用)：aq.水溶液boc叔丁氧基羰基bsa牛血清白蛋白bu丁基cc硅膠管柱層析cho中國倉鼠卵巢cv管柱體積d天dcm二氯甲烷dea二乙胺dipean-乙基二異丙胺dmf二甲基甲酰胺dmso二甲亞砜ea乙酸乙酯edta乙二胺四乙酸egta乙二醇四乙酸et乙基fbs胎牛血清flipr熒光成像讀板儀fluo-4-am2-{[2-(2-{5-[雙(羧甲基)氨基]-2-甲基苯氧基}乙氧基)-4-(2,7-二氟-6-羥基-3-氧代-3h-呫噸基-9-基)苯基](羧甲基)氨基}乙酸g418(2r,3s,4r,5r,6s)-5-氨基-6-[(1r,2s,3s,4r,6s)-4,6-二氨基-3-[(2r,3r,4r,5r)-3,5-二羥基-5-甲基-4-甲基氨基氧雜環(huán)己基-2-基]氧基-2-羥基環(huán)己基]氧基-2-(1-羥乙基)氧雜環(huán)己基-3,4-二醇h小時hatu2-(7-氮雜-1h-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲hep庚烷hepes4-(2-羥乙基)-哌嗪-1-乙磺酸hv高真空hplc高效液相層析ipr異丙基lc液相層析m多重峰m摩爾濃度[moll-1]me甲基ms質(zhì)譜分析min分鐘nmr核磁共振波譜法org.有機(jī)pbs磷酸鹽緩沖鹽水pd/c鈀/碳pg保護(hù)基團(tuán)ph苯基prep制備型rpm轉(zhuǎn)/分鐘rt室溫s單峰sat.飽和sec秒tfa三氟乙酸t(yī)hf四氫呋喃tlc薄層層析tr停留時間uplc超高效液相層析i.化學(xué)以下實例說明本發(fā)明的生物活性化合物的制備，但并不限制其范疇。綜述：所有溫度以攝氏度(℃)陳述。除非另有指示，否則反應(yīng)物在室溫下在氬氣氛圍下發(fā)生，且在配備有磁性攪拌棒的火焰干燥圓底燒瓶中進(jìn)行。所使用的表征方法：已使用以下洗脫條件獲得lc-ms停留時間：i)lc-ms(a)：zorbaxsb-aq，3.5μm，4.6×50mm管柱，其在40℃下恒溫調(diào)節(jié)。兩種洗脫溶劑如下：溶劑a＝水+0.04％tfa；溶劑b＝mecn。洗脫劑流動速率為4.5ml/min，且洗脫混合物比例隨著自洗脫開始的時間t變化的特征概述于下表中(在兩個連續(xù)時間點之間使用線性梯度)：t(min)01.01.451.55溶劑a(％)955595溶劑b(％)595955ii)lc-ms(b)：使用在acquityuplc管柱管理器(60℃)中恒溫調(diào)節(jié)的來自waters的acquityuplchsst3c181.8μm2.1×50mmid管柱。兩種洗脫溶劑如下：溶劑a＝水+0.05％甲酸；溶劑b＝mecn+0.045％甲酸。洗脫劑流動速率為1ml/min，且洗脫混合物比例隨著自洗脫開始的時間t變化的特征概述于下表中(在兩個連續(xù)時間點之間使用線性梯度)：t(min)01.41.81.92.0溶劑a(％)9852298溶劑b(％)29598982iii)lc-ms(c)：使用在acquityuplc管柱管理器(60℃)中恒溫調(diào)節(jié)的來自waters的acquityuplccshc181.7μm2.1×50mmid管柱。兩種洗脫溶劑如下：溶劑a＝水+0.05％甲酸；溶劑b＝mecn+0.045％甲酸。洗脫劑流動速率為1ml/min，且洗脫混合物比例隨著自洗脫開始的時間t變化的特征概述于下表中(在兩個連續(xù)時間點之間使用線性梯度)：t(min)01.41.81.92.0溶劑a(％)9852298溶劑b(％)29598982藉由nmr光譜分析(配備有5mmdch低溫探針的brukeravanceii400mhzultrashieldtm或brukerascendtm500)，1h(400mhz或500mhz)，19f(376mhz)進(jìn)一步確認(rèn)化合物純度及一致性。相對于四甲基硅烷(tms)或三氯氟甲烷以百萬分之一(ppm)報導(dǎo)化學(xué)位移，且以s(單峰)或m(多重峰)的形式給出多峰性。所使用的制備型lc-ms方法：使用下文所描述的條件進(jìn)行藉由制備型lc-ms的純化。i)制備型lc-ms(i)：使用x-bridge管柱(watersc18，10μmobd，30×75mm)。兩種洗脫溶劑如下：溶劑a＝水+0.5％nh4oh(25％)；溶劑b＝mecn。洗脫劑流動速率為75ml/min，且洗脫混合物比例隨著自洗脫開始的時間t變化的特征概述于下表中(在兩個連續(xù)時間點之間使用線性梯度)：t(min)00.014.06.06.26.6溶劑a(％)8080558080溶劑b(％)202095952020ii)制備型lc-ms(ii)：使用x-bridge管柱(watersc18，10μmobd，30×75mm)。兩種洗脫溶劑如下：溶劑a＝水+0.5％nh4oh(25％)；溶劑b＝mecn。洗脫劑流動速率為75ml/min，且洗脫混合物比例隨著自洗脫開始的時間t變化的特征概述于下表中(在兩個連續(xù)時間點之間使用線性梯度)：t(min)00.014.06.06.26.6溶劑a(％)9090559090溶劑b(％)101095951010iii)制備型lc-ms(iii)：使用atlantis管柱(waterst3，10μmobd，30×75mm)。兩種洗脫溶劑如下：溶劑a＝水+0.5％甲酸；溶劑b＝mecn。洗脫劑流動速率為75ml/min，且洗脫混合物比例隨著自洗脫開始的時間t變化的特征概述于下表中(在兩個連續(xù)時間點之間使用線性梯度)：t(min)00.013.56.06.26.6溶劑a(％)7070557070溶劑b(％)303095953030iv)制備型lc-ms(iv)：使用atlantis管柱(waterst3，10μmobd，30×75mm)。兩種洗脫溶劑如下：溶劑a＝水+0.5％甲酸；溶劑b＝mecn。洗脫劑流動速率為75ml/min，且洗脫混合物比例隨著自洗脫開始的時間t變化的特征概述于下表中(在兩個連續(xù)時間點之間使用線性梯度)：t(min)00.014.06.06.26.6溶劑a(％)8080558080溶劑b(％)202095952020v)制備型lc-ms(v)：使用x-bridge管柱(watersc18，10μmobd，30×75mm)。兩種洗脫溶劑如下：溶劑a＝水+0.5％nh4oh(25％)；溶劑b＝mecn。洗脫劑流動速率為75ml/min，且洗脫混合物比例隨著自洗脫開始的時間t變化的特征概述于下表中(在兩個連續(xù)時間點之間使用線性梯度)：t(min)00.013.56.06.26.6溶劑a(％)7070557070溶劑b(％)303095953030vi)制備型lc-ms(vi)：使用atlantis管柱(waterst3，10μmobd，30×75mm)。兩種洗脫溶劑如下：溶劑a＝水+0.5％甲酸；溶劑b＝mecn。洗脫劑流動速率為75ml/min，且洗脫混合物比例隨著自洗脫開始的時間t變化的特征概述于下表中(在兩個連續(xù)時間點之間使用線性梯度)：t(min)00.0134.06.06.26.6溶劑a(％)959550559595溶劑b(％)5550959555所使用的制備型手性hplc方法：使用下文所描述的條件進(jìn)行藉由制備型手性hplc的純化。i)制備型手性hplc(i)：使用chiralpakib管柱(5μm，30×250mm)。洗脫溶劑為hep/etoh/dea50/50/0.1，持續(xù)10分鐘且以16ml/min的流動速率運行。ii)制備型手性hplc(ii)：使用chiralpakif管柱(5μm，20×250mm)。洗脫溶劑為hep/etoh50/50，持續(xù)8.7分鐘且以19ml/min的流動速率運行。iii)制備型手性hplc(iii)：使用(r,r)whelk-01管柱(10μm，50×250mm)。洗脫溶劑為hep/etoh70/30，持續(xù)16.3分鐘且以100ml/min的流動速率運行。iv)制備型手性hplc(iv)：使用chiralpakib管柱(5μm，30×250mm)。洗脫溶劑為hep/etoh70/30，持續(xù)11.8分鐘且以34ml/min的流動速率運行。v)制備型手性hplc(v)：使用chiralpakib管柱(5μm，30×250mm)。洗脫溶劑為hep/etoh50/50，持續(xù)7.6分鐘且以34ml/min的流動速率運行。vi)制備型手性hplc(vi)：使用chiralpakib管柱(5μm，30×250mm)。洗脫溶劑為hep/etoh60/40，持續(xù)9分鐘且以40ml/min的流動速率運行。vii)制備型手性hplc(vii)：使用chiralpakic管柱(5μm，30×250mm)。洗脫溶劑為hep/etoh70/30，持續(xù)12分鐘且以34ml/min的流動速率運行。具體實施方式實例1：2-(3-叔丁基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(s)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮1.1.5-溴-2-三氟甲基-噻唑-4-甲酸在氬氣下歷經(jīng)15分鐘向冷卻至-78℃的2-(三氟甲基)噻唑-4-甲酸(3.2g)于無水thf(60ml)中的溶液中逐滴添加n-buli(1.6m于己烷中，21.3ml)，以使得內(nèi)部溫度不上升高于-60℃。隨后逐滴添加br2(0.92ml)于環(huán)己烷(8ml)中的溶液以保持內(nèi)部溫度低于-60℃。在-78℃下將所得混合物攪拌2小時且謹(jǐn)慎地藉由添加水(50ml)淬滅。添加檸檬酸(10％)直至ph＝2且用ea萃取混合物。有機(jī)層用鹽水洗滌，干燥(mgso4)，過濾出且蒸發(fā)至干燥，獲得4.15g棕色固體，其不經(jīng)進(jìn)一步純化即可使用。lc-ms(a)：tr＝0.67min。f-nmr(cd3od)：-63.57ppm(s)。1.2.5-溴-2-三氟甲基-噻唑-4-甲酸甲酯向中間物1.1(12g)，meoh(130ml)的溶液中添加h2so4(96％,6.5ml)，且在70℃下攪拌混合物3小時。冷卻后，用飽和na2co3水溶液淬滅反應(yīng)混合物且部分地蒸發(fā)溶劑。殘余物用dcm稀釋且用飽和na2co3(1×)水溶液、水(1×)及鹽水(1×)洗滌，且用dcm(2×)萃取水相。經(jīng)合并的有機(jī)層經(jīng)mgso4干燥，過濾出，蒸發(fā)且在高真空下干燥，獲得12g棕色樹脂。lc-ms(a)：tr＝0.83min。f-nmr(cd3od)：-63.59ppm(s)。1.3.(s)-2-羥甲基-4-(4-甲氧羰基-2-三氟甲基-噻唑-5-基)-哌嗪-1-甲酸叔丁酯在室溫下向中間物1.2(4g)于mecn(100ml)中的溶液中添加(s)-1-boc-2-羥甲基哌嗪(3.07g)及dipea(3.54ml)。在80℃下攪拌反應(yīng)混合物28小時。冷卻后，反應(yīng)混合物用ea稀釋且用水(2×)及鹽水洗滌。用ea萃取水層。經(jīng)合并的有機(jī)層經(jīng)mgso4干燥，過濾出且蒸發(fā)至干燥。藉由cc(biotage，snap340g，溶劑a：hep；溶劑b：ea；以％b計的梯度：歷經(jīng)3cv30，歷經(jīng)5cv30至50，歷經(jīng)3cv50)純化粗產(chǎn)物，獲得4g黃色泡沫。lc-ms(a)：tr＝0.87min；[m+h]+：426.0。1.4.(s)-4-(4-羧基-2-三氟甲基-噻唑-5-基)-2-羥甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯在室溫下向中間物1.3(3.96g)于etoh(20ml)中的溶液中添加1mnaoh(20ml)，且攪拌反應(yīng)混合物1小時10分鐘。蒸發(fā)出溶劑且藉由添加檸檬酸水溶液(10％)將殘余物酸化至ph2-3。用dcm(3×)萃取水層，且經(jīng)合并的有機(jī)層經(jīng)mgso4干燥且濃縮至干燥，獲得2.89g呈米色固體狀的物質(zhì)。lc-ms(a)：tr＝0.79min；[m+h]+：412.1。1.5.(s)-4-(4-溴-2-三氟甲基-噻唑-5-基)-2-羥甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯在室溫下向中間物1.4(2.88g)于thf(55ml)中的溶液中添加libr(614mg)及(二(乙酰氧)碘基)苯(2.3g)。在室溫下將所得懸浮液攪拌隔夜。蒸發(fā)出反應(yīng)混合物且殘余物用h2o/dcm溶解且用dcm(3×)萃取。經(jīng)合并的有機(jī)層經(jīng)mgso4干燥，過濾出且蒸發(fā)至干燥。藉由cc(biotage，snap100g筒，溶劑a：hep；溶劑b：ea；以％b計的梯度：10持續(xù)5cv，歷經(jīng)5cv10至30，40持續(xù)3cv)純化粗產(chǎn)物，獲得2.5g呈白色固體狀的物質(zhì)。lc-ms(a)：tr＝0.93min；[m+h]+：445.9。1.6.(s)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-甲酸叔丁酯在80℃下在氬氣下劇烈攪拌中間物1.5(2.3g)、2-(三氟甲基)嘧啶-5-硼酸(1.65g)、pd(pph3)2cl2(202mg)、1mna2co3(15ml)于mecn(15ml)中的混合物20小時。使反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用h2o稀釋且用dcm(3×)萃取。將經(jīng)合并的有機(jī)層經(jīng)mgso4干燥，過濾出且蒸發(fā)至干燥。藉由cc(biotage，snap340g筒，溶劑a：hep；溶劑b：ea；以％b計的梯度：10持續(xù)5cv，歷經(jīng)6cv10至30，30持續(xù)3cv)純化粗產(chǎn)物，獲得2.22g呈黃色泡沫狀的物質(zhì)。lc-ms(a)：tr＝0.98min；[m+h]+：513.9。1.7.{(s)-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-2-基}-甲醇；呈鹽酸鹽形式在室溫下將中間物1.6(2.25g)于hcl(22ml，4m于二氧六環(huán)中)中的混合物攪拌1小時。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)且在高真空下干燥，得到2.18g呈棕色泡沫狀的物質(zhì)。lc-ms(a)：tr＝0.67min；[m+h++ch3cn]+：413.2。1.8.(3-叔丁基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸苯甲酯向3-叔丁基-1h-1,2,4-三唑(225mg)于mecn(12ml)中的溶液中添加cs2co3(586mg)，隨后添加溴乙酸苯甲酯(0.29ml)，且在室溫下將混合物攪拌1小時45分鐘。反應(yīng)混合物用ea稀釋且用水(2×)及鹽水洗滌。用ea(2×)萃取水層，且經(jīng)合并的有機(jī)層經(jīng)mgso4干燥，過濾出且蒸發(fā)至干燥。藉由cc(biotage，snap25g筒，溶劑a：dcm；溶劑b：dcm/meoh8:2；以％b計的梯度：15持續(xù)8cv)純化殘余物，獲得216mg呈淡黃色固體狀的物質(zhì)(單一位置異構(gòu)體(regioisomer))。lc-ms(a)：tr＝0.73min；[m+h]+：274.1。1.9.(3-叔丁基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸將含有etoh(2ml)中的中間物1.8(202mg)、pd/c(39mg)的燒瓶抽空且用氬氣(3×)回填，然后抽空且用h2(3×)回填，且在室溫下將反應(yīng)混合物攪拌2小時。在硅藻土塞(celiteplug)上過濾反應(yīng)混合物，且將濾液蒸發(fā)至干燥，獲得130mg呈白色固體狀的物質(zhì)。lc-ms(a)：tr＝0.36min；[m+h]+：184.3。1.10.2-(3-叔丁基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(s)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮在室溫下將中間物1.7(30mg)、中間物1.9(11mg)、hatu(26mg)及net3(26μl)于dcm(1.5μl)中的混合物攪拌隔夜。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干燥，且藉由制備型lc-ms(iv)純化粗產(chǎn)物，獲得6mg呈白色固體狀的物質(zhì)。lc-ms(c)：tr＝1.12min；[m+h]+：579.2。實例2：2-(3,5-二甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(s)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮在室溫下向中間物1.7(2.15g)于dcm(66ml)中的溶液中添加(3,5-二甲基-1h-1,2,4-三唑-1-基)乙酸(743mg)、dipea(2.05ml)及hatu(2.37g)，且在室溫下將混合物攪拌3小時。將反應(yīng)混合物用dcm稀釋，且用1mnahso4、飽和nahco3水溶液及鹽水洗滌。再用2×dcm萃取水層，且將經(jīng)合并的有機(jī)層經(jīng)mgso4干燥，過濾出且蒸發(fā)至干燥。藉由cc(biotage，snap100g筒，溶劑a：dcm；溶劑b：dcm/meoh8:2+0.1％et3n；以％b計的梯度：15持續(xù)5cv，歷經(jīng)3cv15至25，25持續(xù)5cv)純化。藉由在dcm/h2o中萃取來移除產(chǎn)物中的殘余dipea，得到778mg呈白色固體狀的物質(zhì)。lc-ms(c)：tr＝0.97min；[m+h]+：551.1。實例3：2-(3-環(huán)丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(s)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮3.1.(3-環(huán)丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸苯甲酯在0℃下向3-環(huán)丙基-1h-1,2,4-三唑(500mg)于thf(10ml)中的溶液中添加nah(60％于油中，174mg)，且將混合物攪拌5分鐘。隨后添加溴乙酸苯甲酯(0.719ml)且在0℃下將反應(yīng)混合物攪拌45分鐘。用飽和nh4cl水溶液淬滅混合物且用ea(3×)萃取水層。經(jīng)合并的有機(jī)層經(jīng)mgso4干燥，過濾出且蒸發(fā)至干燥。藉由cc(biotage，snap25g筒，溶劑a：dcm；溶劑b：meoh；以％b計的梯度：1持續(xù)4cv，歷經(jīng)10cv1至10，10持續(xù)2cv)的純化得到831mg呈位置異構(gòu)體混合物的物質(zhì)。藉由制備型手性hplc(ii)的分離得到兩種位置異構(gòu)體：第一洗脫部分：(5-環(huán)丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸苯甲酯。lc-ms(a)：tr＝0.75min；[m+h]+：258.1。在5.04ppm的ch2co2與1.74ppm的ch(環(huán)丙基)之間可見roesy信號。第二洗脫部分：(3-環(huán)丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸苯甲酯。lc-ms(a)：tr＝0.75min；[m+h]+；258.1。在4.94ppm的ch2co2與8.08ppm的ch(三唑)之間可見roesy信號。3.2.(3-環(huán)丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸使用類似于實例1、步驟1.9的方法，用中間物3.1((3-環(huán)丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸苯甲酯)替換中間物1.8來制備此化合物。lc-ms(a)：tr＝0.33min；[m+h]+：168.47。3.3.2-(3-環(huán)丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(s)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮使用類似于實例1、步驟1.10的方法，用中間物3.2替換中間物1.9來制備此化合物。藉由制備型lc-ms(iv)純化粗產(chǎn)物。lc-ms(c)：tr＝1.05min；[m+h]+：563.1。實例4：1-{(s)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(3-異丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮4.1.(3-異丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸苯甲酯使用類似于實例1、步驟1.8的方法，用3-異丙基-1h-1,2,4-三唑替換3-叔丁基-1h-1,2,4-三唑來制備此化合物。藉由制備型手性hplc(iii)純化位置異構(gòu)體的混合物。第一洗脫部分：(3-異丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸苯甲酯。lc-ms(a)：tr＝0.76min；[m+h]+：260.2。在4.96ppm的ch2與8.08ppm的ch(三唑)之間可見roesy信號。第二洗脫部分：(5-異丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸苯甲酯。lc-ms(a)：tr＝0.76min；[m+h]+：260.2。在4.96ppm的ch2與2.97ppm的ch(異丙基)之間可見roesy信號。4.2.(3-異丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸使用類似于實例1、步驟1.9的方法，用來自步驟4.1的(3-異丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸苯甲酯替換中間物1.8來制備此化合物。lc-ms(a)：tr＝0.30min；[m+h]+：170.2。4.3.1-{(s)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(3-異丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮使用類似于實例1、步驟1.10的方法，用中間物4.2替換中間物1.9來制備此化合物。藉由制備型lc-ms(iv)純化粗產(chǎn)物。lc-ms(c)：tr＝1.07min；[m+h]+：564.9。實例5：1-{(s)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(3-三氟甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮5.1.(3-三氟甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸苯甲酯使用類似于實例1、步驟1.8的方法，用3-(三氟甲基)-1h-1,2,4-三唑替換3-叔丁基-1h-1,2,4-三唑來制備此化合物。cc后獲得呈單一位置異構(gòu)體形式的所需化合物。lc-ms(a)：tr＝0.85min；[m+h]+：286.1。5.2.(3-三氟甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸使用類似于實例1、步驟1.9的方法，用中間物5.1替換中間物1.8來制備此化合物。lc-ms(a)：tr＝0.42min；[m+h]+：196.1。5.3.1-{(s)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(3-三氟甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮使用類似于實例1、步驟1.10的方法，用中間物5.2替換中間物1.9來制備此化合物。添加額外的1.1eqhatu及1eq中間物5.2，且將反應(yīng)混合物再攪拌24小時。藉由制備型lc-ms(iv)純化粗產(chǎn)物。lc-ms(c)：tr＝1.15min；[m+h]+：591.1。實例6：1-{(s)-4-[4-(2-乙氧基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-羥甲基-哌嗪-1-基}-2-(3-三氟甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮6.1.(s)-4-[4-(2-乙氧基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-羥甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯使用類似于實例1、步驟1.6的方法，用2-乙氧基嘧啶-5-硼酸替換2-(三氟甲基)嘧啶-5-硼酸來制備此化合物。lc-ms(a)：tr＝0.92min；[m+h]+：490.2。6.2.(s)-(4-(4-(2-乙氧基嘧啶-5-基)-2-(三氟甲基)噻唑-5-基)哌嗪-2-基)甲醇，呈鹽酸鹽形式使用類似于實例1、步驟1.7的方法，用中間物6.1替換中間物1.6來制備此化合物。lc-ms(a)：tr＝0.57min；[m+h]+：390.2。6.3.1-{(s)-4-[4-(2-乙氧基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-羥甲基-哌嗪-1-基}-2-(3-三氟甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮使用類似于實例1、步驟1.10的方法，用中間物6.2替換中間物1.7、中間物5.2替換中間物1.9且用dmf替換dcm來制備此化合物。藉由制備型lc-ms(i)純化粗產(chǎn)物。lc-ms(c)：tr＝1.09min；[m+h]+：567.1。實例7：2-(3,5-二甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(s)-4-[4-(2-乙氧基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-羥甲基-哌嗪-1-基}-乙酮使用類似于實例6、步驟6.3的方法，用3,5-二甲基-1h-1,2,4-三唑-1-基)乙酸替換中間物5.2來制備此化合物。藉由制備型lc-ms(i)純化粗產(chǎn)物。lc-ms(b)：tr＝1.28min；[m+h]+：527.2。實例8：1-{(s)-4-[4-(2-環(huán)丙基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-羥甲基-哌嗪-1-基}-2-(3,5-二甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮8.1.(s)-4-[4-(2-環(huán)丙基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-羥甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯使用類似于實例1、步驟1.6的方法，用2-環(huán)丙基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環(huán)戊硼烷-2-基)嘧啶替換2-(三氟甲基)嘧啶-5-硼酸來制備此化合物。lc-ms(a)：tr＝0.92min；[m+h]+：486.2。8.2.(s)-(4-(4-(2-環(huán)丙基嘧啶-5-基)-2-(三氟甲基)噻唑-5-基)哌嗪-2-基)甲醇，呈鹽酸鹽形式使用類似于實例1、步驟1.7的方法，用中間物8.1替換中間物1.6來制備此化合物。lc-ms(a)：tr＝0.57min；[m+h]+：386.1。8.3.1-{(s)-4-[4-(2-環(huán)丙基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-羥甲基-哌嗪-1-基}-2-(3,5-二甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮使用類似于實例7的方法，用中間物8.2替換中間物6.2來制備此化合物。藉由制備型lc-ms(i)純化粗產(chǎn)物。lc-ms(c)：tr＝0.9min；[m+h]+：523.2。實例9：1-{(s)-4-[4-(2-環(huán)丙基-嘧啶-5-基)-2-三氟甲基-噻唑-5-基]-2-羥甲基-哌嗪-1-基}-2-(3-三氟甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮使用類似于實例8、步驟8.3的方法，用中間物5.2替換(3,5-二甲基-1h-1,2,4-三唑-1-基)乙酸來制備此化合物。藉由制備型lc-ms(i)隨后制備型tlc(dcm/meoh97:3)純化粗產(chǎn)物。lc-ms(c)：tr＝1.1min；[m+h]+：563.1。實例10：1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(6-三氟甲基-吡啶-3-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(3-異丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮10.1.(r)-4-(4-溴-2-三氟甲基-噻唑-5-基)-2-羥甲基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯使用類似于實例1的方法，遵循步驟1.1至步驟1.5，用(r)-1-boc-2-羥甲基哌嗪替換步驟1.3中的(s)-1-boc-2-羥甲基哌嗪來制備此化合物。lc-ms(a)：tr＝0.92min；[m+h]+：445.9。10.2.(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(6-三氟甲基-吡啶-3-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-甲酸叔丁酯使用類似于實例1、步驟1.6的方法，用2-(三氟甲基)吡啶-5-硼酸替換2-(三氟甲基)嘧啶-5-硼酸來制備此化合物。lc-ms(a)：tr＝0.99min；[m+h]+：512.9。10.3.(r)-(4-(2-(三氟甲基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)噻唑-5-基)哌嗪-2-基)甲醇，呈鹽酸鹽形式使用類似于實例1、步驟1.7的方法，用中間物10.2替換中間物1.6來制備此化合物。lc-ms(a)：tr＝0.68min；[m+h]+：413.1。10.4.1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(6-三氟甲基-吡啶-3-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(3-異丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮使用類似于實例4、步驟4.3的方法，用中間物10.3替換中間物1.7且用dmf替換dcm來制備此化合物。藉由制備型lc-ms(i)純化粗產(chǎn)物。lc-ms(c)：tr＝1.1min；[m+h]+：564.2。實例11：1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(3-異丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮11.1.(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-甲酸叔丁酯使用類似于實例10、步驟10.2的方法，用2-(三氟甲基)嘧啶-5-硼酸替換2-(三氟甲基)吡啶-5-硼酸來制備此化合物。lc-ms(a)：tr＝0.98min；[m+h]+：513.9。11.2.(r)-(4-(2-(三氟甲基)-4-(2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)噻唑-5-基)哌嗪-2-基)甲醇，呈鹽酸鹽形式使用類似于實例10、步驟10.3的方法，用中間物11.1替換中間物10.2來制備此化合物。lc-ms(a)：tr＝0.67min；[m+h]+：414.0。11.3.1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(3-異丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮使用類似于實例10、步驟10.4的方法，用中間物11.2替換中間物10.3來制備此化合物。藉由制備型lc-ms(i)純化粗產(chǎn)物。lc-ms(c)：tr＝1.07min；[m+h]+：565.4。實例12：2-(3,5-二甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮使用類似于實例11、步驟11.3的方法，用(3,5-二甲基-1h-1,2,4-三唑-1-基)乙酸替換中間物4.2來制備此化合物。藉由制備型lc-ms(ii)純化粗產(chǎn)物。lc-ms(c)：tr＝0.97min；[m+h]+：551.1。實例13：2-苯并咪唑-1-基-1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮使用類似于實例11、步驟11.3的方法，用2-(1h-苯并咪唑-1-基)乙酸替換中間物4.2來制備此化合物。藉由制備型lc-ms(i)純化粗產(chǎn)物。lc-ms(c)：tr＝0.89min；[m+h]+：572.1。實例14：2-(5-氟-吲哚-1-基)-1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮使用類似于實例11、步驟11.3的方法，用(5-氟吲哚-1-基)乙酸替換中間物4.2來制備此化合物。藉由制備型lc-ms(v)純化粗產(chǎn)物。lc-ms(c)：tr＝1.25min；[m+h]+：589.1。實例15：1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(5-甲氧基-吲哚-1-基)-乙酮使用類似于實例11、步驟11.3的方法，用(5-甲氧基-1h-吲哚-1-基)乙酸替換中間物4.2來制備此化合物。藉由制備型lc-ms(i)純化粗產(chǎn)物。lc-ms(c)：tr＝1.22min；[m+h]+：601.1。實例16：1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(3-甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮16.1.(3-甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸苯甲酯使用類似于實例1、步驟1.8的方法，用3-甲基-1h-1,2,4-三唑替換3-叔丁基-1h-1,2,4-三唑來制備此化合物。藉由制備型手性hplc(iv)純化位置異構(gòu)體的混合物。第一洗脫部分：(5-甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸苯甲酯。lc-ms(a)：tr＝0.68min；[m+h]+：232.16。1h-nmr(cdcl3):7.83(s,1h)；7.40-7.33(m,5h)；5.23(s,2h)；4.93(s,2h)；2.43(s,3h)。在4.93ppm的ch2與2.43ppm的ch3之間可見roesy信號。第二洗脫部分：(3-甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸苯甲酯。lc-ms(a)：tr＝0.67min；[m+h]+：232.16。1h-nmr(cdcl3):8.05(s,1h)；7.40-7.30(m,5h)；5.23(s,0.95h,ch2)；4.93-4.88(3s,2h)；2.42(s,3h)。在8.05ppm的ch(三唑)與4.93-4.88ppm的ch2之間可見roesy信號。16.2.(3-甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸使用類似于實例1、步驟1.9的方法，用來自步驟16.1的(3-甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸苯甲酯替換中間物1.8來制備此化合物。lc-ms(a)：tr＝0.18min；[m+h]+：142.22。16.3.1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(3-甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮使用類似于實例11、步驟11.3的方法，用中間物16.2替換中間物4.2來制備此化合物。藉由制備型lc-ms(ii)純化粗產(chǎn)物。lc-ms(b)：tr＝1.35min；[m+h]+：537.1。實例17：1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(3-甲氧基甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮17.1.(3-甲氧基甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸苯甲酯使用類似于實例1、步驟1.8的方法，用3-(甲氧基甲基)-1h-1,2,4-三唑替換3-叔丁基-1h-1,2,4-三唑來制備此化合物。藉由兩種cc(1.biotage，snap10g筒，溶劑a：dcm；溶劑b：dcm/meoh8:2；以％b計的梯度：5持續(xù)7cv，歷經(jīng)3cv5至15，15持續(xù)3cv。2.biotage，snap10g筒，溶劑a：dcm；溶劑b：dcm/meoh8:2；以％b計的梯度：5持續(xù)5cv，歷經(jīng)3cv5至10，10持續(xù)3cv，10至15持續(xù)3cv)純化粗產(chǎn)物，產(chǎn)生兩種位置異構(gòu)體：第一洗脫部分：(5-甲氧基甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸苯甲酯：無色油狀物。lc-ms(a)：tr＝0.71min；[m+h]+：262.2。第二洗脫部分：(3-甲氧基甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸苯甲酯：無色油狀物。lc-ms(a)：tr＝0.67min；[m+h]+：262.1。在8.17ppm的ch(三唑)與5.01ppm的nch2co2之間可見roesy信號。17.2.(3-甲氧基甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸使用類似于實例1、步驟1.9的方法，用來自步驟17.1的(3-甲氧基甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸苯甲酯替換中間物1.8來制備此化合物。lc-ms(a)：tr＝0.24min；[m+h]+：172.0。17.3.1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(3-甲氧基甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮使用類似于實例11、步驟11.3的方法，用中間物17.2替換中間物4.2來制備此化合物。藉由制備型lc-ms(ii)純化粗產(chǎn)物。lc-ms(b)：tr＝1.36min；[m+h]+：567.1。實例18：1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-[3-(5-甲基-[1,2,4]噁二唑-3-基)-[1,2,4]三唑-1-基]-乙酮18.1.5-甲基-3-(1h-[1,2,4]三唑-3-基)-[1,2,4]噁二唑在室溫下向n-羥基-乙脒(803mg)于thf(25ml)中的懸浮液中添加nah(60％于油中，434mg)。在70℃下在氬氣下將發(fā)泡懸浮液攪拌30分鐘，隨后添加1h-1,2,4-三唑-3-甲酸甲酯(725mg)且在70℃下將混合物攪拌2小時40分鐘。使反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用飽和nh4cl淬滅，過濾出，且用thf及meoh洗滌沉淀。將濾液蒸發(fā)且在高真空下干燥，得到1.85g呈米色固體狀的物質(zhì)。lc-ms(a)：tr＝0.4min；[m+h]+：152.2。18.2.[3-(5-甲基-[1,2,4]噁二唑-3-基)-[1,2,4]三唑-1-基]-乙酸苯甲酯在室溫下向中間物18.1(1.84g)于mecn(85ml)及dmf(5ml)中的懸浮液中添加cs2co3(3.97g)及溴乙酸苯甲酯(4ml)，且在室溫下將反應(yīng)混合物攪拌隔夜。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干燥，用ea稀釋且用水(2×)及鹽水(1×)洗滌。再用ea(2×)萃取水層。將經(jīng)合并的有機(jī)層經(jīng)mgso4干燥，過濾出，蒸發(fā)且在高真空下干燥。cc(biotage，snap100g筒，溶劑a：hep；溶劑b：ea；以％b計的梯度：30持續(xù)2cv，歷經(jīng)3cv30至50，50持續(xù)3cv，歷經(jīng)3cv50至70)，隨后制備型lc-ms(i)，得到341mg呈白色粉末狀的物質(zhì)(含有22mol％中間物18.3)。lc-ms(a)：tr＝0.77min；[m+h]+：300.0。18.3.[3-(5-甲基-[1,2,4]噁二唑-3-基)-[1,2,4]三唑-1-基]-乙酸酯，呈鈉鹽形式在室溫下向中間物18.2(335mg)于etoh(3ml)中的懸浮液中添加1mnaoh(0.88ml)，且在室溫下將所得溶液攪拌1小時。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)且在高真空下干燥，得到349mg呈米色固體狀的物質(zhì)。lc-ms(a)：tr＝0.39min；[m+h]+：210.1。18.4.1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-[3-(5-甲基-[1,2,4]噁二唑-3-基)-[1,2,4]三唑-1-基]-乙酮使用類似于實例11、步驟11.3的方法，用中間物18.3替換中間物4.2來制備此化合物。藉由制備型lc-ms(i)純化粗產(chǎn)物。lc-ms(b)：tr＝1.41min；[m+h]+：605.1。實例19：1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(3-苯基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮使用類似于實例11、步驟11.3的方法，用2-(3-苯基-1h-1,2,4-三唑-1-基)乙酸替換中間物4.2來制備此化合物。藉由制備型lc-ms(i)純化粗產(chǎn)物。lc-ms(c)：tr＝1.15min；[m+h]+：599.2。實例20：2-(3-乙?；?[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮20.1.(3-乙?；?[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸苯甲酯使用類似于實例1、步驟1.8的方法，用1-(1h-1,2,4-三唑-5-基)乙酮替換3-叔丁基-1h-1,2,4-三唑來制備此化合物。藉由cc(biotage，snap10g筒，溶劑a：hep；溶劑b：ea；以％b計的梯度：30持續(xù)4cv，歷經(jīng)4cv30至70，70持續(xù)2cv，歷經(jīng)2cv70至100，100持續(xù)2cv)純化粗產(chǎn)物，得到所需三唑位置異構(gòu)體作為第二洗脫份。在8.28ppm的ch(三唑)與5.1ppm的ch2之間可見roesy信號。lc-ms(a)：tr＝0.7min；[m+h]+：260.1。20.2.(3-乙?；?[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸使用類似于實例1、步驟1.9的方法，用中間物20.1替換中間物1.8來制備此化合物。lc-ms(a)：tr＝0.25min；[m+h]+：170.0。20.3.2-(3-乙酰基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮使用類似于實例11、步驟11.3的方法，用中間物20.2替換中間物4.2且用dcm替換dmf來制備此化合物。藉由制備型lc-ms(ii)隨后制備型lc-ms(iv)純化粗產(chǎn)物。lc-ms(b)：tr＝1.38min；[m+h]+：565.1。實例21：2-[3-(1-羥基-乙基)-[1,2,4]三唑-1-基]-1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮向?qū)嵗?0(40mg)于thf(0.75ml)及etoh(0.25ml)中的溶液中添加nabh4(1.3mg)，且在0℃下將混合物攪拌1小時10分鐘。藉由添加h2o將反應(yīng)混合物淬滅且用dcm(3×)萃取。將經(jīng)合并的有機(jī)層蒸發(fā)且在高真空下干燥。藉由制備型lc-ms(iv)純化粗產(chǎn)物，得到25mg呈白色粉末狀的物質(zhì)。lc-ms(b)：tr＝1.32min；[m+h]+：567.1。實例22：1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(3-甲基-吡唑-1-基)-乙酮使用類似于實例11、步驟11.3的方法，用(3-甲基-1h-吡唑-1-基)乙酸替換中間物4.2且用dcm替換dmf來制備此化合物。藉由制備型lc-ms(iv)純化粗產(chǎn)物。lc-ms(c)：tr＝1.07min；[m+h]+：536.4。實例23：1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(3-吡啶-2-基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮23.1.(3-吡啶-2-基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸叔丁酯使用類似于實例1、步驟1.8的方法，用2-(1h-1,2,4-三唑-3-基)吡啶替換3-叔丁基-1h-1,2,4-三唑且用溴乙酸叔丁酯替換溴乙酸苯甲酯來制備此化合物。藉由制備型lc-ms(vi)進(jìn)一步純化化合物。lc-ms(a)：tr＝0.61min；[m+h]+：261.2。23.2.2-(3-(吡啶-2-基)-1h-1,2,4-三唑-1-基)乙酸，呈鹽酸鹽形式向中間物23.1(263mg)于二氧六環(huán)(2ml)中的懸浮液中添加hcl(4m于二氧六環(huán)中；2ml)。在室溫下1小時后，添加幾滴h2o且攪拌反應(yīng)混合物26小時。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)且在高真空下干燥，得到263mg呈淡黃色固體狀的物質(zhì)。lc-ms(a)：tr＝0.29min；[m+h]+：205.1。23.3.1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(3-吡啶-2-基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮使用類似于實例11、步驟11.3的方法，用中間物23.2替換中間物4.2且用dcm替換dmf來制備此化合物。藉由制備型lc-ms(iv)隨后制備型tlc(0.5mm，dcm/meoh95/5)純化粗產(chǎn)物。lc-ms(c)：tr＝1.00min；[m+h]+：600.1。實例24及實例25：2-(3-乙基-5-甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮及2-(5-乙基-3-甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮酸前體，實例24及25：步驟24.1.向mecn(6ml)中的乙酰亞胺酸乙酯鹽酸鹽(500mg)中添加amberlysta21樹脂(1.14g)，且在室溫下將懸浮液攪拌15分鐘。隨后過濾混合物且用mecn(1ml)洗滌樹脂。將丙酸肼(353mg)添加至濾液中，且在50℃下在氬氣下將所得白色懸浮液攪拌4天且在80℃下隔夜。蒸發(fā)反應(yīng)混合物。藉由cc(biotage，snap10g筒，溶劑a：dcm；溶劑b：meoh；以％b計的梯度：10持續(xù)6cv，歷經(jīng)3cv10至20，20持續(xù)6cv)隨后第二cc(biotage，snap10g筒，溶劑a：dcm；溶劑b：dcm/meoh8:2；以％b計的梯度：25持續(xù)7cv，歷經(jīng)3cv25至50，50持續(xù)5cv)純化，得到3-乙基-5-甲基-1h-[1,2,4]三唑(125mg呈黃色油狀物的物質(zhì))。lc-ms(a)：tr＝0.21min；[m+h]+：112.4。步驟24.2：遵循類似于實例1、步驟1.8的方法，來自步驟24.1的3-乙基-5-甲基-1h-[1,2,4]三唑替換3-叔丁基-1h-1,2,4-三唑。獲得位置異構(gòu)體的混合物：(3-乙基-5-甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸苯甲酯及(5-乙基-3-甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸苯甲酯。步驟24.3：遵循類似于實例1、步驟1.9的方法，來自步驟24.2的中間物替換中間物1.8。獲得位置異構(gòu)體的混合物(約1:1)：(3-乙基-5-甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸及(5-乙基-3-甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸。使用類似于實例11、步驟11.3的方法，用來自步驟24.3的中間物替換中間物4.2且用dcm替換dmf來制備最終化合物。藉由制備型lc-ms(iv)隨后制備型手性hplc(i)純化粗產(chǎn)物。將兩部分溶解于dcm中且用水(2×)洗滌，且用dcm(1×)萃取水層。經(jīng)合并的有機(jī)層經(jīng)mgso4干燥，過濾出，蒸發(fā)且在高真空下干燥。第一洗脫部分(實例24)：2-(3-乙基-5-甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮。lc-ms(c)：tr＝1.00min；[m+h]+：565.1。第二洗脫部分(實例25)：2-(5-乙基-3-甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮。lc-ms(c)：tr＝1.00min；[m+h]+：565.5。實例26：1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-咪唑并[4,5-b]吡啶-3-基-乙酮26.1.咪唑并[4,5-b]吡啶-3-基-乙酸苯甲酯向4-氮雜苯并咪唑(4.75g)于dmf(80ml)中的溶液中添加溴乙酸苯甲酯(6.58ml)，隨后添加cs2co3(25.9g)。將所得懸浮液攪拌隔夜。將反應(yīng)混合物用ea稀釋且用水(2×)及飽和nh4cl水溶液洗滌。用ea(2×)萃取水層。經(jīng)合并的有機(jī)層經(jīng)mgso4干燥，過濾出且在減壓中蒸發(fā)。藉由cc(biotage，snap100g筒，溶劑a：dcm；溶劑b：dcm/meoh8:2；以％b計的梯度：歷經(jīng)3cv0至5，5持續(xù)5cv，歷經(jīng)5cv5至15，15持續(xù)3cv)純化粗產(chǎn)物，獲得4.99g呈黃色固體狀的所需化合物。lc-ms(b)：tr＝0.59min；[m+h]+：267.86。26.2.咪唑并[4,5-b]吡啶-3-基-乙酸在氬氣下向中間物26.1(4.99g)于meoh(30ml)及乙酸(0.3ml)中的黃色懸浮液中添加pd/c(10％，994mg)。將燒瓶抽空且用氬氣回填三次，隨后抽空且用氫氣回填兩次。在室溫下在氫氣下將反應(yīng)混合物攪拌5小時，在硅藻土上過濾且用meoh洗滌硅藻土。將濾液蒸發(fā)至干燥，獲得2.41g灰白色固體，其不經(jīng)純化即使用。lc-ms(b)：tr＝0.15min；[m+h]+：178.24。26.3.1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-咪唑并[4,5-b]吡啶-3-基-乙酮使用類似于實例11、步驟11.3的方法，用中間物26.2替換中間物4.2且用dcm替換dmf來制備此化合物。藉由制備型lc-ms(iv)隨后制備型tlc(0.5mm，dcm/meoh95/5)純化粗產(chǎn)物。lc-ms(a)：tr＝0.8min；[m+h]+：573.0。實例27：2-(3,5-二甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-(2-羥基-乙基)-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮27.1.(r)-2-(4-(2-(三氟甲基)-4-(2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)噻唑-5-基)哌嗪-2-基)乙-1-醇，呈鹽酸鹽形式使用類似于實例1的方法，遵循步驟1.1至步驟1.7，用(r)-1-叔丁氧基羰基-2-羥乙基哌嗪替換步驟1.3中的(s)-1-叔丁氧基羰基-2-羥甲基哌嗪來制備此化合物。lc-ms(a)：tr＝0.69min；[m+h]+：428.0。27.2.2-(3,5-二甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-(2-羥基-乙基)-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮使用類似于實例12的方法，用中間物27.1替換中間物11.2且用dcm替換dmf來制備此化合物。藉由制備型lc-ms(i)隨后制備型tlc(0.5mm，dcm/meoh97/3)純化粗產(chǎn)物。lc-ms(c)：tr＝0.98min；[m+h]+：565.2。實例28：1-{(r)-2-(2-羥基-乙基)-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(3-三氟甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮使用類似于實例27、步驟27.2的方法，用中間物5.2替換(3,5-二甲基-1h-1,2,4-三唑-1-基)乙酸來制備此化合物。藉由制備型lc-ms(v)純化粗產(chǎn)物。lc-ms(c)：tr＝1.16min；[m+h]+：605.1。實例29：2-(3-環(huán)丁基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-(2-羥基-乙基)-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮29.1.(3-環(huán)丁基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸苯甲酯使用類似于實例1、步驟1.8的方法，用3-環(huán)丁基-1h-1,2,4-三唑替換3-叔丁基-1h-1,2,4-三唑來制備此化合物。進(jìn)一步進(jìn)行制備型lc-ms(iv)純化，之后使位置異構(gòu)混合物經(jīng)受制備型手性hplc(v)供分離。第一洗脫部分：(5-環(huán)丁基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸苯甲酯。lc-ms(a)：tr＝0.68min；[m+h]+：272.2。第二洗脫部分：(3-環(huán)丁基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸苯甲酯。lc-ms(a)：tr＝0.7min；[m+h]+：272.2。29.2.(3-環(huán)丁基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸使用類似于實例1、步驟1.9的方法，用來自步驟29.1的(3-環(huán)丁基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸苯甲酯替換中間物1.8來制備此化合物。lc-ms(a)：tr＝0.32min；[m+h]+：182.3。在8.40ppm的ch(三唑)與5.02ppm的n-ch2-cooh之間可見roesy信號。29.3.2-(3-環(huán)丁基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-(2-羥基-乙基)-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮使用類似于實例27、步驟27.2的方法，用中間物29.2替換(3,5-二甲基-1h-1,2,4-三唑-1-基)乙酸來制備此化合物。藉由制備型lc-ms(iv)純化粗產(chǎn)物。lc-ms(c)：tr＝1.11min；[m+h]+：591.2。實例30：2-(3-叔丁基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-(2-羥基-乙基)-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮使用類似于實例27、步驟27.2的方法，用中間物1.9替換(3,5-二甲基-1h-1,2,4-三唑-1-基)乙酸來制備此化合物。藉由制備型lc-ms(i)純化粗產(chǎn)物。lc-ms(c)：tr＝1.13min；[m+h]+：593.2。實例31：2-(3-環(huán)丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-(2-羥基-乙基)-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮使用類似于實例27、步驟27.2的方法，用中間物3.2替換(3,5-二甲基-1h-1,2,4-三唑-1-基)乙酸來制備此化合物。藉由制備型lc-ms(i)純化粗產(chǎn)物。lc-ms(c)：tr＝1.06min；[m+h]+：577.4。實例32：2-(3-乙基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-(2-羥基-乙基)-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮32.1.(3-乙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸苯甲酯使用類似于實例1、步驟1.8的方法，用3-乙基-1h-1,2,4-三唑替換3-叔丁基-1h-1,2,4-三唑來制備此化合物。藉由制備型手性hplc(vi)純化位置異構(gòu)體的混合物。第一洗脫部分：(5-乙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸苯甲酯：lc-ms(a)：tr＝0.72min；[m+h]+：246.2。在2.72ppm的ch2ch3與4.93ppm的ch2co2之間可見roesy信號。第二洗脫部分：(3-乙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸苯甲酯：lc-ms(a)：tr＝0.71min；[m+h]+：246.2。在8.08ppm的ch與4.96ppm的ch2co2之間可見roesy信號。32.2.(3-乙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸使用類似于實例1、步驟1.9的方法，用來自步驟32.1的(3-乙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸苯甲酯替換中間物1.8來制備此化合物。lc-ms(a)：tr＝0.25min；[m+h]+：156.2。32.3.2-(3-乙基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-(2-羥基-乙基)-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮使用類似于實例27、步驟27.2的方法，用中間物32.2替換(3,5-二甲基-1h-1,2,4-三唑-1-基)乙酸來制備此化合物。藉由制備型lc-ms(iv)純化粗產(chǎn)物。lc-ms(c)：tr＝1.04min；[m+h]+：564.9。實例33：2-(5-乙基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-(2-羥基-乙基)-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮33.1.(5-乙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸使用類似于實例1、步驟1.9的方法，用來自步驟32.1的(5-乙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸苯甲酯替換中間物1.8來制備此化合物。lc-ms(a)：tr＝0.22min；[m+h]+：156.1。33.2.2-(5-乙基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-(2-羥基-乙基)-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮使用類似于實例27、步驟27.2的方法，用中間物33.1替換(3,5-二甲基-1h-1,2,4-三唑-1-基)乙酸來制備此化合物。藉由制備型lc-ms(i)純化粗產(chǎn)物。lc-ms(c)：tr＝1.03min；[m+h]+：565.2。實例34：1-{(r)-2-(2-羥基-乙基)-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(3-異丙基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮使用類似于實例27、步驟27.2的方法，用中間物4.2替換(3,5-二甲基-1h-1,2,4-三唑-1-基)乙酸來制備此化合物。藉由制備型lc-ms(iv)純化粗產(chǎn)物。lc-ms(c)：tr＝1.08min；[m+h]+：579.2。實例35：1-{(r)-2-(2-羥基-乙基)-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(3-甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮使用類似于實例27、步驟27.2的方法，用中間物16.2替換(3,5-二甲基-1h-1,2,4-三唑-1-基)乙酸來制備此化合物。藉由制備型lc-ms(ii)隨后制備型lc-ms(iv)純化粗產(chǎn)物。lc-ms(c)：tr＝1.00min；[m+h]+：551.2。實例36：1-{(r)-2-(2-羥基-乙基)-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(5-甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮36.1.(5-甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸使用類似于實例1、步驟1.9的方法，用來自步驟16.1的(5-甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸苯甲酯替換中間物1.8來制備此化合物。lc-ms(a)：tr＝0.19min；[m+h]+：142.2。36.2.1-{(r)-2-(2-羥基-乙基)-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(5-甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮使用類似于實例27、步驟27.2的方法，用中間物36.1替換(3,5-二甲基-1h-1,2,4-三唑-1-基)乙酸來制備此化合物。藉由制備型lc-ms(iv)純化粗產(chǎn)物。lc-ms(c)：tr＝1.00min；[m+h]+：551.1。實例37：1-{(r)-2-(2-羥基-乙基)-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(3-甲氧基甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酮使用類似于實例27、步驟27.2的方法，用中間物17.2替換(3,5-二甲基-1h-1,2,4-三唑-1-基)乙酸來制備此化合物。藉由制備型lc-ms(iv)純化粗產(chǎn)物。lc-ms(b)：tr＝1.37min；[m+h]+：581.1。實例38：2-(3-二氟甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮38.1.(3-二氟甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸苯甲酯使用類似于實例1、步驟1.8的方法，用3-(二氟甲基)-1h-1,2,4-三唑替換3-叔丁基-1h-1,2,4-三唑來制備此化合物。藉由cc(biotage，snap50g筒，溶劑a：hep；溶劑b：ea；以％b計的梯度：30持續(xù)5cv，歷經(jīng)5cv30至70，70持續(xù)3cv，歷經(jīng)2cv70至100，100持續(xù)1cv)純化粗產(chǎn)物，產(chǎn)生兩種位置異構(gòu)體：第一洗脫部分：(5-二氟甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸苯甲酯：黃色油狀物。lc-ms(a)：tr＝0.78min；[m+h]+：268.2。第二洗脫部分：(3-二氟甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸苯甲酯：灰白色固體。lc-ms(a)：tr＝0.77min；[m+h]+：268.1。38.2.(3-二氟甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸使用類似于實例1、步驟1.9的方法，用來自步驟38.1的(3-二氟甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-乙酸苯甲酯替換中間物1.8來制備此化合物。lc-ms(a)：tr＝0.26min；[m+h]+：178.2。38.3.2-(3-二氟甲基-[1,2,4]三唑-1-基)-1-{(r)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮使用類似于實例27、步驟27.2的方法，用中間物38.2替換(3,5-二甲基-1h-1,2,4-三唑-1-基)乙酸來制備此化合物。藉由制備型lc-ms(iv)純化粗產(chǎn)物。lc-ms(a)：tr＝0.86min；[m+h]+：573.0。實例39：1-{(r)-2-(2-羥基-乙基)-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(3-甲基-吡唑-1-基)-乙酮使用類似于實例27、步驟27.2的方法，用(3-甲基-1h-吡唑-1-基)乙酸替換(3,5-二甲基-1h-1,2,4-三唑-1-基)乙酸來制備此化合物。藉由制備型lc-ms(iv)純化粗產(chǎn)物。lc-ms(c)：tr＝1.08min；[m+h]+：550.0。實例40：2-(3-乙基-吡唑-1-基)-1-{(r)-2-(2-羥基-乙基)-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮40.1(3-乙基-吡唑-1-基)-乙酸苯甲酯使用類似于實例1、步驟1.8的方法，用3-乙基-1h-吡唑替換3-叔丁基-1h-1,2,4-三唑來制備此化合物。藉由制備型手性hplc(vii)純化位置異構(gòu)體的混合物。第一洗脫部分：(3-乙基-吡唑-1-基)-乙酸苯甲酯：lc-ms(a)：tr＝0.82min；[m+h]+：245.1。在7.37ppm的吡唑-ch與4.91ppm的ch2co2之間可見roesy信號。40.2(3-乙基-吡唑-1-基)-乙酸使用類似于實例1、步驟1.9的方法，用來自步驟40.1的(3-乙基-吡唑-1-基)-乙酸苯甲酯替換中間物1.8來制備此化合物。lc-ms(a)：tr＝0.43min；[m+h]+：155.4。40.3.2-(3-乙基-吡唑-1-基)-1-{(r)-2-(2-羥基-乙基)-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮使用類似于實例27、步驟27.2的方法，用中間物40.2替換(3,5-二甲基-1h-1,2,4-三唑-1-基)乙酸來制備此化合物。藉由制備型lc-ms(i)純化粗產(chǎn)物。lc-ms(c)：tr＝1.14min；[m+h]+：564.0。實例41：2-(3-環(huán)丙基-吡唑-1-基)-1-{(r)-2-(2-羥基-乙基)-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮使用類似于實例27、步驟27.2的方法，用(3-環(huán)丙基-1h-吡唑-1-基)乙酸替換(3,5-二甲基-1h-1,2,4-三唑-1-基)乙酸來制備此化合物。藉由制備型lc-ms(iv)純化粗產(chǎn)物。lc-ms(c)：tr＝1.15min；[m+h]+：576.2。實例42：1-{(s)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-2-(3-甲基-吡唑-1-基)-乙酮使用類似于實例1、步驟1.10的方法，用(3-甲基-1h-吡唑-1-基)乙酸替換中間物1.9來制備此化合物。藉由制備型lc-ms(i)純化粗產(chǎn)物。lc-ms(c)：tr＝1.07min；[m+h]+：536.2。實例43：2-(3-乙基-吡唑-1-基)-1-{(s)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮使用類似于實例1、步驟1.10的方法，用中間物40.2替換中間物1.9來制備此化合物。藉由制備型lc-ms(i)純化粗產(chǎn)物。lc-ms(c)：tr＝1.12min；[m+h]+：550.0。實例44：2-(3-環(huán)丙基-吡唑-1-基)-1-{(s)-2-羥甲基-4-[2-三氟甲基-4-(2-三氟甲基-嘧啶-5-基)-噻唑-5-基]-哌嗪-1-基}-乙酮使用類似于實例1、步驟1.10的方法，用(3-環(huán)丙基-1h-吡唑-1-基)乙酸替換中間物1.9來制備此化合物。藉由制備型lc-ms(i)純化粗產(chǎn)物。lc-ms(c)：tr＝1.13min；[m+h]+：562.2。ii.生物分析a)flipr分析：在熒光成像讀板儀(flipr：分子裝置)中使用表達(dá)偶合至g蛋白(galpha(16))的人類cxcr3a(基因庫(genbank)：ay242128)的經(jīng)改造cho-k1細(xì)胞來測試化合物的生物活性。在生物測定之前的那天將細(xì)胞涂于補充有10％fbs及g418及濕霉素抗生素的f12培養(yǎng)基中，以維持重組性選擇。在生物測定時，洗滌細(xì)胞且在hanks平衡鹽溶液(invitrogen)中用fluo-4-am(invitrogen)染料負(fù)載一小時，該hanks平衡鹽溶液用ph7.4下的20mmhepes及含有5mm丙磺舒的碳酸氫鈉(0.038％)緩沖。但不具有染料且含有2.5mm濃度的丙磺舒的此緩沖液亦用于洗滌步驟(洗滌緩沖液)；或不具有染料及丙磺舒兩者但補充有0.1％bsa的緩沖液用于化合物稀釋步驟(稀釋緩沖液)。將細(xì)胞洗滌不含過量染料，且添加60微升洗滌緩沖液。以于dmso中10mm的濃度制成測試化合物的儲備溶液，且在稀釋緩沖液中連續(xù)稀釋，達(dá)至抑制劑量反應(yīng)曲線所需的濃度。37℃下10分鐘培育期后，根據(jù)制造商的說明書將10微升各化合物稀釋液自化合物培養(yǎng)盤轉(zhuǎn)移至flipr儀器中含有重組性細(xì)胞的培養(yǎng)盤。基線讀數(shù)后，再次使用flipr儀器，添加10微升20nm濃度的cxcl10激動劑(來自peprotech)。監(jiān)測添加測試化合物前后的熒光變化。在扣除基線之后輸出添加cxcl10之后基準(zhǔn)面上方的發(fā)射峰值。所計算的ic50值可視日常分析效能而變動。此類波動為本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知。在已測定相同化合物的ic50值若干次的情況下，給出平均值。數(shù)據(jù)展示于表1中。表1實例編號flipr：ic50(nm)實例編號flipr：ic50(nm)16.7233526.0247.633.0253.641.8263.554.0275.264.6281.173.1295.5810304.491.3314.4101.1322.6113.43327126.9344.5131.2352.9140.7368.0152.3375.7163.9388.6175.9391.018510401.61942410.45206.4421.0214.3431.2221.6440.38b)：受體內(nèi)化分析：以于dmso中10mm的濃度制成測試化合物的儲備溶液，且在含有0.5％bsa的pbs中連續(xù)稀釋，達(dá)至抑制劑量反應(yīng)曲線所需的濃度。隨后使經(jīng)稀釋化合物與在pbs中稀釋的相等體積的cxcl10(peprotech)混合。將抗凝靜脈人類全血添加至混合物中，隨后使其在37℃下的co2恒溫箱中培育，以允許配體介導(dǎo)的受體內(nèi)化(最終cxcl10濃度為9nm)。30分鐘后，使血液與熒光標(biāo)記的cxcr3及cd4特異性抗體(bectondickinson)混合且在冰上培育10分鐘。隨后使樣品與bdfacs裂解溶液(bectondickinson)混合，以便消除紅血球。用含有0.5％bsa的pbs洗滌細(xì)胞后，隨后在流式細(xì)胞儀(facscantoii，bectondickinson)中分析樣品。對于數(shù)據(jù)分析，使用facsdiva軟件(bectondickinson)，關(guān)于cd4陽性細(xì)胞測定對應(yīng)于cxcr3細(xì)胞表面表達(dá)的平均熒光。使用程序格拉夫帕德(graphpad)prism或類似軟件來將數(shù)據(jù)擬合成單一位點劑量反應(yīng)曲線且計算ic50值。所計算的ic50值可視日常分析效能而變動。此類波動為本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知。在已測定相同化合物的ic50值若干次的情況下，給出平均值。數(shù)據(jù)展示于表2中。表2實例編號內(nèi)化ic50(nm)實例編號內(nèi)化ic50(nm)141523273024632435531912566442832674.253282723567782821472270291578320030170915203173.8109613293.31133933652123243484.81310503510214199364511516603739316542382581712903946.31865004032.71933104130.22023804259.7217374340.3221054476.0c)hergq-patch分析：對于hergk通道的阻斷，使用穩(wěn)定表達(dá)人類erg基因(登錄號(accessionnumber)u04270,bsys,witterswil,switzerland)的cho細(xì)胞及qpatch自動平臺(sophion,ballerup,denmark)以單細(xì)胞模式在室溫下評估化合物。細(xì)胞在37℃下含5％co2的培養(yǎng)燒瓶中，在補充有9％(v/v)胎牛血清、0.9％青霉素/鏈霉素(10,000u/ml，invitrogen15140148)、100μg/ml濕霉素b(invitrogen10687010)的培養(yǎng)基(ham'sf-12營養(yǎng)混合物，invitrogen21765-029)中生長。當(dāng)細(xì)胞～80％匯合(每2-3天)時，使其分裂以用于進(jìn)一步培養(yǎng)或用于電生理學(xué)。對于進(jìn)一步培養(yǎng)，用0.25％胰蛋白酶edta溶液(invitrogen25200-056)分離細(xì)胞，且將一部分細(xì)胞(10-30％)再接種于培養(yǎng)基中。對于電生理學(xué)，在實驗日，用0.25％胰蛋白酶edta溶液分離細(xì)胞，且將所有細(xì)胞懸浮于補充有20mmhepes及0.04mg/ml胰蛋白酶抑制劑的懸浮液培養(yǎng)基(293sfmii，invitrogen11686-029)中。在qpatch自動機(jī)中在32-35℃下將細(xì)胞保持于懸浮液培養(yǎng)基中直至使用，此時將等分試樣轉(zhuǎn)移至含有0.3％v/vdmso的胞外溶液(以mm為單位：nacl150；kcl4；cacl21.2；mgcl21；hepes10；用naoh調(diào)節(jié)至ph7.4)，且施用至測試板。用膜片-電壓-箝制技術(shù)在全細(xì)胞組態(tài)中使用內(nèi)部溶液(以mm為單位：kcl，140；nacl，10；mgcl2，1；hepes；10；egta；5；koh下ph＝7.2)量測k+流。使用qpatch自動機(jī)的內(nèi)部貝塞爾(bessel)過濾器在2khz截止頻率下低通過濾流且使其在10khz下數(shù)字化。由-80mv的吸持電壓藉由500-ms去極化至+20mv，隨后500-ms復(fù)極化至-40mv產(chǎn)生k+尾流；在復(fù)極化至-40mv結(jié)束時量測尾流振幅。實驗期間每10秒重復(fù)脈沖圖案，在胞外溶液中3分鐘后量測基線k+流，隨后施用含有化合物的測試溶液，且施用至細(xì)胞3分鐘后量測化合物存在下的k+流。藉由以下制備各別測試溶液：(1)將測試化合物溶解于純dmso中，(2)在胞外溶液中稀釋此dmso溶液，及(3)進(jìn)一步添加dmso，使得最終測試溶液具有300nm或3000nm的濃度的測試化合物且含有0.3％v/vdmso。藉由化合物存在下的流除以基線流以阻斷％來定量化合物作用，針對各化合物進(jìn)行兩次或三次實驗，且最終值表示各實驗的結(jié)果平均值。數(shù)據(jù)展示于表3中。表3當(dāng)前第1頁12