本發(fā)明屬于藥物化學(xué)的合成技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種具有生物活性的哌啶酮鏈接鄰氟苯化合物的制備方法

背景技術(shù)：

含氮雜環(huán)化合物因其具有良好的生物活性而在醫(yī)藥和農(nóng)藥等人類(lèi)健康和農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中發(fā)揮著重要的作用。近年來(lái)，這類(lèi)物質(zhì)在醫(yī)藥和農(nóng)藥發(fā)展中的作用日益明顯，大多數(shù)雜環(huán)類(lèi)的新農(nóng)藥對(duì)溫血?jiǎng)游锒拘院苄?，?duì)鳥(niǎo)類(lèi)、魚(yú)類(lèi)的毒性也很低，這為新型農(nóng)藥醫(yī)藥的研發(fā)提供了極其廣闊的應(yīng)用前景。哌啶衍生物是重要的農(nóng)藥和醫(yī)藥中間體，比如在農(nóng)藥行業(yè)中可以合成一種名為哌草丹的稻田除草劑，它是一種選擇性的非激素型硫代氨基甲酸類(lèi)除草劑，具有很大的發(fā)展空間；在醫(yī)藥行業(yè)可以用于合成鹽酸乙酰羅沙替丁(是一種消化系統(tǒng)藥物)，雙密達(dá)莫心(是一種血管疾病藥物)等。因此，探索具有哌啶基團(tuán)的新型化合物對(duì)于合成新的農(nóng)藥及醫(yī)藥等先導(dǎo)化合物具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。本課題組設(shè)計(jì)并合成了一系列新型哌啶酮鏈接鄰氟苯化合物，并對(duì)其進(jìn)行了相關(guān)活性測(cè)試。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明解決的技術(shù)問(wèn)題是提供了一種合成方法簡(jiǎn)單，分子結(jié)構(gòu)新穎的具有抗真菌活性的哌啶酮鏈接鄰氟苯化合物的制備方法。

本發(fā)明為解決上述技術(shù)問(wèn)題采用如下技術(shù)方案，一種新型的哌啶酮鏈接鄰氟苯化合物制備方法，其特征在于具體步驟為：

a、n-boc-4-哌啶酮與碳酸二甲酯在叔丁醇鉀的作用下反應(yīng)得到n-boc-3-甲酸甲酯-4-哌啶酮

b、n-boc-3-甲酸甲酯-4-哌啶酮在乙酸銨作用下，酮羰基氧化還原成氨基，得到化合物n-boc-3-甲酸甲酯-4-氨基-3-烯-哌啶

c、n-boc-3-甲酸甲酯-4-氨基-3-烯-哌啶與氯甲酰乙酸乙酯在tea作用下發(fā)生取代反應(yīng)得到化合物n-boc-3-甲酸甲酯-4-氨基甲酰乙酸乙酯-3-烯-哌啶

d、n-boc-3-甲酸甲酯-4-氨基甲酰乙酸乙酯-3-烯-哌啶在叔丁醇鉀的作用下發(fā)生分子內(nèi)成環(huán)得到化合物然后在酸性條件下該化合物進(jìn)行分子內(nèi)氫轉(zhuǎn)移和羰基還原得到化合物

e、在強(qiáng)酸條件下，加熱脫去酯基和boc基團(tuán)，得到化合物

f、在三氯氧磷作用下，羥基被氯取代得到化合物

g、在濃鹽酸作用下使氯代碳氮雙鍵變?yōu)轷０锋I得到化合物

h、在堿性條件下，進(jìn)行boc氨基保護(hù)得到化合物

i、在碳酸銫作用下與碘甲烷反應(yīng)得到化合物

j、在磷酸鉀作用下與鄰氟苯硼酸反應(yīng)生成

k、脫去boc基團(tuán)得到化合物

l、與羧酸化合物在堿性條件進(jìn)行?；兔摷谆磻?yīng)得到

進(jìn)一步限定，步驟a的具體過(guò)程為：在反應(yīng)瓶中，把1eq的n-boc-4-哌啶酮加入到10v體積的甲苯中，再加入2eq的碳酸二甲酯和2eq的叔丁醇鉀，加熱至70℃反應(yīng)1h，冷卻至室溫，加水淬滅，用1mol/l的hcl調(diào)節(jié)反應(yīng)液ph為7，乙酸乙酯萃取，無(wú)水硫酸鈉干燥后，旋干得到黃色油狀物n-boc-3-甲酸甲酯-4-哌啶酮

進(jìn)一步限定，步驟b的具體過(guò)程為：將1eq的n-boc-3-甲酸甲酯-4-哌啶酮加入到10倍體積的甲醇中，再加入3eq的乙酸銨，反應(yīng)過(guò)夜，旋干甲醇，加入3倍體積的水，二氯甲烷萃取反應(yīng)液后用無(wú)水硫酸鈉干燥，旋干后得到紅的油狀液體n-boc-3-甲酸甲酯-4-氨基-3-烯-哌啶

進(jìn)一步限定，步驟c的具體過(guò)程為：將1eq的n-boc-3-甲酸甲酯-4-氨基-3-烯-哌啶加入到8倍體積的dcm中，再加入1.05eq的tea，冷卻至10℃，滴加1.05eq的4-氯甲酰乙酸乙酯，室溫反應(yīng)過(guò)夜，再加入8倍體積的dcm稀釋反應(yīng)液，水洗兩次，無(wú)水硫酸鈉干燥，旋干既得紅色油狀產(chǎn)物n-boc-3-甲酸甲酯-4-氨基甲酰乙酸乙酯-3-烯-哌啶

進(jìn)一步限定，步驟d的具體過(guò)程為：把1eq的n-boc-3-甲酸甲酯-4-氨基甲酰乙酸乙酯-3-烯-哌啶加入到10倍體積的thf中，再分批加入2.0eq的t-buok，反應(yīng)溫度控制在小于25℃，反應(yīng)1h后加入冰水淬滅，用2mol/l的hcl調(diào)節(jié)反應(yīng)液ph為3，過(guò)濾，真空干燥得到類(lèi)白色固體產(chǎn)品

進(jìn)一步限定，步驟e的具體過(guò)程為：在10eq6mol/l的hcl溶液中，分批加入1.0eq的加熱至100℃，反應(yīng)過(guò)夜，旋干反應(yīng)溶劑，再用乙醚洗滌，真空干燥得到類(lèi)白色固體

進(jìn)一步限定，步驟f的具體過(guò)程為：向5eqpocl3中分批加入1.0eq的加熱至100℃，反應(yīng)過(guò)夜，旋干pocl3得到紅色油狀產(chǎn)物

進(jìn)一步限定，步驟g的具體過(guò)程為：把加入到4倍體積的1,4-二氧六環(huán)中，再加入4倍體積的濃鹽酸，加熱至100℃，回流反應(yīng)2天，旋干溶劑后加入10倍體積的乙酸乙酯，水洗三次，干燥旋干后得到棕色固體

進(jìn)一步限定，步驟h的具體過(guò)程為：把1eq的加入到10倍體積的1,4-二氧六環(huán)和10倍體積的水中，再分批加入3.0eq的碳酸鈉和1.5eq的(boc)2o，室溫反應(yīng)10h后，過(guò)濾，再用乙酸乙酯洗滌濾餅后用乙酸乙酯萃取反應(yīng)液，再用氯化鈉溶液洗滌，干燥，旋反應(yīng)液得到

進(jìn)一步限定，步驟i的具體過(guò)程為：把1.0eq的加入到10倍體積的dmf中，再加入1.5eq的cs2co3，1.3eq的碘化鉀，室溫反應(yīng)過(guò)夜，加入冰水淬滅反應(yīng)液，乙酸乙酯萃取反應(yīng)液，氯化鈉溶液洗滌，干燥，旋干，再用乙醚打漿，過(guò)濾，真空干燥得到白色固體

進(jìn)一步限定，步驟j的具體過(guò)程為：將1.0eq的加入到20倍體積的thf中，再加入3eq的1mol/l的磷酸鉀和1.2eq的鄰氟苯硼酸，加熱至100℃，反應(yīng)過(guò)夜，乙酸乙酯萃取，干燥，旋干后柱層析分離得到

進(jìn)一步限定，步驟k的具體過(guò)程為：1.0eq的加入到10倍體積的甲醇和10體積的12mol/l的hcl/1,4-二氧六環(huán)中，室溫反應(yīng)過(guò)夜，旋干，乙醚洗滌，得到

進(jìn)一步限定，步驟l的具體過(guò)程為：在反應(yīng)瓶中，把加入到dmf中，再加入三乙胺和羧酸化合物，加熱到70℃，反應(yīng)一段時(shí)間，同時(shí)進(jìn)行?；兔摷谆玫交衔?imgfile="bda0001312424290000055.gif"wi="313"he="279"img-content="drawing"img-format="gif"orientation="portrait"inline="no"/>

本發(fā)明所述的具有生物活性的哌啶酮鏈接鄰氟苯化合物合成路線為：

本發(fā)明通過(guò)對(duì)哌啶酮分子進(jìn)行了改造，合成了一系列哌啶酮鏈接鄰氟苯化合物并進(jìn)行了抗真菌活性測(cè)試，發(fā)現(xiàn)該類(lèi)化合物對(duì)白假絲酵母菌具有較好的抑制活性。

具體實(shí)施方式

以下通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容做進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明，但不應(yīng)該將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)施例，凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。

實(shí)施例1

在反應(yīng)瓶中，把n-boc-4-哌啶酮20g(0.1mol)加入到甲苯200ml中，再加入碳酸二甲酯18g(0.2mol)和叔丁醇鉀22g(0.2mol)，加熱至70℃反應(yīng)1h，冷卻至室溫，加水100ml淬滅，用1mol/l的hcl調(diào)節(jié)反應(yīng)液ph為7，乙酸乙酯萃取，無(wú)水硫酸鈉干燥后，旋干得到黃色油狀物n-boc-3-甲酸甲酯-4-哌啶酮24g；¹hnmr(400mhz,cd3cl)δ:3.81(s,1h),3.71(d,j＝8.4hz,1h),3.68(d,j＝8.4hz,1h),3.45(s,3h),3.07-3.05(m,2h),2.76-2.73(m,2h),1.37(s,9h).ms-esi(m/z):258.3[m+h⁺]。

實(shí)施例2

在反應(yīng)瓶中，將n-boc-3-甲酸甲酯-4-哌啶酮25g(0.1mol)加入到甲醇300ml中，再加入乙酸銨22g(0.3mol)，反應(yīng)過(guò)夜，tlc監(jiān)控原料反應(yīng)完全，旋干甲醇，加入水900ml，用二氯甲烷300ml萃取反應(yīng)液三次，合并有機(jī)相后用無(wú)水硫酸鈉干燥，旋干后得到紅的油狀液體n-boc-3-甲酸甲酯-4-氨基-3-烯-哌啶22g；¹hnmr(400mhz,cd3cl)δ:8.56(s,2h),3.93(s,2h),3.77(s,3h),3.57-3.55(m,2h),2.16-2.13(m,2h),1.37(s,9h).ms-esi(m/z):257.3[m+h⁺]。

實(shí)施例3

在反應(yīng)瓶中，將n-boc-3-甲酸甲酯-4-氨基-3-烯-哌啶26g(0.1mol)加入到二氯甲烷200ml中，再加入tea11g(0.11mol)，冷卻至10℃，緩慢滴加4-氯甲酰乙酸乙酯16g(0.105mol)，室溫反應(yīng)過(guò)夜，tlc監(jiān)控原料反應(yīng)完全，再加入二氯甲烷200ml稀釋反應(yīng)液，水洗兩次，無(wú)水硫酸鈉干燥，旋干既得紅色油狀產(chǎn)物n-boc-3-甲酸甲酯-4-氨基甲酰乙酸乙酯-3-烯-哌啶23g；¹hnmr(400mhz,cd3cl)δ:4.71(s,2h),3.93(s,2h),3.79(s,3h),3.57-3.55(m,2h),3.53(s,2h),2.16-2.13(m,2h),1.37(s,9h),1.29(s,3h).ms-esi(m/z):371.4[m+h⁺]。

實(shí)施例4

在反應(yīng)瓶中，把n-boc-3-甲酸甲酯-4-氨基甲酰乙酸乙酯-3-烯-哌啶37g(0.1mol)加入到thf400ml中，再分批加入t-buok23g(0.2mol)，反應(yīng)溫度控制在小于25℃，反應(yīng)1h后加入冰水300ml淬滅，用2mol/l的hcl調(diào)節(jié)反應(yīng)液ph為3，過(guò)濾，真空干燥得到類(lèi)白色固體產(chǎn)品32g；¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:11.51(s,1h),5.35(s,1h),4.71(s,2h),4.33(d,j＝4.0hz,2h),3.66-3.62(m,2h),3.25(d,j＝12.0hz,2h),1.41-1.39(m,9h),1.33-1.32(m,3h)。

實(shí)施例5

在反應(yīng)瓶中，加入在6mol/l的hcl溶液200ml，再分批加入34g(0.1mol)，加熱至100℃，反應(yīng)過(guò)夜，旋干反應(yīng)溶劑，再用乙醚洗滌，真空干燥得到類(lèi)白色固體15g；¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:11.47(s,1h),5.95(s,1h),5.41(s,1h),3.86-3.85(m,2h),3.71(d,j＝12.0hz,2h),3.11-3.09(m,2h),1.90(s,1h)。

實(shí)施例6

在密閉的反應(yīng)瓶中，向三氯氧磷50g(0.5mol)中分批加入16g(0.1mol)，緩慢加熱至100℃，反應(yīng)過(guò)夜，真空旋干三氯氧磷得到紅色油狀產(chǎn)物16g；¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:7.61(s,1h),3.81(s,2h),3.37(d,j＝12.0hz,2h),3.13-3.12(m,2h),1.87(s,1h)。

實(shí)施例7

在帶有溫度計(jì)和攪拌的反應(yīng)瓶中，把20g加入到1,4-二氧六環(huán)100ml中，再緩慢加入濃鹽酸100ml，加熱至100℃，回流反應(yīng)2天，旋干溶劑后加入10倍體積的乙酸乙酯，水洗三次，干燥旋干后得到棕色固體17g；¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:8.17(s,1h),6.62(s,1h),3.35(s,2h),2.96(d,j＝12.0hz,2h),2.07-2.05(m,2h).ms-esi(m/z):185.6[m+h⁺]。

實(shí)施例8

在反應(yīng)瓶中，把18g(0.1mol)加入到1,4-二氧六環(huán)200ml和水200ml中，再分批加入碳酸鈉30g(0.3mol)和(boc)2o33g(0.15mol)，室溫反應(yīng)10h后，tlc監(jiān)控原料反應(yīng)完全，過(guò)濾反應(yīng)液，再用乙酸乙酯100ml洗滌濾餅后用乙酸乙酯200ml萃取反應(yīng)液三次，再用氯化鈉溶液洗滌，干燥，旋反應(yīng)液得到20g；¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:6.61(s,1h),3.93(s,2h),3.54(s,3h),3.57(d,j＝12.0hz,2h),2.07-2.05(m,2h),1.39(s,9h)。

實(shí)施例9

在反應(yīng)液中，把28g(0.1mol)加入到dmf300ml中，再加入碳酸銫50g(0.15mol)，碘化鉀20g(0.13mol)，室溫反應(yīng)過(guò)夜，tlc監(jiān)控原料反應(yīng)完全，加入冰水100ml淬滅反應(yīng)液，乙酸乙酯200ml萃取反應(yīng)液三次，飽和氯化鈉溶液200ml洗滌反應(yīng)液，干燥，旋干，再用乙醚打漿，過(guò)濾，真空干燥得到白色固體26g；¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:6.61(s,1h),3.94(s,2h),3.54(s,3h),3.55(d,j＝8.0hz,2h),2.07-2.05(m,2h),1.38(s,9h).ms-esi(m/z):299.8[m+h⁺]。

實(shí)施例10

在反應(yīng)液中，將30g(0.1mol)加入到無(wú)水thf500ml中，再加入1mol/l的磷酸鉀70ml(0.3mol)和2-氟苯硼酸17g(0.12mol)，加熱至100℃，反應(yīng)過(guò)夜，再用乙酸乙酯300ml萃取反應(yīng)液兩次，合并有機(jī)相干燥，旋干有機(jī)相后經(jīng)柱層析分離得到39g；¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:7.47-7.41(m,4h),5.71(s,1h),3.96(s,2h),3.57(s,3h),3.51(d,j＝12.0hz,2h),2.11-2.10(m,2h),1.39(s,9h)。

實(shí)施例11

在反應(yīng)瓶中，將36g(0.1mol)加入到甲醇400ml和12mol/l的hcl/1,4-二氧六環(huán)400ml中，室溫反應(yīng)過(guò)夜，tlc監(jiān)控原料反應(yīng)完全，旋干，乙醚洗滌濃縮物，得到22g；¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:7.63-7.59(m,2h),7.19-7.17(m,2h),5.71(s,1h),3.93(s,2h),3.55(d,j＝12.0hz,2h),3.54(s,3h),2.95-2.93(m,2h),2.07-2.05(m,2h)。

實(shí)施例12

在反應(yīng)瓶中，把26g(0.1mol)加入到dmf中，再加入三乙胺20g(0.2mol)和苯甲酸12g(0.1mol)，加熱到70℃，反應(yīng)3h后經(jīng)tlc監(jiān)控原料反應(yīng)完全，把反應(yīng)液倒入水中，用氯仿200ml萃取反應(yīng)液三次，合并有機(jī)相后旋干得到化合物31g；¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:8.11(s,1h),8.01-7.89(m,3h),7.70-7.66(m,2h),7.12-7.09(m,2h),7.02(d,j＝4.0hz,1h),5.71(s,1h),3.93(s,2h),3.55(d,j＝12.0hz,2h),2.07-2.05(m,2h)。

實(shí)施例13

生物活性測(cè)定

根據(jù)國(guó)標(biāo)gb15979-2002，測(cè)定了藥物質(zhì)量濃度為0.1ml/l時(shí)，目標(biāo)化合物對(duì)白假絲酵母菌和光滑假絲酵母菌標(biāo)準(zhǔn)菌株的抑菌活性。以質(zhì)量濃度為0.1mg/l的化合物對(duì)白假絲酵母菌和光滑假絲酵母菌的活性測(cè)試過(guò)程為例，測(cè)試步驟如下：(1)取實(shí)驗(yàn)樣品0.05mg，加入3mldmso和2ml蒸餾水，配成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10mg/l的樣品溶液；(2)菌液的配置：用棉簽蘸取適量的白假絲酵母菌或光滑假絲酵母菌，溶入到裝有緩沖液的標(biāo)準(zhǔn)試管中混勻，與比濁管對(duì)比，濁度與比濁管相當(dāng)即為所需濃度；(3)取實(shí)驗(yàn)樣品管和含有相同體積相同溶劑的對(duì)照液各1管，高壓滅菌；(4)分別用移液槍移去步驟(2)中的菌懸液100μl，分別加入盛有實(shí)驗(yàn)樣品液和對(duì)照樣液的試管中，混勻，作用20min；(5)分別取0.5ml樣品溶液，加入含4.5ml緩沖溶液的試管內(nèi)，用混勻器混勻，取3個(gè)稀釋度；(6)分別取0.5ml稀釋后的樣品溶液，置于兩個(gè)材料、規(guī)格相同的無(wú)菌培養(yǎng)皿中，在其中加入約15ml溫度為40～50℃的無(wú)菌沙氏培養(yǎng)基，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿，使培養(yǎng)基在培養(yǎng)皿中厚度均勻，待培養(yǎng)基凝固后翻轉(zhuǎn)平板，置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72h；(7)培養(yǎng)完畢，取出培養(yǎng)皿數(shù)菌落個(gè)數(shù)，計(jì)算抑菌率。經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)該類(lèi)化合物苯環(huán)取代基上，間位為吸電子取代基時(shí)對(duì)光滑假絲酵母菌的抑制作用普遍優(yōu)于對(duì)白假絲酵母菌的抑制作用，當(dāng)間位為給電子取代基時(shí)對(duì)白假絲酵母菌的抑制作用普遍優(yōu)于對(duì)光滑假絲酵母菌的抑制作用。

以上實(shí)施例描述了本發(fā)明的基本原理、主要特征及優(yōu)點(diǎn)，本行業(yè)的技術(shù)人員應(yīng)該了解，本發(fā)明不受上述實(shí)施例的限制，上述實(shí)施例和說(shuō)明書(shū)中描述的只是說(shuō)明本發(fā)明的原理，在不脫離本發(fā)明原理的范圍下，本發(fā)明還會(huì)有各種變化和改進(jìn)，這些變化和改進(jìn)均落入本發(fā)明保護(hù)的范圍內(nèi)。