本發(fā)明屬于制藥領(lǐng)域，具體涉及一種胸腺法新聚乙二醇聚合物、包含其的藥物組合物及應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：胸腺法新(簡稱tɑ1)是goldstein等最早從牛胸腺素組分5(tf5)中分離出來的一種28肽，其相對分子量為3108.3，等電點為4.2左右，臨床使用的胸腺法新均為氮末端乙?；漠a(chǎn)品，本發(fā)明中所使用到的胸腺法新均指未乙?；男叵俜ㄐ?。tɑ1廣泛分布于哺乳動物的多種器官，以胸腺組織中的濃度分布最高。tɑ1在各種組織器官中的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)均相同。人tɑ1序列與豬、牛、鼠等動物的tɑ1具有很高的同源性。利用ncbi、pir及swiss-prot等蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫，對已知的tɑ1進行蛋白質(zhì)序列聯(lián)配，發(fā)現(xiàn)從大腸桿菌到哺乳動物，來自不同種屬的tɑ1其氨基酸組成均高度保守。tɑ1作為一種廣譜免疫調(diào)節(jié)劑，臨床結(jié)果顯示其對乙型肝炎和丙型肝炎有顯著療效，對腫瘤和艾滋病也有一定療效。對此，tɑ1還可以用作免疫輔助藥劑，以增強免疫機能衰弱的患者對疫苗的應(yīng)答能力，其應(yīng)用前景極為廣泛。但tɑ1是一種生物活性小肽，在體內(nèi)很容易降解而造成生物穩(wěn)定性差，體內(nèi)半衰期短。臨床數(shù)據(jù)表明，用tɑ1治療乙型肝炎的患者，每周需兩次皮下注射1.6mg，一個療程持續(xù)6個月，長期的注射給患者帶來痛苦或使患者不愿意接受。因此迫切需要研制生物半衰期長、生物活性不發(fā)生顯著降低的tɑ1衍生物或者聚合物。對多肽類藥物進行聚乙二醇修飾，以提高其在體內(nèi)的穩(wěn)定性和延長藥物的半衰期。聚乙二醇(peg)共價修飾蛋白質(zhì)藥物，在蛋白表面形成空間位阻，可以作為屏障擋住蛋白質(zhì)分子表面的抗原決定簇，從而減少免疫原性，減少體內(nèi)清除率。peg的屏障作用還可以保護蛋白質(zhì)不易被蛋白酶水解。蛋白質(zhì)peg化的上述特點均有利于延長蛋白藥物的半衰期。目前來說，對于tɑ1的peg修飾化，主要存在下述難點：(1)tɑ1本身不存在與peg進行偶聯(lián)反應(yīng)的特異性位點，采用賴氨酸ε-nh2和末端氨基進行非特異性peg修飾，易產(chǎn)生多種混合物，難以分離純化，不利于產(chǎn)品質(zhì)量控制；(2)通過固相合成，采用半胱氨酸替代tɑ1序列中的某個氨基酸，然后與peg進行特異性偶聯(lián)，此法改變了tɑ1的原有氨基酸序列，生物學(xué)活性難以得到保障。專利us2009/0221487通過固相合成，采用半胱氨酸替代tɑ1中特位點氨基酸，然后與聚乙二醇馬來酰亞胺進行偶聯(lián)，制備tɑ1衍生物。鑒于tɑ1序列的保守性，采用半胱氨酸替代tɑ1勢必對tɑ1原有的生物學(xué)活性造成改變。此外，該發(fā)明人同樣通過對tɑ1的末端偶聯(lián)了半胱氨酸，然后與聚乙二醇馬來酰亞胺進行偶聯(lián)，制備tɑ1的聚合物，但研究結(jié)果表明該聚合物的半衰期小于其它位點的偶聯(lián)物。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于提供一種胸腺法新聚乙二醇聚合物、包含其的藥用組合物及應(yīng)用。本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是：一種胸腺法新聚乙二醇聚合物或其藥學(xué)上可以接受的鹽、水合物、溶劑化物、多晶型物、互變異構(gòu)體或前藥，該胸腺法新聚乙二醇聚合物具有以下通式：其中r1、r2、r3各自獨立選自h，f，cl，br，i，羥基，c1-6烷基，c2-6烯基，c2-6炔基，氰基，c1-6烷氧基，3至8元碳環(huán)基，3-8元雜環(huán)基或者3至8元雜環(huán)基氧基；n1、n2、n3為0至11。優(yōu)選的，n1、n2和n3之和不超過11。優(yōu)選的，n1、n2和n3之和為2、3、4、5、6。優(yōu)選的，巰基聚乙二醇的分子量范圍為1000-40000。優(yōu)選的，聚乙二醇為單巰基聚乙二醇，分子量范圍為5000-20000。優(yōu)選的，胸腺法新聚乙二醇聚合物具體選自下列結(jié)構(gòu)式中的至少一種：一種藥物組合物，包含上述任一項所述的胸腺法新聚乙二醇聚合物或其藥學(xué)上可以接受的鹽、水合物、溶劑化物、多晶型物、互變異構(gòu)體或前藥。優(yōu)選的，藥物組合物的制劑形式是注射液、注射用粉針；該注射液或注射用粉針溶解后每1ml溶液含有胸腺法新聚乙二醇聚合物1-32mg、甘露醇35-75mg。優(yōu)選的，藥物組合物的制劑形式是注射液、注射用粉針；該注射液或注射用粉針溶解后每1ml溶液含有胸腺法新聚乙二醇聚合物2-10mg，甘露醇45-60mg。上述任一項所述的胸腺法新聚乙二醇聚合物的制備方法，采用固相合成法合成胸腺法新，胸腺法新肽鏈合成完成后脫fmoc保護，將最后一步的乙?；D(zhuǎn)變?yōu)榧尤腭R來酰亞胺基團的羧酸衍生物進行縮合反應(yīng)得到多肽衍生物樹脂，加入切割試劑將多肽衍生物切割下來，多肽衍生物進一步和聚乙二醇巰基反應(yīng)得到胸腺法新聚乙二醇聚合物。優(yōu)選的，馬來酰亞胺基團的羧酸衍生物包括馬來酰亞胺基-x-cooh，x表示連接馬來酰亞胺基與羧基的碳鏈。優(yōu)選的，馬來酰亞胺基團的羧酸衍生物包括乙酸馬來酰亞胺、丙酸馬來酰亞胺、丁酸馬來酰亞胺、己酸馬來酰亞胺、戊酸馬來酰亞胺。優(yōu)選的，縮合反應(yīng)所用的縮合劑為6-氯-1-羥基苯并三氮唑和n,n-二異丙基碳二亞胺。優(yōu)選的，切割試劑為三氟乙酸溶液。優(yōu)選的，多肽衍生物與聚乙二醇巰基按照1：0.5～1:30的摩爾比混合，室溫反應(yīng)，得到胸腺法新聚乙二醇聚合物。優(yōu)選的，多肽衍生物與聚乙二醇巰基按照1：0.5～1:10的摩爾比混合，室溫反應(yīng)，得到胸腺法新聚乙二醇聚合物。優(yōu)選的，多肽衍生物與聚乙二醇巰基按照1：1～1：5的摩爾比混合，室溫反應(yīng)，得到胸腺法新聚乙二醇聚合物。優(yōu)選的，巰基聚乙二醇的分子量范圍為1000～40000。優(yōu)選的，聚乙二醇為單巰基聚乙二醇，分子量范圍為5000～20000。優(yōu)選的，所述制備方法具體包括下列步驟：采用固相合成法合成胸腺法新，脫樹脂fmoc保護基后，加入含馬來酰亞胺基團的羧酸衍生物(1mmol)和縮合劑(1.1ml的8％的cl-hobt和dicdmf溶液)室溫振蕩反應(yīng)，離心，依次用dcm、甲醇、dmf、dcm洗滌，并抽干。加入切割試劑(tfa10ml；苯甲迷0.5ml；苯酚0.5g；tis0.5ml；水0.5ml)室溫下反應(yīng)，過濾反應(yīng)液至50ml離心管中，向離心管中加入無水乙醚至50ml以上，與冰水中冷卻30min沉淀多肽衍生物。取多肽衍生物0.31mmol，加入純化水或ph3-8的磷酸鈉緩沖液1ml，加入0.31mmol～9mmol的聚乙二醇巰基，室溫反應(yīng)4小時即得胸腺法新聚乙二醇聚合物。優(yōu)選的，胸腺法新聚乙二醇聚合物，進一步純化，其純化過程如下：1)平衡：采用20mmolph6.8磷酸鹽緩沖液洗脫5個柱體積；2)上樣：聚合物反應(yīng)液采用陰離子交換柱(bioradnuviatm或類似柱)直接上樣，上樣后采用20mmolph6.8磷酸鹽緩沖液洗脫5個柱體積；3)洗脫：采用含有200mmol的氯化鈉的20mmolph6.8的磷酸鹽洗脫液洗脫，接收洗脫液；將上述洗脫液采用制備色譜進行分離，收集聚合物色譜峰即可。上述任一項所述的胸腺法新聚乙二醇聚合物或其藥學(xué)上可以接受的鹽、水合物、溶劑化物、多晶型物、互變異構(gòu)體或前藥或上述所述的藥物組合物在制備治療提高或維持機體免疫力的藥物中的運用。本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明采用常規(guī)的固相合成法合成tɑ1，將最后一步乙酰化轉(zhuǎn)變?yōu)橐腭R來酰亞胺基活性基團，可特異性與單巰基聚乙二醇室溫偶聯(lián)得到聚合物。本發(fā)明方法工藝簡單，易于工業(yè)化，反應(yīng)條件溫和，摩爾收率大于95％，具有良好的市場前景。本發(fā)明通過固相合成將馬來酰亞胺基引入tɑ1氮末端，然后與peg-sh在室溫下進行特異性偶聯(lián)獲得胸腺法新聚乙二醇聚合物，所述胸腺法新聚乙二醇聚合物不改變胸腺法新的生物結(jié)構(gòu)，對胸腺法新的生物學(xué)活性沒有造成改變，并顯著提高了聚合物的半衰期。本發(fā)明意外的發(fā)現(xiàn)，改用本發(fā)明實施例1制備的胸腺法新聚乙二醇聚合物(peg-mal-ta1)其半衰期是us2009/0221487中的末端引入半胱氨酸形成的聚合物(peg-cys-ta1)的2.5倍，該聚合物半衰期是普通胸腺法新а1半衰期的8倍左右，有效的延長了藥物的半衰期。附圖說明圖1為聚合物的平均分子量測定；圖2為聚合物半衰期的測定結(jié)果。具體實施方式臨床使用的胸腺法新均為氮末端乙?；漠a(chǎn)品，但是，本專利以及實施例中所使用到的胸腺法新均指未乙?；男叵俜ㄐ?。本發(fā)明通過固相合成tɑ1及其n-末端馬來酰亞胺衍生物，然后與peg-sh進行偶聯(lián)獲得該胸腺法新聚乙二醇聚合物，或其藥學(xué)上可以接受的鹽、水合物、溶劑化物、多晶型物、互變異構(gòu)體或前藥；包含其的藥物組合物及其在提高人體免疫上的用途；以便為提高或維持機體免疫力，治療乙肝、丙肝等相關(guān)疾病提供更多更優(yōu)的藥物選擇途徑。本發(fā)明提供一種胸腺法新聚乙二醇聚合物或其藥學(xué)上可以接受的鹽、水合物、溶劑化物、多晶型物、互變異構(gòu)體或前藥，該胸腺法新聚乙二醇聚合物具有以下通式：其中r1、r2、r3各自獨立選自h，f，cl，br，i，羥基，c1-6烷基，c2-6烯基，c2-6炔基，氰基，c1-6烷氧基，3至8元碳環(huán)基，3-8元雜環(huán)基或者3至8元雜環(huán)基氧基。n1、n2、n3為0至11。n1、n2和n3之和優(yōu)選為2、3、4、5、6。采用固相合成法合成tɑ1，將最后一步乙酰化轉(zhuǎn)變?yōu)榧尤牒R來酰亞胺基團羧酸衍生物和偶聯(lián)試劑。包括下列步驟：25％哌啶溶液4ml混勻，室溫振蕩15min脫樹脂fmoc保護基(樹脂0.1mmol)，過濾后換新的哌啶溶液重復(fù)一次，依次使用dmf、甲醇、dcm洗滌樹脂各3次后抽干，加入含馬來酰亞胺基團的羧酸衍生物(1mmol)和縮合劑(1.1ml的8％的cl-hobt和dicdmf溶液)室溫振蕩2小時，離心，依次用dcm、甲醇、dmf、dcm各洗滌2次，并抽干。加入切割試劑(tfa10ml；苯甲迷0.5ml；苯酚0.5g；tis0.5ml；水0.5ml)室溫下反應(yīng)2小時，過濾反應(yīng)液至50ml離心管中，用少量的tfa洗滌樹脂，合并濾液，向離心管中加入無水乙醚至50ml以上，與冰水中冷卻30min沉淀多肽衍生物。取多肽衍生物0.31mmol，加入純化水或ph3-8的磷酸鈉緩沖液1ml，加入0.31mmol～9mmol的聚乙二醇巰基，室溫反應(yīng)4小時即得聚合物。上述聚合物，其純化過程如下：1)平衡：采用20mmolph6.8磷酸鹽緩沖液洗脫5個柱體積；2)上樣：聚合物反應(yīng)液采用陰離子交換柱(bioradnuviatm或類似柱)直接上樣，上樣后采用20mmolph6.8磷酸鹽緩沖液洗脫5個柱體積；3)洗脫：采用含有200mmol的氯化鈉的20mmolph6.8的磷酸鹽洗脫液洗脫，接收洗脫液；將上述洗脫液采用制備色譜進行分離，收集聚合物色譜峰即可。下面結(jié)合實施例對本發(fā)明做進一步的說明，但不限于此。實施例1：采用固相合成法合成tɑ1，將最后一步乙?；D(zhuǎn)變?yōu)榧尤牒R來酰亞胺基團羧酸衍生物和偶聯(lián)試劑，具體包括下列步驟：25％哌啶溶液4ml混勻，室溫振蕩15min脫樹脂fmoc保護基(樹脂0.1mmol)，過濾后換新的哌啶溶液重復(fù)一次，依次使用dmf，甲醇，dcm洗滌樹脂各3次后抽干，加入含3-馬來酰亞胺基丙酸(1mmol)和縮合劑(1.1ml的8％的cl-hobt和dicdmf溶液)室溫振蕩2小時，離心，依次用dcm，甲醇，dmf，dcm各洗滌2次，并抽干。加入切割試劑(tfa10ml；苯甲迷0.5ml；苯酚0.5g；tis0.5ml；水0.5ml)室溫下反應(yīng)2小時，過濾反應(yīng)液至50ml離心管中，用少量的tfa洗滌樹脂，合并濾液，向離心管中加入無水乙醚至50ml，與冰水中冷卻30min沉淀多肽衍生物。通過lc-ms對tɑ1馬來酰亞胺衍生物分子量進行了測定，分子量為3217.4，與目標(biāo)分子量一致。取tɑ1衍生物0.31mmol，加入純化水或ph3-8的磷酸鈉緩沖液1ml，加入0.31mmol～9mmol的聚乙二醇巰基(5kda，n平均值約為124)，室溫反應(yīng)4小時，制備得到胸腺法新聚乙二醇聚合物。其合成路線如下所示：取上述胸腺法新聚乙二醇聚合物反應(yīng)液進行純化，其純化過程如下：1)平衡：采用20mmolph6.8磷酸鹽緩沖液洗脫5個柱體積；2)上樣：取聚合物反應(yīng)液采用陰離子交換柱(bioradnuviatm或類似柱)直接上樣，然后用20mmolph6.8磷酸鹽緩沖液洗脫5個柱體積；3)洗脫：采用含有200mmol的氯化鈉20mmolph6.8的磷酸鹽洗脫液洗脫，接收洗脫液。將接收的洗脫液濃縮后采用制備色譜進行分離，色譜分離條件如下：采用hplc進行制備分離，以zorbax300-sb-c8(5μm,dimensions9.4mm×250mmid,agilent；ln-wsb1156002)色譜柱為固定相；流動相a為0.1％的tfa水溶液，流動相b為含0.1％tfa的80％的乙腈水溶液，按表1進行梯度洗脫；檢測波長220nm，流速為2.0ml/min，進樣量為1ml。表1hplc洗脫梯度時間(min)a相b相080％20％2020％80％20.180％20％3080％20％收集聚合物色譜峰，37℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)后冷凍干燥，冷凍干燥工序如下：(1)預(yù)凍：1小時左右由室溫降低至-40℃，維持2小時；(2)第一次干燥：5小時由-40℃升溫至-30℃，維持5小時；2小時由-30℃升溫至-20℃，維持2小時；1小時由-20℃升溫至-10℃，維持2小時；(3)第二次干燥：2小時由-10℃升溫至0℃，維持1小時；2小時內(nèi)由0℃升溫至20℃，然后2小時內(nèi)升溫至25℃。通過malid-tof-ms對聚合物的平均分子量進行了測定，實驗結(jié)果見圖1。圖1中，聚合物的平均分子量為8kda，與目標(biāo)分子量一致。tɑ1衍生物保持不變，聚乙二醇巰基平均分子量分別為10kda、20kda、40kda時，反應(yīng)結(jié)果基本相同。對實施例1制備的胸腺法新聚乙二醇聚合物(記為peg-mal-ta1)進行半衰期的測定，結(jié)果見圖2。此外，peg-mal-tα1andpeg-cys-tα1在體內(nèi)的藥代動力學(xué)參數(shù)結(jié)果見表2。表2peg-mal-tα1andpeg-cys-tα1在體內(nèi)的藥代動力學(xué)參數(shù)參數(shù)peg-cys-tα1(mean±sd,n＝4)peg-mal-tα1(mean±sd,n＝4)t1/2α(h)0.507±0.3010.468±0.074t1/2β(h)8.175±1.05220.345±4.064v1(l/kg)0.114±0.0280.127±0.007cl(l/h/kg)0.022±0.0010.008±0.003auc(0-t)(mg/l*h)17.461±1.25232.549±2.459auc(0-∞)(mg/l*h)20.641±0.8665.753±22.304表2結(jié)果顯示，本發(fā)明的聚合物，其半衰期(t1/2β20.344h)是us2009/0221487中的末端引入半胱氨酸形成的聚合物(記為peg-cys-ta1)的2.5倍。該聚合物半衰期是普通ta1半衰期(約2.5小時)的8倍左右。此外，由于本偶聯(lián)方法是通過對ta1的氮末端進行偶聯(lián)，與文獻報道的us2009/0221487氮末端偶聯(lián)物應(yīng)具有相似的生物學(xué)活性，均不影響ta1的活性，但本品的體內(nèi)半衰期長，因此體內(nèi)活性理論上應(yīng)該優(yōu)于文獻報道方法。實施例2：采用固相合成法合成tɑ1，在脫保、護切割之前加入6-馬來酰亞胺基己酸和偶聯(lián)試劑。其合成方法同實施例1，合成路線如下所示：通過lc-ms對胸腺法新聚乙二醇聚合物分子量進行了測定，分子量為3259.3，與目標(biāo)分子量一致。純化工藝同實施例1，純化后通過malid-tof-ms對聚合物的平均分子量進行了測定，聚合物的平均分子量為8.1kda，與目標(biāo)分子量一致。實施例3：采用固相合成法合成tɑ1，在脫保、護切割之前加入11-馬來酰亞胺基十一酸和偶聯(lián)試劑。其合成方法同實施例1，合成路線如下所示：通過lc-ms對胸腺法新聚乙二醇聚合物分子量進行了測定，分子量為3329.4，與目標(biāo)分子量一致。純化工藝同實施例1，純化后通過malid-tof-ms對聚合物的平均分子量進行了測定，聚合物的平均分子量為8.2kda，與目標(biāo)分子量一致。實施例4采用固相合成法合成tɑ1，在脫保、護切割之前加入6-氟-6-馬來酰亞胺基己酸和偶聯(lián)試劑。其合成方法同實施例1，合成路線如下所示：通過lc-ms對胸腺法新聚乙二醇聚合物分子量進行了測定，分子量為3277.5，與目標(biāo)分子量一致。純化工藝同實施例1，純化后通過malid-tof-ms對聚合物的平均分子量進行了測定，聚合物的平均分子量為8.1kda，與目標(biāo)分子量一致。實施例5采用固相合成法合成tɑ1，在脫保、護切割之前加入6-馬來酰亞胺基庚酸和偶聯(lián)試劑。其合成方法同實施例1，合成路線如下所示：通過lc-ms對胸腺法新聚乙二醇聚合物分子量進行了測定，分子量為3273.5，與目標(biāo)分子量一致。純化工藝同實施例1，純化后通過malid-tof-ms對聚合物的平均分子量進行了測定，聚合物的平均分子量為8.1kda，與目標(biāo)分子量一致。實施例6采用固相合成法合成tɑ1，在脫保、護切割之前加入2甲基-6-馬來酰亞胺基己酸和偶聯(lián)試劑。其合成方法同實施例1，合成路線如下所示：通過lc-ms對胸腺法新聚乙二醇聚合物分子量進行了測定，分子量為3273.5，與目標(biāo)分子量一致。純化工藝同實施例1，純化后通過malid-tof-ms對聚合物的平均分子量進行了測定，聚合物的平均分子量為8.1kda，與目標(biāo)分子量一致。實施例7采用固相合成法合成tɑ1，在脫保、護切割之前加入2,3-二甲基-6-馬來酰亞胺基己酸和偶聯(lián)試劑。其合成方法同實施例1，合成路線如下所示：通過lc-ms對胸腺法新聚乙二醇聚合物分子量進行了測定，分子量為3287.3，與目標(biāo)分子量一致。純化工藝同實施例1，純化后通過malid-tof-ms對聚合物的平均分子量進行了測定，聚合物的平均分子量為8.1kda，與目標(biāo)分子量一致。實施例8采用固相合成法合成tɑ1，在脫保、護切割之前加入化合物2-(4-馬來酰亞胺丁基)-辛酸和偶聯(lián)試劑。其合成方法同實施例1，合成路線如下所示：通過lc-ms測定胸腺法新聚乙二醇聚合物的分子量，分子量為3343.5，與目標(biāo)分子量一致。純化工藝同實施例1，純化后通過malid-tof-ms對聚合物的平均分子量進行了測定，聚合物的平均分子量為8.2kda，與目標(biāo)分子量一致。實施例9采用固相合成法合成tɑ1，在脫保、護切割之前加入2-(4-甲氧基丁基)-6-馬來酰亞胺基己酸和偶聯(lián)試劑。其合成方法同實施例1，合成路線如下所示：通過lc-ms測定胸腺法新聚乙二醇聚合物的分子量，分子量為3345.4，與目標(biāo)分子量一致。純化工藝同實施例1，通過malid-tof-ms對純化后聚合物的平均分子量進行了測定，聚合物的平均分子量為8.2kda，與目標(biāo)分子量一致。實施例10采用固相合成法合成tɑ1，在脫保、護切割之前加入2-戊氧基-6-馬來酰亞胺基己酸和偶聯(lián)試劑。其合成方法同實施例1，合成路線如下所示：通過lc-ms測定胸腺法新聚乙二醇聚合物的分子量，分子量為3345.4，與目標(biāo)分子量一致。純化工藝同實施例1，純化后通過malid-tof-ms對聚合物的平均分子量進行了測定，聚合物的平均分子量為8.2kda，與目標(biāo)分子量一致。實施例11采用固相合成法合成tɑ1，在脫保、護切割之前加入2-乙烯基-6-馬來酰亞胺基己酸和偶聯(lián)試劑。其合成方法同實施例1，合成路線如下所示：通過lc-ms測定胸腺法新聚乙二醇聚合物的分子量，分子量為3285.4，與目標(biāo)分子量一致。純化工藝同實施例1，純化后通過malid-tof-ms對聚合物的平均分子量進行了測定，聚合物的平均分子量為8.2kda，與目標(biāo)分子量一致。實施例12采用固相合成法合成tɑ1，在脫保、護切割之前加入2-丙烯基-6-馬來酰亞胺基己酸和偶聯(lián)試劑。其合成方法同實施例1，合成路線如下所示：通過lc-ms測定胸腺法新聚乙二醇聚合物的分子量，分子量為3299.5，與目標(biāo)分子量一致。純化工藝同實施例1，純化后通過malid-tof-ms對聚合物的平均分子量進行了測定，聚合物的平均分子量為8.2kda，與目標(biāo)分子量一致。實施例13采用固相合成法合成tɑ1，在脫保、護切割之前加入2-丙炔基-6-馬來酰亞胺基己酸和偶聯(lián)試劑。其合成方法同實施例1，合成路線如下所示：通過lc-ms測定胸腺法新聚乙二醇聚合物的分子量，分子量為3297.5，與目標(biāo)分子量一致。純化工藝同實施例1，純化后通過malid-tof-ms對聚合物的平均分子量進行了測定，聚合物的平均分子量為8.2kda，與目標(biāo)分子量一致。實施例14采用固相合成法合成tɑ1，在脫保、護切割之前加入4乙炔基-2-丙炔基-6-馬來酰亞胺基己酸和偶聯(lián)試劑。其合成方法同實施例1，合成路線如下所示：通過lc-ms測定胸腺法新聚乙二醇聚合物的分子量，分子量為3322.5，與目標(biāo)分子量一致。純化工藝同實施例1，純化后通過malid-tof-ms對聚合物的平均分子量進行了測定，聚合物的平均分子量為8.3kda，與目標(biāo)分子量一致。實施例15采用固相合成法合成tɑ1，在脫保、護切割之前加入2-環(huán)己烷基-5-環(huán)丙基-6-馬來酰亞胺基己酸和偶聯(lián)試劑。其合成方法同實施例1，合成路線如下所示：通過lc-ms測定胸腺法新聚乙二醇聚合物的分子量，分子量為3381.6，與目標(biāo)分子量一致。純化工藝同實施例1，純化后通過malid-tof-ms對聚合物的平均分子量進行了測定，聚合物的平均分子量為8.3kda，與目標(biāo)分子量一致。實施例16采用固相合成法合成tɑ1，在脫保、護切割之前加入2-4吡喃基-5-環(huán)丙基-6-馬來酰亞胺基己酸和偶聯(lián)試劑。其合成方法同實施例1，合成路線如下所示：通過lc-ms測定胸腺法新聚乙二醇聚合物的分子量，分子量為3383.6，與目標(biāo)分子量一致。純化工藝同實施例1，純化后通過malid-tof-ms對聚合物的平均分子量進行了測定，聚合物的平均分子量為8.3kda，與目標(biāo)分子量一致。實施例17采用固相合成法合成tɑ1，在脫保、護切割之前加入2-哌啶基-6-馬來酰亞胺基己酸和偶聯(lián)試劑。其合成方法同實施例1，合成路線如下所示：通過lc-ms測定胸腺法新聚乙二醇聚合物的分子量，分子量為3342.3，與目標(biāo)分子量一致。純化工藝同實施例1，純化后通過malid-tof-ms對聚合物的平均分子量進行了測定，聚合物的平均分子量為8.3kda，與目標(biāo)分子量一致。實施例18藥物組合物注射液取實施例1制備得到的tɑ1聚合物按照表3的配方制備胸腺法新聚乙二醇聚合物注射液。表3藥物組合物注射液配方制備方法包括下列步驟：按照表3的配方，取胸腺法新聚乙二醇聚合物，加入一定量的甘露醇，然后用ph5.5-7.5的磷酸鹽緩沖液1ml溶解，過0.45μm無菌濾膜，充氮保護后密封2-8度保存。實施例19藥物組合物注射用粉針配方同實施例18，制備得到胸腺法新聚乙二醇聚合物注射液，無菌率過后，冷凍干燥。冷凍干燥工藝如下：(1)預(yù)凍：1小時左右由室溫降低至-40℃，維持2小時；(2)第一次干燥：5小時由-40℃升溫至-30℃，維持5小時；2小時由-30℃升溫至-20℃，維持2小時；1小時由-20℃升溫至-10℃，維持2小時；(3)第二次干燥：2小時由-10℃升溫至0℃，維持1小時；2小時內(nèi)由0℃升溫至20℃，然后2小時內(nèi)升溫至25℃。干燥后壓蓋，至2-8度保存。以上僅為本發(fā)明的優(yōu)選實施例而已，并不用于限制本發(fā)明，對于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來說，本發(fā)明可以有各種更改和變化。凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。當(dāng)前第1頁12