本發(fā)明涉及化合物合成
技術(shù)領(lǐng)域：
，更具體地說(shuō)，本發(fā)明涉及20-羥基-孕烯-3-烷烴酯基孕甾化合物及其合成方法和在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：孕烯醇酮本身具有較弱的抗炎活性，文獻(xiàn)曾報(bào)道孕烯醇酮c3-位羥基酯化，水楊酸酯和甲酸酯有與臨床應(yīng)用的可的松相當(dāng)?shù)目寡鬃饔?，而三氯乙酸酯、氯乙酸酯、呋?2’-酸酯、對(duì)甲苯磺酸酯、鄰苯二甲酸酯有較抗炎松略強(qiáng)的抗炎作用(李振肅,王海青等.5-孕甾烯-3β,17α-雙醇-20-酮-3-醋酸酯-17α-脂肪酸酯類的合成及其構(gòu)效關(guān)系研究[j].藥學(xué)學(xué)報(bào),1983,18(2):119-124.)。課題組已經(jīng)對(duì)孕烯醇酮進(jìn)行化學(xué)修飾改造的相關(guān)研究，“孕烯醇酮芳香醛吖嗪甾體化合物及其合成方法和在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用”(中國(guó)發(fā)明專利，申請(qǐng)?zhí)枺?01310184358.x，申請(qǐng)公布號(hào)cn103254264a)，“3-取代-b-homo-甾體-b-環(huán)內(nèi)酰胺化合物及其制備方法和在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用”(中國(guó)發(fā)明專利，申請(qǐng)?zhí)枺?01110009124.2，申請(qǐng)公布號(hào)：cn102146115a)，“具有氨衍生物支鏈結(jié)構(gòu)的3-羥基-5-烯甾體化合物制備方法及其在抗腫瘤藥物中的應(yīng)用”(中國(guó)發(fā)明專利，申請(qǐng)?zhí)枺?01210330275.2，申請(qǐng)公布號(hào)：cn102816198a)。但是，有關(guān)20-羥基-孕烯-3-烷烴酯基孕甾化合物及其合成方法、以及其在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用未見報(bào)道。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是提供一種20-羥基-孕烯-3-烷烴酯基孕甾化合物。本發(fā)明的另一目的是提供上述化合物的合成方法。本發(fā)明的進(jìn)一步目的是提供上述化合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的20-羥基-孕烯-3-烷烴酯基孕甾化合物的甾核結(jié)構(gòu)式如下所示：其中，r-基團(tuán)可為：r＝-ccl3、-ch2ch3。優(yōu)選的是，包括以下步驟：以甾體化合物孕烯醇酮為原料，首先將孕烯醇酮的3-位羥基經(jīng)過(guò)烷烴基酰氯酯化成酯，反應(yīng)得到中間產(chǎn)物，再將中間產(chǎn)物的17-位羰基還原，即得到20-羥基-孕烯-3-烷烴酯基孕甾化合物。優(yōu)選的是，3-位羥基經(jīng)過(guò)烷烴基酰氯酯化成酯的反應(yīng)方法為：將孕烯醇酮溶于吡啶，于40℃溫度下攪拌，再緩慢加入烷烴基酰氯，tlc跟蹤反應(yīng)，至無(wú)原料點(diǎn)后停止反應(yīng)，得到的反應(yīng)產(chǎn)物先加入冰水，再用乙酸乙酯萃取，合并有機(jī)相，依次用1mol/l稀鹽酸、飽和nahco3、蒸餾水、飽和nacl洗滌洗滌，再用無(wú)水na2so4干燥，最后減壓蒸餾掉有機(jī)溶劑，柱層析分離，得到白色針狀晶體，即為中間產(chǎn)物；其中，所述烷烴基酰氯為的三氯乙酰氯或丙酰氯。優(yōu)選的是，17-位羰基還原的反應(yīng)方法為：將所述中間產(chǎn)物與ch2cl2混合，于40℃溫度下攪拌至所述中間產(chǎn)物完全溶解，加入cecl3·7h2o和ch3oh，待cecl3·7h2o完全溶解后，稱取nabh4緩慢加入進(jìn)行反應(yīng)，室溫下反應(yīng)，tlc檢測(cè)，反應(yīng)至無(wú)原料點(diǎn)停止反應(yīng)，加入1mol/l稀鹽酸淬滅反應(yīng)，減壓蒸餾掉有機(jī)溶劑后，加入蒸餾水，用乙酸乙酯萃取，合并有機(jī)相，再依次用水、飽和nacl溶液洗滌，然后用無(wú)水na2so4干燥，最后減壓蒸餾掉有機(jī)溶劑，柱層析分離，得到白色固體的終產(chǎn)物，即為所述20-羥基-孕烯-3-烷烴酯基孕甾化合物。所述的20-羥基-孕烯-3-烷烴酯基孕甾化合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。所述的20-羥基-孕烯-3-烷烴酯基孕甾化合物為活性成分的藥用組合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。制備所述20-羥基-孕烯-3-烷烴酯基孕甾化合物的反應(yīng)路線如下所示：其中，化合物1至4中的r基團(tuán)如下所示：1r＝-ccl3、2r＝-ch2ch3、3r＝-ccl3、4、r＝-ch2ch3；試劑和條件：a、吡啶、ccl3cocl、ch3ch2cocl；b:ch3oh、ch2cl2、cecl3·7h2o、nabh4。通過(guò)生理活性試驗(yàn)研究表明，本發(fā)明的20-羥基-孕烯-3-酯基孕甾化合物3和4對(duì)對(duì)人肺腺癌細(xì)胞株的生長(zhǎng)增殖具有抑制作用，可作為藥物中間體或藥物應(yīng)用于不同抗腫瘤藥物制造和用途。本發(fā)明的其它優(yōu)點(diǎn)、目標(biāo)和特征將部分通過(guò)下面的說(shuō)明體現(xiàn)，部分還將通過(guò)對(duì)本發(fā)明的研究和實(shí)踐而為本領(lǐng)域的技術(shù)人員所理解。具體實(shí)施方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明，以令本領(lǐng)域技術(shù)人員參照說(shuō)明書文字能夠據(jù)以實(shí)施。需要說(shuō)明的是，下述實(shí)施方案中所述實(shí)驗(yàn)方法，如無(wú)特殊說(shuō)明，均為常規(guī)方法，所述試劑和材料，如無(wú)特殊說(shuō)明，均可從商業(yè)途徑獲得。<實(shí)施例1>20-乙酰水楊酸孕烯酯-3-三氯乙酸酯(3)的制備步驟1:孕烯-3-三氯乙酸酯(1)的制備稱取0.320g(1.01mmol)孕烯醇酮于100ml茄型燒瓶中，通風(fēng)櫥下加入15ml吡啶，置于40℃油浴鍋中攪拌，待原料溶解完后，移取400ul(3.58mmol)三氯乙酰氯緩慢加入反應(yīng)，tlc跟蹤反應(yīng)至無(wú)原料點(diǎn)幾乎消失后停止反應(yīng)，反應(yīng)12h，先向反應(yīng)瓶加入15ml冰蒸餾水，用乙酸乙酯萃取4次(15ml×4)，合并萃取液，依次用1mol/l稀鹽酸、飽和nahco3、蒸餾水、飽和nacl洗滌，再用無(wú)水na2so4干燥，然后減壓蒸餾，柱層析分離(洗脫劑：v石油醚:v乙酸乙酯＝5:1)得到白色針狀晶體0.396g，m.p.174-177℃，產(chǎn)率：85.0％，產(chǎn)物結(jié)構(gòu)經(jīng)ir、nmr和ms分析確定；步驟2:20-羥基-孕烯-3-三氯乙酸酯(3)的制備稱取0.289g(0.63mmol)化合物(1)于100ml茄型燒瓶中，加入10mlch2cl2，置于40℃水浴中攪拌，待固體溶解完后，加入0.242g(0.65mmol)cecl3·7h20、5mlch3oh，完全溶解后，繼續(xù)攪拌15min，最后分批加入0.118g(3.12mmol)nabh4，加完后繼續(xù)攪拌5min，tlc跟蹤反應(yīng)至無(wú)原料點(diǎn)后停止反應(yīng)。用1mol/l稀鹽酸淬滅反應(yīng)，旋掉大部分溶劑，加入15ml蒸餾水，用乙酸乙酯萃取4次(15ml×4)，有機(jī)相依次用水、飽和nacl洗滌，無(wú)水na2so4干燥，減壓蒸餾，柱層析分離(洗脫劑：v石油醚:v乙酸乙酯＝6:1)得到白色粉末狀固體0.261g，m.p.177-179℃，產(chǎn)率：90.0％，經(jīng)ir、nmr和ms分析確定產(chǎn)物結(jié)構(gòu)為20-乙酰水楊酸孕烯酯-3-三氯乙酸酯。<實(shí)施例2>20-乙酰水楊酸孕烯酯-3-丙酸酯的(4)的制備步驟1:孕烯-3-丙酸酯(2)的制備稱取0.322g(1.02mmol)孕烯醇酮于100ml茄型燒瓶中，通風(fēng)櫥下加入15ml吡啶，置于40℃油浴鍋中攪拌，待原料溶解完后，移取400ul(4.59mmol)丙酰氯緩慢加入反應(yīng)，tlc跟蹤反應(yīng)至無(wú)原料點(diǎn)幾乎消失后停止反應(yīng)，反應(yīng)12h，先向反應(yīng)瓶加入15ml冰蒸餾水，用乙酸乙酯萃取4次(15ml×4)，合并萃取液，依次用1mol/l稀鹽酸、飽和nahco3、蒸餾水、飽和nacl洗滌，再用無(wú)水na2so4干燥，然后減壓蒸餾，柱層析分離(洗脫劑：v石油醚:v乙酸乙酯＝5:1)得到白色針狀晶體0.368g，m.p.124-126℃，產(chǎn)率：97.1％，產(chǎn)物結(jié)構(gòu)經(jīng)ir、nmr和ms分析確定；步驟2:20-羥基-孕烯-3-丙酸酯(4)的制備稱取0.290g(0.78mmol)化合物(2)于100ml茄型燒瓶中，加入10mlch2cl2，置于40℃水浴中攪拌，待固體溶解完后，加入0.302g(0.81mmol)cecl3·7h20、5mlch3oh，完全溶解后，繼續(xù)攪拌15min，最后分批加入0.141g(3.71mmol)nabh4，加完后繼續(xù)攪拌5min，tlc跟蹤反應(yīng)至無(wú)原料點(diǎn)后停止反應(yīng)，用1mol/l稀鹽酸淬滅反應(yīng)，旋掉大部分溶劑，加入15ml蒸餾水，用乙酸乙酯萃取4次(15ml×4)，有機(jī)相依次用水、飽和nacl洗滌，無(wú)水na2so4干燥，減壓蒸餾，柱層析分離(洗脫劑：v石油醚:v乙酸乙酯＝6:1)得到白色粉末狀固體0.274g，m.p.153-155℃，產(chǎn)率：90.0％。經(jīng)ir、nmr和ms分析確定產(chǎn)物結(jié)構(gòu)為20-乙酰水楊酸孕烯酯-3-丙酸酯。采用本發(fā)明所述的20-羥基-孕烯-3-烷烴酯基孕甾化合物對(duì)某些腫瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞毒性試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)其中某些化合物具有顯著的抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)增殖效果。如表中化合物3和4對(duì)人肺腺癌細(xì)胞株(a549)的抑制作用。表1化合物3、4對(duì)人肺腺癌細(xì)胞株的ic50值(μmol/l)化合物34ic507.910.3盡管本發(fā)明的實(shí)施方案已公開如上，但其并不僅僅限于說(shuō)明書和實(shí)施方式中所列運(yùn)用，它完全可以被適用于各種適合本發(fā)明的領(lǐng)域，對(duì)于熟悉本領(lǐng)域的人員而言，可容易地實(shí)現(xiàn)另外的修改，因此在不背離權(quán)利要求及等同范圍所限定的一般概念下，本發(fā)明并不限于特定的細(xì)節(jié)。當(dāng)前第1頁(yè)12