本發(fā)明涉及克羅恩病的輔助診斷方法，尤其是涉及一種用于輔助診斷克羅恩病的erna分子標(biāo)記物及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、克羅恩病（crohn?disease，簡稱為cd）是炎癥性腸病譜中的主要實體之一，是一種胃腸道慢性炎癥性疾病，可能導(dǎo)致進(jìn)行性腸道損傷和殘疾。cd?的病程以其可變性和不可預(yù)測性為特征，并且與結(jié)直腸癌的長期風(fēng)險增加有關(guān)。cd的診斷金標(biāo)準(zhǔn)是結(jié)腸鏡檢查和組織學(xué)檢查，金標(biāo)準(zhǔn)診斷方法具有較強(qiáng)侵入性，可能增加腸道損傷風(fēng)險；傳統(tǒng)的血清學(xué)標(biāo)志物如c反應(yīng)蛋白、紅細(xì)胞沉降率，缺乏特異性，難以區(qū)分cd與其它炎癥性腸??；影像學(xué)檢查如ct檢查和核磁共振成像檢測，成本較高，不適合大規(guī)模篩查和頻繁隨訪?，F(xiàn)有診斷方法主要關(guān)注蛋白水平的變化，對疾病的早期分子機(jī)制認(rèn)識不足，缺乏能夠反映基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)變化的診斷標(biāo)志物。

2、隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，無創(chuàng)監(jiān)測方法在診斷和隨訪患者中的應(yīng)用迅速增加。例如，通過分析患者來源的血液中各種組學(xué)數(shù)據(jù)，可以提供新的生物標(biāo)志物，為早期診斷和疾病預(yù)防開辟了新的前景。全基因組關(guān)聯(lián)研究發(fā)現(xiàn)了數(shù)千種與性狀相關(guān)或改變疾病風(fēng)險的遺傳變異，這些基因主要位于非編碼基因組中，基因的轉(zhuǎn)錄受到多種復(fù)雜的調(diào)控因子影響。而活性增強(qiáng)子具有轉(zhuǎn)錄潛力，可生成定義為增強(qiáng)子?rna（enhancer?rna，簡稱為erna）的非編碼轉(zhuǎn)錄本，erna通過各種轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)錄后機(jī)制在介導(dǎo)基因表達(dá)方面具有不同的功能。近年來研究表明，erna在多種疾病中表現(xiàn)出潛在的生物標(biāo)志物作用，而erna與cd的關(guān)聯(lián)性研究較少，erna在血液、唾液和尿液等體液中的非侵入性檢測中具有治療潛力。因此，開發(fā)用于輔助診斷克羅恩病的erna分子標(biāo)記物，用于反映cd疾病早期分子變化的診斷具有重要意義。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種特異性強(qiáng)、靈敏度高的用于輔助診斷克羅恩病的erna分子標(biāo)記物及其應(yīng)用。

2、本發(fā)明解決上述技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案為：一種用于輔助診斷克羅恩病的erna分子標(biāo)記物，所述的erna分子標(biāo)記物為erna42767，其核苷酸序列為seq?id?no.1所示。位置是在人類2號染色體:173644313-173653943。

3、本發(fā)明還提供上述erna分子標(biāo)記物在制備輔助診斷克羅恩病試劑盒中的應(yīng)用。

4、本發(fā)明還提供上述erna分子標(biāo)記物在制備輔助診斷克羅恩病試劑盒中的應(yīng)用，所述的試劑盒包括erna42767熒光定量pcr的上下游擴(kuò)增引物，所述的erna42767熒光定量pcr的上游擴(kuò)增引物的核苷酸序列為seq?id?no.2所示：5'-cctctctctgggacatgccta-3'；所述的erna42767熒光定量pcr的下游擴(kuò)增引物的核苷酸序列為seq?id?no.3所示：5'-cacatgcgtagagattcttgcc-3'。

5、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點在于：本發(fā)明首次公開了一種用于輔助診斷克羅恩病的erna分子標(biāo)記物及其應(yīng)用，erna42767分子標(biāo)志物在克羅恩病患者血漿中高表達(dá)。利用采集的外周血標(biāo)本，對血漿中erna42767進(jìn)行檢測可以方便快捷并高效地在分子水平上對克羅恩病患者進(jìn)行早期診斷，針對性強(qiáng)、靈敏度高，并且檢測結(jié)果準(zhǔn)確性高，提高了克羅恩病檢出率，有利于克羅恩病的早期發(fā)現(xiàn)和及時治療。

技術(shù)特征：

1.一種用于輔助診斷克羅恩病的erna分子標(biāo)記物，其特征在于：所述的erna分子標(biāo)記物為erna42767，所述的erna42767核苷酸序列為seq?id?no.1所示。

2.一種權(quán)利要求1所述的erna分子標(biāo)記物在制備輔助診斷克羅恩病試劑盒中的應(yīng)用。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種erna分子標(biāo)記物在制備輔助診斷克羅恩病試劑盒中的應(yīng)用，其特征在于：所述的試劑盒包括erna42767熒光定量pcr的上下游擴(kuò)增引物，所述的erna42767熒光定量pcr的上游擴(kuò)增引物的核苷酸序列為seq?id?no.2所示：5'-cctctctctgggacatgccta-3'，所述的erna42767熒光定量pcr的下游擴(kuò)增引物的核苷酸序列為seq?id?no.3所示：5'-cacatgcgtagagattcttgcc-3'。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種用于輔助診斷克羅恩病的eRNA分子標(biāo)記物及其應(yīng)用，特點是eRNA分子標(biāo)記物為eRNA42767，其核苷酸序列為SEQ?ID?NO.1所示，還提供上述eRNA分子標(biāo)記物在制備輔助診斷克羅恩病試劑盒中的應(yīng)用，試劑盒包括eRNA42767熒光定量PCR特異性擴(kuò)增引物，上游擴(kuò)增引物的核苷酸序列為5'?CCTCTCTCTGGGACATGCCTA?3'，下游擴(kuò)增引物的核苷酸序列為5'?CACATGCGTAGAGATTCTTGCC?3'，優(yōu)點是方便快捷并高效地實現(xiàn)在分子水平上對克羅恩病患者進(jìn)行早期診斷，針對性強(qiáng)，特異性強(qiáng)、靈敏度高，有利于克羅恩病的早期發(fā)現(xiàn)和及時治療。

技術(shù)研發(fā)人員：俞秀沖,戎浩,佟嘉寧,杜涓,陶躍柱,廖奇,習(xí)陽,嚴(yán)志龍,孫浩暉,李艷國
受保護(hù)的技術(shù)使用者：寧波大學(xué)附屬第一醫(yī)院
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/5