專利名稱:一種從虎杖中提取純化白藜蘆醇的工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從虎杖中提取純化白藜蘆醇的工藝，屬于中草藥中天然活性成分的提取技術(shù)領(lǐng)域：
。
背景技術(shù)：
虎杖 (Rhizome Polygoni Cuspidati)Polygonaceae 為蓼科 Polygonum cuspidatum Sieb. et ^icc.，的干燥根莖和根，主要分布于山東、河南、陜西、湖北、江西、福建、臺(tái)灣、云南、四川、貴州、廣西。
白藜蘆醇是虎杖中的一種次生代謝產(chǎn)物，在干燥的虎杖原料中白藜蘆醇的含量?jī)H為0. 1 % 0. 2 %，虎杖甙的含量在2. O %左右，虎杖甙通過(guò)酶解可轉(zhuǎn)化為白藜蘆醇。白藜蘆醇具有多種生物學(xué)活性及藥理作用，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)具有抗癌、抗菌、抗氧化、預(yù)防心臟病、降血脂和抗誘變等作用。已有的從虎杖中提取白藜蘆醇的方法包括溶劑提取、酶解提取、微波提取等，這些方法中所用的提取溶劑大多是有機(jī)溶劑，而且用量較大，生產(chǎn)成本較高，工業(yè)化生產(chǎn)過(guò)程中存在安全隱患。近年來(lái)新出現(xiàn)了以堿從虎杖中提取白藜蘆醇的方法，如公開號(hào)為 CN101348805的中國(guó)發(fā)明專利，公開了一種從植物中提取白藜蘆醇，制備白藜蘆醇含量分別為50%和98%產(chǎn)品的新工藝。該方法以植物虎杖、花生紅衣或葡萄籽為原料，用堿提取，提取液經(jīng)過(guò)調(diào)PH值、用絮凝劑、澄清劑處理、酶解、過(guò)濾，得到的沉淀物干燥后先獲得白藜蘆醇含量50%的產(chǎn)品；進(jìn)一步將該產(chǎn)品用稀堿液洗，再用水洗至中性，然后溶于大量熱水中， 將水液在室溫下放置，析出沉淀，過(guò)濾干燥后即得到白藜蘆醇含量為98%的產(chǎn)品。該方法不使用有機(jī)溶劑，宜于工業(yè)化生產(chǎn)；但其工藝較復(fù)雜，在制備過(guò)程中仍需加入生物酶進(jìn)行酶解，生產(chǎn)成本較高。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種工藝簡(jiǎn)單，以生虎杖藥材為原料，在生產(chǎn)過(guò)程中不使用有機(jī)溶劑且生產(chǎn)成本低的從虎杖中提取純化白藜蘆醇的工藝。該工藝所得產(chǎn)品的純度可達(dá)99%以上，收率可達(dá)1. 3%以上(折合成干藥材)。
為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案
一種從虎杖中提取純化白藜蘆醇的工藝，它是以生虎杖藥材為原料，加水浸泡利用自身的生物酶進(jìn)行酶解，堿提后酸沉，所得沉淀脫色處理，析晶，重結(jié)晶，干燥即得。
上述方法具體包括以下步驟
1)取生藥材虎杖，粉碎，加水于10 50°C條件下浸泡酶解2 20天；
2)所得酶解藥液加入3 10倍原料重量的水，加堿調(diào)節(jié)pH值至8 10，升溫至 30 60°C提取1 池，過(guò)濾，收集提取液；
3)提取液加酸調(diào)節(jié)pH值至1 4，收集沉淀；
4)所得沉淀水洗至中性后用乙醇溶解，過(guò)脫色樹脂柱，收集流出液；
5)流出液濃縮，放置析晶，重結(jié)晶，即得。[0013]其中
步驟1)中，生藥材虎杖粉碎的粒度可為10 100目。水的加入量為原料重量的 0. 6 1. 2倍。酶解的時(shí)間與水的溫度有關(guān)，當(dāng)水溫較低時(shí)酶解的時(shí)間稍長(zhǎng)，水溫較高時(shí)酶解的時(shí)間稍短。
步驟幻中，所述的堿為碳酸鈉、碳酸氫鈉、氫氧化鈉或氫氧化鈣。
步驟幻中，所述的酸為鹽酸或硫酸。
步驟4)中，所述的脫色樹脂柱為大孔樹脂柱、中性氧化鋁樹脂柱或活性炭柱。所述大孔樹脂的型號(hào)可以是AB-8、HP-20、D101、D102等。
步驟5)中，流出液可濃縮至藥材量的0. 02 0. 1倍后放置析晶。
析晶。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于
1、本發(fā)明直接以新鮮藥材為原料，不僅有利于藥材的粉碎，還可避免藥材在干燥過(guò)程中對(duì)白藜蘆醇和虎杖甙的破壞，更主要的是保全了虎杖生藥材中的葡萄糖苷酶，無(wú)需再另外加入生物酶來(lái)促進(jìn)虎杖甙的轉(zhuǎn)化；與傳統(tǒng)提取工藝比較，能最大限度的保全目標(biāo)成分，且因?yàn)樯a(chǎn)過(guò)程中不用再添加任何的生物酶，減少操作環(huán)節(jié)，降低生產(chǎn)成本，更適合于工業(yè)化大生產(chǎn)；
2、通過(guò)堿提酸沉的提取方法代替常規(guī)的有機(jī)溶劑提取或萃取，工藝更環(huán)保，成本更低；
3、由本發(fā)明所述方法制得的產(chǎn)品純度高，可達(dá)99%以上(HPLC法測(cè)定)，收率可達(dá) 1.3%以上(折合成干藥材)。
具體實(shí)施方式
下面以實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明，但本發(fā)明并不局限于這些實(shí)施例。
實(shí)施例1
將虎杖粉碎，過(guò)20目篩，稱取50kg (干重30kg)，用0. 7倍原料重量的水潤(rùn)濕混合均勻后進(jìn)行酶解，溫度控制在30°C，酶解時(shí)間15天；在酶解藥液中加入原料重量8倍的水， 用碳酸氫鈉調(diào)節(jié)酶解藥液的PH = 9，升溫至50°C，攪拌提取2h，過(guò)濾；濾液加鹽酸調(diào)PH = 3，取出沉淀，水洗至中性后用乙醇溶解，過(guò)中性氧化鋁柱進(jìn)行脫色，流出液濃縮至2. 4kg，放置4h，析出的晶體在相同條件下進(jìn)行重結(jié)晶，干燥，得白藜蘆醇白色晶體0. 4kg，HPLC法檢測(cè)含量為99.2%。
實(shí)施例2
將虎杖粉碎，過(guò)60目篩，稱取80kg (干重50kg)，用1倍原料重量的水潤(rùn)濕混合均勻后進(jìn)行酶解，溫度控制在40°C，酶解時(shí)間8天；在酶解藥液中加入原料重量4. 4倍的水， 用氫氧化鈉調(diào)節(jié)酶解藥液的PH = 9，升溫至45°C，攪拌提取池，過(guò)濾；濾液加鹽酸調(diào)PH = 4，取出沉淀，水洗至中性以后用乙醇溶解，過(guò)活性炭柱進(jìn)行脫色，流出液濃縮至6. ^g，放置他，析出的晶體在相同條件下進(jìn)行重結(jié)晶，干燥，得白藜蘆醇白色晶體0. 68kg，HPLC法檢測(cè)含量為99. 1% ο
實(shí)施例3
將虎杖粉碎，過(guò)10目篩，稱取100kg (干重60kg)，用1. 2倍原料重量的潤(rùn)濕混合均
4勻后進(jìn)行酶解，溫度控制在50°C，酶解時(shí)間6天；在酶解藥液中加入原料重量7倍的水，用氫氧化鈣調(diào)節(jié)酶解藥液的PH = 9，升溫至50°C，攪拌提取池，過(guò)濾，濾液加鹽酸調(diào)PH = 1， 取出沉淀，水洗至中性以后用乙醇溶解，過(guò)AB-8型大孔型脫色樹脂柱進(jìn)行脫色，流出液濃縮至5. mcg，放置他，析出的晶體再用乙醇溶解，濃縮，重結(jié)晶，干燥，得白藜蘆醇白色晶體 0. 78kg，HPLC法檢測(cè)含量為99. 5%0
實(shí)施例4
將虎杖粉碎，過(guò)100目篩，稱取100kg (干重60kg)，用0. 6倍原料重量的潤(rùn)濕混合均勻后進(jìn)行酶解，溫度控制在15°C，酶解時(shí)間20天；在酶解藥液中加入原料重量10倍的水，用碳酸鈉調(diào)節(jié)酶解藥液的PH = 8，升溫至30°C，攪拌提取池，過(guò)濾，濾液加硫酸調(diào)PH = 2，取出沉淀，水洗至中性以后用乙醇溶解，過(guò)活性炭柱進(jìn)行脫色，流出液濃縮至4. mcg，放置 10h，析出的晶體在相同條件下進(jìn)行重結(jié)晶，干燥，得白藜蘆醇白色晶體0. 82kg，HPLC法檢測(cè)含量為99.0%。
實(shí)施例5
將虎杖粉碎，過(guò)80目篩，稱取100kg (干重60kg)，用0. 8倍原料重量的潤(rùn)濕混合均勻后進(jìn)行酶解，溫度控制在50°C，酶解時(shí)間3天；在酶解藥液中加入原料重量5倍的水， 用碳酸氫鈉調(diào)節(jié)酶解藥液的PH = 10，升溫至60°C，攪拌提取1.證，過(guò)濾，濾液加硫酸調(diào)PH =1.5，取出沉淀，水洗至中性以后用乙醇溶解，過(guò)DlOl型大孔樹脂柱進(jìn)行脫色，流出液濃縮至5. Wcg，放置池，析出的晶體在相同條件下進(jìn)行重結(jié)晶，干燥，得白藜蘆醇白色晶體 0. 79kg，HPLC法檢測(cè)含量為99. 3%0
權(quán)利要求
1. 一種從虎杖中提取純化白藜蘆醇的工藝，其特征在于它是以生虎杖藥材為原料， 加水浸泡利用自身的生物酶進(jìn)行酶解，堿提后酸沉，所得沉淀經(jīng)脫色處理后析晶，重結(jié)晶， 干燥即得；具體包括以下步驟1)取生藥材虎杖，粉碎，加水于10 50°C條件下浸泡酶解2 20天；所述水的加入量為原料重量的0. 6 1. 2倍；2)所得酶解藥液加入3 10倍原料重量的水，加堿調(diào)節(jié)pH值至8 10，升溫至30 60°C提取1 池，過(guò)濾，收集提取液；所述的堿為碳酸鈉、碳酸氫鈉、氫氧化鈉或氫氧化鈣；3)提取液加酸調(diào)節(jié)pH值至1 4，收集沉淀；所述的酸為鹽酸或硫酸；4)所得沉淀水洗至中性后用乙醇溶解，過(guò)脫色樹脂柱或活性炭柱，收集流出液；所述的脫色樹脂柱為大孔樹脂柱或中性氧化鋁樹脂柱；5)流出液濃縮，放置析晶，重結(jié)晶，即得。
專利摘要
本發(fā)明公開了一種從虎杖中提取純化白藜蘆醇的工藝，它是以生虎杖藥材為原料，加水浸泡利用自身的生物酶進(jìn)行酶解，堿提后酸沉，所得沉淀脫色處理，析晶，重結(jié)晶，干燥即得。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明直接以新鮮藥材為原料，不僅有利于藥材的粉碎，還可避免藥材在干燥過(guò)程中對(duì)白藜蘆醇和虎杖甙的破壞，更主要的是保全了虎杖生藥材中的葡萄糖苷酶，無(wú)需另外加入生物酶來(lái)促進(jìn)虎杖甙的轉(zhuǎn)化；與傳統(tǒng)提取工藝比較，能最大限度的保全目標(biāo)成分，且因?yàn)樯a(chǎn)過(guò)程中不用再添加任何的生物酶，減少操作環(huán)節(jié)，降低生產(chǎn)成本，更適合于工業(yè)化大生產(chǎn)；而且生產(chǎn)過(guò)程中不使用有機(jī)溶劑，更利于環(huán)保；由本發(fā)明方法制得的產(chǎn)品純度可達(dá)99％以上，收率可達(dá)1.3％以上。
文檔編號(hào)C12P7/22GKCN101805755 B發(fā)布類型授權(quán) 專利申請(qǐng)?zhí)朇N 201010146767
公開日2012年1月25日 申請(qǐng)日期2010年4月14日
發(fā)明者盧昶年, 盧照凱 申請(qǐng)人:盧昶年, 盧照凱導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan專利引用 (9),