荸薺提取6-甲基圣草酚的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于天然有機(jī)化學(xué)領(lǐng)域，涉及一種6-甲基圣草酚的提取分離方法，特別是 涉及一種從荸薺皮中提取分離6-甲基圣草酚的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 6-甲基圣草酷（6-Methyleriodictyol)，化學(xué)名為（_) - (S) _6_ 甲 基_5,7,3'，4'-四羥基二氫黃酮，淡黃色粉末，為圣草酚的C-甲基化衍生物。該類圣草 酚的衍生物具有抗氧化、抗炎、鎮(zhèn)痛等多種藥理活性以及利尿、改善糖尿病及糖尿并發(fā)癥的 作用，在食品上抗用作抗氧化劑。學(xué)者Barton，G. M.曾于1968年從松科植物花旗松的樹根 中分離得到6-甲基圣草酚及其衍生物。目前，沒有發(fā)現(xiàn)其他有關(guān)6-甲基圣草酚制備的技 術(shù)文獻(xiàn)。
[0003] 荸養(yǎng)（Eleocharis tuberosa)，又稱馬蹄，屬莎草科多年生淺水草本植物荸養(yǎng)的地 下球莖，我國(guó)大部分地區(qū)都有栽培。其中，廣西荸薺產(chǎn)量占全國(guó)70%，賀州荸薺產(chǎn)量占廣西 70%。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，荸薺有抗菌、抗腫瘤、防治呼吸道疾病、利腸通便和利尿排淋等作用；臨 床上可用于治療咽喉疼痛、痰熱咳嗽、熱病煩渴、小便不利、痢疾等癥。研宄表明，荸薺的活 性物質(zhì)主要富集在果皮和果肉之間。在荸薺加工過(guò)程中，被丟棄的荸薺皮質(zhì)量約占新鮮荸 薺質(zhì)量的25%，資源非常豐富。我們?cè)谘绣持邪l(fā)現(xiàn)荸薺皮中含有6-甲基圣草酚，但目前未 見從荸薺皮中提取分離該化合物的文獻(xiàn)報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于：提出一種荸薺提取6-甲基圣草酚的方法。
[0005] 本發(fā)明的荸薺提取6-甲基圣草酚的方法，應(yīng)用常規(guī)提取法和色譜技術(shù)從荸薺皮 中提取分離6-甲基圣草酚，具體步驟如下：
[0006] (1)將新鮮的荸薺皮風(fēng)干，粉碎，備用；以重量計(jì)，稱取荸薺皮粉末1份，加入提取 罐中，每次加入4-10份70%體積百分比的丙酮水溶液，在25°C下浸泡24h，浸泡3次，過(guò)濾， 合并濾液，減壓濃縮至膏狀，獲得提取物。
[0007] (2)以重量計(jì)，將提取物1份分散在5份水中制成懸濁液，用1-2倍水體積的乙酸 乙酯萃取3次，合并萃取液，減壓濃縮至干，獲得萃取物。
[0008] (3)往萃取物中加入甲醇至完全溶解，用2-4倍萃取物質(zhì)量的聚酰胺拌樣，將甲醇 揮發(fā)至干，裝柱，連接MCI柱進(jìn)行中壓分離，以40-100%體積百分比的甲醇水溶液為流動(dòng)相 梯度洗脫，薄層色譜法檢測(cè)，收集合并流動(dòng)相濃度為65-69%百分比的洗脫液，減壓濃縮，獲 得粗品A。
[0009] (4)往粗品A中加入甲醇至完全溶解，用2-4倍質(zhì)量的聚酰胺拌樣，將甲醇揮發(fā)至 干，轉(zhuǎn)入聚酰胺色譜柱進(jìn)行分離，用體積比為3:1-1:1的氯仿-甲醇溶液洗脫，薄層色譜法 檢測(cè)，收集合并含有6-甲基圣草酚的洗脫液，減壓濃縮，獲得粗品B。
[0010] (5)以重量計(jì)，將粗品Bl份溶于4-8份甲醇中，加入等體積的水制成懸濁液，用 S印hadex LH-20凝膠色譜柱純化，用甲醇洗脫，薄層色譜法檢測(cè)，收集合并含有6-甲基圣 草酚的洗脫液，減壓濃縮，獲得粗品C。
[0011] (6)將所得粗品C經(jīng)硅膠柱色譜層析，用體積比為9:1-7:3的氯仿-丙酮洗脫，收 集合并含有6-甲基圣草酚的洗脫液，減壓濃縮，干燥，獲得含量達(dá)95%以上的6-甲基圣草 酚產(chǎn)品。
[0012] 所述步驟（3)中的所述的此1柱規(guī)格為70父46〇111111，填充材料為此11610^-20?， 柱色譜條件為：柱壓為80Psi，流動(dòng)相流速為50mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為245nm ;所述的流動(dòng)相為 40-100 %體積百分比的甲醇水溶液。
[0013] 所述步驟⑷中所述的聚酰胺，規(guī)格為200-300目；所用洗脫液為體積比為 3:1-1:1的氯仿-甲醇溶液。
[0014] 本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比其有益效果是：設(shè)計(jì)科學(xué)合理，開辟了從天然植物中提取 分離6-甲基圣草酚的新途徑，分離效果好，產(chǎn)品純度高，使一貫被視為廢棄物的荸薺皮變 廢為寶，所選用的層析材料MCI、聚酰胺和凝膠均可反復(fù)使用，原料易得，資源豐富，生產(chǎn)成 本低，可進(jìn)行規(guī)?；a(chǎn)，滿足醫(yī)藥工業(yè)需要。
【具體實(shí)施方式】
[0015] 下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明，但本發(fā)明的實(shí)施方式不限于此。
[0016] 本發(fā)明的荸薺提取6-甲基圣草酚的方法，應(yīng)用常規(guī)提取法和色譜技術(shù)從荸薺皮 中提取分離6-甲基圣草酚，具體步驟如下：
[0017] (1)將新鮮的荸薺皮風(fēng)干，粉碎，備用。稱取一定質(zhì)量（g)的荸薺皮粉末加入提取 罐中，再加入4-10倍體積（mL)的70%體積百分比的丙酮水溶液，在25°C下浸泡24h，浸泡 3次，過(guò)濾，合并濾液，減壓濃縮至膏狀，獲得提取物。
[0018] (2)將提取物（g)分散在5倍體積（mL)的水中制成懸濁液，用1-2倍水體積的乙 酸乙酯萃取3次，合并萃取液，減壓濃縮至干，獲得萃取物。
[0019] (3)往萃取物中加入甲醇至完全溶解，用2-4倍萃取物質(zhì)量的聚酰胺拌樣，將甲醇 揮發(fā)至干，裝柱，連接MCI柱進(jìn)行中壓分離，柱規(guī)格為70mm X 460mm，填充材料為日本三菱化 學(xué)公司生產(chǎn)的MCI-gel CHP-20P，柱色譜條件為：柱壓為80Psi，流動(dòng)相流速為50mL/min， 檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm，以40-100%體積百分比的甲醇水溶液為流動(dòng)相梯度洗脫，根據(jù)檢測(cè)峰 變化情況調(diào)節(jié)洗脫液濃度，按每份500mL收集，薄層色譜法檢測(cè)，收集合并流動(dòng)相濃度為 65-69 %百分比的洗脫液，減壓濃縮，獲得粗品A。
[0020] (4)往粗品A中加入甲醇至完全溶解，用2-4倍質(zhì)量的聚酰胺拌樣，將甲醇揮發(fā)至 干，轉(zhuǎn)入聚酰胺色譜柱進(jìn)行分離，用體積比為3:1-1:1的氯仿-甲醇溶液洗脫，薄層色譜法 檢測(cè)，收集合并含有6-甲基圣草酚的洗脫液的洗脫液，減壓濃縮，獲得粗品B。
[0021] (5)將粗品B(g)溶于4-8倍體積（mL)的甲醇中，加入等甲醇體積的水制成懸濁 液，用瑞典Amersham Pharmacia Biotech公司生產(chǎn)的Sephadex LH-20凝膠色譜柱純化，用 甲醇洗脫，薄層色譜法檢測(cè)，收集合并含有6-甲基圣草酚的洗脫液，減壓濃縮，獲得粗品C。
[0022] (6)將所得粗品C經(jīng)硅膠柱色譜層析，用體積比為9:1-7:3的氯仿-丙酮洗脫，收 集合并含有6-甲基圣草酚的洗脫液，減壓濃縮，干燥，獲得含量達(dá)95%以上的6-甲基圣草 酚產(chǎn)品。
[0023] 實(shí)施例I
[0024] 將8kg新鮮荸薺皮粉末加入在提取罐中，加入32L 70%體積百分比的丙酮水溶 液，在25°C下浸泡24h，共浸泡3次，過(guò)濾，合并濾液，減壓濃縮膏狀，獲得提取物I. 05kg。
[0025] 將提取物加入5. OL水中制成渾濁液，用5. OL乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液，減 壓濃縮，獲得萃取物120g。
[0026] 往萃取物中加入300mL甲醇溶解，用260g聚酰胺拌樣，將甲醇揮發(fā)至干，裝柱，連 接MCI柱進(jìn)行中壓分離，用40-100%體積百分比的甲醇水溶液為流動(dòng)相梯度洗脫，按每份 500mL收集，薄層色譜法檢測(cè)，收集合并流動(dòng)相濃度為65-69 %