bacteria)的編號為 1.2352,酵母菌(Saccharomyces sp)的編號為 20122,枯草芽抱桿菌(Bacillus subtilissubsp.subtilis)的編號為 1.0015,乳酸片球菌(Ped1coccus acidilactici)的編號為 1.2696,幾鏈球菌(Lactobacillus acidophilus)的編號為 10180,嗜酸乳桿菌(Lactobacillusacidophilus)的編號為 1.2686。
[0022]在購買館藏菌種時，菌藏保管單位會給出不同菌種的應用方向上的配套標準活化培養(yǎng)基型號以供參考，如活化酵母菌的培養(yǎng)基為YPD，…活化培養(yǎng)基LB，…活化培養(yǎng)基MRS。以上的配套于菌種活化的培養(yǎng)基簡稱為配套培養(yǎng)基。
[0023]A、菌種選取與活化:
按照所選定的菌種種類、分別選取健康的菌株和配套的活化培養(yǎng)基在試管中進行斜面激活培養(yǎng)，
B、搖瓶培養(yǎng)基的確定和液體菌種的培育:
按如下體積份數比關系制得所需的搖瓶培養(yǎng)基:復合維生素水溶液2份、微量元素水溶液I份、與菌種配套的活化培養(yǎng)基1.5份混配搖勻分散植入燒瓶，然后加入激活后的菌種、在28-33°C無菌室內的搖床上培養(yǎng)24-48小時生成液體菌種，
C、菌種罐培養(yǎng)基的配比和混合菌種的發(fā)酵培育:
參照以下的組份重量比配置菌種罐培養(yǎng)基:35%硫酸lg、7水硫酸鎂2g、氯化鈉lg、磷酸二氫鉀0.5g、蘋果酸鈉2g、2水氯化鈣0.5g、酵母浸出液0.5g、7水硫酸亞鐵0.lg、微量元素水溶液1ml、復合維生素水溶液1ml、瓊脂10g、鹿糖5g、蛋白胨5g、加入純凈水形成IL的形成液體培養(yǎng)基，
在菌種罐中注入液體培養(yǎng)基后，必須調整復合液體菌種中各菌種有效活菌總數達到106CfU/ml-107CfU/ml，并參照各菌種活菌數量的如下百分比組成進行調整成為混合菌種:光合菌20?22%，
酵母菌18?22%，
枯草芽孢桿菌17?20%
乳酸片球菌18?21%，
糞鏈球菌22?24%，
嗜酸乳桿菌22?18%，
然后按照擴大培養(yǎng)的發(fā)酵罐大小以積比100:7?10加入到液體培養(yǎng)基中攪拌均勻，調整PH7.0、保持溫度28-30°C，培養(yǎng)時間28天得到液體菌種。
[0024]以上所述微量元素水溶液，是適應于混合菌種中每一種均衡生長需求而經反復試驗和配方比例調整而得出的經驗配比。
[0025]實施例如下:
實施例(mg) 1234
EDTA-2Na190195205210
2 水鑰酸鈉1819.520.522
7水硫酸亞鐵 8090105120
6水氮化鎳1211108
硼酸8090105120
2水氯化銅8090105120
氯化鋅8090105120 4水氯化錳8090105120
加入蒸餾水I升
以上所述的復合維生素水溶液也是適應于混合菌種中每一種均衡生長需求而經反復試驗和配方比例調整而得出的經驗配比。具體實施例如下:
實施例如下:
實施例(g) ABCD
維生素 BI480490505520
對氨基苯甲酸 320310300180
維生素 B3480490505520
維生素 B1240505560
維生素 B61201109580
維生素B40485260
蒸餾水(L) 1.21.19.58。
[0026]將所選取的6種益生菌分別活化、并進一步經搖床擴大培養(yǎng)成為液體菌種之后，活體菌總數量達到106cfu/ml-107cfu/ml。并且，混合菌種中各菌種活菌數量的比例應當符合接種時百分比組成規(guī)定。以保證在菌種發(fā)酵罐中，在特定的培養(yǎng)基中最終的產品能達到混合菌種產品的標準。
[0027]將生成的液體菌種經干燥至水分< 15%得到固留物，再經粉碎，過60目篩，包裝，形成有效活菌總數不少于17Cfu/克的粉狀制劑。
[0028]復合生物活菌制劑作為益生菌為基礎原料混合菌種，本身具備分解生物質材料轉化為生物質肥料的基本屬性，又具有抑制有害菌類生長和分解污物的能力。根據不同的目的、目前已經開發(fā)出借助生物質培養(yǎng)基的組份和配套好氧、厭氧菌系的輔助組成發(fā)酵菌系，生成微生物營養(yǎng)互補，功能各異生長同步的效果效果。以本復合生物活菌制為基礎的復合生物活菌制劑二次發(fā)酵產品已經廣泛試用在水產、畜禽、農業(yè)種植和環(huán)境保護領域。十余種復合生物活菌制劑直接和間接產品已經展現(xiàn)出強大的生命力。
【主權項】
1.復合生物活菌制劑，有效活菌總數不少于108cfu/ml，其特征在于:本制劑借助混合菌種在裝有配套培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中生成，經過濾、濃縮、配比形成活菌制劑，該制劑中所含各菌種的有效活菌數的百分比為: 光合菌22?25%， 酵母菌21?24%， 枯草芽孢桿菌15?20% 乳酸片球菌15?20%， 糞鏈球菌12?16%， 嗜酸乳桿菌12?16%。
2.根據權利要求1所述的復合生物活菌制劑的制備工藝，其特征在于:該工藝中包括以下步驟: A、菌種選取與活化: 按照所選定的菌種種類、分別選取健康的菌株和配套的活化培養(yǎng)基在試管中進行斜面激活培養(yǎng)， B、搖瓶培養(yǎng)基的確定和液體菌種的培育: 按如下體積份數比關系制得所需的搖瓶培養(yǎng)基:復合維生素水溶液2份、微量元素水溶液I份、與菌種配套的活化培養(yǎng)基1.5份混配搖勻分散注入燒瓶，然后加入激活后的菌種、在28-33°C無菌室內的搖床上培養(yǎng)24-48小時生成液體菌種， C、菌種罐培養(yǎng)基的配比和混合菌種的發(fā)酵培育: 參照以下的組份重量比配置菌種罐培養(yǎng)基:35%稀硫酸lml、7水硫酸鎂2g、氯化鈉lg、磷酸二氫鉀0.5g、蘋果酸鈉2g、2水氯化鈣0.5g、酵母浸出液0.5g、7水硫酸亞鐵0.lg、微量元素水溶液1ml、復合維生素水溶液1ml、瓊脂10g、蔗糖5g、蛋白胨5g、加入純凈水IL形成液體培養(yǎng)基， 在菌種發(fā)酵罐中注入上述液體培養(yǎng)基后，調整復合液體菌種中各菌種有效活菌總數達到106cfu/ml-107cfu/ml,并參照各菌種活菌數量達如下百分比組成的混合菌種: 光合菌20?22%， 酵母菌18?22%， 枯草芽孢桿菌17?20% 乳酸片球菌18?21%， 糞鏈球菌22?24%， 嗜酸乳桿菌22?18%， 然后按照體積比100:7?10加入到液體培養(yǎng)基中攪拌均勻，調整PH7.0、保持溫度28-30°C，培養(yǎng)時間28天得到液體菌種。
3.根據權利要求2所述的復合生物活菌制劑的制備工藝，其特征在于:所述微量元素水溶液由以下成分混合而成: EDTA-2Na: 19(T210mg，2 水鑰酸鈉:18?22mg，7 水硫酸亞鐵:8(Tl20mg，6 氮化鎳8?12mg:硼酸 8(Tl20mg，2 水氯化銅:8(Tl20mg，氯化鋅:8(Tl20mg，4 水氯化錳:8(Tl20mg，蒸餾水:0.8?1.2L。
4.根據權利要求2所述的復合生物活菌制劑的制備工藝，其特征在于:所述的復合維生素水溶液由以下成分混合而成: 維生素B1:480?520g，對氨基苯甲酸:28(T320g，維生素B3:480?520mg，維生素B1240?60mg,維生素B6:80?120mg、維生素B7:40?60mg、蒸懼水0.8?1.2L。
5.一種復合生物活菌粉劑，按照權利要求2所說的的工藝步驟制作，其特征在于:在C步驟完成之后，將液體制劑經干燥至水分< 15%，再經粉碎，過60目篩，包裝，形成有效活菌總數不少于17Cfu/克的粉狀制劑。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種復合生物活菌制劑及其制備方法。有效活菌總數不少于108cfu/ml。借助優(yōu)選的益生菌種經配套培養(yǎng)基活化，擴大培養(yǎng)后混合、并借助于混合菌種培養(yǎng)基和發(fā)酵罐培育，過濾、濃縮、配比形成復合活菌制劑。該制劑中所含的各菌種以及有效活菌數的百分比為：光合菌-22～25%、酵母菌-21～24%、枯草芽孢桿菌-15～20%、乳酸片球菌-15～20%、糞鏈球菌-12～16%，嗜酸乳桿菌-12～16%。應用于農業(yè)種植、畜禽養(yǎng)殖、水產養(yǎng)殖、飼料添加和城市污水生活垃圾處理等領域。
【IPC分類】C12R1-125, A23K1-16, C12R1-46, C12R1-01, C12N1-20, C12R1-23
【公開號】CN104611248
【申請?zhí)枴緾N201410630319
【發(fā)明人】角志海
【申請人】角志海
【公開日】2015年5月13日
【申請日】2014年11月11日