血管抑素活化劑多肽及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及血管抑素活化劑多肽及其應(yīng)用，具體涉及具有活化血管抑素，治療惡性腫瘤的多肽。
【背景技術(shù)】
[0002]1971年Folkman提出腫瘤生長和轉(zhuǎn)移依賴新生血管生成。并認(rèn)為實體瘤形成后，其發(fā)展可分為無血管期和血管期兩個階段。無血管期，微小腫瘤的存在依靠周圍間質(zhì)彌散供血,生長速度呈線性,腫瘤限制在Imm?2mm之內(nèi)，瘤細(xì)胞數(shù)少于10 5?10 6個，迫使腫瘤處于“休眠狀態(tài)”；進(jìn)入血管期后，腫瘤組織為灌注性供血，瘤體呈指數(shù)性生長，2周后可增大1.6萬倍。新生血管不僅提供腫瘤所需要的營養(yǎng)和氧氣，排除代謝產(chǎn)物，而且是遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的途徑。因此，阻斷腫瘤新生血管形成就可能阻止腫瘤生長和轉(zhuǎn)移，抗新生血管療法也成為腫瘤治療的手段之一。
[0003]血管抑素是纖維蛋白溶酶原的水解產(chǎn)物，有較強(qiáng)的血管生成抑制活性。大量研究證實血管抑素在體外能抑制內(nèi)皮細(xì)胞的生長和遷移，在體內(nèi)試驗中可抑制新生血管形成，從而誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，抑制腫瘤生長，使腫瘤處于“休眠狀態(tài)”。
[0004]因此，活化血管抑素，可以有效抑制體內(nèi)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖，抑制腫瘤的生長。從而，達(dá)到治療腫瘤的效果。
[0005]目前，沒有成熟開發(fā)的血管抑素活化劑多肽問世，用于治療惡性腫瘤。
[0006]本專利中的血管抑素活化劑多肽已證明在治療前列腺癌中有效，具有在其他腫瘤模型中開發(fā)的前景。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]發(fā)明目的
本發(fā)明提供全新的序列，該序列為血管抑素活化劑多肽，對惡性腫瘤具有很好的療效。
[0008]技術(shù)方案
血管抑素活化劑多肽，其特征在于其序列為EALALMYYHSQSLRKTYP。
[0009]血管抑素活化劑多肽在治療惡性腫瘤，如前列腺癌藥物中的應(yīng)用。
[0010]有益效果
利用固相合成法化學(xué)合成血管抑素活化劑多肽，該多肽具有全新的序列，該多肽可體外促進(jìn)纖維蛋白溶酶原水解，治療惡性腫瘤，如前列腺癌。我們發(fā)現(xiàn)的血管抑素活化劑多肽可以同時抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖活力，并在體內(nèi)試驗中提高荷瘤小鼠生存率，具有潛在的新藥開發(fā)價值。
【具體實施方式】
[0011]實施例1
血管抑素活化劑多肽對體外水解纖維蛋白溶酶原的活性。
[0012]采用ELISA法檢測纖維蛋白溶酶原水解產(chǎn)物——血管抑素。將Iml的lmg/ml的纖維蛋白溶酶為底物，分別在底物溶液中加入2、4、8ng的血管抑素活化劑多肽(上海生工合成)和陽性對照藥金屬蛋白酶10ng，在37°C，反應(yīng)5min后，離心，取上清，用ELISA法反應(yīng)后溶液中血管抑素的含量，結(jié)果顯示，2、4、8ng的血管抑素活化劑多肽和金屬蛋白酶產(chǎn)生的血管抑素分別為24.87,31.98,53.98 μ Μ。
[0013]實施例2
血管抑素活化劑多肽對體外培養(yǎng)人血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長和存活I(lǐng)C50。
[0014]采用MTT比色法。將對數(shù)生長的人血管內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC，以1.0X 15加入96孔培養(yǎng)板中，培養(yǎng)24h，實驗孔、陽性藥物對照孔分別加入不同濃度的實驗藥物血管抑素活化劑多肽(上海生工合成)和陽性對照藥物紫杉醇；空白組加入相同體積的溶劑。每孔設(shè)五個復(fù)孔，培養(yǎng)4811，分別在他、211、811、1411、2011、2411、3611、，4811每孔加入MTT，作用4h后，力口入DMS0，孵育30min，在酶標(biāo)儀620nm處測定吸光度A值，按公式HUVEC生長抑制率=(1-實驗組吸光值/對照組吸光值)X 100%。計算出實驗藥物的IC50為19.32 μ M。
[0015]實施例3
用腫瘤模型檢測血管抑素活化劑多肽的體內(nèi)活力。
[0016]建立前列腺癌腫瘤模型，陽性對照藥物紫杉醇；空白組加入相同體積的溶劑，實驗組多肽(上海生工合成)設(shè)3個劑量:2、4、8 mg/Kg。21天后，觀察小鼠存活數(shù)量，計算存活率。結(jié)果顯示，血管抑素活化劑多肽可有效地保護(hù)小白鼠，提高荷瘤小鼠的生存率，生存率達(dá)到81.54%ο
【主權(quán)項】
1.血管抑素活化劑多肽，其特征在于其序列為EALALMYYHSQSLRKTYP。
2.如權(quán)利要求1所述的血管抑素活化劑多肽在治療腫瘤藥物中的應(yīng)用。
3.如權(quán)利要求1所述的血管抑素活化劑多肽在治療前列腺癌藥物中的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明涉及藥物領(lǐng)域，具體涉及具有活化血管抑素，治療惡性腫瘤的多肽。其序列為EALALMYYHSQSLRKTYP是全新的序列，它們可以在體外活化血管抑素，抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖，并在體內(nèi)試驗中提高荷瘤小鼠生存率，具有潛在的新藥開發(fā)價值。
【IPC分類】C07K7-08, A61K38-10, A61P35-00
【公開號】CN104693281
【申請?zhí)枴緾N201510157244
【發(fā)明人】羅瑞雪
【申請人】蘇州普羅達(dá)生物科技有限公司
【公開日】2015年6月10日
【申請日】2015年4月6日