一種微生物生產(chǎn)普脂肪酶的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種利用微生物生產(chǎn)幾丁質(zhì)酶的方法和幾丁質(zhì)酶的應(yīng)用方法。
技術(shù)背景
[0002]幾丁質(zhì)是廣泛存在于自然界的一種含氮多糖類生物性高分子，主要的來源為蝦、蟹、昆蟲等甲殼類動(dòng)物的外殼與軟體動(dòng)物的器官(例如烏賊的軟骨)，以及真菌類的細(xì)胞壁等。其蘊(yùn)藏量在地球上的天然高分子中占第二位，估計(jì)每年自然界生物的合成量可達(dá)I X1011噸,僅次于纖維素。
[0003]幾丁質(zhì)通過脫乙?；幚碛脕砩a(chǎn)殼聚糖、低聚殼聚糖等產(chǎn)品，現(xiàn)在的生產(chǎn)工藝主要采用化學(xué)降解的方法，污染大，生產(chǎn)過程可控性差。本發(fā)明是通過幾丁質(zhì)酶的定向降解來分解幾丁質(zhì)生產(chǎn)殼聚糖和低聚殼聚糖，產(chǎn)品質(zhì)量安全性大大提高，同時(shí)減少了在生產(chǎn)過程中引起的污染問題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的，就是通過微生物發(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)幾丁質(zhì)酶，用于水產(chǎn)養(yǎng)殖飼料添加劑或者用于生物降解蝦殼、蟹殼等幾丁質(zhì)，生產(chǎn)殼聚糖或者殼寡糖，在飼料中通過使用幾丁質(zhì)酶，可以提高水產(chǎn)飼料的利用率，提高水產(chǎn)動(dòng)物的免疫力，減少藥物的使用；在殼聚糖生產(chǎn)中添加幾丁質(zhì)酶可以減少化學(xué)降解帶來的環(huán)境污染，而且生物降解更加利于人體的吸收。
[0005]本發(fā)明采用的菌種是在正常的蝦殼、蟹殼表面篩選和優(yōu)化得到的高質(zhì)優(yōu)良菌株，經(jīng)過鑒定屬于假單胞菌類。
[0006]本發(fā)明工藝簡單，成本低廉，通過微生物發(fā)酵技術(shù)以及后處理工藝，可以得到高純度的、高活性的幾丁質(zhì)酶，可以應(yīng)用于水產(chǎn)飼料和降解殼聚糖的生產(chǎn)工藝中。
【具體實(shí)施方式】
實(shí)施例
[0007]下面詳細(xì)介紹本發(fā)明的內(nèi)容
1、菌種的篩選
A在蝦殼、蟹殼表面定向篩選原始菌株，通過選擇性培養(yǎng)基的篩選得到到了幾株高活性菌。
[0008]B通過紫外誘變技術(shù)和化學(xué)誘變技術(shù)，對篩選到的野生菌株進(jìn)行改良，
2、菌種發(fā)酵
根據(jù)假單胞菌的營養(yǎng)需求，設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)，篩選最佳的培養(yǎng)基配方；通過中試和小試試驗(yàn)，選擇最佳的發(fā)酵工藝條件；根據(jù)幾丁質(zhì)酶的酶學(xué)特征，優(yōu)化最佳的后處理工藝。
[0009]3、幾丁質(zhì)酶的應(yīng)用 A、水產(chǎn)飼料中的應(yīng)用:在水產(chǎn)飼料的加工過程中，每噸飼料添加幾丁質(zhì)酶200-1000克，可以大大提聞水廣詞料的利用率；
B、幾丁質(zhì)的降解應(yīng)用:在幾丁質(zhì)的講解過程中，在41度的講解過程中控制pH在7.0，酶活達(dá)到1000U/ml，降解效率最快。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種微生物微生物生產(chǎn)幾丁質(zhì)酶的生產(chǎn)方法，該菌種是從奸殼和蟹殼表面上分離出的原始菌株，通過紫外誘變技術(shù)和化學(xué)誘變技術(shù)處理得到高產(chǎn)菌株。
2.根據(jù)權(quán)利要求1，該處理方法采用的微生物菌種是本公司經(jīng)過篩選和改造得到的工程菌株，經(jīng)過鑒定屬于假單胞菌。
3.根據(jù)權(quán)利要求2，該菌株在特定的發(fā)酵條件下可以生產(chǎn)幾丁質(zhì)酶。
4.根據(jù)權(quán)利要求1到2，幾丁質(zhì)酶可以進(jìn)行安全高效的脫乙酰化，將蝦殼、蟹殼等富含幾丁質(zhì)的天然物質(zhì)用來生產(chǎn)殼聚糖、低聚殼聚糖等保健品原料，替代現(xiàn)有的化學(xué)降解產(chǎn)品，不僅減少的環(huán)境污染，而且提高了產(chǎn)品的安全性能。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種利用微生物生產(chǎn)幾丁質(zhì)酶的方法，通過在蝦殼和蟹殼表面表面篩選分離到的野生菌，通過選擇性培養(yǎng)基的篩選，得到目標(biāo)菌株，該菌株經(jīng)過紫外誘變以及化學(xué)誘變等技術(shù)的改良，得到高產(chǎn)幾丁質(zhì)酶的原始菌種，通過高密度發(fā)酵工藝優(yōu)化以及后處理干燥技術(shù)，可以得到優(yōu)質(zhì)的幾丁質(zhì)酶。本發(fā)明特點(diǎn)通過微生物發(fā)酵技術(shù)以及后處理工藝，可以得到高純度的、高活性的幾丁質(zhì)酶，可以應(yīng)用于水產(chǎn)飼料和降解殼聚糖的生產(chǎn)工藝中。
【IPC分類】A23K1-165, C12N9-42, C12P19-26, C12R1-38
【公開號(hào)】CN104694516
【申請?zhí)枴緾N201310658021
【發(fā)明人】趙志強(qiáng)
【申請人】青島根源生物技術(shù)集團(tuán)有限公司
【公開日】2015年6月10日
【申請日】2013年12月9日