一種Icetexane型二萜二聚體類化合物及其制備方法和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于植物有效成分提取技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種Icetexane型二貓二聚體 類化合物biperovskatone及其制備方法和應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 分藥花屬植物全球約7種，主要分布在伊朗、巴基斯坦、印度以及 我國的西藏和新疆。我國西藏有2種。研宄表明，分藥花屬植物富含松香烷型二萜和 Icetexane型二萜。這類二萜類成分結(jié)構(gòu)新穎多樣，且具有廣泛的藥理活性，其中的丹參醌 類結(jié)構(gòu)具有廣譜強(qiáng)效的抗腫瘤活性。我們在前期抗HBV活性篩選過程中，發(fā)現(xiàn)濱藜葉分藥 花的90%乙醇提取物具有顯著的抗HBV活性。乙型肝炎病毒（HBV)是目前嚴(yán)重危害人類健 康的病毒之一。當(dāng)前對于HBV主要是采用乙肝疫苗預(yù)防，但是這些疫苗對于后期乙型肝炎 患者則沒有作用。當(dāng)前臨床一線用藥均為核苷及其類似物，如拉米夫定（3-TC)、阿德福韋 酯、替諾夫韋、替比夫定等，這些核苷類似物均存在毒副作用大、長期服用導(dǎo)致病毒產(chǎn)生耐 藥性和變異，且停藥后病毒反彈大的缺點(diǎn)。為了尋找天然抗病毒活性成分，我們對前期篩選 具有顯著抗HBV活性的分藥花屬植物濱藜葉分藥花進(jìn)行了較系統(tǒng)的活性成分研宄工作。本 發(fā)明從分藥花屬植物濱藜葉分藥花中分離得到一個(gè)結(jié)構(gòu)新穎的Icetexane型二貓二聚體， 該化合物具有顯著的抑制表面抗原（HBsAg)和e抗原（HBeAg)的活性，并能使HBV DNA顯 著下降，該化合物至今尚未見到相關(guān)報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的第一目的在于提供一種新的Icetexane型二萜二聚體類化合物 biperovskatone ;第二目的在于提供所述Icetexane型二貓二聚體類化合物的制備方法； 第三目的在于提供所述Icetexane型二萜二聚體類化合物在制備抗乙型肝炎病毒藥物中 的應(yīng)用。
[0004] 本發(fā)明的第一目的是這樣實(shí)現(xiàn)的，所述的化合物是從干燥的分藥花屬植物全草中 分離得到的，其分子式為C 4tlH56O6，具有下述結(jié)構(gòu)：
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種Icetexane型二貓二聚體類化合物，其特征在于所述Icetexane型二貓二聚體 類化合物是以干燥的分藥花屬植物全草為原料分離得到，命名為biperovskaton，其分子式 為(： 4(|115606,具有下述結(jié)構(gòu)：
2. -種權(quán)利要求1所述的Icetexane型二貓二聚體類化合物的制備方法，其特征在于 是以干燥的分藥花屬植物全草為原料，經(jīng)浸膏提取、有機(jī)溶劑萃取、硅膠柱層析、反相柱層 析、高壓液相色譜分離獲得，具體為： A、 浸膏提?。喝I藜葉分藥花全草，粉碎至20~40目，用有機(jī)溶劑在85-90°C下回流提 取2~4次，每次30~60分鐘，提取液合并、過濾，減壓濃縮提取液至1/4 ~ 1/2體積時(shí)，靜 置，濾除沉淀物，濃縮成浸膏a ; B、 有機(jī)溶劑萃?。航郺中加入重量比1~2倍量的水，用與水等體積的有機(jī)溶劑萃取 3~4次，合并有機(jī)溶劑萃取相，減壓濃縮成浸膏b ; C、 硅膠柱層析：浸膏b上硅膠柱層析，裝柱硅膠為160~200目，用量為浸膏b重量6~8 倍量；以體積配比為1 :〇~〇: 1的混合有機(jī)溶劑梯度洗脫，收集梯度洗脫液、濃縮，經(jīng)TLC檢 測，合并相同的部分； D、 反相柱層析：C步驟洗脫液的10:1的部分上反相柱層析，反相柱用反相材料C-18裝 柱；用體積含量為20~100%的甲醇水溶液進(jìn)行梯度洗脫，收集各部分洗脫液并濃縮，經(jīng)TLC 檢測，合并相同的部分； E、 高效液相色譜分離：將以體積含量60~85%甲醇水溶液洗脫得到的洗脫液經(jīng)高效液 相色譜分離純化，即得所述的Icetexane型二貓二聚體類化合物。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述Icetexane型二貓二聚體類化合物的制備方法，其特征在于所 述A步驟的有機(jī)溶劑為70~90 %的丙酮、乙醇或甲醇。
4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述Icetexane型二貓二聚體類化合物的制備方法，其特征在于所 述B步驟的有機(jī)溶劑為乙酸乙酯、氯仿、石油醚或苯。
5. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的Icetexane型二貓二聚體類化合物的制備方法，其特征在 于所述C步驟的浸膏b在經(jīng)硅膠柱層析前，用重量比1. 5~3倍量的氯仿溶解后用重量比 0? 8~L 2倍的80~100目硅膠拌樣。
6. 根據(jù)權(quán)利要求2所述Icetexane型二貓二聚體類化合物的制備方法，其特征在于所 述C步驟的混合有機(jī)溶劑為石油醚-丙酮、氯仿-丙酮、氯仿-甲醇、正己烷-丙酮或石油 醚-乙酸乙酯。
7. 根據(jù)權(quán)利要求2所述Icetexane型二貓二聚體類化合物的制備方法，其特征在于所 述C步驟的混合有機(jī)溶劑的體積配比為1:0、20:1、10:1、8:2、3:2、1:1、1:2、0:1。
8. 根據(jù)權(quán)利要求2所述Icetexane型二貓二聚體類化合物的制備方法，其特征在于所 述E步驟的高效液相色譜分離純化是以70%的甲醇為流動相，流速為2 ml/min，10 X 250 mm，5ym的Agilent Zorbax C18制備色譜柱為固定相，紫外檢測器檢測波長為254 nm，每 次進(jìn)樣50~100 y L，收集19. 5~23. 0 min的色譜峰，多次累加后蒸干。
9. 一種權(quán)利要求1所述的Icetexane型二萜二聚體類化合物在制備抗乙型肝炎病毒 (HBV)藥物中的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種Icetexane型二萜二聚體類化合物及其制備方法和應(yīng)用，所述Icetexane 型二萜二聚體類化合物是從分藥花屬植物中分離得到，是目前為止首個(gè)C環(huán)C-11位羰基與C-10位羥基形成分子內(nèi)半縮酮結(jié)構(gòu)的二萜二聚體，命名為biperovskatone，其分子式為C40H56O6，具有下述結(jié)構(gòu)：所述Icetexane型二萜二聚體是以干燥的分藥花屬植物全株為原料，經(jīng)浸膏提取、有機(jī)溶劑萃取、硅膠柱層析、反相柱層析、高壓液相色譜分離步驟而得到。該化合物對HepG2.2.15細(xì)胞分泌表面抗原(HBsAg)和e抗原(HBeAg)有顯著的抑制活性，還能顯著降低細(xì)胞內(nèi)HBV DNA。本發(fā)明化合物為結(jié)構(gòu)新穎的二萜類二聚體，活性好，可作為抗HBV藥物的先導(dǎo)性化合物，有良好的應(yīng)用前景。
【IPC分類】C07D493-10, A61P31-20
【公開號】CN104804014
【申請?zhí)枴緾N201510139862
【發(fā)明人】江志勇, 黃相中, 周俊, 黃超冠, 胡秋芬, 高雪梅, 楊光宇, 李干鵬
【申請人】云南民族大學(xué)
【公開日】2015年7月29日
【申請日】2015年3月27日