一種從野百合萃取野百合堿的方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明屬于生物技術領域，涉及一種從野百合萃取野百合堿的方法。
【背景技術】
[0002] 野百合堿，CAS號315-22-0,分子式C16H23N06,分子量325. 36,分子結構：
野百合堿對小鼠肉瘤-180、白血病L615、大鼠瓦克癌-256等均有一定的抑制作用（接 種后24小時開始治療)，其中以對瓦克癌-256療效最為顯著。另有報告，對S37抑制率為 54~75%。如在野百合堿母核氮原子上引入氧原子，毒性可降低，但對肉瘤-180的抑制率 亦隨之降低。臨床試用于皮膚癌及子宮癌有較好的療效，對白血病亦有一定效果。此生物 堿為雙稠吡咯啶類，其抗癌作用與烷化劑相似。通過文獻檢索，從野百合中制備野百合堿的 方法披露較少，多采用硅膠柱分離，操作復雜，生產(chǎn)成本高。現(xiàn)有野百合堿的制備方法一般 采用常壓提取，再采用硅膠柱或制備液相方法分離，常壓提取法存在提取效率低，后續(xù)純化 工序操作復雜等缺點。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術的缺陷和不足，提供一種從野百合萃取野百合堿的 高效方法。
[0004] 本發(fā)明的目的是通過以下技術方案來實現(xiàn)的： 一種從野百合萃取野百合堿的方法，其特征在于以下步驟： 1) 野百合原料粉碎20-80目，投入萃取釜，通入液態(tài)C02和夾帶劑，在壓力20-30MPa、 溫度40-55°C條件下，萃取30-60min，在壓力5-9MPa、溫度40-60°C條件下解析，得萃取物； 2) 上述萃取物用酸水溶解，用納濾膜過濾，濾液再用反滲透膜濃縮，濃縮液加乙醇溶液 沉淀，濾出得沉淀物用丙酮溶液溶解重結晶2-3次，干燥即得野百合堿。
[0005] 步驟1)中所述的夾帶劑為氯仿溶液，流速為0. 1-0. 5ml/g/min。
[0006] 步驟2)中所述的納濾膜為截留分子量500-1000的中空纖維素納濾膜。
[0007] 本發(fā)明的優(yōu)點是：方法利用超臨界C02萃取，提取效率高，溶出雜質(zhì)少，而且對環(huán) 境友好；方法采用膜分離技術，是一種物理分離過程，操作簡單，而且環(huán)保、低能耗。
【具體實施方式】
[0008] 下面將結合【具體實施方式】進一步說明本發(fā)明。
[0009]實施例1: 野百合粉碎40目，稱取3kg投入萃取釜，通入液態(tài)C02,流速為3ml/g/min調(diào)節(jié)壓力 20MPa、溫度50°C，達到上述參數(shù)，再通入氯仿溶液，流速為0. 2ml/g/min，萃取40min，在壓 力6MPa、溫度50°C條件下解析萃取物。所得萃取物用1%的鹽酸水溶液溶解，用截留分子 量500的中空纖維素膜納濾，濾液再用反滲透膜濃縮，濃縮液加3倍體積乙醇溶液沉淀12 小時，濾出得沉淀物用丙酮溶液溶解重結晶2次，干燥得野百合堿I. 4g，經(jīng)HPLC檢測，含量 98. 2%〇
[0010] 實施例2 : 野百合粉碎60目，稱取3kg投入萃取釜，通入液態(tài)C02,流速為5ml/g/min調(diào)節(jié)壓力 25MPa、溫度40°C，達到上述參數(shù)，再通入氯仿溶液，流速為0. 2ml/g/min，萃取30min，在壓 力9MPa、溫度60°C條件下解析萃取物。所得萃取物用22%的鹽酸水溶液溶解，用截留分子 量800的中空纖維素膜納濾，濾液再用反滲透膜濃縮，濃縮液加4倍體積乙醇溶液沉淀8 小時，濾出得沉淀物用丙酮溶液溶解重結晶3次，干燥得野百合堿I.lg，經(jīng)HPLC檢測，含量 98. 5%〇
[0011] 實施例3: 野百合粉碎80目，稱取3kg投入萃取釜，通入液態(tài)C02,流速為2ml/g/min調(diào)節(jié)壓力 30MPa、溫度45°C，達到上述參數(shù)，再通入氯仿溶液，流速為0. 2ml/g/min，萃取60min，在壓 力5MPa、溫度40°C條件下解析萃取物。所得萃取物用1%的鹽酸水溶液溶解，用截留分子 量1000的中空纖維素膜納濾，濾液再用反滲透膜濃縮，濃縮液加3倍體積乙醇溶液沉淀10 小時，濾出得沉淀物用丙酮溶液溶解重結晶3次，干燥得野百合堿I. 6g，經(jīng)HPLC檢測，含量 97. 1%〇
【主權項】
1. 一種從野百合萃取野百合堿的方法，其特征在于以下步驟： 1) 野百合原料粉碎20-80目，投入萃取釜，通入液態(tài)C02和夾帶劑，在壓力20-30MPa、 溫度40-55°C條件下，萃取30-60min，在壓力5-9MPa、溫度40-60°C條件下解析，得萃取物； 2) 上述萃取物用酸水溶解，用納濾膜過濾，濾液再用反滲透膜濃縮，濃縮液加乙醇溶液 沉淀，濾出得沉淀物用丙酮溶液溶解重結晶2-3次，干燥即得野百合堿。2. 根據(jù)權利要求1所述的從野百合萃取野百合堿的方法，其特征在于步驟1)中所述的 夾帶劑為氯仿溶液，流速為〇. 1-0. 5ml/g/min。3. 根據(jù)權利要求1所述的從野百合萃取野百合堿的方法，其特征在于步驟2)中所述的 納濾膜為截留分子量500-1000的中空纖維素納濾。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種從野百合萃取野百合堿的高效、低污染方法。工藝步驟如下：1）野百合原料粉碎20-80目，投入萃取釜，通入液態(tài)CO2和夾帶劑，在壓力20-30MPa、溫度40-55℃條件下，萃取30-60min，在壓力5-9MPa、溫度40-60℃條件下解析，得萃取物；2）上述萃取物用酸水溶解，用納濾膜過濾，濾液再用反滲透膜濃縮，濃縮液加乙醇溶液沉淀，濾出得沉淀物用丙酮溶液溶解重結晶2-3次，干燥即得野百合堿。采用本發(fā)明萃取野百合堿，工藝操作簡便，所得產(chǎn)品純度高，易于實現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化放大。
【IPC分類】C07D491/16
【公開號】CN104926822
【申請?zhí)枴緾N201510281005
【發(fā)明人】蘇劉花
【申請人】南京澤朗生物科技有限公司
【公開日】2015年9月23日
【申請日】2015年5月28日