一種從桑葉中提取1-脫氧野尻霉素的方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及天然物提取技術領域，特別涉及一種從桑葉中提取1-脫氧野尻霉素的方法。
【背景技術】
[0002]我國桑樹資源及產(chǎn)量均居世界首位，全國各地均有栽培。目前大部分地區(qū)將桑作為飼用栽培，每年入冬后隨著冬蠶飼養(yǎng)減少，大量桑葉都被廢棄。桑葉味苦、甘，性寒，歸肺、肝經(jīng)，具有疏風清熱、平肝明目的功效；在藥理上具有抗炎、降血糖、降血脂、利尿等作用，這些藥理活性歸功于桑葉中的1-脫氧野尻霉素(DNJ)、白黎蘆醇等成分，因而研究桑葉中的這兩種成分的提取技術具有重要意義。此外，1-脫氧野尻霉素還具有抗病毒、抑制腫瘤等功能。目前，1-脫氧野尻霉素的市場價格昂貴(98%純度1-脫氧野尻霉素約20萬元/克)，如果其生產(chǎn)成本降低，其應用領域還將進一步擴大。微生物發(fā)酵可以產(chǎn)生1-脫氧野尻霉素。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)枯草桿菌、放線菌等微生物可以發(fā)酵產(chǎn)1-脫氧野尻霉素。但是它們的產(chǎn)量較低，一般為0.01g/L左右。由于產(chǎn)量極低，目前僅僅局限于菌株初步篩選和改造，沒有開展大規(guī)模發(fā)酵制備1-脫氧野尻霉素的嘗試。利用桑樹廢棄物為原料生產(chǎn)1-脫氧野尻霉素具有巨大的潛力。其優(yōu)點在于原料來源豐富，價格低廉，是生產(chǎn)1-脫氧野尻霉素等活性物質(zhì)的理想原料。因此很有必要建立一種高效的1-脫氧野尻霉素提取方法。
[0003]目前1-脫氧野尻霉素的提取多采用溶劑提取法和酸提取法。溶劑提取主要采用乙酸乙酯、乙醇和石油醚等溶劑分部提?。欢崽崛》ㄖ饕捎孟←}酸和稀硫酸提取桑葉中的1-脫氧野尻霉素。這些提取方法提取效率和提取率低、成本高。因此，桑樹中1-脫氧野尻霉素提取效率較低成為1-脫氧野尻霉素制備的瓶頸問題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明所要解決的技術問題是提供一種從桑葉中提取1-脫氧野尻霉素的方法，該方法工藝簡單，易于操作，環(huán)保，提取效率高，制備得到的1-脫氧野尻霉素純度高。
[0005]為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術方案:
[0006]本發(fā)明提供一種從桑葉中提取1-脫氧野尻霉素的方法，包括以下制備步驟:
[0007]I)原料處理:取桑葉，去除雜質(zhì)后，洗凈，瀝干，粉碎；
[0008]2)微波處理:將粉碎后的桑葉放入微波專用容器，設定微波功率為550?750W，溫度為35?45°C，時間為6?lOmin，然后再將桑葉翻動，保持溫度不變，設定微波功率為100?200W，調(diào)節(jié)時間為4?7min ；
[0009]3)高壓處理:將步驟2)得到的桑葉放入高壓罐中，加入與桑葉相同重量的純凈水，加壓至2.7?4.8kgf/cm2，使其壓力均勻，并保持6?lOmin，恢復常壓，得到膏狀漿液；
[0010]4)浸提:向膏狀漿液中加入5?7倍重量份的混合溶液，置于3?TC，避光，浸提4?7小時，得到浸提液；
[0011]5)超聲提取:將浸提液進行超聲提取，超聲波提取處理時間20?35min，作用溫度35?45°C，功率為300?400W，得到超聲提取液；
[0012]6)冷凍:將超聲提取液置于3?7°C下，離心15?25min，轉(zhuǎn)速3000?3500r/min，收集沉淀，-14?-20°C冷凍16?19h ；
[0013]7)融化、濃縮:將上步驟得到的冷凍物取出，加熱使之融化，過濾，收集濾液，將濾液進行濃縮成相對密度為1.12?1.23(35°C )的浸膏；
[0014]8)將浸膏進行噴霧干燥，包裝后即得成品。
[0015]優(yōu)選地，步驟I)中，將桑葉粉碎至150?250目。在這個目數(shù)范圍內(nèi)，本發(fā)明的1-脫氧野尻霉素的提取率最高。
[0016]優(yōu)選地，步驟3)中，高壓處理加壓至3.4kgf/cm2。在這個壓力下，1_脫氧野尻霉素的提取率最尚。
[0017]本發(fā)明的有益效果在于:
[0018]1、本發(fā)明在高壓處理前，進行微波處理，能夠提高提取率，有效降低提取時間。
[0019]2、本發(fā)明采用高壓處理原料，利用各成分對高壓的不同承受力而將1-脫氧野尻霉素和其它成分分離出，可以提高提取率。
[0020]3、本發(fā)明方法中，在超聲提取前，先浸提，能夠提尚提取率，且有效降低提取時間。
[0021]4、本發(fā)明的方法中，使用高壓處理過的甜茶葉來進行提取，而不是直接使用桑葉原料進彳丁提取，有助于提尚提取率。
[0022]5、本發(fā)明采用微波處理、高壓技術、浸提、超聲提取、離心冷凍和融化技術結合，避免柱層析等技術的使用，節(jié)約時間，也避免使用超臨界C(V流體萃取，降低成本，同時還顯著提高了 1-脫氧野尻霉素的純度。
[0023]6、本發(fā)明方法考慮了 1-脫氧野尻霉素的穩(wěn)定性問題，選擇低溫、避光條件，避免了 1-脫氧野尻霉素降解和損耗，提高1-脫氧野尻霉素含量，保持1-脫氧野尻霉素的穩(wěn)定性。
[0024]7、本發(fā)明方法工藝簡單，易于操作，環(huán)保。
【具體實施方式】
[0025]以下結合實施例對本發(fā)明作進一步說明，但本發(fā)明并不局限于這些實施例。
[0026]實施例1
[0027]I)原料處理:取桑葉，去除雜質(zhì)后，洗凈，瀝干，粉碎至150目；
[0028]2)微波處理:將粉碎后的桑葉放入微波專用容器，設定微波功率為550W，溫度為450C，時間為6min，然后再將桑葉翻動，保持溫度不變，設定微波功率為200W，調(diào)節(jié)時間為4min ；
[0029]3)高壓處理:將步驟2)得到的桑葉放入高壓罐中，加入與桑葉相同重量的純凈水，加壓至4.8kgf/cm2,使其壓力均勻，并保持6min，恢復常壓，得到膏狀漿液；
[0030]4)浸提:向膏狀漿液中加入7倍重量份的混合溶液，置于3°C，避光，浸提5小時，得到浸提液；
[0031]5)超聲提取:將浸提液進行超聲提取，超聲波提取處理時間20min，作用溫度45 0C，功率為400W，得到超聲提取液；
[0032]6)冷凍:將超聲提取液置于3°C下，離心15min，轉(zhuǎn)速3400r/min，收集沉淀，-14°C冷凍17h ；
[0033]7)融化、濃縮:將上步驟得到的冷凍物取出，加熱使之融化，過濾，收集濾液，將濾液進行濃縮成相對密度為1.12(35°C )的浸膏；
[0034]8)將浸膏進行噴霧干燥，包裝后即得成品。
[0035]實施例2
[0036]I)原料處理:取桑葉，去除雜質(zhì)后，洗凈，瀝干，粉碎至180目；
[0037]2)微波處理:將粉碎后的桑葉放入微波專用容器，設定微波功率為600W，溫度為430C，時間為7min，然后再將桑葉翻動，保持溫度不變，設定微波功率為180W，調(diào)節(jié)時間為5min ；
[0038]3)高壓處理:將步驟2)得到的桑葉放入高壓罐中，加入與桑葉相同重量的純凈水，加壓至4.2kgf/cm2，使其壓力均勻，并保持7min，恢復常壓，得到膏狀漿液；