二級(jí)發(fā)酵液30份-50份、產(chǎn)航假絲酵母二級(jí)發(fā)酵液20 份-40份和高山被抱霉二級(jí)發(fā)酵液10份-30份進(jìn)行混合，制備復(fù)合菌種的混合液。
[0016] (5)添加輔料：將步驟（4)制備的復(fù)合菌種混合液充分吸附于載體中，載體選用溫 室大棚±壤；輔料采用尿素和過憐酸巧，其中尿素與過憐酸巧的重量比為1:2. 5 ;載體和輔 料的用量按照重量比為1:3配比混合，加水至含水量40-70%，然后按體積比每立方米載體 與輔料的混合用料加入上述步驟（4)制備的復(fù)合菌種混合液100-300g，并混合均勻，制備 獲得溫室大棚±壤修復(fù)組劑。
[0017] 進(jìn)一步，本發(fā)明提供應(yīng)用上述±壤修復(fù)組劑在溫室大棚中的應(yīng)用。通過利用自行 篩選分離馴化獲得白地霉（GeotrichumCandidum)XHS0030BCGMCCNO. 9435,通過實(shí)踐與 其他沼澤紅假單胞菌、產(chǎn)航假絲酵母和高山被抱霉四種菌種融合試驗(yàn)，實(shí)踐證明制備的± 壤修復(fù)劑應(yīng)用于改良溫室大棚的±壤，對(duì)于改良和活化±壤、降解±壤中的有害物質(zhì)、解決 ±壤的鹽潰化問題，獲得顯著突出的技術(shù)效果。
[0018] 本發(fā)明進(jìn)一步提供上述溫室大棚±壤修復(fù)組劑的應(yīng)用方法：在空氣溫度20-30°C 下堆制；堆制是在覆蓋草簾下進(jìn)行，堆制開始后每30天翻堆一次，翻堆時(shí)補(bǔ)水至含水量 40-70%，堆制時(shí)間持續(xù)120天；堆制完成后攤驚至干燥后即可直接施用于±壤。
[0019] 本發(fā)明所選用編號(hào)為XHS0030B的白地霉是從溫室大棚±壤中篩選得到，同時(shí)，盡 管沼澤紅假單胞菌、產(chǎn)航假絲酵母和高山被抱霉為常見的菌種，但是，微生物菌種的特異性 和復(fù)雜性，將各種不同的菌種能夠復(fù)合配伍使用，通過各種菌種的相融性、配伍性與各菌種 屬性結(jié)合，考慮的復(fù)合菌種的安全性，特別是應(yīng)用于溫室大棚±壤修復(fù)中都需要大量的基 礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，本發(fā)明基于前期基礎(chǔ)研究積累，通過采用大量不同的菌種復(fù)配試驗(yàn)，證明本發(fā) 明采用復(fù)合菌種通過添加載體與輔料混合制備溫室大棚±壤修復(fù)劑，溫室大棚±壤修復(fù)劑 按照重量比配比白地霉70份-80份、沼澤紅假單胞菌30份-50份、產(chǎn)航假絲酵母20份-40 份和高山被抱霉10份-30份混合，菌種混合液充分吸附于載體大棚±壤中，并與選用合適 的輔料相混合，通過工藝制備獲得溫室大棚±壤修復(fù)組劑，并通過大棚生產(chǎn)實(shí)踐應(yīng)用獲得 的±壤修復(fù)組劑，對(duì)于有效改良和活化±壤、降解±壤中的有害物質(zhì)、解決±壤的鹽潰化問 題等方面都具有重要的意義和作用。
[0020] 通過實(shí)施本發(fā)明具體的
【發(fā)明內(nèi)容】
，可W達(dá)到W下有益效果：
[0021] (1)本發(fā)明篩選的編號(hào)為X服0030B的菌株具有較強(qiáng)的生長繁殖能力，生長速率 快，遺傳特性穩(wěn)定，并對(duì)±壤修復(fù)有特定的作用。
[0022] (2)本發(fā)明制備的溫室大棚±壤修復(fù)組劑有利于改良溫室大棚的±壤，有效地改 良和活化±壤、降解±壤中的有害物質(zhì)、解決±壤的次生鹽潰化等問題，將±壤對(duì)果蔬生產(chǎn) 中的不利影響降低到最低限度，有利于提高蔬菜的產(chǎn)量和品質(zhì)，獲得良好的技術(shù)效果，因 此在溫室大棚±壤修復(fù)中具有廣泛而適用的價(jià)值。
【附圖說明】
[0023]圖 1 顯示為白地霉（GeotrichumCandidum)X服0030BCGMCCNO. 9435 的菌落形態(tài) 圖，其中，A為菌落正面，B為菌落反面。
[0024]圖 2 顯示為白地霉（GeotrichumCandidum)X服0030BCGMCCNO. 9435 的菌絲顯微 觀察圖。
[00巧]圖 3 顯示為白地霉（GeotrichumCandidum)X服0030BCGMCCNO. 9435 的菌絲和抱 子的顯微結(jié)構(gòu)圖，其中，A為抱子的顯微結(jié)構(gòu)，B為菌絲的顯微結(jié)構(gòu)。
[0026]圖 4 顯示為白地霉（GeotrichumCandidum)X服0030BCGMCCNO. 9435 的口SrDNA 序列系統(tǒng)進(jìn)化發(fā)育樹圖。
【具體實(shí)施方式】
[0027] 下面，舉實(shí)施例說明本發(fā)明，但是，本發(fā)明并不限于下述的實(shí)施例。
[0028] 本發(fā)明中選用的所有原輔材料，W及選用的菌種培養(yǎng)方法都為本領(lǐng)域熟知選用 的，本發(fā)明中設(shè)及到的％都為重量百分比，除非特別指出除外。
[0029]實(shí)施例一：白地霉（GeotrichumCandidum)XHS0030BCGMCCNO. 9435 的分離、篩選 及鑒定
[0030] 1、菌種的分離和篩選
[0031] (1)分離
[0032] 本發(fā)明所使用的白地霉從新疆南疆庫爾勒典型的鹽潰化嚴(yán)重、±壤沙化或結(jié)板突 出的溫室大棚±壤中取樣分離，根據(jù)菌種括抗作用機(jī)理分析，初步篩選出對(duì)溫室大棚±壤 的±壤鹽潰化、±壤板結(jié)等±壤問題具有一定括抗能力的菌株。利用傳統(tǒng)的平板培養(yǎng)法分 離出±層中的微生物，平板劃線法純化菌株，W不同的培養(yǎng)溫度、抑值、培養(yǎng)基為富集條件， 篩選出一批生長良好的微生物菌株，從中優(yōu)選一株編號(hào)為XHS0030B的菌株。
[0033] 分離步驟：依據(jù)梯度稀釋法，稱取IOg±壤樣品于90血無菌生理鹽水，25°C活化 SOmin后進(jìn)行梯度稀釋，選取10 2、10 3、10 4稀釋液分別涂布于PDA培養(yǎng)基的平板，每個(gè)處理 3個(gè)重復(fù)，于25°C培養(yǎng)。待長出菌落后挑取形狀、大小、顏色等不同的菌落分別劃線接種于 新的分離培養(yǎng)基PDA培養(yǎng)基，直至無雜菌落。將純化后的菌株一部分采用凍干物安飯管、甘 油管和液氮等方式保藏，一部分保存于4°C直接用于后續(xù)研究。
[0034] 似培養(yǎng)條件
[0035] 將純化的菌株接種到馬鈴馨固體培養(yǎng)基斜面上，于30°C培養(yǎng)2天，放入4°C冰箱中 保存?zhèn)溆谩?br>[0036] 具體的：該菌株培養(yǎng)溫度為10-38°C，最適溫度為25°C，生長抑為3-11，最適抑為 5-7;該菌種生長于PDA培養(yǎng)基表面。
[0037] 所述PDA培養(yǎng)基的制備為：把馬鈴馨洗凈去皮，取200克切成小塊，加水1000毫 升，煮沸半小時(shí)后，補(bǔ)足水分。在濾液中加入10克瓊脂，煮沸溶解后加薦糖20克，補(bǔ)足水分， 分裝，滅菌，即可制備獲得PDA固體培養(yǎng)基。
[0038] 通過對(duì)溫室大棚±壤中微生物進(jìn)行分離、篩選和培養(yǎng)，獲得一批微生物菌株，從 中篩選出一株編號(hào)為XHS0030B的菌株，經(jīng)微生物學(xué)分類與鑒定，該菌株屬于Geotrichum Candidum。本發(fā)明采用菌株編號(hào)為XHS0030B的白地霉（GeotrichumCandidum),該菌株已 于申請(qǐng)日前保藏于布達(dá)佩斯條約微生物國際保藏單位：中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普 通微生物中屯、（CGMCC)。地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)，中國科學(xué)院微生物研 究所，郵編：100101。保藏日期是2014年7月10日，保藏號(hào)是CGMCCNo. 9435。經(jīng)微生物 學(xué)鑒定為白地霉（GeotrichumCandidum)。該菌株最適生長條件為：溫度25°C,培養(yǎng)基采 用PDA培養(yǎng)基，培養(yǎng)條件：溫度25°C，P冊(cè)-7,時(shí)間2地-4她；該菌株會(huì)產(chǎn)生白色的、呈毛絨狀 或粉狀的膜，具有真菌絲、有的分枝、橫隔或多或少；繁殖方式為裂殖，形成的節(jié)抱子單個(gè)或 連接成鏈，抱子呈楠圓或圓形；菌落呈平面擴(kuò)散，生長快，扁平，正面乳白色，背面上黃色，直 徑40-70mm，短絨狀或近于粉狀，有同屯、圈可放射線，有的呈中屯、突起；經(jīng)微生物學(xué)鑒定為 GeotrichumCandidum菌。參照《真菌鑒定手冊(cè)》對(duì)編號(hào)為XHS0030B菌株進(jìn)行鑒定，結(jié)合生 理生化綜合檢測(cè)確定菌種編號(hào)為XHS0030B菌株為地霉屬（Geotrichum)中的成員，從分類 學(xué)角度劃分為白地霉（GeotrichumCandidum)。
[0039] 通過BLAST同源比對(duì)，菌株X服0030B的口SrDNA序列在NCBI數(shù)據(jù)庫中進(jìn)行BLAST 分析后，構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹，該菌株XHS0030B與GeotrichumcandidumisolateLllB處于 最小分支，是其近似種，但從分子水平分析，菌種編號(hào)為XHS0030B與常見的白地霉有明顯 的差異，但從分類學(xué)角度進(jìn)而將該菌株XHS0030B確定為白地霉（GeotrichumCandidum)。
[0040] 該菌株X服0030B在PDA培養(yǎng)基生長良好，經(jīng)鑒定板試驗(yàn)證明X服0030B可W利用 吐溫80,N-乙酷基-0 -D-葡萄糖胺，核糖醇，k阿拉伯糖，D-阿拉伯醇，熊果巧，D-纖維二 糖，D-木糖，蘋果酸，糊精，赤藻糖醇，D-葡萄糖酸，a-D-葡萄糖，D-甘露醇，0-甲基-D-葡 萄糖巧，6-0-D-化喃葡萄糖酷，D-巧喃果糖，D-葡萄醒酸，丙S醇，肝糖，麥芽S糖，奎尼酸， k谷氨酸，腺巧-5 ' -