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      一種提高食藥用真菌β-葡聚糖的提取溶出率方法

      文檔序號(hào):9627228閱讀:722來(lái)源:國(guó)知局
      一種提高食藥用真菌β-葡聚糖的提取溶出率方法
      【技術(shù)領(lǐng)域】
      [0001]本發(fā)明涉及β -葡聚糖領(lǐng)域,特別是涉及一種提高食藥用真菌β -葡聚糖的提取溶出率方法。
      【背景技術(shù)】
      [0002]β -葡聚糖被稱為“21世紀(jì)最新生物科技成果”。近年來(lái),多糖的多種生物活性的發(fā)現(xiàn)引發(fā)了科研工作者的普遍關(guān)注,特別是隨著生物高分子研究新技術(shù)、新方法在多糖研究上的應(yīng)用,使國(guó)內(nèi)外對(duì)生物活性多糖的研究迅速發(fā)展。國(guó)內(nèi)外學(xué)者的研究表明葡聚糖具有獨(dú)特的生理活性和藥用價(jià)值。藥用、食用菌葡聚糖作為多糖研究領(lǐng)域中的一個(gè)重要分支,正因其獨(dú)特的生物活性而引起越來(lái)越多的關(guān)注。自1958年Bmnde III報(bào)道了酵母細(xì)胞壁多糖具有抗腫瘤作用以來(lái),人們對(duì)藥用、食用菌多糖的化學(xué)結(jié)構(gòu)及生物活性進(jìn)行了深入細(xì)致的研究并己取得了豐碩的成果。近20年來(lái),已有大量關(guān)于食用菌β-葡聚糖生物活性的研究報(bào)道,主要集中在抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、抗病毒及抗氧化等方面。因此,葡聚糖的研究具有重要的意義,β -葡聚糖因其特有的生理功能性,已受到廣大科研工作者的關(guān)注與研究,現(xiàn)已成功的應(yīng)用于制藥業(yè)和保健品業(yè)。
      [0003]葡聚糖分為2大類:1類是β-1,3-糖苷鍵連接為主,并兼有少量β_1,4或其它糖苷鍵,香菇多糖、茯苓多糖、云芝多糖等都屬于這種連接。如香菇多糖的主鏈?zhǔn)怯搔耞1,3糖苷鍵連接的葡聚糖,主鏈上約有23%葡萄糖殘基通過(guò)C-6分支點(diǎn)連有側(cè)鏈。側(cè)鏈有3種:一是單一的非還原端葡萄糖殘基;另一種是β_1,6糖苷鍵連接的低聚葡萄糖,如杏鮑菇多糖;再一種是β_1,3糖苷鍵連接的低聚葡萄糖。另一類是β-1,6葡聚糖,如灰樹(shù)花β-組分是以β_1,6連接為主,在3位上有支鏈,支鏈的連接方式為β_1,3連接,它們長(zhǎng)短程度不均一組分。有些葡聚糖的生物學(xué)功能需要形成蛋白復(fù)合物才能發(fā)揮提高免疫力和抗腫瘤的功效,如姬松茸子實(shí)體中含有一類抗腫瘤的堿溶性的活性多糖體,該類多糖體是一種由直鏈的β_1,6葡聚糖和蛋白組成。把這種葡聚糖-蛋白復(fù)合物用甲醛降解并分離出純多糖,發(fā)現(xiàn)抗腫瘤活性大為下降,可見(jiàn)有些多糖的蛋白部分對(duì)高的生物活性是必需的。
      [0004]β-葡聚糖的提取、分離、純化,目前尚無(wú)公認(rèn)、有效、統(tǒng)一的方法,現(xiàn)常用工藝主要有水提法、酸提法、堿提法以及輔酶法。這些方法無(wú)論在葡聚糖提取率、能耗與物耗,還是在葡聚糖活性控制等方面存在較顯著不足,并且所得的葡聚糖的產(chǎn)品科技含量較低,具體體現(xiàn)在一下幾方面:β -葡聚糖純度低、水溶性差、組分不均一等,制約了其高附加值應(yīng)用。
      [0005]現(xiàn)有方法主要有以下問(wèn)題:水浸提法通常耗時(shí)長(zhǎng),能耗高,葡聚糖的提取率低。酸堿提取所使用的無(wú)機(jī)強(qiáng)酸、強(qiáng)堿用量及處理時(shí)間均不好控制。強(qiáng)酸強(qiáng)堿極易破壞β -葡聚糖的生物活性,并且在反應(yīng)結(jié)束后含有強(qiáng)酸強(qiáng)堿廢液,在大規(guī)模生產(chǎn)時(shí)容易造成嚴(yán)重的環(huán)境污染。輔酶法技術(shù)在生產(chǎn)過(guò)程中應(yīng)用到的酶制劑,一般價(jià)格昂貴且容易失活、使用壽命短等缺點(diǎn),若將其應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn),尚需進(jìn)一步的深入研究。常用的傳統(tǒng)提取技術(shù)通常通過(guò)大劑量溶劑長(zhǎng)時(shí)間浸漬,使食藥用真菌植物細(xì)胞壁充分膨脹,從而提高浸出速率及浸出量,因此傳統(tǒng)方式需要溶劑量較大時(shí)間較長(zhǎng),并且提取率不高。假如在食藥用真菌β -葡聚糖的提取過(guò)程中輔以超聲波,并且使用酸度適中的有機(jī)酸體系,就有可能通過(guò)控制工藝條件,利用超聲波的空化作用促進(jìn)β -葡聚糖的浸出提取。

      【發(fā)明內(nèi)容】

      [0006]本發(fā)明的目的在于提供一種提高食藥用真菌β -葡聚糖的提取溶出率方法,能有效提升食藥用真菌β -葡聚糖的提取溶出率,同時(shí)還能實(shí)現(xiàn)工藝過(guò)程中節(jié)水、節(jié)能的目標(biāo)。
      [0007]本發(fā)明的目的通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn):
      一種提高食藥用真菌葡聚糖的提取溶出率方法,包括以下步驟:
      1.將經(jīng)粉碎預(yù)處理后的原料,放入加有有機(jī)酸的提取容器中,充分?jǐn)嚢枋蛊渚鶆驖?rùn)濕;
      2.向潤(rùn)濕的原料中加入石油醚,待5-10min后,加熱物料,加熱溫度為90_120°C,保溫10_20min ;
      3.采用與有機(jī)溶劑洗滌除去少量殘余的酸液,完成原料的有機(jī)酸處理以及脫脂;
      4.經(jīng)有機(jī)酸處理以及脫脂后的原料加入4-16倍體積水進(jìn)行分散、調(diào)節(jié)pH值至4.5,在一定溫度下輔助以超聲波進(jìn)行提取,反復(fù)提取兩次,收集兩次濾液,并將兩次濾液抽濾、合并;
      5.取濾液靜置一小時(shí)后進(jìn)行離心處理,上清液調(diào)pH值至7.0后加入水溶液體積的3-6倍的乙醇,使溶于水但不溶于乙醇的葡聚糖沉淀出來(lái),收集沉淀物即粗葡聚糖;
      6.沉淀物即粗β -葡聚糖用95%乙醇進(jìn)行兩次脫水后進(jìn)行離心處理,再經(jīng)沉淀、干燥,得到β _匍聚糖。
      [0008]本發(fā)明的有益效果:本發(fā)明的一種提高食藥用真菌葡聚糖的提取溶出率方法,能有效提升食藥用真菌葡聚糖的提取溶出率,工藝過(guò)程中具有節(jié)水、節(jié)能、高效的優(yōu)點(diǎn)。
      【具體實(shí)施方式】
      [0009]為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白,下面結(jié)合實(shí)施例,對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。
      [0010]實(shí)施例1
      原料預(yù)處理:取1.5kg干燥、除雜的猴頭菇置于粉碎機(jī)中粉碎,待粉碎均勻?qū)⒃现糜谥胁菟幪崛∑髦?,加?0L乙醇,加熱回流提取30min,重復(fù)上述過(guò)程一次,過(guò)濾合并兩次濾液并加壓蒸餾回收乙醇,加入2L草酸溶液及石油醚,充分?jǐn)嚢枋蛊浠旌暇鶆?,并將物料加熱?00°C,保溫20min后進(jìn)行減壓蒸餾,直至容器中無(wú)液體,再向容器中加入6L乙醇,充分過(guò)濾、攪拌,得到酸處理猴頭菇;
      提取:取上一步制得的酸處理猴頭菇,加入1L蒸餾水調(diào)節(jié)pH值至4.5后在超聲波輔助下浸提lh,以5000r/min離心30min,取上清液調(diào)節(jié)pH值至7.0后用乙醇沉淀,以4500r/min離心20min,沉淀物用95%乙醇脫水,進(jìn)行兩次,隨后以4500r/min離心lOmin,得到沉淀物備用;
      干燥:將提取后的沉淀物在60-70°C下進(jìn)行干燥,得到β -葡聚糖; 滅菌:將得到的β-葡聚糖進(jìn)行巴氏殺菌。
      [0011]實(shí)施例2
      原料預(yù)處理:取1.5kg干燥、除雜的猴頭菇置于粉碎機(jī)中粉碎,待粉碎均勻?qū)⒃现糜谥胁菟幪崛∑髦?,加?5L乙醇,加熱回流提取20min,重復(fù)上述過(guò)程一次,過(guò)濾合并兩次濾液并加壓蒸餾回收乙醇,加入2L草酸溶液及石油醚,充分?jǐn)嚢枋蛊浠旌暇鶆?,并將物料加熱?00°C,保溫20min后進(jìn)行減壓蒸餾,直至容器中無(wú)液體,再向容器中加入5L乙醇,充分過(guò)濾、攪拌,得到酸處理猴頭菇;
      提取:取上一步制得的酸處理猴頭菇,加入2L蒸餾水調(diào)節(jié)pH值至4.5后在超聲波輔助下浸提lh,以5000r/min離心30min,取上清液調(diào)節(jié)pH值至7.0后用乙醇沉淀,以4500r/min離心30min,沉淀物用95%乙醇脫水,進(jìn)行兩次,隨后以4500r/min離心lOmin,得到沉淀物備用;
      干燥:將提取后的沉淀物在60-70°C下進(jìn)行干燥,得到β -葡聚糖;
      滅菌:將得到的葡聚糖進(jìn)行巴氏殺菌。
      [0012]實(shí)施例3
      原料預(yù)處理:取1.5kg干燥、除雜的猴頭菇置于粉碎機(jī)中粉碎,待粉碎均勻?qū)⒃现糜谥胁菟幪崛∑髦?,加?0L乙醇,加熱回流提取30min,重復(fù)上述過(guò)程一次,過(guò)濾合并兩次濾液并加壓蒸餾回收乙醇,加入1.5L草酸溶液及石油醚,充分?jǐn)嚢枋蛊浠旌暇鶆?,并將物料加熱?00°C,保溫20min后進(jìn)行減壓蒸餾,直至容器中無(wú)液體,再向容器中加入5L乙醇,充分過(guò)濾、攪拌,得到酸處理猴頭菇;
      提取:取上一步制得的酸處理猴頭菇,加入2L蒸餾水調(diào)節(jié)pH值至4.5后在超聲波輔助下浸提lh,以5000r/min離心30min,取上清液調(diào)節(jié)pH值至7.0后用乙醇沉淀,以4500r/min離心20min,沉淀物用95%乙醇脫水,進(jìn)行兩次,隨后以4500r/min離心lOmin,得到沉淀物備用;
      干燥:將提取后的沉淀物在60-70°C下進(jìn)行干燥,得到β -葡聚糖;
      滅菌:將得到的葡聚糖進(jìn)行巴氏殺菌。
      [0013]實(shí)施例4
      原料預(yù)處理:取1.5kg干燥、除雜的猴頭菇置于粉碎機(jī)中粉碎,待粉碎均勻?qū)⒃现糜谥胁菟幪崛∑髦?,加?5L乙醇,加熱回流提取20min,重復(fù)上述過(guò)程一次,過(guò)濾合并兩次濾液并加壓蒸餾回收乙醇,加入1.5L草酸溶液及石油醚,充分?jǐn)嚢枋蛊浠旌暇鶆?,并將物料加熱?00°C,保溫20min后進(jìn)行減壓蒸餾,直至容器中無(wú)液體,再向容器中加入5L乙醇,充分過(guò)濾、攪拌,得到酸處理猴頭菇;
      提取:取上一步制得的酸處理猴頭菇,加入1.5L蒸餾水調(diào)節(jié)pH值至4.5后在超聲波輔助下浸提lh,以5000r/min離心30min,取上清液調(diào)節(jié)pH值至7.0后用乙醇沉淀,以4500r/min離心20min,沉淀物用95%乙醇脫水,進(jìn)行兩次,隨后以4500r/min離心lOmin,得到沉淀物備用;
      干燥:將提取后的沉淀物在60-70°C下進(jìn)行干燥,得到β -葡聚糖;
      滅菌:將得到的葡聚糖進(jìn)行巴氏殺菌。
      [0014]本發(fā)明實(shí)施例得到的β -葡聚糖純度高、水溶性好,并且通過(guò)此方法β -葡聚糖得率可達(dá)91.83%。
      [0015]上述實(shí)施例僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例,只對(duì)本發(fā)明作示例性說(shuō)明,而非限定本發(fā)明。本專業(yè)技術(shù)人員凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換和改進(jìn)等,均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。
      【主權(quán)項(xiàng)】
      1.一種提高食藥用真菌β -葡聚糖的提取溶出率方法,其特征在于:包括以下步驟: 將經(jīng)粉碎預(yù)處理后的原料,放入加有有機(jī)酸的提取容器中,充分?jǐn)嚢枋蛊渚鶆驖?rùn)濕; 向潤(rùn)濕的原料中加入石油醚,待5-10min后,加熱物料,加熱溫度為90-120°C,保溫10_20min ; 采用與有機(jī)溶劑洗滌除去少量殘余的酸液,完成原料的有機(jī)酸處理以及脫脂; 經(jīng)有機(jī)酸處理以及脫脂后的原料加入4-16倍體積水進(jìn)行分散、調(diào)節(jié)pH值至4.5,在一定溫度下輔助以超聲波進(jìn)行提取,反復(fù)提取兩次,收集兩次濾液,并將兩次濾液抽濾、合并; 取濾液靜置一小時(shí)后進(jìn)行離心處理,上清液調(diào)pH值至7.0后加入水溶液體積的3-6倍的乙醇,使溶于水但不溶于乙醇的葡聚糖沉淀出來(lái),收集沉淀物即粗葡聚糖; 沉淀物即粗β -葡聚糖用95%乙醇進(jìn)行兩次脫水后進(jìn)行離心處理,再經(jīng)沉淀、干燥,得到葡聚糖。
      【專利摘要】<b>一種提高食藥用真菌β-葡聚糖的提取溶出率方法,采用有機(jī)酸體系對(duì)食藥用真菌類植物進(jìn)行處理,然后采用水提醇沉工藝,浸提過(guò)程輔助以超聲波,最后獲得β-葡聚糖。本發(fā)明的一種提高食藥用真菌β-葡聚糖的提取溶出率方法,能有效提升食藥用真菌β-葡聚糖的提取溶出率,工藝過(guò)程中具有節(jié)水、節(jié)能、高效的優(yōu)點(diǎn)。</b>
      【IPC分類】C08B37/00
      【公開(kāi)號(hào)】CN105384836
      【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510939482
      【發(fā)明人】陳喜軍
      【申請(qǐng)人】黑龍江眾生生物工程有限公司
      【公開(kāi)日】2016年3月9日
      【申請(qǐng)日】2015年12月16日
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