一種蘆丁的提取方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物提取分離技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種蘆丁的提取方法。
【背景技術(shù)】
[0002]槐米為豆科植物槐(Sophora japonica L.)的花蕾，始載于《日華子本草》，《神農(nóng)本草經(jīng)》中將其列為上品，現(xiàn)列在國家衛(wèi)生部第一批藥食同源名單中，有涼血止血，清肝瀉火等功效?；泵字懈缓J丁和槲皮素等黃酮類成分，其中主要活性成分蘆丁，具有維持及恢復(fù)毛細(xì)管的正常彈性，增強(qiáng)其抵抗力，防止血細(xì)胞凝聚等多方面的生理活性，醫(yī)藥工業(yè)中常以槐米為主要原料提取蘆丁，主要銷往日本、東南亞和歐美等國家和地區(qū)。中國是槐米的原產(chǎn)地，全國各地均有栽種，多為野生。由于品種與環(huán)境差異等因素，各地所產(chǎn)槐米質(zhì)量參差不齊。目前，對不同產(chǎn)地槐米中蘆丁含量的研究報(bào)道相對較少，為確定最佳的藥材來源，本實(shí)驗(yàn)收集了廣西、湖南、陜西以及越南等產(chǎn)地的槐米，采用高效液相色譜法，對不同產(chǎn)地槐米進(jìn)行蘆丁含量的測定，為評價(jià)槐米的質(zhì)量提供科學(xué)依據(jù)。
[0003]蘆丁(Rutin)是由斛皮素(Quercetin)3位上的輕基與蕓香糖(Rutinose)〔為葡萄糖(Glucose)與鼠李糖(Rhamnose)組成的雙糖〕脫水合成的苷。蘆丁 (Rut in)廣泛存在于植物界中，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)含蘆丁的植物至少在70種以上，如煙葉、槐花、蕎麥和蒲公英等。尤以槐花米(為植物Sophora japonica的未開放的花蕾)和蕎麥中含量最高，可作為大量提取蘆丁的原料。蘆丁為淺黃色粉末或極細(xì)的針狀結(jié)晶，含有三分子的結(jié)晶水，熔點(diǎn)為174?178°C，無水物188?190°C。溶解度:冷水中為1: 10000;熱水中1: 200;冷乙醇1:650;熱乙醇1:60;冷吡啶1:12。微溶于丙酮、乙酸乙酯，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚，溶于堿而呈黃色。蘆丁具有維生素P樣作用，有助于保持及恢復(fù)毛細(xì)血管的正常彈性，主要用作防治高血壓病的輔助治療劑，亦可用于防治因缺乏蘆丁所致的其他出血癥。
[0004]傳統(tǒng)蘆丁的提取方法為:先將槐米高溫熏蒸、粉碎，開水燙洗后裝入滲漉缸中，用飽和石灰水滲漉后，收集滲漉液，再用稀鹽酸調(diào)節(jié)PH值，靜置，蘆丁結(jié)晶析出，得到蘆丁粗體物；由于槐米高溫熏蒸和開水燙洗都會(huì)破壞蘆丁，導(dǎo)致收率降低，之后的堿溶酸沉過程也會(huì)破壞蘆丁的結(jié)構(gòu)和析出，而排出的大量酸水又給環(huán)境帶來了污染，處理起來非常困難。整個(gè)提取過程要求高溫、強(qiáng)酸強(qiáng)堿等工藝條件，并且周期長，產(chǎn)生的三廢多，蘆丁收率只能達(dá)到18 ?20%。
[0005]現(xiàn)在國內(nèi)有用蘆丁生物轉(zhuǎn)化酶將槐米發(fā)酵的方法來提取蘆丁，大致方法為:將槐米洗凈烘干置于發(fā)酵罐中，加入生物轉(zhuǎn)化酶，密閉發(fā)酵后轉(zhuǎn)入提取罐;在提取罐中加入甲醇、乙醇混合溶劑，攪拌、過濾得到濾液;濾液蒸餾后回收溶劑，得到蘆丁提取物;在蘆丁提取物中加入丙酮、石油醚和正辛醇的混合溶劑，常規(guī)方法攪拌、萃取、過濾，濾液蒸餾，回收溶劑后得到高純度蘆丁成品。由于該方法大量使用了混合溶劑，雖然收率比傳統(tǒng)方法有所提高，但混合溶劑不易分離，導(dǎo)致生產(chǎn)成本大幅升高;混合溶劑的回收和再利用，又是非常復(fù)雜的技術(shù)難題。且整個(gè)方法操作復(fù)雜，會(huì)帶來大量有機(jī)溶劑的損失和環(huán)境污染，并且投資設(shè)備過多，生產(chǎn)周期長，不適合推廣。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]為解決現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了一種蘆丁的提取方法。
[0007]一種蘆丁的提取方法，包括以下步驟:
[0008]I)將槐米破碎研磨成粉末，以槐米粉末的重量為基準(zhǔn)，將6?8g的槐米粉末加入至IJ150?200ml的70?90°C的熱水中，再加入100?150ml的70?90°C的0.5mol/L的氫氧化鈉溶液中，超聲分散20?40分鐘，過濾，得到樣品溶液。
[0009]具體的，步驟I)中，超聲分散的超聲頻率為25?40KHz，超聲功率40?100w。
[0010]2)調(diào)節(jié)步驟I)得到的樣品溶液的pH值為4?6，冷卻，抽濾，得到樣品。
[0011]3)將步驟2)得到的樣品溶解到100?200mL的無水乙醇中，均質(zhì)分散，再加入1.5?2.0g的聚丙烯酸，在?；瘎?、常溫及機(jī)械攪拌條件下進(jìn)行酯化，反應(yīng)過程中間隔滴加催化劑，反應(yīng)4?6小時(shí)，60?90°C冷凝回流，濃縮至60?120mL，得到中間粗品。
[0012]優(yōu)選的，步驟3)中，聚丙烯酸的數(shù)均分子量為1000?5000。
[0013]具體的，步驟3)中，間隔滴加催化劑的過程為:每隔I?2小時(shí)滴加2?3滴，重復(fù)2?3次。
[0014]4)將步驟3)得到的中間粗品與150?250ml的Imo I /L的氫氧化鈉溶液混合，微波條件下水解，之后在恒溫水浴條件下酸化至PH值為4?6，冷卻析出、過濾，得到蘆丁細(xì)品。
[0015]優(yōu)選的，步驟4)中，恒溫水浴的溫度為16?25°C，微波水解的功率為100?1000?。
[0016]通過本發(fā)明所提供的蘆丁的提取方法，可以直接得到高純度的蘆丁。其雜質(zhì)中醇類和羧酸類的含量極少，有利于進(jìn)一步的高純精煉。
【具體實(shí)施方式】
[0017]以下對本發(fā)明的原理和特征進(jìn)行描述，所舉實(shí)施例只用于解釋本發(fā)明，并非用于限定本發(fā)明的范圍。
[0018]實(shí)施例1
[0019]I)將槐米破碎研磨成粉末，以槐米粉末的重量為基準(zhǔn)，將6.5g的槐米粉末加入到170ml的85°C的熱水中，再加入120ml的85°C的0.5mol/L的氫氧化鈉溶液中，超聲分散30分鐘，超聲頻率為30KHz，超聲功率80w過濾，得到樣品溶液。
[0020]2)調(diào)節(jié)步驟I)得到的樣品溶液的pH值為5，冷卻，抽濾，得到樣品。
[0021]3)將步驟2)得到的樣品溶解到150mL的無水乙醇中，均質(zhì)分散，再加入1.7g的聚丙烯酸，在二氯亞砜、常溫及機(jī)械攪拌條件下進(jìn)行酯化，反應(yīng)過程中間隔滴加DMF，反應(yīng)4.5小時(shí)，80°C冷凝回流，濃縮至SOmL，得到中間粗品。
[0022 ] 4)將步驟3)得到的中間粗品與150ml的Imo I /L的氫氧化鈉溶液混合，微波條件下水解，微波水解的功率為400w，之后在恒溫水浴條件下酸化至pH值為4，恒溫水浴的溫度為25°C，冷卻析出、過濾，得到蘆丁細(xì)品，純度97.7%。
[0023]實(shí)施例2
[0024]I)將槐米破碎研磨成粉末，以槐米粉末的重量為基準(zhǔn)，將7.5g的槐米粉末加入到190ml的88°C的熱水中，再加入150ml的85°C的0.5mol/L的氫氧化鈉溶液中，超聲分散20分鐘，超聲頻率為25KHz，超聲功率75w過濾，得到樣品溶液。
[0025]2)調(diào)節(jié)步驟I)得到的樣品溶液的pH值為6，冷卻，抽濾，得到樣品。
[0026]3)將步驟2)得到的樣品溶解到ISOmL的無水乙醇中，均質(zhì)分散，再加入2.0g的聚丙烯酸，在二氯亞砜、常溫及機(jī)械攪拌條件下進(jìn)行酯化，反應(yīng)過程中間隔滴加DMF，反應(yīng)4小時(shí)，90°C冷凝回流，濃縮至I1mL，得到中間粗品。
[0027]4)將步驟3)得到的中間粗品與200ml的Imo 1/L的氫氧化鈉溶液混合，微波條件下水解，微波水解的功率為800w，之后在恒溫水浴條件下酸化至pH值為6，恒溫水浴的溫度為18°C，冷卻析出、過濾，得到蘆丁細(xì)品，純度98.0%。
[0028]實(shí)施例3
[0029]I)將槐米破碎研磨成粉末，以槐米粉末的重量為基準(zhǔn)，將7g的槐米粉末加入到175ml的80°C的熱水中，再加入135ml的85°C的0.5moI/L的氫氧化鈉溶液中，超聲分散40分鐘，超聲頻率為40KHz，超聲功率10w過濾，得到樣品溶液。
[0030]2)調(diào)節(jié)步驟I)得到的樣品溶液的pH值為4，冷卻，抽濾，得到樣品。
[0031]3)將步驟2)得到的樣品溶解到200mL的無水乙醇中，均質(zhì)分散，再加入1.Sg的聚丙烯酸，在二氯亞砜、常溫及機(jī)械攪拌條件下進(jìn)行酯化，反應(yīng)過程中間隔滴加DMF，反應(yīng)5.5小時(shí)，90°C冷凝回流，濃縮至10mL，得到中間粗品。
[0032 ] 4)將步驟3)得到的中間粗品與250ml的Imo I /L的氫氧化鈉溶液混合，微波條件下水解，微波水解的功率為600w，之后在恒溫水浴條件下酸化至pH值為6，恒溫水浴的溫度為25°C，冷卻析出、過濾，得到蘆丁細(xì)品，純度98.2%。
[0033]以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種蘆丁的提取方法，其特征在于，包括以下步驟: 1)將槐米破碎研磨成粉末，以槐米粉末的重量為基準(zhǔn)，將6?8g的槐米粉末加入到150?200ml的70?90°C的熱水中，再加入100?150ml的70?90°C的0.5mol/L的氫氧化鈉溶液中，超聲分散20?40分鐘，過濾，得到樣品溶液； 2)調(diào)節(jié)步驟I)得到的樣品溶液的pH值為4?6，冷卻，抽濾，得到樣品； 3)將步驟2)得到的樣品溶解到100?200mL的無水乙醇中，均質(zhì)分散，再加入1.5?2.0g的聚丙烯酸，在?；瘎?、常溫及機(jī)械攪拌條件下進(jìn)行酯化，反應(yīng)過程中間隔滴加催化劑，反應(yīng)4?6小時(shí)，60?90°C冷凝回流，濃縮至60?120mL，得到中間粗品； 4)將步驟3)得到的中間粗品與150?250ml的ImoI /L的氫氧化鈉溶液混合，微波條件下水解，之后在恒溫水浴條件下酸化至PH值為4?6，冷卻析出、過濾，得到蘆丁細(xì)品。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蘆丁的提取方法，其特征在于:步驟I)中，超聲分散的超聲頻率為25?40KHz，超聲功率40?100w。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的蘆丁的提取方法，其特征在于:步驟3)中，聚丙烯酸的數(shù)均分子量為1000?5000。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的蘆丁的提取方法，其特征在于，步驟3)中，間隔滴加催化劑的過程為:每隔I?2小時(shí)滴加2?3滴，重復(fù)2?3次。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的蘆丁的提取方法，其特征在于，步驟4)中，恒溫水浴的溫度為16?25°〇。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的蘆丁的提取方法，其特征在于，步驟4)中，微波水解的功率為100?100w0
【專利摘要】本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物提取分離技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種蘆丁的提取方法。該方法將超聲與微波聯(lián)用，先以堿液進(jìn)行溶解，再以酸進(jìn)行承載，最后由液相中析出，可以直接得到高純度的蘆丁。并且，雜質(zhì)中醇類和羧酸類的含量極少，有利于進(jìn)一步的高純精煉。
【IPC分類】C07H1/08, C07H17/07
【公開號(hào)】CN105541940
【申請?zhí)枴緾N201510926215
【發(fā)明人】周金輝, 王玉娟, 上官國強(qiáng), 石茂健, 丁林, 羅紅宇
【申請人】濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院
【公開日】2016年5月4日
【申請日】2015年12月11日