明的方法進彳丁處理。
[0052]使用時，將溶液稀釋成三個連續(xù)級的10倍稀釋梯度，如圖1中所示，從左到右，最左邊1t3溶液為原溶液，取ImL原溶液加水至1mL溶液為10—1濃度的溶液，依次類推得到10一2、10一3濃度的溶液;分別取稀釋后的水樣溶液，每個稀釋度取ImL樣品，取三份ImL樣品；每份樣品等量分成數(shù)個液滴逐滴滴下;采用激光束照射液滴，在屏幕上投射出陰影;激光束照射液滴會產(chǎn)生發(fā)散光線，液滴具有凸透鏡效應，液滴中的細菌被放大投影至屏幕上;拍攝投影照片，將照片采用模式識別方法判斷是否有細菌，并采用MPN計數(shù)法計算樣品中細菌的數(shù)量；對每滴水樣的投影拍攝照片進行電腦識別，具體識別過程如下:
[0053]每個液滴中有細菌標記為+，沒有細菌標記為
[0054]每個稀釋度的三份樣品HA3中存在+，記為I，沒有+，記為O;
[0055]將每個稀釋度的三份樣品的標記相加，為該稀釋度的標記；
[0056]將三個稀釋度的標記按順序排列，形成一組三位數(shù)，檢索MPN表中的排列查每毫升中細菌數(shù)量。
[0057]具體實施例一
[0058]如圖2所示，使用時，將相對污染水樣稀釋度為0.1、0.01、0.001，每個稀釋度樣品取三份ImL樣品；將每份樣品等量分成數(shù)個液滴，滴到超疏水材料7表面，形成球狀液滴2，由于液體的折射作用，液滴2可類似于一個凸透鏡，采用激光發(fā)生器I將一束激光光線從液滴2的一側射入，光線呈擴束發(fā)散的趨勢從液滴2射出并投影至屏幕4上;采用拍照裝置5獲取投影圖像，將獲取的圖像發(fā)送到處理裝置6，處理裝置6對獲取的圖像進行分析，采用MPN計數(shù)法獲得細菌的數(shù)量;超疏水材料采用四甲基硅烷和含氟硅烷負載在玻璃上形成的透明材料，其表面穩(wěn)定，接觸角大于150°，滾動接觸角小于10°，液滴2可以在超疏水材料表面保持球狀。
[0059]具體實施例二
[0060]使用時，將相對污染水樣稀釋度為0.1,0.01,0.001，每個稀釋度樣品取三份ImL樣品；將注射器8倒置，緩慢推動活塞擠出水樣，從針頭流出的水樣形成液滴2懸掛于針頭，并維持其形態(tài)不變；由于液體的折射作用，液滴2可類似于一個凸透鏡，采用激光發(fā)生器I將一束激光光線從液滴2的一側射入，光線呈擴束發(fā)散的趨勢從液滴2射出并投影至屏幕4上;采用拍照裝置5獲取投影圖像，將獲取的圖像發(fā)送到處理裝置6，處理裝置6對獲取的圖像進行分析，采用MPN計數(shù)法獲得細菌的數(shù)量。
[0061 ] 具體實施例三
[0062]使用時，將相對污染水樣稀釋度為0.1,0.01,0.001，每個稀釋度樣品取三份ImL樣品；將蠕動栗9通過導管將水樣抽出，水樣從導管另一頭緩慢流出形成液滴2，并可以維持其形狀不變;蠕動栗9可以控制出水速度以及出水量，可以使得液滴大小基本一致；由于液體的折射作用，液滴2可類似于一個凸透鏡，采用激光發(fā)生器I將一束激光光線從液滴2的一側射入，光線呈擴束發(fā)散的趨勢從液滴2射出并投影至屏幕4上;采用拍照裝置5獲取投影圖像，將獲取的圖像發(fā)送到處理裝置6，處理裝置6對獲取的圖像進行分析，采用MPN計數(shù)法獲得細菌的數(shù)量。
[0063]本發(fā)明的優(yōu)點在于耗時短(I?2小時)，操作簡便、易于實施，預期可廣泛用于環(huán)境監(jiān)測、食品安全和醫(yī)療衛(wèi)生等領域對液體中細菌的檢測;這種快速檢測水中細菌的方法是結合了微生物檢測和光學現(xiàn)象的一種新型檢測技術，不僅避免了傳統(tǒng)檢測方法繁瑣、耗時長等缺點，也無需提供新型分子技術的復雜技術和高昂成本，使得本發(fā)明具有便捷高效的優(yōu)點，可實現(xiàn)即測即顯示分析，可對水樣給出定性定量結果，對環(huán)境監(jiān)測，食品安全及醫(yī)療衛(wèi)生領域有十分重要的意義。
[0064]以上所述僅為本發(fā)明的較佳實施例而已，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換和改進等，均應包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。
【主權項】
1.一種液體中細菌的計數(shù)方法，其特征在于，包括如下步驟: 取需要檢測的溶液，選擇三個連續(xù)級的10倍稀釋梯度，得到三個稀釋度溶液； 從每個稀釋度溶液中分別取三份樣品得到A1、A2、A3，形成液滴后逐滴滴下； 用激光束從液滴一側射入，從液滴中射出形成投影； 獲取每滴溶液的投影圖像，對投影圖像采用模式識別判斷是否有細菌，采用MPN計數(shù)方法計算細菌數(shù)量。2.根據(jù)權利要求1所述的一種液體中細菌的計數(shù)方法，其特征在于，將液滴逐滴滴到超疏水材料上，激光束從液滴上部射入，分別進行投影。3.根據(jù)權利要求1所述的一種液體中細菌的計數(shù)方法，其特征在于，所述液滴采用蠕動栗通過導管將水樣抽出形成。4.根據(jù)權利要求1所述的一種液體中細菌的計數(shù)方法，其特征在于，所述液滴通過注射器形成。5.根據(jù)權利要求1所述的一種液體中細菌的計數(shù)方法，其特征在于，所述激光束為可見光激光。6.根據(jù)權利要求1所述的一種液體中細菌的計數(shù)方法，其特征在于，所述MPN計數(shù)方法步驟如下: 每個液滴中有細菌標記為+，沒有細菌標記為-; 每個稀釋度的三份樣品Al、A2、A3中存在+，記為I，沒有+，記為O; 將每個稀釋度的三份樣品的標記相加，為該稀釋度的標記； 將三個稀釋度的標記按順序排列，形成一組三位數(shù)，檢索MPN表中的排列查每毫升中細菌數(shù)量。7.根據(jù)權利要求1所述的一種液體中細菌的計數(shù)方法，其特征在于，操作過程在黑暗的環(huán)境中進行。8.根據(jù)權利要求1所述的一種液體中細菌的計數(shù)方法，其特征在于，獲取投影圖像之前，調(diào)整激光光束的位置，待細菌移動到液滴中央位置時，再獲取投影圖像。9.根據(jù)權利要求2所述的一種液體中細菌的計數(shù)方法，其特征在于，所述超疏水材料由四甲硅烷和含氟硅氧烷負載在玻璃上構成。10.根據(jù)權利要求1所述的一種液體中細菌的計數(shù)方法，其特征在于，溶液進行稀釋之前，在溶液中添加細菌染色劑或者添加納米粒子。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種液體中細菌的計數(shù)方法，包括如下步驟：取需要檢測的溶液，選擇三個連續(xù)級的10倍稀釋梯度，得到三個稀釋度溶液；從每個稀釋度溶液中分別取三份樣品得到A1、A2、A3，形成液滴后逐滴滴下；用激光束從液滴一側射入，從液滴中射出形成投影；獲取每滴溶液的投影圖像，對投影圖像采用模式識別判斷是否有細菌，采用MPN計數(shù)方法計算細菌數(shù)量；本發(fā)明耗時短、操作簡便、易于實施，可廣泛用于環(huán)境監(jiān)測、食品安全和醫(yī)療衛(wèi)生等領域對液體中細菌的檢測。
【IPC分類】C12Q1/06
【公開號】CN105671123
【申請?zhí)枴緾N201610036039
【發(fā)明人】范美坤, 龔正君, 何雨希, 湯文浩, 孟凡昊, 侯玉卿
【申請人】西南交通大學
【公開日】2016年6月15日
【申請日】2016年1月19日