專利名稱：用于檢測茶葉農(nóng)藥殘留物的樣品前處理方法及茶葉凈化柱的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及食品衛(wèi)生、農(nóng)產(chǎn)品安全檢測領(lǐng)域，特別涉及一種用于檢測茶葉農(nóng)藥殘留物質(zhì)的樣品前處理方法及茶葉凈化柱。
背景技術(shù)：
對(duì)于茶葉中農(nóng)藥等有害化學(xué)物質(zhì)的分析檢測，無論使用何種分析檢測方法，通常都需要將被分析的微量化學(xué)成分與茶葉樣品主要基質(zhì)(如色素、有機(jī)酸、有機(jī)堿，非極性有機(jī)物等)及其它雜質(zhì)得到較好的分離，以避免基質(zhì)對(duì)于檢測靈敏度，準(zhǔn)確性的干擾。通常使用的方法包括液液萃取，固相萃取和凝膠色譜GPC凈化等。但是目前的檢測方法具有操作復(fù)雜、通用性差的缺陷。隨著茶葉出口量逐年增加，檢驗(yàn)需求的增長，有必要進(jìn)一步開發(fā)更為簡單可靠的方法，以利于準(zhǔn)確的分析檢測。尤其在對(duì)于多種農(nóng)藥殘留同時(shí)檢測領(lǐng)域，國際上已出現(xiàn)多種代表性的多殘留分析方法，如美國FDA的多殘留方法(可檢測360多種農(nóng)藥)、德國DFG的方法(可檢測325種農(nóng)藥)、荷蘭衛(wèi)生部的多殘留分析方法(可檢測200種農(nóng)藥)、加拿大多殘留檢測方法(可檢測251種農(nóng)藥)等。而我國現(xiàn)在缺乏300種以上農(nóng)殘?jiān)诓铇I(yè)這類復(fù)雜基質(zhì)中的檢測方法。農(nóng)藥多農(nóng)殘分析常用的固相前處理材料主要分為I、第一代硅酸鎂或氧化鋁或硅膠主要適用于去除有機(jī)酸和部分色素，但對(duì)于有機(jī)磷等極性農(nóng)藥有吸附；僅適用于水果和蔬菜中弱極性農(nóng)藥的氣相法檢測。2、第二代含有氨基的堿性硅膠主要去除有機(jī)酸，對(duì)于色素去除效果有限；好處是減少了對(duì)于有機(jī)磷農(nóng)藥的吸附；凈化效果不理想，僅適用于基質(zhì)簡單、色素較少的水果蔬菜中的農(nóng)藥檢測(氣相或氣質(zhì)法)，但可以包括有機(jī)磷等極性較強(qiáng)的農(nóng)藥。3、第三代上層，石墨化碳或活性炭去除色素；下層，含有氨基的堿性硅膠，用于去除揮發(fā)性有機(jī)酸。主要適用于氣質(zhì)法測定水果和蔬菜中的農(nóng)藥(含有機(jī)磷、有機(jī)氯和菊酯等多種類型)殘留。我國現(xiàn)在通行的農(nóng)藥殘留分析方法，多數(shù)針對(duì)水果、蔬菜、谷物等樣品提出，缺少針對(duì)茶葉農(nóng)藥殘留的多殘留檢測方法和樣品制備新技術(shù)，難以滿足國際貿(mào)易的需求，茶葉成分復(fù)雜，含有多酚類、蛋白質(zhì)、氨基酸、色素、碳水化合物等多種化學(xué)成分，這就使得這類樣品不能簡單采用現(xiàn)行的方法完成所有檢測要求。本發(fā)明創(chuàng)新性在于采用極性官能團(tuán)修飾的高聚物材料(如聚苯乙烯二乙烯苯或酰胺化聚苯乙烯二乙烯苯、羧基化聚乙烯二乙烯苯、丙磺酸化聚乙烯二乙烯苯)；加大基質(zhì)干擾物吸附同時(shí)降低對(duì)目標(biāo)物的吸附。另外對(duì)于碳材料(如石墨化碳)進(jìn)行表面積，微孔率的控制也為了同樣的目的，可以有效的避免某些多環(huán)類農(nóng)藥在碳材料表面吸附過強(qiáng)無法洗脫的問題
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種用于檢測茶葉農(nóng)藥殘留物質(zhì)的樣品前處理方法及茶葉凈化柱。該樣品預(yù)處理方法可用于紅茶、綠茶、花茶、普洱茶、烏龍茶等茶葉中數(shù)百種農(nóng)藥及代謝產(chǎn)物的分析檢測，是一種快速的、通用性強(qiáng)的樣品預(yù)處理方法。為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為一種茶葉凈化吸附材料，用于茶葉農(nóng)藥殘留物質(zhì)檢測的樣品前處理過程中茶葉樣品主要基質(zhì)的吸附，其特征在于該茶葉凈化吸附材料包括碳材料、氨基官能化的吸附材料和極性官能團(tuán)修飾的高聚物材料。優(yōu)選地，上述茶葉凈化吸附材料中，所述碳材料、氨基官能化的吸附材料和極性官能團(tuán)修飾的高聚物材料質(zhì)量配比為2-10份2-10份I份。優(yōu)選地，上述茶葉凈化吸附材料中，碳材料為石墨化碳、活性炭中的一種或兩種的混合物，碳材料粒徑范圍為80目 400目，比表面積為100 300m2/g ;更優(yōu)選地，所述碳材料為石墨化碳，粒徑范圍為80目 400目，比表面積為100-300m2/g ;微孔比例不高于2% ； 石墨化程度不低于50%。優(yōu)選地，上述茶葉凈化吸附材料中，氨基官能化的吸附材料為氨基化硅膠NH2、多氨基化硅膠PSA、氨基化聚乙烯二乙烯苯中的一種或幾種的混合物，更優(yōu)選地，所述氨基官能化的吸附材料的粒徑范圍為30微米 80微米，比表面積為300 800平方米/克，平均孔徑為40 150埃。優(yōu)選地，上述茶葉凈化吸附材料中，所述極性官能團(tuán)修飾的高聚物材料為聚苯乙烯二乙烯苯或酰胺化聚苯乙烯二乙烯苯中的一種或兩種以上的混合物，所述極性官能團(tuán)修飾的高聚物材料的粒徑范圍為30微米 80微米，比表面積為300 800平方米/克，平均孔徑為40 150埃，交聯(lián)度15-80%。更優(yōu)選地，所述的極性官能團(tuán)修飾的高聚物材料還包括羧基化聚乙烯二乙烯苯、丙磺酸化聚乙烯二乙烯苯中的一種或兩種的混合物。所述極性官能團(tuán)修飾的高聚物材料的粒徑范圍為30微米 80微米，比表面積為300 800平方米 /克，平均孔徑為40 150埃。本發(fā)明還提供了一種茶葉凈化柱，該茶葉凈化柱包括柱管和柱管內(nèi)的填料，所述的填料為上述茶葉凈化吸附材料，所述的茶葉凈化吸附材料包括碳材料、氨基官能化的吸附材料和極性官能團(tuán)修飾的高聚物材料通過分層裝填或混料裝填的形式設(shè)計(jì)使用，優(yōu)選地，所述碳材料裝填于柱管底層，所述氨基官能化的吸附材料和極性官能團(tuán)修飾的高聚物材料混合裝填在柱管上層，其間使用聚丙烯篩板作為分隔。上述茶葉凈化柱中，所用到的柱管為聚乙烯材料或玻璃材料，柱管內(nèi)填充填料，填料的兩端由篩板封住，柱管的一端為樣品或溶劑的注入口，另一端為樣品或溶劑的流出口， 如圖I所示。上述茶葉凈化吸附材料設(shè)計(jì)使用時(shí)，不僅限于通過專用凈化柱的方式使用，還可以通過吸附不同基質(zhì)的吸附材料分散固相萃取的形式使用，如碳材料、氨基官能化的吸附材料和極性官能團(tuán)修飾的高聚物材料以分散固相萃取的形式放置在離心管中使用。本發(fā)明還提供了上述茶葉凈化吸附材料在檢測茶葉中農(nóng)藥殘留物質(zhì)的樣品前處理過程中的應(yīng)用。本發(fā)明還提供了上述茶葉凈化柱在檢測茶葉中農(nóng)藥殘留物質(zhì)的樣品前處理過程中的應(yīng)用。
本發(fā)明還提供了一種用于茶葉中農(nóng)藥殘留物質(zhì)檢測的樣品前處理方法，包括如下步驟I)將茶葉樣品打碎或碾碎；2)向步驟I)所得碎茶葉樣品中加入提取溶劑和緩沖鹽進(jìn)行提取，離心后取上清液；重復(fù)提取過程(可以重復(fù)操作2-4次，重復(fù)提取過程中無需再添加緩沖鹽)，合并上清液濃縮，得濃縮液，待上樣；3)將步驟2)中得到的濃縮液加入上述制備的茶葉凈化柱中，接收流出液，4)加入洗脫溶劑，將殘留在茶葉凈化柱上的農(nóng)藥殘留洗脫下來，得洗脫液，合并洗脫液和步驟3)得到的流出液；5)將合并的洗脫液和流出液濃縮后進(jìn)行儀器分析，準(zhǔn)確定性定量檢測農(nóng)藥及其代謝物質(zhì)。優(yōu)選地，上述方法中，步驟2)中各物質(zhì)的添加比例為如果碎茶葉樣品取lg，則提取溶劑取3-8mL，緩沖鹽取O. 2-lg。優(yōu)選地，上述方法中步驟2)中的提取溶劑為甲醇、乙腈、正己烷、丙酮、二氯甲烷、 乙酸乙酯、石油醚、甲苯、四氫呋喃或異丙醇中的一種或兩種以上以任意比例混合的混合物。優(yōu)選地，步驟2)中的提取溶劑為水和有機(jī)溶劑的混合物，所述的有機(jī)溶劑為甲醇、乙腈、正己烷、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、石油醚、甲苯、四氫呋喃、異丙醇中的一種或兩種以上以任意比例混合的混合物。所述的有機(jī)溶劑占提取溶劑的體積百分比含量為 1% -99%。優(yōu)選地，步驟2)中的提取溶劑為有機(jī)溶劑與酸的混合物，其中酸占提取溶劑的質(zhì)量百分比為O. 01% -10%，所述的有機(jī)溶劑為甲醇，乙腈，正己烷，丙酮，二氯甲烷，乙酸乙酯，石油醚，甲苯，四氫呋喃或異丙醇中的一種或兩種以上以任意比例混合的混合物。所述的酸為三氯乙酸、磺基水楊酸、鹽酸、三氟乙酸、甲酸、乙酸、硝酸、磷酸或高氯酸中的一種或兩種以上以任意比例混合的混合物。優(yōu)選地，步驟2)中的提取溶劑為有機(jī)溶劑與堿的混合物，其中堿占提取溶劑的質(zhì)量百分比為O. 01% -10%，所述的有機(jī)溶劑為甲醇，乙腈，正己烷，丙酮，二氯甲烷，乙酸乙酯，石油醚，甲苯，四氫呋喃或異丙醇中的一種或兩種以上以任意比例混合的混合物。所述的堿為氨水、三乙胺、氫氧化鈉、碳酸鈉、碳酸氫鈉、乙酸鈉、磷酸鈉或磷酸二氫鈉的水溶液中的一種或兩種以上以任意比例混合的混合物。優(yōu)選地，上述方法中，步驟2)中的緩沖鹽為氯化鈉、醋酸鈉、檸檬酸鈉中的一種或兩種以上混合物。緩沖鹽的加入幫助提高萃取效率。優(yōu)選地，上述方法中，在步驟2)中加入提取溶劑和緩沖鹽對(duì)碎茶葉樣品進(jìn)行提取時(shí)，可根據(jù)分析農(nóng)藥的性質(zhì)不同，可以在提取酸性農(nóng)藥時(shí)加入甲酸，乙酸等調(diào)節(jié)提取液PH 值至酸性下提取，提高提取效率；分析堿性物質(zhì)時(shí)可以加入氫氧化鈉，氨水等調(diào)節(jié)提取液 PH值至堿性條件下提取，提高提取效率。優(yōu)選地，上述方法中，步驟4)中的洗脫溶劑為甲醇、乙腈、丙酮、正己烷、二氯甲烷或甲苯中的一種或兩種以上的混合物。優(yōu)選地，上述方法中，步驟4)的洗脫溶劑中可以根據(jù)洗脫農(nóng)藥的不同性質(zhì)，加入PH調(diào)節(jié)劑，以提高不同種類農(nóng)藥的洗脫效率，如可以在提取酸性農(nóng)藥時(shí)加入甲酸，乙酸等調(diào)節(jié)洗脫液pH值至酸性下洗脫，提高洗脫效率；分析堿性物質(zhì)時(shí)可以加入氫氧化鈉，氨水等調(diào)節(jié)洗脫液PH值至堿性條件下洗脫，提高洗脫效率。本發(fā)明所具有的有益效果本發(fā)明可用于各種茶葉原料及茶葉成品，茶葉二次加工品等農(nóng)藥殘留物質(zhì)的檢測；采用本發(fā)明所得到凈化的樣品可進(jìn)一步使用，但不局限于以下方法進(jìn)行分析檢測氣相色譜法，氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用，液相色譜法，液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用，毛細(xì)管電泳，酶試劑免疫檢測法，各種直接光譜檢測法。經(jīng)過本發(fā)明的方法凈化后用于測試的化學(xué)物質(zhì)成分包括以下物質(zhì)中的一類或幾類有機(jī)磷類農(nóng)藥，有機(jī)氯類農(nóng)藥，氨基甲酸酯類農(nóng)藥，除蟲菊酯類農(nóng)藥及其他類型的殺蟲劑，除草劑等用于農(nóng)殘品除蟲除害的有機(jī)化學(xué)試劑。具體化學(xué)物質(zhì)成份實(shí)例如敵敵畏、 DDT、草銨膦、樂果、氯氰菊酯等農(nóng)藥。目前，茶葉其多農(nóng)殘檢測面臨的問題包括I、選擇的凈化材料對(duì)400余種農(nóng)藥均不能有明顯過渡吸附；2、茶葉基質(zhì)復(fù)雜，含色素等雜質(zhì)極多，需要吸附能力加強(qiáng)的材料；3、農(nóng)藥因其自身物理化學(xué)性質(zhì)不同，需要不同的檢測手段完成檢測，這就需要前處理方法適應(yīng)于至少氣質(zhì)和液質(zhì)兩種檢測方法，因?yàn)橘|(zhì)譜往往對(duì)于樣品凈化要求更高；針對(duì)這些問題，本發(fā)明創(chuàng)新性的進(jìn)行了以下改進(jìn)I、本發(fā)明中的茶業(yè)凈化柱通過優(yōu)化了十幾種吸附材料的性能,優(yōu)選出了三種材料，又通過優(yōu)化三種材料的用量和配比，結(jié)合應(yīng)用方法達(dá)到了對(duì)幾大類茶業(yè)的凈化要求。吸附材料的選擇既要考慮到不能對(duì)農(nóng)藥待測物有過強(qiáng)的吸附力，從而影響其洗脫效果；還要考慮到吸附材料的凈化效果，需要能最大程度地去除樣品基質(zhì)干擾物，其中包括1-1碳材料，需要較合適的比表面保證對(duì)色素等干擾物質(zhì)的吸附，同時(shí)要保持微孔率較低，從而能保證沒有對(duì)農(nóng)藥的過度吸附；本發(fā)明中用到的碳材料優(yōu)選石墨化碳比表面積約合100-300m2/g ;粒徑范圍為80目 400目；微孔比例不高于2% ;石墨化程度不低于 50% ；1-2極性官能團(tuán)修飾的高聚物材料，對(duì)于非極性干擾物、茶多酚、茶堿均有很好的吸附去除作用，同時(shí)避免了鍵合硅膠或金屬氧化物，如硅酸鎂、氧化鋁等造成的對(duì)于有機(jī)磷等極性農(nóng)藥的吸附；高聚物材料比表面較高于硅膠基質(zhì)材料，可以提升吸附總?cè)萘俊?、多種材料復(fù)合本發(fā)明中涉及的茶業(yè)凈化柱通過使用不同物理化學(xué)性質(zhì)的材料混合使用，以期達(dá)到同時(shí)去除多種茶葉樣品農(nóng)藥殘留物質(zhì)檢測過程中的干擾基質(zhì)，例如較常用固相萃取前處理方法需要至少1-2小時(shí)時(shí)間，可能會(huì)用到2-3種固相萃取柱產(chǎn)品，而本發(fā)明節(jié)省了至少一半的實(shí)驗(yàn)操作時(shí)間，只使用一支固相萃取柱，簡化了經(jīng)濟(jì)和人工操作成本。3、串接順序現(xiàn)能買到分層的固相萃取產(chǎn)品都是在上層放置碳類材料，而上層放置碳類材料容易被水和某些基質(zhì)成分污染后，吸附色素能力大幅下降；而改用上層放置氨基官能化的吸附材料和極性官能團(tuán)修飾的高聚物材料混合物，將影響碳材料除色素能力的成份首先去除，從而保障碳材料的除色效果不受水分等因素的影響；通過將石墨化碳材料置于上層的凈化柱與將石墨化碳材料置于上層的凈化柱對(duì)比，通過目測就可以看出將石墨化碳置于下層的凈化柱對(duì)色素的凈化效果更好。
與現(xiàn)存其他相關(guān)專利相比，本發(fā)明在凈化專用柱的材料，裝填，在檢測方法和檢測儀器的選擇方面都有所創(chuàng)新，具體表現(xiàn)為專利201010197943. X采用比色法測定二硫代氨基甲酸酯類農(nóng)藥，在對(duì)于深顏色作物，加入石墨粉和氯化鈉均質(zhì)，以吸附色素；在原理上同樣是采用了吸附雜質(zhì)排出干擾檢測的方式；然而因?yàn)楸壬ㄖ粚?duì)色素干擾比較敏感，方法只加入了石墨粉以除去色素，并不適用于其他檢測手段。專利1010108788. X基于基質(zhì)效應(yīng)補(bǔ)償?shù)牟枞~中有機(jī)磷類多農(nóng)殘測定方法，以在標(biāo)準(zhǔn)品中添加基質(zhì)模擬物的形式進(jìn)行基質(zhì)效應(yīng)補(bǔ)償，其凈化步驟加入了 C18，以除去一部分脂肪性質(zhì)干擾基質(zhì)，避免對(duì)氣相色譜檢測的嚴(yán)重的基質(zhì)干擾；03153725. I農(nóng)藥殘留凈化柱及其凈化方法保護(hù)了一種農(nóng)藥殘留凈化柱，利用吸附劑填料的吸附作用原理去除雜質(zhì)，采用了活性炭，硅藻土，助濾劑混合裝填用于食品中農(nóng)殘分析用的凈化柱；其中硅藻土和助濾劑都起到了過濾和支撐活性炭材料的作用，主要還是對(duì)蛋白質(zhì)和色素等雜質(zhì)進(jìn)行了去除，適合于食品類樣品，而本發(fā)明中的凈化柱針對(duì)茶業(yè)等綠色素豐富，富含天然茶業(yè)酸，茶業(yè)堿的樣品，不僅使用了混合裝填的方式，還采用了分層裝填，實(shí)現(xiàn)兩種柱子在一支柱管中串接的方式。而且凈化柱中采用的材料不僅含有碳類材料，還加入了帶有離子交換作用的堿性官能團(tuán)化的硅膠材料(即氨基官能化的吸附材料)、 極性官能團(tuán)修飾的高聚物材料等創(chuàng)新性的材料；利用了不同的吸附原理吸附雜質(zhì)。本發(fā)明對(duì)于茶業(yè)類復(fù)雜基質(zhì)樣品的農(nóng)藥殘留前處理和檢測領(lǐng)域提出了創(chuàng)新性的應(yīng)用方法，為該領(lǐng)域的研究人員提供了更多的選擇；本發(fā)明中的應(yīng)用方法結(jié)合了茶業(yè)凈化柱的特點(diǎn)，通過創(chuàng)新性的一次性凈化，分組檢測法，實(shí)現(xiàn)了在茶業(yè)類復(fù)雜基質(zhì)樣品中多種農(nóng)藥殘留及其代謝物的同時(shí)檢測，是目前唯一一個(gè)可以同時(shí)檢測400種以上農(nóng)藥及代謝物的檢測方法，填補(bǔ)了國內(nèi)空白。


圖I為茶葉凈化柱的結(jié)構(gòu)示意圖。圖中I為柱管，2-1為氨基官能化的吸附材料及極性官能團(tuán)修飾的高聚物材料的混合物，2-2為碳材料,3為篩板,4為注入口，5為流出口。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明，但不限定本發(fā)明的保護(hù)范圍。實(shí)施例I一種茶葉凈化柱，由包括如下步驟的方法制備得到使用體積容量為6mL或12mL的高密度聚乙烯柱管，其中填充石墨化碳，氨基化硅膠NH2，酰胺化聚乙烯二乙烯苯三種材料，其中氨基化硅膠NH2與酰胺化聚乙烯二乙烯苯混合作為一層，石墨化碳作為一層，其間使用20um孔徑的聚丙烯篩板作為分隔，填充為兩層的三種材料混合凈化柱，該茶葉凈化柱中石墨化碳，氨基化硅膠NH2與酰胺化聚乙烯二乙烯苯三種材料的質(zhì)量比例為8 8 1，其中石墨化碳裝填于柱管底層。實(shí)施例2一種茶葉凈化柱，由包括如下步驟的方法制備得到
使用體積容量為6mL或12mL的高密度聚乙烯柱管，其中填充石墨化碳，氨基化硅膠NH2，酰胺化聚乙烯二乙烯苯三種材料，其中氨基化硅膠NH2與酰胺化聚乙烯二乙烯苯混合作為一層，石墨化碳作為一層，其間使用20um孔徑的聚丙烯篩板作為分隔，填充為兩層的三種材料混合凈化柱，該茶葉凈化柱中石墨化碳，氨基化硅膠NH2與酰胺化聚乙烯二乙烯苯三種材料的質(zhì)量比例為6 4 1，其中石墨化碳裝填于柱管底層。實(shí)施例3一種茶葉凈化柱，由包括如下步驟的方法制備得到使用體積容量為6mL或12mL的高密度聚乙烯柱管，其中填充石墨化碳，氨基化硅膠NH2，酰胺化聚乙烯二乙烯苯三種材料，其中氨基化硅膠NH2與酰胺化聚乙烯二乙烯苯混合作為一層，石墨化碳作為一層，其間使用20um孔徑的聚丙烯篩板作為分隔，填充為兩層的三種材料混合凈化柱，該茶葉凈化柱中石墨化碳，氨基化硅膠NH2與酰胺化聚乙烯二乙烯苯三種材料的質(zhì)量比例為5 4 1，其中石墨化碳裝填于柱管底層。實(shí)施例4一種茶葉凈化柱，由包括如下步驟的方法制備得到使用體積容量為6mL或12mL的高密度聚乙烯柱管，其中填充石墨化碳，氨基化硅膠NH2，酰胺化聚乙烯二乙烯苯三種材料，其中氨基化硅膠NH2與酰胺化聚乙烯二乙烯苯混合作為一層，石墨化碳作為一層，其間使用20um孔徑的聚丙烯篩板作為分隔，填充為兩層的三種材料混合凈化柱，該茶葉凈化柱中石墨化碳，氨基化硅膠NH2與酰胺化聚乙烯二乙烯苯三種材料的質(zhì)量比例為4 4 1，其中石墨化碳裝填于柱管底層。實(shí)施例5一種茶葉凈化柱，由包括如下步驟的方法制備得到使用體積容量為6mL或12mL的高密度聚乙烯柱管，其中填充石墨化碳，氨基化硅膠NH2，酰胺化聚乙烯二乙烯苯三種材料，其中氨基化硅膠NH2與酰胺化聚乙烯二乙烯苯混合作為一層，石墨化碳作為一層，其間使用20um孔徑的聚丙烯篩板作為分隔，填充為兩層的三種材料混合凈化柱，該茶葉凈化柱中石墨化碳，氨基化硅膠NH2與酰胺化聚乙烯二乙烯苯三種材料的質(zhì)量比例為2 2 1，其中石墨化碳裝填于柱管底層。實(shí)施例6用于分析檢測茶葉中若干種農(nóng)藥等有害物質(zhì)的氣質(zhì)譜聯(lián)用檢測方法，包括如下步驟茶葉樣品提取的具體步驟如下I)將茶葉樣品碾碎，準(zhǔn)確稱取5. Og碎茶葉樣品于IOOmL離心管中；2)加入 15mL 乙臆，2g NaCL, 15000r/min 均質(zhì)提取 lmin, 4200r/min 離心 5min,取上清液于200mL雞心瓶中；3)向步驟2)殘洛中再加入15mL乙腈，15000r/min均質(zhì)提取lmin, 4200r/min離心5min,合并兩次茶葉提取液；4)將合并的茶葉提取液在40°C水浴旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至約lmL，得濃縮液，作為下一步固相萃取過程的上樣液。用實(shí)施例2中的茶葉凈化柱固相萃取方法凈化的過程如下I)在茶葉凈化柱中加入高約2cm的無水硫酸鈉，IOmL乙腈+甲苯(3+1)預(yù)洗此茶葉凈化柱； 2)將茶葉樣品提取過程所得的濃縮液轉(zhuǎn)移至茶葉凈化柱中，用3 X 2mL乙腈+甲苯 (3+1)洗滌樣液瓶,并將洗滌液移入茶葉凈化柱中；3)再用25mL乙腈+甲苯(3+1)洗滌茶葉凈化柱，收集上述所有流出液于雞心瓶中；4) 40°C水浴中旋轉(zhuǎn)濃縮至約O. 5mL,得濃縮液；5)氣質(zhì)聯(lián)用檢測向步驟4)所得濃縮液中加入2X5mL正己烷進(jìn)行溶劑交換兩次，最后使樣液體積約為ImL,加入40 μ L內(nèi)標(biāo)溶液,混勻,經(jīng)O. 2 μ m微孔濾膜過濾后,用于氣相色譜-質(zhì)譜測定。實(shí)施例7用于分析檢測茶葉中若干種農(nóng)藥等有害物質(zhì)的液相色譜二級(jí)質(zhì)譜聯(lián)用檢測方法， 包括如下步驟茶葉提取的具體步驟如下I)將茶葉樣品碾碎，準(zhǔn)確稱取2. Og茶葉于IOOmL離心管中；2)加入 15mL 乙臆，2g NaCL, 15000r/min 均質(zhì)提取 lmin, 4200r/min 離心 5min,取上清液于200mL雞心瓶(3)中；3)向步驟2)殘洛中再加入15mL乙腈，15000r/min均質(zhì)提取lmin, 4200r/min離心5min,合并兩次茶葉提取液；4)將合并的茶葉提取液在40°C水浴旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至約lmL，得濃縮液，作為下一步固相萃取過程的上樣液。用實(shí)施例I中的茶葉凈化柱固相萃取方法凈化的過程如下I)在茶葉凈化柱中加入高約2cm的無水硫酸鈉，IOmL乙腈+甲苯(3+1)預(yù)洗此柱；2)將茶葉樣品提取過程所得的濃縮液轉(zhuǎn)移至茶葉凈化柱中，用3 X 2mL乙腈+甲苯 (3+1)洗滌樣液瓶,并將洗滌液移入茶葉凈化柱中；3)收集上述所有流出液于雞心瓶中；4)40°C水浴中旋轉(zhuǎn)濃縮至約lmL，再于35°C下氮?dú)獯蹈桑琁mL乙腈+水(3+2)溶解殘?jiān)?jīng)O. 2 μ m微孔濾膜過濾后，供液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定。以上所述，僅是本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并非對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案作任何形式上的限制，凡是依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)實(shí)質(zhì)對(duì)以上實(shí)施例所作的任何簡單修改、等同變化與修飾，均仍屬于本發(fā)明的技術(shù)方案的范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種茶葉凈化吸附材料，用于茶葉農(nóng)藥殘留物質(zhì)檢測的樣品前處理過程中茶葉樣品主要基質(zhì)的吸附，其特征在于該茶葉凈化吸附材料包括碳材料、氨基官能化的吸附材料和極性官能團(tuán)修飾的高聚物材料。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的茶葉凈化吸附材料，其特征在于所述碳材料、氨基官能化的吸附材料和極性官能團(tuán)修飾的高聚物材料質(zhì)量配比為2-10份2-10份I份。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的茶葉凈化吸附材料，其特征在于所述碳材料為石墨化碳、活性炭中的一種或兩種的混合物，所述碳材料粒徑范圍為80目 400目，比表面積為 100 300m2/g，優(yōu)選地，所述碳材料為石墨化碳，粒徑范圍為80目 400目，比表面積為 100-300m2/g ;微孔比例不高于2% ;石墨化程度不低于50%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的茶葉凈化吸附材料，其特征在于所述氨基官能化的吸附材料為氨基化硅膠NH2、多氨基化硅膠PSA、氨基化聚乙烯二乙烯苯中的一種或幾種的混合物，優(yōu)選地，所述氨基官能化的吸附材料的粒徑范圍為30微米 80微米，比表面積為300 800平方米/克，平均孔徑為40 150埃。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的茶葉凈化吸附材料，其特征在于所述極性官能團(tuán)修飾的高聚物材料為聚苯乙烯二乙烯苯或酰胺化聚苯乙烯二乙烯苯中的一種或兩種以上的混合物，所述極性官能團(tuán)修飾的高聚物材料的粒徑范圍為30微米 80微米，比表面積為 300 800平方米/克，平均孔徑為40 150埃，交聯(lián)度15-80%。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5所述的茶葉凈化吸附材料，其特征在于所述的極性官能團(tuán)修飾的高聚物材料還包括羧基化聚乙烯二乙烯苯、丙磺酸化聚乙烯二乙烯苯中的一種或兩種的混合物。所述極性官能團(tuán)修飾的高聚物材料的粒徑范圍為30微米 80微米，比表面積為 300 800平方米/克，平均孔徑為40 150埃。
7.權(quán)利要求1-6所述的茶葉凈化吸附材料在檢測茶葉中農(nóng)藥殘留物質(zhì)的樣品前處理過程中的應(yīng)用。
8.一種茶葉凈化柱，其特征在于該茶葉凈化柱包括柱管和柱管內(nèi)的填料，所述的填料為權(quán)利要求1-6所述的茶葉凈化吸附材料，優(yōu)選地，所述碳材料裝填與柱管底層，所述氨基官能化的吸附材料和極性官能團(tuán)修飾的高聚物材料混合裝填在柱管上層，其間使用聚丙烯篩板作為分隔。
9.一種用于茶葉中農(nóng)藥殘留物質(zhì)檢測的樣品前處理方法，其特征在于包括如下步驟1)將茶葉樣品打碎或碾碎；2)向步驟I)所得碎茶葉樣品中加入提取溶劑和緩沖鹽進(jìn)行提取，離心后取上清液；重復(fù)提取過程，重復(fù)提取過程中無需再添加緩沖鹽，合并上清液濃縮，得濃縮液，待上樣；3)將步驟2)中得到的濃縮液加入權(quán)利要求8所述的茶葉凈化柱中，接收流出液，4)加入洗脫溶劑，將殘留在茶葉凈化柱上的農(nóng)藥殘留洗脫下來，得洗脫液，合并洗脫液和步驟3)得到的流出液；5)將合并的洗脫液和流出液濃縮后進(jìn)行儀器分析，準(zhǔn)確定性定量農(nóng)藥及其代謝物質(zhì)。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的一種用于茶葉中農(nóng)藥殘留物質(zhì)檢測的樣品前處理方法，其特征在于步驟2)中碎茶葉樣品提取溶劑緩沖鹽=Ig 3-8mL O. 2_lg。
11.根據(jù)權(quán)利要求9或10所述的一種用于茶葉中農(nóng)藥殘留物質(zhì)檢測的樣品前處理方法，其特征在于上述方法中步驟2)中的提取溶劑為甲醇、乙腈、正己烷、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、石油醚、甲苯、四氫呋喃、或異丙醇中的一種或兩種以上以任意比例混合的混合物；或者，步驟2)中的提取溶劑為水和有機(jī)溶劑的混合物，所述的有機(jī)溶劑為甲醇、乙腈、 正己烷、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、石油醚、甲苯、四氫呋喃、異丙醇中的一種或兩種以上以任意比例混合的混合物，所述的有機(jī)溶劑占提取溶劑的體積百分比含量為1% -99% ；或者，步驟2)中的提取溶劑為有機(jī)溶劑與酸的混合物，其中酸占提取溶劑的質(zhì)量百分比為O. 01% -10%，所述的有機(jī)溶劑為甲醇，乙腈，正己烷，丙酮，二氯甲烷，乙酸乙酯，石油醚，甲苯，四氫呋喃或異丙醇中的一種或兩種以上以任意比例混合的混合物，所述的酸為三氯乙酸、磺基水楊酸、鹽酸、三氟乙酸、甲酸、乙酸、硝酸、磷酸或高氯酸中的一種或兩種以上以任意比例混合的混合物；或者，步驟2)中的提取溶劑為有機(jī)溶劑與堿的混合物，其中堿占提取溶劑的質(zhì)量百分比為O. 01% -10%，所述的有機(jī)溶劑為甲醇，乙腈，正己烷，丙酮，二氯甲烷，乙酸乙酯，石油醚，甲苯，四氫呋喃或異丙醇中的一種或兩種以上以任意比例混合的混合物，所述的堿為氨水、三乙胺、氫氧化鈉、碳酸鈉、碳酸氫鈉、乙酸鈉、磷酸鈉或磷酸二氫鈉的水溶液中的一種或兩種以上以任意比例混合的混合物。優(yōu)選地，上述方法中，步驟2)中所述的緩沖鹽為氯化鈉、醋酸鈉、檸檬酸鈉中的一種或兩種以上混合物。
12.根據(jù)權(quán)利要求9-11任一項(xiàng)所述的一種用于茶葉中農(nóng)藥殘留物質(zhì)檢測的樣品前處理方法，其特征在于所述的步驟4)中的洗脫溶劑為甲醇、乙腈、丙酮、正己烷、二氯甲烷或甲苯中的一種或兩種以上的混合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種用于檢測茶葉農(nóng)藥殘留物質(zhì)的樣品前處理方法及茶葉凈化柱。本發(fā)明提及一種茶葉凈化吸附材料，用于茶葉農(nóng)藥殘留物質(zhì)檢測的樣品前處理過程中茶葉樣品主要基質(zhì)的吸附，其特征在于該茶葉凈化吸附材料包括碳材料、氨基官能化的吸附材料和極性官能團(tuán)修飾的高聚物材料。本發(fā)明還提供了一種茶葉凈化柱，該茶葉凈化柱包括柱管和柱管內(nèi)的填料，所述的填料為上述茶葉凈化吸附材料。本發(fā)明可用于各種茶葉原料及茶葉成品，茶葉二次加工品等農(nóng)藥殘留物質(zhì)的檢測。
文檔編號(hào)B01J20/26GK102600811SQ20121009146
公開日2012年7月25日 申請(qǐng)日期2012年3月31日 優(yōu)先權(quán)日2012年3月31日
發(fā)明者梁萍, 汪群杰, 黃韋 申請(qǐng)人:天津博納艾杰爾科技有限公司