專利名稱：用于校驗(yàn)血細(xì)胞分析儀的質(zhì)控品和校準(zhǔn)品及其制備方法
用于校驗(yàn)血細(xì)胞分析儀的質(zhì)控品和校準(zhǔn)品及其制備方法技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種校驗(yàn)細(xì)胞分析儀的精確度和穩(wěn)定性時(shí)所用到的質(zhì)控品和校準(zhǔn)品。背景技術(shù)：
血細(xì)胞分析儀是日常檢驗(yàn)當(dāng)中不可或缺的篩查設(shè)備，每天肩負(fù)著大量的對(duì)正?；虍惓?biāo)本的篩查工作，一旦發(fā)現(xiàn)異常，醫(yī)務(wù)人員即時(shí)進(jìn)行下一步相關(guān)檢查，以根據(jù)病理數(shù)據(jù)進(jìn)行判斷及相關(guān)治療或調(diào)理。及時(shí)將病人與健康人員分流，減輕醫(yī)務(wù)工作量及加快醫(yī)務(wù)工作效率。由于血細(xì)胞分析儀每天對(duì)大量的病人或正常體檢標(biāo)本進(jìn)行分析報(bào)告數(shù)據(jù)，所以醫(yī)院每天都必須確定儀器的性能是否符合出廠時(shí)性能指標(biāo)，這就需要特定的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。目前國(guó)內(nèi)衛(wèi)生部門使用的多種血細(xì)胞分析儀校驗(yàn)用的質(zhì)控品和校準(zhǔn)品，其作用在于通過(guò)質(zhì)控品的日常測(cè)試可分析出儀器的精確度和穩(wěn)定性，通過(guò)校準(zhǔn)品對(duì)儀器的校準(zhǔn)可以保證儀器的檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。通常該儀器使用的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)都由儀器廠家配套銷售，逐漸形成壟斷性質(zhì)，若用戶不是使用該廠家提供的配套試劑而是使用國(guó)內(nèi)生產(chǎn)的配套試劑，該用戶基本不可能買到其昂貴的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，而廠家配套的試劑往往價(jià)格都比較高，造成目前國(guó)內(nèi)醫(yī)療成本居高不下。再者，進(jìn)口標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)也受各種條件限制而經(jīng)常斷貨，如供應(yīng)量(廠家也受控制)、有效期 (一般只有三個(gè)月，到用戶手上不到兩個(gè)月)、運(yùn)輸方式、周期(進(jìn)口基本需要一周以上)、天氣 (必須保存在2 8°C)等，生產(chǎn)儀器的廠家試劑也并不參與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的生產(chǎn)，他們基本都是依靠美國(guó)的幾個(gè)廠家貼牌生產(chǎn)，所以配套到國(guó)內(nèi)用戶手上就特別稀缺且昂貴。國(guó)內(nèi)曾經(jīng)有多家廠家試圖開(kāi)發(fā)生產(chǎn)，結(jié)果只有兩三家利用人血生產(chǎn)出替代的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，但效果依然欠佳；特別是近年來(lái)，國(guó)家已經(jīng)明令禁止人體血液或其制品作為商品銷售，導(dǎo)致該些廠家只能將其原料轉(zhuǎn)為豬血，由于豬血與人血細(xì)胞差異較大，雖然成本低，但效果與人血就相差甚遠(yuǎn)。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供了一種價(jià)格合理、質(zhì)量可靠，符合國(guó)家衛(wèi)生要求、又能更準(zhǔn)確地測(cè)試血細(xì)胞分析儀的精確度和穩(wěn)定性的質(zhì)控品。本發(fā)明的另一目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供了一種價(jià)格合理、質(zhì)量可靠，符合國(guó)家衛(wèi)生要求、又能準(zhǔn)確校準(zhǔn)血細(xì)胞分析儀的校準(zhǔn)品。本發(fā)明的又一目的是提供了上述用于校驗(yàn)血細(xì)胞分析儀的質(zhì)控品和校準(zhǔn)品的制備方法。為了解決上述存在的技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用下述技術(shù)方案
一種用于校驗(yàn)血細(xì)胞分析儀的質(zhì)控品，其包括有猴全血血漿、抗凝劑、保存液、細(xì)胞模擬物和穩(wěn)定劑，其中猴全血血漿與抗凝劑之間的重量比為10 :1，猴全血血漿和抗凝劑混合后的混合液與保存液之間的重量比為10 1 ；在上述三種成份的混合液中按重量加入1%的穩(wěn)定劑；所加入的細(xì)胞模擬物根據(jù)產(chǎn)品的多少和濃度來(lái)添加，在此所述的抗凝劑的原料組成有Na2HP04，KH2P04，3-羥基-3-羧基戊二酸，2-羥基丙烷-1，2，3-三羧酸鈉和純水，它們的重量比為5 10 :3 10 20 50 15 30 1000 ；所述保存液的原料組成有 C21H27N7014P2Na, C10H14013N3P3N2 ·
3H20, NH4CL, C6H1206, C6H1406, C5H5N5 和純水，它們的重量比為:0· 5 5 :0· 1 1 5 15 20 50 10 50 :0. 5 5 1000 ；所述穩(wěn)定劑的原料組成有羥乙基淀粉，氯化鈉注射液和青霉素鈉，其中氯化鈉注射液和青霉素鈉之間的重量比為1:100，它們兩者的混合液中按每升加入1600000U的青霉素鈉；所述的細(xì)胞模擬物的原料是血細(xì)胞或直徑1 IOum的乳膠顆粒。上述用于校驗(yàn)血細(xì)胞分析儀的質(zhì)控品的制備方法，其包括有如下步驟采血抗凝一保鮮一過(guò)濾一檢測(cè)一離心提純稀釋一添加細(xì)胞模擬物一細(xì)胞穩(wěn)定一賦值。一種用于校驗(yàn)血細(xì)胞分析儀的校準(zhǔn)品，其包括有猴全血血漿、抗凝劑、保存液、細(xì)胞模擬物和穩(wěn)定劑(抗菌劑)，其中猴全血血漿與抗凝劑之間的重量比為10 :1，猴全血血漿和抗凝劑混合后的混合液與保存液之間的重量比為10 1 ；在上述三種成份的混合液中按重量加入1%的穩(wěn)定劑；所加入的細(xì)胞模擬物根據(jù)產(chǎn)品的多少和濃度來(lái)添加，在此所述的抗凝劑的原料組成有妝2朋04，1(!12 04，3-羥基-3-羧基戊二酸，2-羥基丙烷-1，2，3-三羧酸鈉和純水，它們的重量比為5 10 :3 10 20 50 15 30 1000 ；所述保存液的原料組成有C21H27N7014P2Na，C10H14013N3P3N2 ·
3H20, NH4CL, C6H1206, C6H1406, C5H5N5 和純水，它們的重量比為:0· 5 5 :0· 1 1 5 15 20 50 10 50 :0. 5 5 1000 ；所述穩(wěn)定劑的原料組成有羥乙基淀粉，氯化鈉注射液和青霉素鈉，其中氯化鈉注射液和青霉素鈉之間的重量比為1:100，它們兩者的混合液中按每升加入1600000U的青霉素鈉；所述的細(xì)胞模擬物的原料是直徑1 IOum的乳膠顆粒。上述用于校驗(yàn)血細(xì)胞分析儀的質(zhì)控品的制備方法，包括有如下步驟采血抗凝一保鮮一過(guò)濾一檢測(cè)一離心提純稀釋一添加細(xì)胞模擬物一細(xì)胞穩(wěn)定一賦值。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是1)、本發(fā)明采用猴血代替人血，效果與人血制成的質(zhì)控品和校準(zhǔn)品相同，可以彌補(bǔ)目前國(guó)內(nèi)用人血制造的技術(shù)空白，該項(xiàng)目經(jīng)過(guò)多年研究和多次反復(fù)試驗(yàn)，已經(jīng)解決了猴血細(xì)胞活性保護(hù)和保證細(xì)胞的生長(zhǎng)壽命一系列問(wèn)題；2)、由于進(jìn)口產(chǎn)品成本價(jià)格昂貴，且受各種條件限制而經(jīng)常斷貨，如供應(yīng)量(廠家也受控制)、有效期(一般只有三個(gè)月，到用戶手上不到兩個(gè)月)、運(yùn)輸方式、周期(進(jìn)口基本需要一周以上)、溫度(必須保存在2 8°C)等，該項(xiàng)目一旦應(yīng)用于生產(chǎn)，將會(huì)大大降低同類產(chǎn)品的生產(chǎn)成本，打破人血制成質(zhì)控品及校準(zhǔn)品市場(chǎng)壟斷的局面；3)、由于國(guó)家明令禁止人體血液或其制品作為商品銷售，本項(xiàng)目完全可以彌補(bǔ)到目前國(guó)內(nèi)相關(guān)領(lǐng)域的空白。下面結(jié)合具體實(shí)施方式
對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)描述具體實(shí)施方式
本發(fā)明是用于校驗(yàn)血細(xì)胞分析儀的質(zhì)控品，其用猴血漿制成的，由類白細(xì)胞、類血小板和類紅細(xì)胞組成，其中類白細(xì)胞為經(jīng)過(guò)加工處理得到的類似人的白細(xì)胞模擬物；類血小板為猴血小板加工處理而成的類似人的血小板模擬物；類紅細(xì)胞為猴紅細(xì)胞加工處理后進(jìn)行保存而成。在血漿中添加檸檬酸及磷酸鹽緩沖液作抗凝，ATP作營(yíng)養(yǎng)劑穩(wěn)定細(xì)胞，以青霉素殺菌防腐。本質(zhì)控品，包括有猴全血血漿、抗凝劑、保存液、細(xì)胞模擬物和穩(wěn)定劑(抗菌劑)，其中猴全血血漿與抗凝劑之間的重量比為10 :1，猴全血血漿和抗凝劑混合后的混合液與保存液之間的重量比為10 1 ；在上述三種成份的混合液中按重量加入1%的穩(wěn)定劑；所加入的細(xì)胞模擬物根據(jù)產(chǎn)品的多少和濃度來(lái)添加。在此
所述的抗凝劑的原料組成有Na2HP04，KH2P04, 3-羥基-3-羧基戊二酸，2-羥基丙烷-1,2，3-三羧酸鈉和純水，它們的重量比為5 10 :3 10 20 50 15 30 1000 ；抗凝劑的作用是防止猴全血血漿凝固，在此用3-羥基-3-羧基戊二酸，2-羥基丙烷-1，2，3-三羧酸鈉(檸檬酸和檸檬酸鈉)作抗凝劑；磷酸鹽Na2HP04、KH2P04緩沖液起到保持血漿的酸堿度平衡作用，從而延長(zhǎng)紅細(xì)胞的保存期。所述保存液的原料組成有C21H27N7014P2Na，C10H14013N3P3N2·
3H20, NH4CL, C6H1206, C6H1406, C5H5N5 和純水，它們的重量比為:0· 5 5 :0· 1 1 5 15 20 50 10 50 :0. 5 5 1000 ；保存液的作用是提供營(yíng)養(yǎng)，保持細(xì)胞活性，延長(zhǎng)細(xì)胞壽命，其中C21H27N7014P2Na是還原型輔酶，與C10H14013N3P3N2 ·3Η20—同補(bǔ)充細(xì)胞所需營(yíng)養(yǎng)，NH4CL可降低血漿中二氧化碳含量，C6H1206 (葡萄糖)是紅細(xì)胞代謝所必需的營(yíng)養(yǎng)成分，可延長(zhǎng)紅細(xì)胞保存時(shí)間，且防止溶血；并可使細(xì)胞中的有機(jī)磷消失緩慢，防止紅細(xì)胞儲(chǔ)存的損傷；C6H1406對(duì)細(xì)胞膜有保護(hù)作用，且不影響細(xì)胞膜的功能，從而提高了紅細(xì)胞的再活率；C5H5N5可促進(jìn)紅細(xì)胞ATP合成，延長(zhǎng)紅細(xì)胞的保存期，并增強(qiáng)紅細(xì)胞放氧功能。所述穩(wěn)定劑的原料組成有羥乙基淀粉，氯化鈉注射液和青霉素鈉，其中氯化鈉注射液和青霉素鈉之間的重量比為1 :100，它們兩者的混合液中按每升加入160000011的青霉素鈉。青霉素鈉是比較溫和的殺菌劑，可以殺死血漿中的細(xì)菌，保護(hù)細(xì)胞生長(zhǎng)環(huán)境；羥乙基淀粉和氯化鈉注射液作為血漿填充劑，按照每批細(xì)胞含量適當(dāng)添加。所述的細(xì)胞模擬物的原料是血細(xì)胞或直徑1 IOum的乳膠顆粒，它可以替代同等級(jí)大小細(xì)胞，例如當(dāng)質(zhì)控品用來(lái)替代白細(xì)胞時(shí)，則按2 20X 109/L來(lái)添加細(xì)胞模擬物，由于顆粒穩(wěn)定，可以保證數(shù)量的準(zhǔn)確性，并配合不同儀器所需制作成不同的固定的直方圖或散點(diǎn)圖供數(shù)據(jù)分析。本質(zhì)控品的主要生產(chǎn)工藝流程如下
采血抗凝一保鮮一過(guò)濾一檢測(cè)一離心提純稀釋一添加細(xì)胞模擬物一細(xì)胞穩(wěn)定一賦值， 其中
1、采血至已消毒的玻璃容器，先按101的比例加入抗凝劑，混合到一定數(shù)量后再按 10 1的比例加入保存液混勻后加蓋密封，使混合液保鮮，防止凝固；
2、血漿過(guò)濾采用輸血器過(guò)濾雜質(zhì)及凝塊，經(jīng)充分混勻后濾出的血液靠壁流入瓶底，以防止溶血現(xiàn)象破壞細(xì)胞，隨后檢測(cè)細(xì)胞含量及其它參數(shù)。3、分離提取
根據(jù)需要按照細(xì)胞數(shù)值的高低定離心的次數(shù)和提取細(xì)胞的多少取已過(guò)濾的血液平行離心吸提取所需細(xì)胞，測(cè)試余下的血細(xì)胞參數(shù)值。4、添加細(xì)胞模擬物
根據(jù)產(chǎn)品要求按量添加不同大小及濃度比例的細(xì)胞模擬物 5、細(xì)胞穩(wěn)定
根據(jù)血液體積按1 :100提取穩(wěn)定劑加入到血液中混合，并輕度充分搖勻。
6、分裝時(shí)輕度充分搖勻血液，根據(jù)生產(chǎn)要求包裝量分裝到試管內(nèi)，加蓋密封并置于2 8攝氏度冷庫(kù)保存。7、測(cè)試并賦值
在相應(yīng)的血細(xì)胞分析儀上按要求測(cè)試或通過(guò)顆粒計(jì)數(shù)儀反復(fù)檢測(cè)各種細(xì)胞的含量并計(jì)算賦值不確定度。
本校準(zhǔn)品也是用猴血漿制成的，其由類白細(xì)胞、類血小板和類紅細(xì)胞組成，其中類白細(xì)胞為經(jīng)過(guò)加工處理得到的類似人的白細(xì)胞模擬物；類血小板為猴血小板加工處理而成的類似人的血小板模擬物；紅細(xì)胞為猴紅細(xì)胞加工處理后進(jìn)行保存而成。血漿中添加檸檬酸及磷酸鹽緩沖液作抗凝，ATP作營(yíng)養(yǎng)劑穩(wěn)定細(xì)胞，以氰霉素殺菌防腐。校準(zhǔn)品與質(zhì)控品的原料、 重量比和制作方法基本上一樣，只是模擬物質(zhì)的添加和使用不一樣，質(zhì)控品可直接使用血細(xì)胞或乳膠顆粒，而校準(zhǔn)品必須使用乳膠顆粒。例如，當(dāng)用來(lái)替代白細(xì)胞來(lái)校準(zhǔn)時(shí)，按4 IlX 109/L來(lái)添加細(xì)胞模擬物；當(dāng)用來(lái)替代紅細(xì)胞來(lái)校準(zhǔn)時(shí)，按3 5X 1012/L來(lái)添加細(xì)胞模擬物；而當(dāng)用來(lái)替代血小板時(shí)則按100 300X 109/L來(lái)添加細(xì)胞模擬物。對(duì)制備出來(lái)的本校準(zhǔn)品和質(zhì)控品進(jìn)行生物安全的檢測(cè)，在此通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)對(duì)HBsAg、HIV-1/HIV-2抗體、HCV抗體檢測(cè)為陰性；
從上可以看出，1本發(fā)明采用猴血代替人血，效果與人血制成的質(zhì)控品和校準(zhǔn)品相同， 可以彌補(bǔ)目前國(guó)內(nèi)用人血制造的技術(shù)空白，該項(xiàng)目經(jīng)過(guò)多年研究和多次反復(fù)試驗(yàn)，已經(jīng)解決了猴血細(xì)胞活性保護(hù)和保證細(xì)胞的生長(zhǎng)壽命一系列問(wèn)題；2、由于進(jìn)口產(chǎn)品成本價(jià)格昂貴，且受各種條件限制而經(jīng)常斷貨，如供應(yīng)量(廠家也受控制)、有效期(一般只有三個(gè)月， 到用戶手上不到兩個(gè)月)、運(yùn)輸方式、周期(進(jìn)口基本需要一周以上)、溫度(必須保存在2 8°C)等，該項(xiàng)目一旦應(yīng)用于生產(chǎn)，將會(huì)大大降低同類產(chǎn)品的生產(chǎn)成本，打破人血制成質(zhì)控品及校準(zhǔn)品市場(chǎng)壟斷的局面；3、由于國(guó)家明令禁止人體血液或其制品作為商品銷售，本項(xiàng)目完全可以彌補(bǔ)到目前國(guó)內(nèi)相關(guān)領(lǐng)域的空白。
權(quán)利要求
1.一種用于校驗(yàn)血細(xì)胞分析儀的質(zhì)控品，其特征在于包括有猴全血血漿、抗凝劑、保存液、細(xì)胞模擬物和穩(wěn)定劑，其中猴全血血漿與抗凝劑之間的重量比為10 :1，猴全血血漿和抗凝劑混合后的混合液與保存液之間的重量比為10 1 ；在上述三種成份的混合液中按重量加入1%的穩(wěn)定劑；所加入的細(xì)胞模擬物根據(jù)產(chǎn)品的多少和濃度來(lái)添加，在此所述的抗凝劑的原料組成有Na2HP04，KH2P04，3-羥基-3-羧基戊二酸，2-羥基丙烷-1，2，3-三羧酸鈉和純水，它們的重量比為5 10 :3 10 20 50 15 30 1000 ；所述保存液的原料組成有C21H27N7014P2Na，C10H14013N3P3N2 ·3H20, NH4CL, C6H1206, C6H1406, C5H5N5 和純水，它們的重量比為:0· 5 5 :0· 1 1 5 15 20 50 10 50 :0. 5 5 1000 ；所述穩(wěn)定劑的原料組成有羥乙基淀粉，氯化鈉注射液和青霉素鈉，其中氯化鈉注射液和青霉素鈉之間的重量比為1 :100，它們兩者的混合液中按每升加入160000011的青霉素鈉；所述的細(xì)胞模擬物的原料是血細(xì)胞或直徑1 IOum的乳膠顆粒。
2.一種制備如權(quán)利要求1所述的用于校驗(yàn)血細(xì)胞分析儀的質(zhì)控品的制備方法，其包括有如下步驟采血抗凝一保鮮一過(guò)濾一檢測(cè)一離心提純稀釋一添加細(xì)胞模擬物一細(xì)胞穩(wěn)定一賦值。
3.一種用于校驗(yàn)血細(xì)胞分析儀的校準(zhǔn)品，其特征在于其特征在于包括有猴全血血漿、抗凝劑、保存液、細(xì)胞模擬物和穩(wěn)定劑(抗菌劑)，其中猴全血血漿與抗凝劑之間的重量比為10 :1，猴全血血漿和抗凝劑混合后的混合液與保存液之間的重量比為10 1 ；在上述三種成份的混合液中按重量加入1%的穩(wěn)定劑；所加入的細(xì)胞模擬物根據(jù)產(chǎn)品的多少和濃度來(lái)添加，在此所述的抗凝劑的原料組成有Na2HP04，KH2P04，3-羥基-3-羧基戊二酸，2-羥基丙烷-1，2，3-三羧酸鈉和純水，它們的重量比為5 10 :3 10 20 50 15 30 1000 ；所述保存液的原料組成有C21H27N7014P2Na，C10H14013N3P3N2 ·3H20, NH4CL, C6H1206, C6H1406, C5H5N5 和純水，它們的重量比為:0· 5 5 :0· 1 1 5 15 20 50 10 50 :0. 5 5 1000 ；所述穩(wěn)定劑的原料組成有羥乙基淀粉，氯化鈉注射液和青霉素鈉，其中氯化鈉注射液和青霉素鈉之間的重量比為1 :100，它們兩者的混合液中按每升加入160000011的青霉素鈉；所述的細(xì)胞模擬物的原料是直徑1 IOum的乳膠顆粒。
4.一種制備如權(quán)利要求3所述的用于校驗(yàn)血細(xì)胞分析儀的質(zhì)控品的制備方法，其包括有如下步驟采血抗凝一保鮮一過(guò)濾一檢測(cè)一離心提純稀釋一添加細(xì)胞模擬物一細(xì)胞穩(wěn)定一賦值。
全文摘要
一種用于校驗(yàn)血細(xì)胞分析儀的質(zhì)控品和校準(zhǔn)品，包括有猴全血血漿、抗凝劑、保存液、細(xì)胞模擬物和穩(wěn)定劑，其中猴全血血漿與抗凝劑之間的重量比為10∶1，猴全血血漿和抗凝劑混合后的混合液與保存液之間的重量比為10∶1；在上述三種成份的混合液中按重量加入1%的穩(wěn)定劑；所加入的細(xì)胞模擬物根據(jù)產(chǎn)品的多少和濃度來(lái)添加。它們的價(jià)格合理、質(zhì)量可靠，符合國(guó)家衛(wèi)生要求、又能更準(zhǔn)確地測(cè)試血細(xì)胞分析儀的精確度和穩(wěn)定性。
文檔編號(hào)G01N33/48GK102435724SQ201110000498
公開(kāi)日2012年5月2日 申請(qǐng)日期2011年1月4日 優(yōu)先權(quán)日2011年1月4日
發(fā)明者歐明坤 申請(qǐng)人:中山市滔略生物科技有限公司