專利名稱：立體多維多模式毛細管電泳方法及專用裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及毛細管電泳的分離技術(shù)，具體地說是一種立體多維多模式毛細管電泳方法及專用裝置。
背景技術(shù)：
毛細管電泳是近年來發(fā)展起來的微分離技術(shù)，由于其高效、樣品用量少、應(yīng)用范圍寬等特點而引起分析化學(xué)領(lǐng)域的廣泛關(guān)注。目前已發(fā)展成為包括毛細管區(qū)帶電泳(CZE)、毛細管電動力學(xué)色譜(MEKC)、毛細管電色譜(CEC)等多種分離模式，數(shù)十種商品化儀器的新型學(xué)科。
盡管毛細管電泳方法具有較高的柱效，但是由于應(yīng)用電壓的限制，制約了所采用的分離柱長度，因而也限制了實際柱效和可能達到的峰容量。此外，毛細管柱過細的內(nèi)徑使得其光譜檢測光程過小，對檢測靈敏度產(chǎn)生很大影響。這些限制和影響在復(fù)雜生化樣品、環(huán)境樣品分析中尤為突出。因此發(fā)展具有較大峰容量和較高檢測靈敏度的毛細管電泳儀器和方法對于進一步拓寬其應(yīng)用和研究領(lǐng)域具有十分重要意義。
采用多維分離技術(shù)可以極大地提高系統(tǒng)的峰容量，也可以更方便地與高靈敏檢測器聯(lián)用，更好地完成復(fù)雜樣品的分離分析任務(wù)。其方法目前主要有兩種，一是通過柱切換技術(shù)實現(xiàn)高效液相色譜與毛細管電泳技術(shù)聯(lián)用的二維分離；二是毛細管電泳-毛細管電泳的二維聯(lián)用。文獻1A Simple Two-dimensionalHPLC/HPCE Set Up For The Separation Of Complex Mixtures，Electrophoresis，1999，Vol.20，Issue 7，1533-1537；文獻2J.Chromatogr.A.，Multi-DimensionalMapping Of Pyridylamine Labeled N-Linked Oligosaccharides By CE，1996，720，395-407；文獻3A Transparent Flow Gating Interface For The Coupling OfMicroclumn LC With CZE In A Comprehensive Two-Dimensional System，Anal.Chem.1997，69，4134。這些方法基于柱間電動-機械切換實現(xiàn)樣品由一根毛細管柱進入另一根毛細管柱，由于流路中有泵、閥等組件，盡管可以使峰容量得到一定的提高，但由于切換過程損失柱效較大，對儀器條件的要求較為苛刻，限制了其應(yīng)用；另外，在二維氣相色譜中，第二維柱必須為短柱，也對柱效有較大影響。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種柱效損失小，峰容量更大，結(jié)構(gòu)簡單、檢測靈敏度高的立體多維多模式毛細管電泳方法及專用裝置。
為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案是根據(jù)流動相在毛細管電泳輸運過程中的特點，采用電壓切換切換方式，實現(xiàn)樣品特別是復(fù)雜樣品在毛細管柱中進行多維分離，以極大增加峰容量，滿足蛋白質(zhì)組等復(fù)雜體系對分離的要求；具體地說是通過電壓切換的方式使流體在不同流路之間切換，使樣品組分可以在至少2根毛細管柱中，采用不同的毛細管電泳分離模式，通過串聯(lián)、并聯(lián)或串并聯(lián)組合的流路形式，以及對應(yīng)的不同流動相組合完成分離；其專用裝置主要由至少2根毛細管柱、至少1個連接件、高壓源組成，其中用連接件進行柱間樣品輸運，其接口處連接毛細管柱和空毛細管，高壓源通過控制開關(guān)、裝有流動相的容器安裝在毛細管柱或空毛細管自由端。
本發(fā)明工作原理如下由于流體在毛細管中存在潤濕現(xiàn)象，因此毛細管內(nèi)徑較小的情況下，只有在柱管兩端施加適當?shù)膲毫r，才能使流體在柱內(nèi)輸運。這一原理說明只有在通過連接件連接后的對應(yīng)毛細管兩端施加電壓時，流動相才能夠在對應(yīng)的毛細管柱內(nèi)輸運，而沒有被施加電壓的毛細管中流動相不會隨之流動。基于這種思想可以在毛細管柱徑較小的情況下，無需接入閥門等組件即可保證切換過程順利完成。具體方法是通過電壓的切換使流動相在不同流路之間切換，使樣品組分在多根毛細管柱中，采用不同的毛細管電泳分離模式和流動相組合完成分離。根據(jù)不同的分離要求和樣品特征，設(shè)計二維及二維以上不同的分離模式(如CZE、CEC等)，這些模式能夠在相應(yīng)的毛細管柱內(nèi)實現(xiàn)，且在流動相兼容的情況下，不同柱分離之間不產(chǎn)生相互影響。理論上講，可以達到無限的柱容量，使得超復(fù)雜樣品的分離成為可能。由于每一分離毛細管柱可配置相應(yīng)的檢測系統(tǒng)，因此結(jié)合切換程序的設(shè)計，能夠得到多個多維立體譜圖。
本發(fā)明具有如下優(yōu)點1.峰容量大。本發(fā)明采用多維多模式毛細管電泳分離方案，可以在一臺儀器上通過串聯(lián)或并聯(lián)等模式同時實現(xiàn)樣品在多種類型柱、多種流動相體系下的分離分析，理論上講，可以達到無限的柱容量，使得超復(fù)雜樣品的分離成為可能。而且通過串聯(lián)技術(shù)能夠得到極高的實際柱效，總峰容量為各柱峰容量乘積。
2.成本低、柱效損失小。本發(fā)明采用零死體積交叉連接件進行柱間流體的輸運，在毛細管柱徑較小的情況下，無需接入閥門等組件即可保證轉(zhuǎn)換過程順利完成。由于省了泵和閥，避免了閥切換引起的柱效降低問題，裝置簡單，也保證了分離的高效性。
3.分離效果好。本發(fā)明通過電壓的切換使流體在不同流路之間切換，樣品組分在多根毛細管柱中，采用不同的毛細管電泳分離模式和流動相組合完成分離。
4.多分離模式。本發(fā)明根據(jù)不同的分離要求和樣品特征，可以設(shè)計不同的分離模式(如CZE、CEC等)，這些模式能夠在相應(yīng)的毛細管柱內(nèi)實現(xiàn)，且在流動相兼容的情況下，不同柱分離之間不相互影響?？蓪崿F(xiàn)多次的柱內(nèi)富集。
5.檢測靈敏度高。本發(fā)明結(jié)合多次柱內(nèi)富集技術(shù)及溶劑置換技術(shù)，對不同組分而不是整個樣品可以配以相應(yīng)的檢測器，可以極大地提高檢測靈敏度。柱間切換可以采用定峰切換和定切換兩種方案，也可以根據(jù)需要，設(shè)計切換程序按指定的切換方式切換。并且試樣分析過程可實現(xiàn)切換程序設(shè)計的全自動化控制。切換方式和檢測手段的改變，可以得到多個立體多維譜圖，便于峰跟蹤和定性、定量。


圖1為本發(fā)明一個實施例二維串聯(lián)毛細管柱電泳裝置結(jié)構(gòu)示意圖。
圖2為圖1中連接件結(jié)構(gòu)示意圖。
圖3為本發(fā)明一個實施例二維串聯(lián)毛細管柱電泳定時切換紫外可見光度檢測器得到的三維譜圖。
圖4為本發(fā)明另一個實施例三維串聯(lián)毛細管柱電泳裝置結(jié)構(gòu)示意圖。
圖5為本發(fā)明第三個實施例二維并聯(lián)毛細管柱電泳裝置結(jié)構(gòu)示意圖。
具體實施例方式
下面結(jié)合附圖和實施例詳述本發(fā)明。
實施例1二維串聯(lián)毛細管柱電泳如圖2所示，毛細管柱A1采用毛細管凝膠電泳分離模式，毛細管柱B2采用毛細管電色譜或毛細管區(qū)帶電泳分離模式，設(shè)計所需毛細管柱A1、B2尺寸相同，分別插入連接件5的接口里，并經(jīng)粘合劑粘結(jié)，連接件5為四通結(jié)構(gòu)，在連接件5的點對稱位置接合空毛細管4，為了避免不必要的柱效損失，經(jīng)連接件5連接的毛細管柱A1和B2的設(shè)置，應(yīng)使毛細管柱A1中的樣品組分在通過切換進入毛細管柱B2的過程中不經(jīng)過有小角度的流路，避免不必要的峰形展寬；在毛細管柱A1、B2流動相的流出端設(shè)置窗口，設(shè)檢測器6為紫外光譜儀，高壓源7通過控制開關(guān)K1～K4、裝有流動相的樣品瓶安放在毛細管柱或空毛細管自由端。
其中不同毛細管電泳柱內(nèi)富集技術(shù)皆可通過操作條件的適當控制，在毛細管柱A1和B2上實現(xiàn)，例如，第一維中采用毛細管凝膠電泳的分離模式，并通過場放大進樣技術(shù)實現(xiàn)樣品的初步富集；樣品經(jīng)毛細管柱A1分離后，根據(jù)有機調(diào)節(jié)劑濃度的改變和離子強度等的相應(yīng)調(diào)整，在毛細管柱B2的毛細管電色譜模式中可實現(xiàn)再一次的柱內(nèi)富集，使檢測靈敏度得到極大的提高。
毛細管柱之間的常用切換方式有兩種定峰和定時切換，本實施例為定時切換，即設(shè)定程序，在一定的時間間隙(如5分鐘)完成切換。
其分離操作可按下述步驟進行
1.組裝好設(shè)備，在第一～二瓶11～12和第三～四瓶21～22分別裝入兩次分離用流動相，保持電路中所有開關(guān)處于斷開狀態(tài)；2.按一般毛細管電泳柱進樣方法進樣；3.在高壓電源7的控制下將第一～二開關(guān)K1、K2閉合，在電場的驅(qū)動下，樣品在流動相1的氛圍中沿毛細管柱A1向柱尾遷移，使試樣初步分離；4.根據(jù)設(shè)定的切換時間(5分鐘)，將第一開關(guān)K1斷開，接通第四開關(guān)K4，接通沿柱毛細管柱A1和B2電路，樣品組分經(jīng)連接件5進入到毛細管柱B2中；5.斷開第一開關(guān)K1完成毛細管柱B2的進樣過程；6.接通第三～四開關(guān)K3、K4在毛細管柱B2中以流動相2沖洗進一步完成分離，并通過檢測器6 得到檢測結(jié)果，這期間毛細管柱A1內(nèi)組分停止遷移；7.毛細管柱B2中的組分完成分離后，斷開K3并接通K1，進行下一次進樣；8.重復(fù)上述步驟，直至所有組分從毛細管柱A1和B2中流出。
定時切換與二維氣相色譜的原理相同，但不需要冷阱，切換時間可以任意選擇，經(jīng)與GC-GC(氣相色譜)相似的軟件處理后，可以得到二維分離譜圖。如圖3所示，圖中的每一列峰對應(yīng)于毛細管柱A1的分離結(jié)果，而其垂直方向的峰對應(yīng)于毛細管柱B2的分離，這種系統(tǒng)中，毛細管柱A1的檢測器6可以略去，即只采用毛細管柱B2的檢測器6檢測；為了保證每次毛細管柱B2中所有組分都能夠在下一次進樣前全部流出，由程序設(shè)計保證毛細管柱B2開啟足夠的時間，由于樣品組分在毛細管電泳柱內(nèi)的濃差擴散較GC中小很多，因此可適當加長毛細管柱B2，增加其實際柱效(相應(yīng)的分析時間加長)從而可以避免二維氣相色譜中第二維柱必須為短柱，柱效較低的缺陷。
在切換過程中，根據(jù)毛細管柱A1和B2的電滲流速率的差別，應(yīng)合理調(diào)整切換時間，(尤其在定峰切換的情況下)，以保證目標峰全部由毛細管柱A1進入毛細管柱B2中。在研究生物大分子如蛋白時，可以基本上不考慮分子擴散問題，在毛細管凝膠電泳或毛細管區(qū)帶電泳模式下的組分峰形極窄，可以方便地完成這種切換。
實施本發(fā)明對不同樣品可以任選分離模式和不同類型的檢測器，以達對目標組分實現(xiàn)高靈敏度的檢測。
實施例2與實施例1不同之處在于本實施例中毛細管柱A1，B2采用相同的毛細管凝膠電泳的分離模式，而且毛細管柱內(nèi)徑不同，并采用與之匹配的連接件5，在電場驅(qū)動下，輔助施以使樣品不會從自由毛細管柱端口流出的適當壓力，進行分離，即實現(xiàn)整體系統(tǒng)具有很大的選擇性調(diào)節(jié)靈活性。
實施例3與實施例2不同之處在于根據(jù)分離模式和實際分離的需要，本發(fā)明流動相不同，除需考慮其兼容性，每一種流動相可以不受影響地單獨調(diào)節(jié)，當毛細管柱A1和B2分離模式相同時，流動相不同的分離結(jié)果類似于特殊的臺階梯度洗脫分離，可以方便地改變臺階的長度和高度，有利于分離條件的優(yōu)化。
實施例4與實施例2不同之處在于本發(fā)明也可采用定峰切換方式，即在毛細管柱A1的檢測器6檢測到有峰出現(xiàn)后，將該峰切換到毛細管柱B2中進行分離，即對毛細管柱A1的每個目標峰進行切換；在毛細管柱A1和B2為相同的分離模式時，定峰切換與一般二維平板電泳的分離原理類似，但具有更高的柱效，分離效果更好，且操作方便，能夠采用的檢測方法更多。
相對而言，采用定峰切換較定時切換所用分析時間較少，但操作相對較復(fù)雜，對于定峰切換在沒有峰出現(xiàn)時不執(zhí)行切換操作，只是將毛細管柱A1分離的每一個完整峰引入到毛細管柱B2中進行分離。
如果毛細管柱A1和B2的峰容量分別為M和N，則這種串聯(lián)柱分離系統(tǒng)的總峰容量為M×N。
實施例5三維串聯(lián)毛細管電泳與實施例1不同之處在于采用3根毛細管柱A1、B2、C3，2個連接件5，適于較實施例1更復(fù)雜的樣品分析。如圖4所示，流路設(shè)計為串聯(lián)結(jié)構(gòu)，毛細管柱A1、C3分別通過連接件5與其對應(yīng)位置的空毛細管安裝在一起，兩個連接件5通過毛細管柱B2串聯(lián)起來，在三維串聯(lián)中，毛細管柱A1、B2、C3中可分別采用毛細管凝膠電泳、電色譜、毛細管區(qū)帶電泳的分離模式，流動相1、2、3可以在基本不受影響的情況下進行調(diào)節(jié)。
操作步驟如下1.組裝好設(shè)備，在第一～二瓶11～12、第三～四瓶21～22、第五～六瓶31～32內(nèi)分別裝入三次分離所需流動相，保持電路中所有開關(guān)處于斷開狀態(tài)；2.按一般毛細管電泳柱進樣方法進樣；3.在高壓源7的控制下將第一～二開關(guān)K1～K2閉合，第三～六開關(guān)K3～K6為斷開狀態(tài)，在電場的驅(qū)動下，樣品在流動相1的氛圍中沿毛細管柱A1向柱尾遷移，使試樣的第一步分離；4.采用定時切換方式，在設(shè)定的時間(如5分鐘)將第二開關(guān)K2斷開，接通第四開關(guān)K4，將沿毛細管柱A1和毛細管柱B2電路接通，樣品組分經(jīng)連接件5進入到毛細管柱B2中；5.斷開第一開關(guān)K1完成毛細管柱B2的進樣過程；6.接通第三、四開關(guān)K3、K4，在毛細管柱B2中以流動相2沖洗，完成第二步分離。并通過檢測儀得到檢測結(jié)果。這期間毛細管柱A1內(nèi)組分停止遷移；7.選擇定峰切換方式，在目標峰出現(xiàn)后，將第四開關(guān)K4斷開，接通第五開關(guān)K5，在第三開關(guān)K3配合下將沿毛細管柱B2和毛細管柱C3電路接通，樣品組分經(jīng)連接件5進入到毛細管柱C3中；8.斷開第三開關(guān)K3，接通第六開關(guān)K6在毛細管柱C3中以流動相3沖洗，完成最后分離，并通過檢測儀得到檢測結(jié)果；9.毛細管柱C3中的組分完成分離后，斷開第五、六開關(guān)K5、K6并接通開關(guān)K1、K2，進行下一次進樣；10.重復(fù)上述步驟6-9，直至所有組分從毛細管柱B2中流出；11.斷開K5、K6并接通K1、K2重復(fù)上述步驟3-10，直至所有組分從毛細管柱A1中流出。
毛細管柱A1、B2及B2、C3之間的切換可用不同的定峰或定時切換方式，對樣品完成三維分離。
在電泳分離過程中，電壓過高將不利于操作；電壓一定時，隨柱長的加大，場強逐漸減小，電滲及電泳速率隨之減小，也不利于分離；在三維串聯(lián)系統(tǒng)中，采用相同柱分離模式時，其結(jié)果相當于毛細管柱的加長，且避免了過高的電壓。不同毛細管電泳分離模式的相對柱效盡管很高，但由于柱長的限制，實際柱效并不能達到理想的效果。例如毛細管區(qū)帶電泳的理論塔板數(shù)可以達到500000/m，但由于所能夠?qū)嶋H采用的柱長只有0.2m，因此實際柱效只有100000/m。在不考慮連接件及切換過程對柱效影響的情況下，三維串聯(lián)系統(tǒng)的實際柱效相當于三根柱柱效的加和，而峰容量為三根柱各自峰容量的乘積。
本實施例由毛細管柱A1和B2構(gòu)成的二維系統(tǒng)可以提供相應(yīng)的三維譜圖，同樣，由毛細管柱B2和C3構(gòu)成的二維系統(tǒng)也可以提供另外的三維譜圖，通過對兩張三維譜圖的對比，并研究流動相組成的改變對峰序等的影響，可以為峰跟蹤和組分定性提供更多的信息。
三維串聯(lián)系統(tǒng)中第三維柱的另一重要作用為對樣品溶劑的置換，例如當流動相2不適于進行質(zhì)譜檢測時，可以考慮通過較短的與毛細管柱B2差別較大的毛細管柱C3進行溶劑置換，使目標組分的溶劑符合質(zhì)譜檢測的要求，此時毛細管柱C3的作用已不是為了分離，主要起到溶劑置換的作用。
本發(fā)明所述毛細管柱A1、B2、C3也可采用相同的分離模式；毛細管柱A1、B2及B2、C3之間的切換也可采用相同的切換方式；也可以對某些峰采用一維或二維分離，針對不同的樣品分離和切換模式可以任意調(diào)整。
實施例6二維并聯(lián)毛細管電泳系統(tǒng)如圖5所示，毛細管柱A1、B2和C3采用不同的分離模式，即在毛細管柱A1中采用毛細管凝膠電泳的分離模式進行初步分離，在毛細管柱B2中可以采用毛細管電色譜進行分離，而在毛細管柱C3中采用毛細管區(qū)帶電泳的分離模式。
本實施例與所述實施例1、2不同之處在于分離系統(tǒng)的流路設(shè)計的并聯(lián)形式(相當于實施例1)。如果分析的樣品性質(zhì)、結(jié)構(gòu)差別較大，首選這種模式，其中連接件5采用六通結(jié)構(gòu)，3根毛細管柱A1、B2、C3與空毛細管點對稱式與連接件5安裝在一起，在毛細管柱A1中先完成族分離后，將每一族組分分別切換到相應(yīng)的第二維柱系統(tǒng)中，進一步完成下一步分離。對于不同性質(zhì)的樣品組分可以極其方便地在毛細管柱B2上配置相應(yīng)的檢測器6，便于提高目標組分的檢測靈敏度。
分離過程如下1.在第一～二瓶11～12、第三～四瓶21～22及第五～六瓶31～32中分別裝入各自分離所需的流動相，保持電路中所有開關(guān)在斷開狀態(tài)；2.按一般的毛細管電泳方法進樣；3.在高壓源7的控制下，使第一～二開關(guān)K1和K2在閉合狀態(tài)，而第三～六開關(guān)K3～K6均為打開狀態(tài)，在電場的驅(qū)動下，樣品在流動相1的氛圍中沿毛細管柱A1向柱尾遷移，并在輸運過程中實現(xiàn)初步分離；4.采用定峰切換的方式完成對二維柱系統(tǒng)的進樣，即將毛細管柱A1中的每一個峰切換到相應(yīng)的柱系統(tǒng)中；如為了將毛細管柱A1中的第一個峰切換到毛細管柱B2中，可以在毛細管柱A1的檢測器6檢測到峰后的一定時間將第二開關(guān)K2斷開，并接通第四開關(guān)K4，這相當于沿毛細管柱A1和毛細管柱B2的電路接通，樣品組分經(jīng)連接件5進入到毛細管柱B2中；5.斷開第一開關(guān)K1，完成毛細管柱B2的進樣過程；6.接通第三開關(guān)K3，與閉合的第四開關(guān)K4配合在毛細管柱B2中以流動相2沖洗進一步完成分離，并通過檢測器6得到檢測結(jié)果；7.毛細管柱B2中的組分完成分離后，斷開第三～四開關(guān)K3、K4并接通第一～二開關(guān)K1、K2，進行下一個峰的進一步分離和檢測，如第二個峰需切換到毛細管柱C3中，可以在毛細管柱A1的檢測器6檢測到該峰后的一定時間將第二開關(guān)K2斷開，并接通第六開關(guān)K6，完成對毛細管柱C3的進樣；8.斷開第一開關(guān)K1，接通第五開關(guān)K5，在毛細管柱C3中以流動相3沖洗，完成進一步分離，并通過檢測器得到檢測結(jié)果；9.重復(fù)上述步驟，直至所有組分從毛細管柱B2和C3中流出。
本實施例毛細管柱A1與毛細管柱B2、C3在連接件中5的連接角應(yīng)盡可能接近水平，以減小柱效的損失；在切換過程中，應(yīng)保證將毛細管柱A1中的完整峰引入到毛細管柱B2中；如果毛細管柱A1、B2和C3的峰容量分別為M、N和P，而毛細管柱A1中有A個峰被引入到毛細管柱B2中，則這種并聯(lián)柱分離系統(tǒng)的總峰容量為A×N+(M-A)×P。由于本方法可以在不同固定相和流動相下操作，因此可以得到更好的分離效果，尤其對于實際生物樣品中復(fù)雜組分的分離分析。
采用這種系統(tǒng)可以首先對復(fù)雜樣品在第一維(毛細管柱A1)中進行分階處理，并在第二維中實現(xiàn)真正分離，結(jié)合多次柱內(nèi)富集技術(shù)，并對不同的組分配以相應(yīng)的檢測器，可以極大地提高檢測靈敏度，且操作方便，當由前一柱流出的組分不適于進入質(zhì)譜等檢測器分離時，通過一小的短柱可以達到改變樣品溶劑的目的，因此特別適用于與質(zhì)譜等的聯(lián)用分析，同時這種系統(tǒng)可以方便與壓力驅(qū)動系統(tǒng)配合使用，達到加快分析速度等目的。
本發(fā)明所述電壓切換也可根據(jù)需要，設(shè)計特定的切換程序，在一個實施例中采用定峰切換和定時切換混合方式切換，如先按指定的切換模式、在一定時間(3、5、8分鐘)內(nèi)定時切換，再在另一時間段根據(jù)目標峰定峰切換，實現(xiàn)分離；其設(shè)計切換程序為現(xiàn)有技術(shù)。
權(quán)利要求
1.一種立體多維多模式毛細管電泳方法，其特征在于根據(jù)流動相在毛細管電泳輸運過程中的特點，采用電壓切換切換方式，實現(xiàn)樣品特別是復(fù)雜樣品在毛細管柱中進行多維分離，以極大增加峰容量，滿足蛋白質(zhì)組等復(fù)雜體系對分離的要求；具體地說是通過電壓切換使流動相在不同流路之間切換，使樣品組分在至少2根毛細管柱中，采用不同的毛細管電泳分離模式，通過串聯(lián)、并聯(lián)或串并聯(lián)組合的流路形式，以及對應(yīng)的不同流動相組合完成分離。
2.按照權(quán)利要求1所述立體多維多模式毛細管電泳方法，其特征在于所述毛細管電泳分離模式為毛細管凝膠電泳分離模式、毛細管電色譜分離模式、毛細管等電聚焦分離模式、毛細管無膠篩分電泳分離模式、毛細管膠束電動力學(xué)色譜分離模式或毛細管區(qū)帶電泳分離模式。
3.按照權(quán)利要求1所述立體多維多模式毛細管電泳方法，其特征在于所述毛細管電泳分離模式為相同模式，以加長毛細管柱之效果，實際柱效為各柱柱效之和，總峰容量為各柱峰容量乘積。
4.按照權(quán)利要求1所述立體多維多模式毛細管電泳方法，其特征在于所述流路為通過毛細管柱的串聯(lián)、并聯(lián)或串并聯(lián)結(jié)合的連接方式，組成二維或多維毛細管電泳分析體系。
5.按照權(quán)利要求1所述立體多維多模式毛細管電泳方法，其特征在于所述柱間切換方式為定峰切換、定時切換或定峰切換和定時切換混合方式。
6.按照權(quán)利要求5所述立體多維多模式毛細管電泳方法，其特征在于所述定時切換方式為根據(jù)設(shè)定的程序、在一定的時間間隙完成相應(yīng)的切換。
7.按照權(quán)利要求5所述立體多維多模式毛細管電泳方法，其特征在于所述定峰切換方式為針對毛細管柱中樣品的目標峰進行切換，即在一個毛細管柱的檢測器檢測到組分峰后，進一步將該峰切換到下一維毛細管柱中進行分離。
8.一種按照權(quán)利要求1所述立體多維多模式毛細管電泳方法的專用裝置，其特征在于主要由至少2根毛細管柱、至少1個連接件、高壓源組成，其中用連接件進行柱間樣品輸運，其接口處連接毛細管柱和空毛細管，高壓源通過控制開關(guān)、裝有流動相的容器安裝在毛細管柱或空毛細管自由端。
9.按照權(quán)利要求8所述專用裝置，其特征在于所述連接件為零死體積交叉連接件，具有中間通路，至少四個接口，所述連接件接口的內(nèi)徑與毛細管柱的外徑匹配，其中間的通路與毛細管柱內(nèi)徑匹配。
10.按照權(quán)利要求8所述專用裝置，其特征在于所述連接件間為通過毛細管柱的串聯(lián)、并聯(lián)或串并聯(lián)組合的連接方式，組成二維或多維毛細管電泳分析系統(tǒng)。
11.按照權(quán)利要求8所述專用裝置，其特征在于采用不同類型檢測器進行毛細管柱上檢測或柱尾檢測。
12.按照權(quán)利要求11所述專用裝置，其特征在于所述檢測器采用紫外可見光度檢測器、熒光檢測器、激光誘導(dǎo)熒光檢測器、電化學(xué)檢測器之一或其組合。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種立體多維多模式毛細管電泳方法及專用裝置。它通過電壓切換使流動相在不同流路之間切換，使樣品組分在至少2根毛細管柱中，采用不同的毛細管電泳分離模式，通過串聯(lián)、并聯(lián)或串聯(lián)并聯(lián)組合的流路形式，以及不同流動相組合完成分離；其專用裝置主要由至少2根毛細管柱、至少1個連接件、高壓源組成，用連接件進行柱間樣品輸運，其接口處連接毛細管柱和空毛細管，高壓源通過控制開關(guān)、裝有流動相的容器安裝在毛細管柱或空毛細管自由端。具有柱效損失小，峰容量更大，結(jié)構(gòu)簡單、檢測靈敏度高特點。
文檔編號G01N30/00GK1395096SQ01127918
公開日2003年2月5日 申請日期2001年7月11日 優(yōu)先權(quán)日2001年7月11日
發(fā)明者張玉奎, 張維冰, 張慶合, 平貴臣 申請人:中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所