專利名稱：一種抗病毒口服液的質(zhì)量檢測方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中成藥的質(zhì)量檢測方法，特別是涉及一種抗病毒口服液的質(zhì)量檢測方法。
本發(fā)明目的是通過如下技術(shù)方案實現(xiàn)的1、抗病毒口服液的鑒別取抗病毒口服液50ml，置分液漏斗中，用乙酸乙酯振搖提取3-5次，每次20-40ml，合并乙酸乙酯液，回收乙酸乙酯，并蒸干；殘留物加5ml20-40％乙醇溶解，加于已處理好的大孔樹脂柱，用20-40％乙醇溶液150ml沖洗，洗液棄去；再用50％乙醇溶液150ml沖洗，收集洗脫液，濃縮至干，殘渣加1ml甲醇使溶解，作為供試品溶液；另取連翹甙對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液4μl、對照品溶液2μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠GF254薄層板上，以85∶10∶5氯仿—甲醇—冰乙酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1-2％香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的斑點；取抗病毒口服液40ml，加水飽和的氯仿10-20ml振搖提取2-3次，合并氯仿液，蒸干，殘渣加氯仿1ml使溶解，作為供試品溶液；另取石菖蒲對照品藥材1g，加水30-60ml，浸泡12-24h，煎煮10-30分鐘，傾出藥液，藥渣加水30-60ml煎煮10-30分鐘，合并藥液，濾過，濃縮至10ml，加水飽和的氯仿5-10ml振搖提取2-3次，合并氯仿液，蒸干，殘渣加氯仿1ml使溶解，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以6-9∶1-2石油醚—乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，放置0.5-1小時，置紫外燈下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
2、抗病毒口服液含量測定(1)菝葜皂甙元的含量測定精密量取抗病毒口服液50ml，用氯仿振搖提取2-4次，每次20-40ml，棄去氯仿液；水液用水飽和的正丁醇振搖提取2-6次，每次20-40ml，合并提取液，蒸干，殘渣加乙醇適量溶解，移至25ml容量瓶中，加乙醇至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液20ml，加鹽酸1-3ml水浴回流0.5-1小時，放冷，滴加30-60％氫氧化鈉溶液調(diào)至中性，移至50ml量瓶中，并用乙醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液15ml，蒸干，殘渣加甲苯適量使溶解，轉(zhuǎn)移至2ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；另取菝葜皂甙元對照品適量，精密稱定，加甲苯制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，精密吸取供試品溶液10μl、對照品溶液2μl與6μl，分別交叉點子同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板一上，以7-10∶0.5-2苯一丙酮為展開劑，取出，晾干，再用同一展開劑進(jìn)行二次展開，取出，晾干，噴以顯色劑，熱風(fēng)吹至斑點顯色清晰，在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定，照薄層色譜法進(jìn)行掃描，測量供試品吸收度積分值與對照品吸收度積分值，計算，即得；抗病毒口服液每支含知母以菝葜皂甙元(C27H34O11)計，不得少于0.1mg；顯色劑的制備甲液取水15-35ml，緩慢加硫酸30-70ml，放冷后，再加乙醇15-35ml，搖勻；乙液4-10％香草醛無水乙醇溶液，用時將甲液5-10份與乙液1-2份混合；(2)連翹甙的含量測定對照品溶液的制備精密稱取連翹甙對照品適量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得；
供試品溶液的制備精密量取本品25ml，置于100ml圓底燒瓶中，用氯仿30-50ml，水浴回流提取10-30分鐘，提取2-5次，每次30-50ml；合并氯仿液，水浴蒸干，用氯仿定容到5ml的容量瓶中，濾過，取續(xù)濾液2ml，加入中性氧化鋁拌勻、干燥，加到層析柱上，用60-80％的乙醇80-150ml沖洗，收集洗脫液，濃縮，殘渣加甲醇使溶解，定溶于2ml量瓶中，搖勻，作為供試品溶液；分別精密吸取對照品液10μl與供試品液10μl，注入液相色譜儀，測定，即得，每支含連翹以連翹甙計，不得少于0.05mg。
照高效液相色譜法(附錄VID)測定，VI，色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性4.6mm×25cm，10μm碳十八鍵合硅膠柱；20-30∶50-80乙腈—水為流動相；檢測波長為277nm；理論塔板數(shù)按連翹甙計應(yīng)不低于2000。
本發(fā)明質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提高的意義在于增加了抗病毒口服液中的知母藥材菝葜皂甙元的含量測定，本發(fā)明采用薄層掃描法對菝葜皂甙元進(jìn)行測定，制定出了最佳的供試品制備方法及菝葜皂甙元的合理限度，加強了對抗病毒口服液進(jìn)行量化的質(zhì)量管理。本發(fā)明改進(jìn)了抗病毒口服液中連翹甙的含量測定方法，采用高效液相色譜法代替原來的薄層掃描法對連翹甙進(jìn)行含量測定，制定出了最佳的供試品制備方法和流動相配制方法，并將連翹甙的含量由每毫升不得少3μg提高到不得少于5μg，連翹甙含量測定方法的這一改進(jìn)，不僅克服了原測定方法步驟多、時間長、有機溶劑用量大、樣品取樣量多、人為因素對試驗結(jié)果影響大的缺點，而且大大提高了連翹甙的含量限度。本發(fā)明質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)增加了對石菖蒲的定性鑒別。制定出了最佳的供試品制備方法、找到了合適的展開劑，本定性鑒別方法的建立，有利于市場上對抗病毒口服液真?zhèn)芜M(jìn)行鑒別。
實施例抗病毒口服液生產(chǎn)工藝取處方量藥材(蜂蜜、蔗糖除外)，用常水沖洗，將郁金、石菖蒲等藥材搗碎，加藥材8倍量的水浸漬1小時后加熱至沸騰，煎煮2小時同時收集揮發(fā)油乳濁液至約300ml止，備用。放料濾過，收集濾液，將藥渣加入藥材6倍量的水，煎煮2小時，放料過濾，殘渣棄去，將上述二次煎液合并，濃縮到860ml，降至室溫，加入乙醇，使含醇量達(dá)到60％，充分?jǐn)嚢?，靜置24小時，過濾，將濾液補加乙醇，使含醇量達(dá)到75％，24小時后，減壓回收乙醇，濃縮至570ml，冷藏，過濾，備用。
取蜂蜜置處理罐中，攪拌升溫到90℃-95℃時，保溫20分鐘，趁熱過濾，降至常溫，用蒸餾水調(diào)至比重為1.25-1.30備用。
取上述濃縮液570ml，加入揮發(fā)油乳濁液300ml，加蜂蜜，蔗糖適量，補加蒸餾水至1000，充分?jǐn)嚢杈鶆?，冷?4小時后離心，取上清液灌封，流通蒸氣滅菌30分鐘，即得。
鑒別取抗病毒口服液50ml，置分液漏斗中，用醋酸乙酯振搖提取3次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，蒸干；殘留物溶于30％乙醇溶液5ml中，加入已處理好的D101#，1×24cm大孔樹脂柱中，用30％乙醇溶液100m1沖洗，洗液棄去；再用50％乙醇溶液100ml洗脫，收集洗脫液，濃縮至干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取連翹苷對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述二種溶液各10μl，分別點于同一含0.3％羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠GF254薄層板上，以85∶10∶5氯仿—甲醇—冰醋酸為展開劑，展開，取出，晾干晾干，噴以1％香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；取抗病毒口服液40ml，加水飽和的氯仿振搖提取兩次，每次15ml，合并提取液，蒸干，殘渣加氯仿1ml使溶解，作為供試品溶液；另取石菖蒲對照藥材1g，加水煎煮30分鐘；濾過，濾液同供試品方法處理，作為對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述二種溶液各10μl，分別點于同一含0.3％羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上；以8∶2石油醚—醋酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干；置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點。
菝葜皂甙元的含量測定精密吸取本品50ml，置分液漏斗中，用氯仿振搖提取2次，每次30ml，棄去氯仿液；水液用水飽和的正丁醇提取5次，每次25ml，合并提取液，蒸干，殘渣加乙醇溶解，轉(zhuǎn)移置25ml量瓶中，并用乙醇稀釋至刻度，搖勻；離心，精密吸取上清液20ml，加鹽酸2ml，水浴回流1小時，放冷；用40％氫氧化鈉溶液調(diào)至中性，移至50ml量瓶中，并用乙醇稀釋至刻度；離心，精密吸取上清液15ml，蒸干，殘渣用甲苯溶解后轉(zhuǎn)移至2ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；另取菝契皂苷元對照品適量，加甲苯制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法，精密吸取供試品溶液10μl，對照品溶液2μl，6μl，分別交叉點于同一含0.3％羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以9∶1苯—丙酮為展開劑，展至7cm，取出，晾干；再用同一展開劑進(jìn)行二次展開，取出，晾干；噴以顯色劑熱風(fēng)吹至斑點顯色清晰。在薄層板上覆蓋一同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定。照薄層色譜法(《中國藥典》2000年版一部附錄VIB)進(jìn)行掃描，波長λS＝443nm，λR＝600nm，測量供試品與對照品吸收度積分值，計算，即得；每支含知母以菝契皂苷元(C27H34O11)計，不得少于0.1mg。顯色劑的制備甲液取水25ml，緩慢加硫酸50ml，放冷后，再加乙醇25ml，搖勻，乙液8％香草醛無水乙醇溶液，將甲液5份與乙液1份混合。
連翹甙的含量測定照高效液相色譜法測定，色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性，用4.6mm×25cm，10μm十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；25∶75乙晴—水為流動相；檢測波長為277nm；理論板數(shù)按連翹苷峰計算應(yīng)不低于2000；對照品溶液的制備精密稱取連翹苷對照品適量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。
供試品溶液的制備精密量取本品25ml，置于100ml圓底燒瓶中，加氯仿30ml，水浴回流提取20分鐘，共提取四次，每次30ml，合并氯仿液，水浴蒸至近干，加中性氧化鋁1g攪勻，蒸干，加于100-120目、2g、內(nèi)徑1～1.5cm中性氧化鋁柱上，用70％的乙醇溶液100ml洗脫，收集洗脫液，濃縮至干，殘渣用甲醇溶解后轉(zhuǎn)移至2ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，用0.45μm微孔濾膜濾過，即得；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得，每支含連翹以連翹苷計，不得少于0.05mg。
權(quán)利要求
1.一種抗病毒口服液的質(zhì)量檢測方法，其特征在于該方法包括取抗病毒口服液50ml，置分液漏斗中，用乙酸乙酯振搖提取3-5次，每次20-40ml，合并乙酸乙酯液，回收乙酸乙酯，并蒸干；殘留物加5ml20-40％乙醇溶解，加于已處理好的大孔樹脂柱，用20-40％乙醇溶液150ml沖洗，洗液棄去；再用50％乙醇溶液150ml沖洗，收集洗脫液，濃縮至干，殘渣加1ml甲醇使溶解，作為供試品溶液；另取連翹甙對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液4μl、對照品溶液2μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠GF254薄層板上，以85∶10∶5氯仿—甲醇—冰乙酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1-2％香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的斑點；取抗病毒口服液40ml，加水飽和的氯仿10-20ml振搖提取2-3次，合并氯仿液，蒸干，殘渣加氯仿1ml使溶解，作為供試品溶液；另取石菖蒲對照品藥材1g，加水30-60ml，浸泡12-24h，煎煮10-30分鐘，傾出藥液，藥渣加水30-60ml煎煮10-30分鐘，合并藥液，濾過，濃縮至10ml，加水飽和的氯仿5-10ml振搖提取2-3次，合并氯仿液，蒸干，殘渣加氯仿1ml使溶解，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以6-9∶1-2石油醚—乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，放置0.5-1小時，置紫外燈下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
2.如權(quán)利要求1所述的質(zhì)量檢測方法，其特征在于該方法包括取抗病毒口服液50ml，置分液漏斗中，用醋酸乙酯振搖提取3次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，蒸干；殘留物溶于30％乙醇溶液5ml中，加入已處理好的D101#，1×24cm大孔樹脂柱中，用30％乙醇溶液100ml沖洗，洗液棄去；再用50％乙醇溶液100ml洗脫，收集洗脫液，濃縮至干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取連翹苷對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述二種溶液各10μl，分別點于同一含0.3％羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠GF254薄層板上，以85∶10∶5氯仿—甲醇—冰醋酸為展開劑，展開，取出，晾干晾干，噴以1％香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；取抗病毒口服液40ml，加水飽和的氯仿振搖提取兩次，每次15ml，合并提取液，蒸干，殘渣加氯仿1ml使溶解，作為供試品溶液；另取石菖蒲對照藥材1g，加水煎煮30分鐘；濾過，濾液同供試品方法處理，作為對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述二種溶液各10μl，分別點于同一含0.3％羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上；以8∶2石油醚—醋酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干；置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點。
3.一種抗病毒口服液的質(zhì)量檢測方法，其特征在于該方法包括菝葜皂甙元的含量測定精密量取抗病毒口服液50ml，用氯仿振搖提取2-4次，每次20-40ml，棄去氯仿液；水液用水飽和的正丁醇振搖提取2-6次，每次20-40ml，合并提取液，蒸干，殘渣加乙醇適量溶解，移至25ml容量瓶中，加乙醇至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液20ml，加鹽酸1-3ml水浴回流0.5-1小時，放冷，滴加30-60％氫氧化鈉溶液調(diào)至中性，移至50ml量瓶中，并用乙醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液15ml，蒸干，殘渣加甲苯適量使溶解，轉(zhuǎn)移至2ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；另取菝葜皂甙元對照品適量，精密稱定，加甲苯制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，精密吸取供試品溶液10μl、對照品溶液2μl與6μl，分別交叉點子同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板一上，以7-10∶0.5-2苯—丙酮為展開劑，取出，晾干，再用同一展開劑進(jìn)行二次展開，取出，晾干，噴以顯色劑，熱風(fēng)吹至斑點顯色清晰，在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定，照薄層色譜法進(jìn)行掃描，測量供試品吸收度積分值與對照品吸收度積分值，計算，即得；其中，顯色劑為甲液取水15-35ml，緩慢加硫酸30-70ml，放冷后，再加乙醇15-35ml，搖勻；乙液4-10％香草醛無水乙醇溶液，用時將甲液5-10份與乙液1-2份混合；抗病毒口服液每支含知母以菝葜皂甙元計，不得少于0.1mg；連翹甙的含量測定照高效液相色譜法測定，色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性4.6mm×25cm，10μm碳十八鍵合硅膠柱；20-30∶50-80乙腈—水為流動相；檢測波長為277nm；理論塔板數(shù)按連翹甙計應(yīng)不低于2000；對照品溶液的制備精密稱取連翹甙對照品適量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得；供試品溶液的制備 精密量取本品25ml，置于100ml圓底燒瓶中，用氯仿30-50ml，水浴回流提取10-30分鐘，提取2-5次，每次30-50ml；合并氯仿液，水浴蒸至近干，加中性氧化鋁拌勻、干燥，加于層析柱上，用60-80％的乙醇80-150ml沖洗，收集洗脫液，濃縮，殘渣加甲醇使溶解，定容于2ml量瓶中，搖勻，作為供試品溶液；分別精密吸取對照品液10μl與供試品液10μl，注入液相色譜儀，測定，即得，每支含連翹以連翹甙計，不得少于0.05mg。
4.如權(quán)利要求3所述的質(zhì)量檢測方法，其特征在于該方法包括知母含量測定精密吸取本品50ml，置分液漏斗中，用氯仿振搖提取2次，每次30ml，棄去氯仿液；水液用水飽和的正丁醇提取5次，每次25ml，合并提取液，蒸干，殘渣加乙醇溶解，轉(zhuǎn)移置25ml量瓶中，并用乙醇稀釋至刻度，搖勻；離心，精密吸取上清液20ml，加鹽酸2ml，水浴回流1小時，放冷；用40％氫氧化鈉溶液調(diào)至中性，移至50ml量瓶中，并用乙醇稀釋至刻度；離心，精密吸取上清液15ml，蒸干，殘渣用甲苯溶解后轉(zhuǎn)移至2ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；另取菝契皂苷元對照品適量，加甲苯制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法，精密吸取供試品溶液10μl，對照品溶液2μl與6μl，分別交叉點于同一含0.3％羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以9∶1苯—丙酮為展開劑，展至7cm，取出，晾干；再用同一展開劑進(jìn)行二次展開，取出，晾干；噴以顯色劑，熱風(fēng)吹至斑點顯色清晰。在薄層板上覆蓋一同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定。照薄層色譜法進(jìn)行掃描，波長λS＝443nm，λR＝600nm，測量供試品與對照品吸收度積分值，計算，即得；每支含知母以菝契皂苷元計，不得少于0.1mg；顯色劑的制備甲液取水25ml，緩慢加硫酸50ml，放冷后，再加乙醇25ml，搖勻，乙液8％香草醛無水乙醇溶液，將甲液5份與乙液1份混合；連翹甙的含量測定照高效液相色譜法測定，色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性，用4.6mm×25cm，10μm十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；25∶75乙晴—水為流動相；檢測波長為277nm；理論板數(shù)按連翹苷峰計算應(yīng)不低于2000；對照品溶液的制備精密稱取連翹苷對照品適量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得；供試品溶液的制備精密量取本品25ml，置于100ml圓底燒瓶中，加氯仿30ml，水浴回流提取20分鐘，共提取四次，每次30ml，合并氯仿液，水浴蒸至近干，加中性氧化鋁1g攪勻，蒸干，加于100-120目、2g、內(nèi)徑1～1.5cm中性氧化鋁柱上，用70％的乙醇溶液100ml洗脫，收集洗脫液，濃縮至干，殘渣用甲醇溶解后轉(zhuǎn)移至2ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，用0.45μm微孔濾膜濾過，即得；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得，每支含連翹以連翹苷計，不得少于0.05mg。
5.一種抗病毒口服液的質(zhì)量檢測方法，其特征在于該方法包括取抗病毒口服液50ml，置分液漏斗中，用乙酸乙酯振搖提取3-5次，每次20-40ml，合并乙酸乙酯液，回收乙酸乙酯，并蒸干；殘留物加5ml20-40％乙醇溶解，加于已處理好的大孔樹脂柱，用20-40％乙醇溶液150ml沖洗，洗液棄去；再用50％乙醇溶液150ml沖洗，收集洗脫液，濃縮至干，殘渣加1ml甲醇使溶解，作為供試品溶液；另取連翹甙對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液4μl、對照品溶液2μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠GF254薄層板上，以85∶10∶5氯仿—甲醇—冰乙酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1-2％香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的斑點；取抗病毒口服液40ml，加水飽和的氯仿10-20ml振搖提取2-3次，合并氯仿液，蒸干，殘渣加氯仿1ml使溶解，作為供試品溶液；另取石菖蒲對照品藥材1g，加水30-60ml，浸泡12-24h，煎煮10-30分鐘，傾出藥液，藥渣加水30-60ml煎煮10-30分鐘，合并藥液，濾過，濃縮至10ml，加水飽和的氯仿5-10ml振搖提取2-3次，合并氯仿液，蒸干，殘渣加氯仿1ml使溶解，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以6-9∶1-2石油醚—乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，放置0.5-1小時，置紫外燈下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的熒光斑點；菝葜皂甙元的含量測定精密量取抗病毒口服液50ml，用氯仿振搖提取2-4次，每次20-40ml，棄去氯仿液；水液用水飽和的正丁醇振搖提取2-6次，每次20-40ml，合并提取液，蒸干，殘渣加乙醇適量溶解，移至25ml容量瓶中，加乙醇至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液20ml，加鹽酸1-3ml水浴回流0.5-1小時，放冷，滴加30-60％氫氧化鈉溶液調(diào)至中性，移至50ml量瓶中，并用乙醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液15ml，蒸干，殘渣加甲苯適量使溶解，轉(zhuǎn)移至2ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；另取菝葜皂甙元對照品適量，精密稱定，加甲苯制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，精密吸取供試品溶液10μl、對照品溶液2μl與6μl，分別交叉點子同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板一上，以7-10∶0.5-2苯一丙酮為展開劑，取出，晾干，再用同一展開劑進(jìn)行二次展開，取出，晾干，噴以顯色劑，熱風(fēng)吹至斑點顯色清晰，在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定，照薄層色譜法進(jìn)行掃描，測量供試品吸收度積分值與對照品吸收度積分值，計算，即得；其中，顯色劑為甲液取水15-35ml，緩慢加硫酸30-70ml，放冷后，再加乙醇15-35ml，搖勻；乙液4-10％香草醛無水乙醇溶液，用時將甲液5-10份與乙液1-2份混合；抗病毒口服液每支含知母以菝葜皂甙元計，不得少于0.1mg；連翹甙的含量測定照高效液相色譜法測定，色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性4.6mm×25cm，10μm碳十八鍵合硅膠柱；20-30∶50-80乙腈—水為流動相；檢測波長為277nm；理論塔板數(shù)按連翹甙計應(yīng)不低于2000；對照品溶液的制備精密稱取連翹甙對照品適量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得；供試品溶液的制備 精密量取本品25ml，置于100ml圓底燒瓶中，用氯仿30-50ml，水浴回流提取10-30分鐘，提取2-5次，每次30-50ml；合并氯仿液，水浴蒸干，用氯仿定容到5ml的容量瓶中，濾過，取續(xù)濾液2ml，加中性氧化鋁拌勻、干燥，加到層析柱上，用60-80％的乙醇80-150ml沖洗，收集洗脫液，濃縮，殘渣加甲醇使溶解，定溶于2ml量瓶中，搖勻，作為供試品溶液；分別精密吸取對照品液10μl與供試品液10μl，注入液相色譜儀，測定，即得，每支含連翹以連翹甙計，不得少于0.05mg。
6.如權(quán)利要求5所述的質(zhì)量檢測方法，其特征在于該方法包括取抗病毒口服液50ml，置分液漏斗中，用醋酸乙酯振搖提取3次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，蒸干；殘留物溶于30％乙醇溶液5ml中，加入已處理好的D101#，1×24cm大孔樹脂柱中，用30％乙醇溶液100ml沖洗，洗液棄去；再用50％乙醇溶液100ml洗脫，收集洗脫液，濃縮至干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取連翹苷對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述二種溶液各10μl，分別點于同一含0.3％羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠GF254薄層板上，以85∶10∶5氯仿—甲醇—冰醋酸為展開劑，展開，取出，晾干晾干，噴以1％香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；取抗病毒口服液40ml，加水飽和的氯仿振搖提取兩次，每次15ml，合并提取液，蒸干，殘渣加氯仿1ml使溶解，作為供試品溶液；另取石菖蒲對照藥材1g，加水煎煮30分鐘；濾過，濾液同供試品方法處理，作為對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述二種溶液各10μl，分別點于同一含0.3％羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上；以8∶2石油醚—醋酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干；置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點。菝葜皂甙元的含量測定精密吸取本品50ml，置分液漏斗中，用氯仿振搖提取2次，每次30ml，棄去氯仿液；水液用水飽和的正丁醇提取5次，每次25ml，合并提取液，蒸干，殘渣加乙醇溶解，轉(zhuǎn)移置25ml量瓶中，并用乙醇稀釋至刻度，搖勻；離心，精密吸取上清液20ml，加鹽酸2ml，水浴回流1小時，放冷；用40％氫氧化鈉溶液調(diào)至中性，移至50ml量瓶中，并用乙醇稀釋至刻度；離心，精密吸取上清液15ml，蒸干，殘渣用甲苯溶解后轉(zhuǎn)移至2ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；另取菝契皂苷元對照品適量，加甲苯制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法，精密吸取供試品溶液10μl，對照品溶液2μl，6μl，分別交叉點于同一含0.3％羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以9∶1苯—丙酮為展開劑，展至7cm，取出，晾干；再用同一展開劑進(jìn)行二次展開，取出，晾干；噴以顯色劑熱風(fēng)吹至斑點顯色清晰。在薄層板上覆蓋一同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定。照薄層色譜法(《中國藥典》2000年版一部附錄VIB)進(jìn)行掃描，波長λS＝443nm，λR＝600nm，測量供試品與對照品吸收度積分值，計算，即得；每支含知母以菝契皂苷元(C27H34O11)計，不得少于0.1mg。顯色劑的制備甲液取水25ml，緩慢加硫酸50ml，放冷后，再加乙醇25ml，搖勻，乙液8％香草醛無水乙醇溶液，將甲液5份與乙液1份混合。連翹甙的含量測定照高效液相色譜法測定，色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性，用4.6mm×25cm，10μm十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；25∶75乙晴—水為流動相；檢測波長為277nm；理論板數(shù)按連翹苷峰計算應(yīng)不低于2000；對照品溶液的制備 精密稱取連翹苷對照品適量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。供試品溶液的制備精密量取本品25ml，置于100ml圓底燒瓶中，加氯仿30ml，水浴回流提取20分鐘，共提取四次，每次30ml，合并氯仿液，水浴蒸至近干，加中性氧化鋁1g攪勻，蒸干，加于100-120目、2g、內(nèi)徑1～1.5cm中性氧化鋁柱上，用70％的乙醇溶液100ml洗脫，收集洗脫液，濃縮至干，殘渣用甲醇溶解后轉(zhuǎn)移至2ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，用0.45μm微孔濾膜濾過，即得；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得，每支含連翹以連翹苷計，不得少于0.05mg。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種抗病毒口服液的質(zhì)量檢測方法，該方法包括抗病毒口服液的鑒別以及菝葜皂甙元的含量測定、連翹甙的含量測定等步驟。該方法測定，每支含連翹以連翹甙計，不得少于0.05mg，每支含知母以菝葜皂甙元(C
文檔編號G01N33/15GK1477395SQ0212919
公開日2004年2月25日 申請日期2002年8月20日 優(yōu)先權(quán)日2002年8月20日
發(fā)明者蕭偉, 戴翔翎, 夏月, 凌婭, 詹永成, 廖正根, 劉濤, 蕭 偉 申請人:江蘇康緣藥業(yè)股份有限公司