專利名稱：一種檢測磺胺二甲嘧啶的酶聯(lián)免疫試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及獸藥殘留檢測分析技術(shù)領(lǐng)域中一種檢測磺胺二甲嘧啶的酶聯(lián)免疫試劑盒。
背景技術(shù)：
磺胺二甲嘧啶(Sulfamethazine，4-氨基苯磺酰胺)是應(yīng)用廣泛的抗菌素，由于它在體內(nèi)的作用時(shí)間和代謝時(shí)間較長，通過任何途徑攝入都有可能在人體中蓄積。藥物蓄積濃度超過一定值對人體機(jī)能是有害的。人體中磺胺地長期蓄積會(huì)導(dǎo)致磺胺藥抗藥性的產(chǎn)生，且有潛在的致癌性。因此，聯(lián)合國食品法典委員會(huì)(CAC)和許多國家規(guī)定，食品和飼料中磺胺二甲嘧啶等磺胺類物質(zhì)單個(gè)均不得超過100μg/kg。2002年12月我國農(nóng)業(yè)部公告第235號(hào)文規(guī)定在所有食品動(dòng)物的肌肉、脂肪、肝和腎中最高殘留限量為100μg/kg，并將其列為獸藥殘留監(jiān)控的重點(diǎn)。
檢測磺胺二甲嘧啶殘留量的化學(xué)方法主要有薄層色譜法(TLC)、氣相色譜法(GC)、高壓液相色譜法(HPLC)、氣-質(zhì)聯(lián)機(jī)(GC/MS)、液-質(zhì)聯(lián)機(jī)(HPLC/MS)、毛細(xì)管電泳(CE)等，由于復(fù)雜的儀器設(shè)備和繁瑣的過程，不適合現(xiàn)場監(jiān)控和大量樣本篩查。
發(fā)明創(chuàng)造內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種檢測磺胺二甲嘧啶的酶聯(lián)免疫試劑盒。
本發(fā)明所提供的檢測磺胺二甲嘧啶的酶聯(lián)免疫試劑盒，包括磺胺二甲嘧啶特異性抗體及包被的磺胺二甲嘧啶與載體蛋白偶聯(lián)物和酶標(biāo)二抗，或包被的二抗和酶標(biāo)磺胺二甲嘧啶。
其中，所述磺胺二甲嘧啶特異性抗體可為磺胺二甲嘧啶單克隆抗體或磺胺二甲嘧啶多克隆抗體，所述磺胺二甲嘧啶單克隆抗體優(yōu)選為磺胺二甲嘧啶鼠單克隆抗體，所述磺胺二甲嘧啶多克隆抗體優(yōu)選為磺胺二甲嘧啶兔多克隆抗體，以上抗體均可按常規(guī)方法制備；所述載體蛋白可為牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HSA)、卵清蛋白(OVA)、血蘭蛋白(KLH)等常用載體蛋白，所述磺胺二甲嘧啶與載體蛋白的偶聯(lián)物可通過將磺胺二甲嘧啶和載體蛋白用戊二醛法或重氮化法進(jìn)行偶聯(lián)得到；所述標(biāo)記酶可為辣根過氧化物酶或堿性磷酸酯酶，優(yōu)選為辣根過氧化物酶，辣根過氧化物酶可通過戊二醛法或過碘酸法交聯(lián)在抗體或磺胺二甲嘧啶上；所述二抗優(yōu)選為抗鼠或抗兔抗抗體。
為了更方便現(xiàn)場監(jiān)控和大量樣本篩查，所述試劑盒還包括磺胺二甲嘧啶標(biāo)準(zhǔn)溶液、顯色劑、濃縮洗滌液、終止液、濃縮復(fù)溶液。
所述濃縮洗滌液為含有0.8％-1.2％吐溫的磷酸鹽緩沖液；所述顯色劑由顯色液A液和顯色液B液組成，所述顯色液A液為過氧化氫或過氧化脲，所述顯色液B液為鄰苯二胺或四甲基聯(lián)苯胺；所述濃縮復(fù)溶液為含有0.1％-0.5％DMF的磷酸鹽緩沖液。
本發(fā)明的檢測原理為將磺胺二甲嘧啶與載體蛋白的偶聯(lián)物作為包被原吸附于固相載體上或?qū)⒖雇没蚩故蟮目箍贵w吸附于固相載體上，加入樣品和磺胺二甲嘧啶特異性抗體，當(dāng)酶標(biāo)板為磺胺二甲嘧啶與載體蛋白偶聯(lián)物包被的固相載體時(shí)，加入酶標(biāo)記二抗，當(dāng)酶標(biāo)板為抗兔或抗鼠的抗抗體包被的固相載體時(shí)，加入酶標(biāo)磺胺二甲嘧啶，待測樣品中殘留的磺胺二甲嘧啶和固相載體上包被的磺胺二甲嘧啶與載體蛋白偶聯(lián)物或酶標(biāo)磺胺二甲嘧啶競爭特異性抗體，顯色后終止，測定樣品吸光值，該值與樣品中磺胺二甲嘧啶殘留物含量呈負(fù)相關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出磺胺二甲嘧啶的含量。
本發(fā)明的檢測磺胺二甲嘧啶的酶聯(lián)免疫試劑盒主要采用間接競爭ELISA方法定性或定量檢測動(dòng)物組織、血清、尿樣、蜂蜜、牛奶及飼料等樣品中磺胺二甲嘧啶的殘留量；對樣品的前處理要求低，樣品前處理過程簡單，能同時(shí)快速檢測大批樣品；采用高特異性的磺胺二甲嘧啶單克隆抗體或多克隆抗體，主要試劑均以工作液形式提供，檢驗(yàn)方法方便易行；具有高特異性、高靈敏度、高精確度、高準(zhǔn)確度等特點(diǎn)，將在食品和飼料磺胺二甲嘧啶殘留量的檢測中發(fā)揮重要作用。


圖1為檢測磺胺二甲嘧啶的酶聯(lián)免疫試劑盒的結(jié)構(gòu)示意圖
圖2為磺胺二甲嘧啶標(biāo)準(zhǔn)曲線圖
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1、抗原及抗體的制備
(1)抗原的合成
將磺胺二甲嘧啶和人血清白蛋白(HSA)采用戊二醛法進(jìn)行偶聯(lián)得到免疫原。
將磺胺二甲嘧啶和卵清蛋白(OVA)采用戊二醛法進(jìn)行偶聯(lián)得到包被原。
(2)磺胺二甲嘧啶鼠單克隆抗體制備
動(dòng)物免疫程序采用BALB/c小鼠作為免疫動(dòng)物，以磺胺二甲嘧啶與人血清白蛋白偶聯(lián)物為免疫原，免疫劑量為80-100μg/只，首免時(shí)將抗原與等量的弗氏完全佐劑混合制成乳化劑，頸背部皮下多點(diǎn)注射，間隔2-3周取相同劑量免疫原加等量弗氏不完全佐劑混合乳化，加強(qiáng)免疫一次，四免后腹腔加強(qiáng)免疫一次，3天后取脾細(xì)胞。
細(xì)胞融合與克隆化取免疫BALB/c小鼠脾細(xì)胞，按5-10∶1比例與SP2/0骨髓瘤細(xì)胞融合，采用間接競爭ELISA測定細(xì)胞上清液，篩選陽性孔。利用有限稀釋法對陽性孔進(jìn)行克隆化，直到得到穩(wěn)定分泌單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株。
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇 取處于對數(shù)生長期的雜交瘤細(xì)胞用凍存液制成1×106-5×106個(gè)/mL的細(xì)胞懸液，分裝于凍存管，在液氮中長期保存。復(fù)蘇時(shí)取出凍存管，立即放入37℃水浴中速融，離心去除凍存液后，移入培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)。
單克隆抗體的制備與純化采用體內(nèi)誘生法，將BALB/c小鼠(8周齡)腹腔注入滅菌石蠟油0.5ml/只，7-14天后腹腔注射雜交瘤細(xì)胞5×105-106個(gè)/只，7-10天后采集腹水。經(jīng)辛酸-飽和硫酸銨法進(jìn)行腹水純化，小瓶分裝，-20℃保存。
(3)磺胺二甲嘧啶兔多克隆抗體的制備
采用新西蘭大白兔作為免疫動(dòng)物，以磺胺二甲嘧啶與人血清白蛋白偶聯(lián)物為免疫原，免疫劑量為1mg/kg.b.w.，首免時(shí)將免疫原與等量的弗氏完全佐劑混合制成乳化劑，頸背部皮下多點(diǎn)注射，間隔3-4周取相同劑量免疫原加等量弗氏不完全佐劑混合乳化，加強(qiáng)免疫一次，共免疫5次，最后一次不加佐劑。最后一次免疫7-10d后采血，測定血清抗體效價(jià)，頸動(dòng)脈放血，經(jīng)硫酸銨分級(jí)沉淀得到純化的多克隆抗體。
(4)二抗的制備
以羊作為免疫動(dòng)物，以鼠或兔IgG為免疫原進(jìn)行免疫，得到羊抗鼠或羊抗兔抗抗體。
實(shí)施例2、檢測磺胺二甲嘧啶的酶聯(lián)免疫試劑盒
(1)檢測磺胺二甲嘧啶的酶聯(lián)免疫試劑盒的結(jié)構(gòu)
試劑盒的結(jié)構(gòu)如圖1所示，主要由盒體1、鋁膜真空包裝96孔/40孔酶標(biāo)板2、6瓶磺胺二甲嘧啶系列濃度標(biāo)準(zhǔn)品3、酶標(biāo)記物工作液4、磺胺二甲嘧啶抗體工作液5、底物顯色液A液6、底物顯色液B液7、終止液8、濃縮洗滌液9、濃縮復(fù)溶液10和泡沫托架11，泡沫托架11上制有凹孔，上述試劑瓶3-10安放在泡沫托架的凹孔內(nèi)，泡沫托架11及酶標(biāo)板2安放在盒體內(nèi)。其中酶標(biāo)板2由塑料支架和可拆分的塑料條組成。
(2)所用試劑的配制
a.磺胺二甲嘧啶標(biāo)準(zhǔn)溶液磺胺二甲嘧啶系列標(biāo)準(zhǔn)溶液6瓶，1-3ml/瓶。
b.包被緩沖液pH9.6，0.05mol/L的碳酸鹽緩沖液。
c.封閉液3-10％小牛血清。
d.濃縮洗滌液含0.8％-1.2％吐溫的磷酸鹽緩沖液(0.01M pH7.4)，為正常使用濃度的15-25倍，30-50ml/瓶，1瓶。
e.磺胺二甲嘧啶抗體工作液將抗體稀釋成蛋白濃度為0.5-5.0μg/L使用，5-8ml/瓶，1瓶。
f.酶標(biāo)記物工作液酶標(biāo)記抗鼠或抗兔的抗抗體稀釋液，5-8ml/瓶，1瓶；或酶標(biāo)記抗原稀釋液，5-8ml/瓶，1瓶。
g.底物顯色液A液過氧化氫或過氧化脲，5-8ml/瓶，1瓶。
h.底物顯色液B液鄰苯二胺(OPD)或四甲基聯(lián)苯胺(TMB)，5-8ml/瓶，1瓶。
i.終止液1-2mol/L硫酸或鹽酸，5-8ml/瓶，1瓶。
j.濃縮復(fù)溶液含有0.1％-0.5％DMF的磷酸鹽緩沖液，30-50ml/瓶，1瓶。為正常使用濃度的2-3倍。
(3)酶標(biāo)板的制備
酶標(biāo)板有兩種，一種是磺胺二甲嘧啶與卵清蛋白偶聯(lián)物包被的酶標(biāo)板，另一種是二抗包被的酶標(biāo)板，其制備方法如下
磺胺二甲嘧啶與卵清蛋白偶聯(lián)物包被的酶標(biāo)板制備方法
用包被緩沖液將磺胺二甲嘧啶與卵清蛋白偶聯(lián)物稀釋成0.1-1μg/ml，每孔加入100μl，37℃溫育2h，4℃過夜，傾去包被液，用洗滌液洗滌3次，每次30秒，拍干，然后在每孔中加入150-200μl封閉液，37℃溫育1-2h，傾去孔內(nèi)液體，干燥后用鋁膜真空密封保存。
二抗包被的酶標(biāo)板制備方法
用包被緩沖液將抗兔或抗鼠抗抗體稀釋成0.1-1μg/ml，每孔加入100μl，37℃溫育2h，4℃過夜，傾去包被液，用洗滌液洗滌3次，每次30秒，拍干，然后在每孔中加入150-200μl封閉液，37℃溫育1-2h，傾去孔內(nèi)液體，干燥后用鋁膜真空密封保存。
實(shí)施例3、檢測樣品中殘留的磺胺二甲嘧啶
(1)樣品前處理
動(dòng)物組織稱取5g勻漿物，加乙腈水溶液混合，3000g以上速度離心10min，上清液再次離心。取3ml上清液，加入水和乙酸乙酯靜置分層。上層液用氮?dú)獯蹈苫?0℃減壓蒸干，用1ml復(fù)溶液溶解干燥的殘留物，加入異辛烷振蕩，離心，除去上層液，取下層液50μl進(jìn)行分析。
血清3000g離心5min，取上層液50μl進(jìn)行分析。
飼料稱取飼料1g，加甲醇-水溶液，超聲波提取30min，取3ml上層液氮?dú)獯蹈?，殘留物?ml復(fù)溶液溶解，取50μl進(jìn)行分析。
尿樣3000g離心5min，取上層液50μl進(jìn)行分析。
蜂蜜取2ml蜂蜜加入4ml重蒸水溶解，加入乙酸乙酯振蕩10min，離心10min，取1ml上層液氮?dú)獯蹈?，殘留物用?fù)溶液溶解，取50μl進(jìn)行分析。
牛奶用復(fù)溶液10倍稀釋，取50μl進(jìn)行分析。
(2)檢測方法
可用磺胺二甲嘧啶與卵清蛋白偶聯(lián)物包被的酶標(biāo)板和二抗包被的酶標(biāo)板兩種酶標(biāo)板進(jìn)行檢測
用磺胺二甲嘧啶與卵清蛋白偶聯(lián)物包被的酶標(biāo)板檢測
向磺胺二甲嘧啶與卵清蛋白偶聯(lián)物包被的96孔酶標(biāo)板微孔中加系列標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣品溶液(各2孔)50μl，然后加入磺胺二甲嘧啶鼠單克隆抗體工作液50μl，用蓋板膜封板，37℃恒溫箱中反應(yīng)30min。倒出孔中液體，每孔加入250μl洗滌液，30秒后倒出孔中液體，用吸水紙拍干，如此重復(fù)操作共洗板5次。加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的羊抗鼠抗抗體工作液100μl，用蓋板膜封板，37℃恒溫箱中反應(yīng)1h。取出酶標(biāo)板，如前述洗板5次。每孔加入底物顯色液A液50μl，再加B液50μl，輕輕振蕩混勻，37℃恒溫箱避光顯色15-30min。每孔加入終止液50μl，輕輕振蕩混勻，用酶標(biāo)儀測定每孔吸光度值(OD值)。
用二抗包被的酶標(biāo)板檢測
向羊抗鼠抗抗體包被的96孔酶標(biāo)板微孔中加系列標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣品溶液50μl，然后加入磺胺二甲嘧啶鼠單克隆抗體工作液50μl，再加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的磺胺二甲嘧啶工作液100μl，用蓋板膜封板，37℃恒溫箱中反應(yīng)1h。倒出孔中液體，每孔加入250μl洗滌液，30秒后倒出孔中液體，用吸水紙拍干，如此重復(fù)操作共洗板5次。每孔加入底物顯色液A液50μl，再加B液50μl，輕輕振蕩混勻，37℃恒溫箱避光顯色15～30min。每孔加入終止液50μl，輕輕振蕩混勻，用酶標(biāo)儀，測定每孔吸光度值(OD值)。
本實(shí)施例所用的試劑均按照實(shí)施例2中的試劑配制方法進(jìn)行配制。
(3)結(jié)果分析
所獲得的每個(gè)濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣本吸光度值的平均值(B)除以第一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)(0標(biāo)準(zhǔn))的吸光度值(B0)再乘以100，即百分吸光度值。
公式中B為標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣本溶液的平均吸光度值，B0為0μg/L標(biāo)準(zhǔn)溶液的平均吸光度值。以磺胺二甲嘧啶濃度(μg/L)的自然對數(shù)值為X軸，百分吸光度值為Y軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖，如圖2所示。相對應(yīng)每一個(gè)樣品的濃度(μg/L)可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出。也可以用回歸方程法，計(jì)算出樣本溶液濃度。利用計(jì)算機(jī)專業(yè)軟件，更便于大量樣品的快速分析。
根據(jù)酶標(biāo)板上的樣品顏色的深淺，與系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液顏色的比較可判斷樣品的濃度范圍。
實(shí)施例4、試劑盒靈敏度、特異性、精密度、準(zhǔn)確度和保存期試驗(yàn)
(1)試劑盒靈敏度試驗(yàn)
50％抑制濃度(既IC50，指0標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度值的50％處所對應(yīng)的藥物濃度)常作為評價(jià)競爭ELISA試劑盒靈敏度的指標(biāo)。分別測定20次標(biāo)準(zhǔn)曲線的50％抑制濃度，確定該試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線IC50應(yīng)在1.7-4.2μg/L的范圍之內(nèi)。分別測定20份雞肉、雞肝、豬肉、豬肝、血清、牛奶、尿樣、蜂蜜和飼料的空白樣品及20份磺胺二甲嘧啶0標(biāo)準(zhǔn)品，并將測定平均值加3倍標(biāo)準(zhǔn)差作為最低檢測限。結(jié)果判定該試劑盒對磺胺二甲嘧啶0標(biāo)準(zhǔn)品最低檢測限為1.0μg/L。對空白樣品的最低檢測限均小于2.0μg/L。
(2)試劑盒特異性試驗(yàn)
選擇與磺胺二甲嘧啶類似結(jié)構(gòu)和類似功能的7種磺胺藥物測定交叉反應(yīng)率。通各種藥物的標(biāo)準(zhǔn)曲線分別得到其50％抑制濃度。用下式計(jì)算試劑盒對其它藥物的交叉反應(yīng)率。交叉反應(yīng)率愈小，表明試劑盒的特異性愈高。
試劑盒的特異性
試劑盒特異性試驗(yàn)結(jié)果如表所示，結(jié)果表明該試劑盒對其它7種磺胺類藥物的交叉反應(yīng)率均＜12％，說明該試劑盒針對磺胺二甲嘧啶特異性高，可保證對動(dòng)物源食品及飼料中磺胺二甲嘧啶殘留檢測結(jié)果的可靠性。
(3)試劑盒精密度試驗(yàn)
標(biāo)準(zhǔn)可重復(fù)性
從三批酶聯(lián)板中，每板各抽出20個(gè)微孔，測定同一濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度值(OD值)，重復(fù)測定10次，計(jì)算變異系數(shù)。變異系數(shù)范圍在2.6-9.3％。
樣品可重復(fù)性
取不同濃度的磺胺二甲嘧啶標(biāo)樣，添加到樣品中，分別取三個(gè)不同批次的試劑盒各三個(gè)，每個(gè)濃度重復(fù)5次。分別計(jì)算板內(nèi)，批內(nèi)，批間變異系數(shù)。肝臟的變異系數(shù)均低于9.8％，肌肉的變異系數(shù)均低于9.6％，血清、尿樣、蜂蜜和牛奶的變異系數(shù)均低于7.5％，飼料的變異系數(shù)均低于7.6％。
(4)試劑盒的準(zhǔn)確度
取4個(gè)濃度的磺胺二甲嘧啶標(biāo)樣，對樣品進(jìn)行添加回收試驗(yàn)，每個(gè)濃度設(shè)4個(gè)平行，分別計(jì)算回收率。豬肉為56.2％-96.3％，豬肝為55.6％-105.0％，雞肉為60.1％-119.0％，雞肝為59.6％-112.0％。血清、尿樣、蜂蜜、牛奶和飼料的添加回收率均在60.0-110.0％范圍內(nèi)。
(5)試劑盒保存期試驗(yàn)
試劑盒保存條件為2-8℃，經(jīng)過6個(gè)月的測定，試劑盒的最大吸光度值(零標(biāo)準(zhǔn))、50％抑制濃度、磺胺二甲嘧啶添加實(shí)際測定值均在正常范圍之內(nèi)?？紤]在運(yùn)輸和使用過程中，會(huì)有非正常保存條件出現(xiàn)，將試劑盒在37℃保存的條件下放置6天，進(jìn)行加速老化實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明該試劑盒各項(xiàng)指標(biāo)完全符合要求?？紤]到試劑盒冷凍情況發(fā)生，將試劑盒放入-20℃冰箱冷凍5天，測定結(jié)果也表明試劑盒各項(xiàng)指標(biāo)完全正常。從以上結(jié)果可得出試劑盒可以在2-8℃至少可以保存6個(gè)月以上。
權(quán)利要求
1、一種檢測磺胺二甲嘧啶的酶聯(lián)免疫試劑盒，包括磺胺二甲嘧啶特異性抗體及包被的磺胺二甲嘧啶與載體蛋白的偶聯(lián)物和酶標(biāo)二抗，或包被的二抗和酶標(biāo)磺胺二甲嘧啶。
2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的酶聯(lián)免疫試劑盒，其特征在于所述試劑盒還包括磺胺二甲嘧啶標(biāo)準(zhǔn)溶液、顯色劑、濃縮洗滌液、終止液、濃縮復(fù)溶液。
3、根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的酶聯(lián)免疫試劑盒，其特征在于所述磺胺二甲嘧啶特異性抗體為磺胺二甲嘧啶單克隆抗體或磺胺二甲嘧啶多克隆抗體。
4、根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的酶聯(lián)免疫試劑盒，其特征在于所述載體蛋白為牛血清白蛋白、人血清白蛋白、卵清蛋白、血蘭蛋白。
5、根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的酶聯(lián)免疫試劑盒，其特征在于所述標(biāo)記酶為辣根過氧化物酶或堿性磷酸酯酶。
6、根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的酶聯(lián)免疫試劑盒，其特征在于所述二抗為抗鼠或抗兔抗抗體。
7、根據(jù)權(quán)利要求2所述的酶聯(lián)免疫試劑盒，其特征在于所述濃縮洗滌液為含有0.8％-1.2％吐溫的磷酸鹽緩沖液。
8、根據(jù)權(quán)利要求2所述的酶聯(lián)免疫試劑盒，其特征在于所述顯色劑由顯色液A液和顯色液B液組成，所述顯色液A液為過氧化氫或過氧化脲，所述顯色液B液為鄰苯二胺(OPD)或四甲基聯(lián)苯胺(TMB)。
9、根據(jù)權(quán)利要求2所述的酶聯(lián)免疫試劑盒，其特征在于所述濃縮復(fù)溶液為含有0.1％-0.5％DMF的磷酸鹽緩沖液。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種檢測磺胺二甲嘧啶的酶聯(lián)免疫試劑盒。本發(fā)明所提供的檢測磺胺二甲嘧啶的酶聯(lián)免疫試劑盒，包括磺胺二甲嘧啶特異性抗體及包被的磺胺二甲嘧啶與載體蛋白的偶聯(lián)物和酶標(biāo)二抗，或包被的二抗和酶標(biāo)磺胺二甲嘧啶。本發(fā)明的檢測磺胺二甲嘧啶的酶聯(lián)免疫試劑盒能同時(shí)快速檢測大批樣品；主要試劑均以工作液形式提供，檢驗(yàn)方法方便易行；具有高特異性、高靈敏度、高精確度、高準(zhǔn)確度等特點(diǎn)，將在動(dòng)物性食品和飼料磺胺二甲嘧啶殘留量的檢測中發(fā)揮重要作用。
文檔編號(hào)G01N33/543GK1547013SQ20031011706
公開日2004年11月17日 申請日期2003年12月8日 優(yōu)先權(quán)日2003年12月8日
發(fā)明者沈建忠, 史為民, 何方洋, 何繼紅, 江海洋, 張素霞, 丁雙陽 申請人:中國農(nóng)業(yè)大學(xué)