專利名稱：一種中藥制劑的質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥制劑的質(zhì)量控制方法，特別涉及復(fù)方丹參顆粒質(zhì)量控制方法。
背景技術(shù)：
復(fù)方丹參顆粒是由藥典收載品種復(fù)方丹參片改變劑型而來，臨床上用于冠心病的治療，有較好的效果。該方配伍精簡合理，為使服用的藥物迅速發(fā)揮療效，我們將以前的片劑通過采用新型輔料及新的成型工藝成功開發(fā)了“復(fù)方丹參顆粒”這一新劑型。該產(chǎn)品具有活血化瘀，芳香開竅，理氣止痛的功能，使用該藥物能迅速發(fā)揮療效，用于治療胸中憋悶、心絞痛。
現(xiàn)有的該制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中含量測定項使用薄層掃描法對該品種的有效成分丹參酮IIA進(jìn)行含量控制，在標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行過程中按該法測定樣品中丹參酮IIA，結(jié)果重現(xiàn)性較差，不能很好的控制成品質(zhì)量。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于公開復(fù)方丹參顆粒的質(zhì)量控制方法。
本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的含量測定照高效液相色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI D)測定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；70-90∶10-25甲醇-水為流動相，檢測波長為270nm，理論板數(shù)按丹參酮IIA計算應(yīng)不低于2000；對照品溶液的制備精密稱取丹參酮IIA對照品適量，加甲醇制成每1ml含80μg的溶液，即得；供試品溶液的制備取復(fù)方丹參顆粒約1g，精密稱定，精密加入甲醇25ml，稱定重量，超聲處理10-25分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，用微孔濾膜濾過，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
本發(fā)明質(zhì)量控制方法對產(chǎn)品的質(zhì)量控制更為有效，較原方法精密度、靈敏度、穩(wěn)定性均較高。
下述實驗例進(jìn)一步說明本發(fā)明。
實驗例1提取條件的選擇根據(jù)丹參酮IIA易溶于甲醇等有機(jī)溶劑和丹參酮IIA不穩(wěn)定的性質(zhì)，實驗選用超聲提取。分別用甲醇超聲5、10、15、20、25分鐘，結(jié)果表明超聲時間為15分鐘的效果比較好。在實驗中，分別以甲醇、80％甲醇、50％甲醇為溶劑，超聲處理15分鐘，結(jié)果表明以甲醇處理樣品測定效果最佳，且甲醇提取的雜質(zhì)少，可更好保護(hù)色譜柱。因此本方法采用以甲醇作為提取溶劑。
表1 超聲時間的選擇(批號030303)超聲時間 丹參酮IIA含量(mg/g)5分鐘 2.9610分鐘3.0415分鐘3.3720分鐘3.3425分鐘3.33表2 提取溶劑的選擇(批號030303)提取溶劑 丹參酮IIA含量(mg/g)甲醇 3.3780％甲醇 2.9350％甲醇 0.192色譜條件考察2.1流動相的選擇 以《中國藥典》2000版一部復(fù)方丹參片含量測定項下提供的流動相為參考，實驗選用甲醇和水的四種不同配比的流動相進(jìn)行考察，其比例分別為75∶25、80∶20、82∶18、85∶15結(jié)果表明，四種不同配比的流動相中，甲醇∶水(82∶18)分離效果最好，樣品分離度、拖尾因子均符合規(guī)定。
2.2色譜條件及系統(tǒng)適應(yīng)性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相∶甲醇-水(82∶18)；檢測波長270nm；流速1ml/min；溫度室溫；理論板數(shù)按丹參酮IIA峰計算應(yīng)不低于2000(參照中國藥典2000年版復(fù)方丹參片的含量測定)。丹參酮IIA對照品(批號0766-200011中國藥品生物制品檢定所提供，供含量測定用)；甲醇為色譜純，其他試劑均為分析純。
2.3對照品溶液的制備精密稱取丹參酮IIA對照品適量，加甲醇制成每1ml含80μg的溶液，即得。
2.4供試品溶液的制備取裝量差異項下的內(nèi)容物，研細(xì)，取約1g，精密稱定，精密加入甲醇25ml，稱定重量，超聲處理15分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，即得。
3方法學(xué)考察3.1線性關(guān)系對照品儲備液的制備精密稱取丹參酮IIA5.15mg置10ml的量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，作為儲備液(0.515mg/ml)。
對照品溶液的制備分別精密吸取上述儲備液0.2、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0ml置5.0ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。照高效液相色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VID)測定峰面積，結(jié)果見表3，以色譜峰峰面積為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
表3 線性關(guān)系考察表C(μg/ml) 20.641.2 82.4 123.6164.8206.0A(峰面積) 786373 1595287 3147302 4620177 6216641 7893287標(biāo)準(zhǔn)曲線方程y＝37996x-810.57r＝1由回歸方程可見，丹參酮IIA量在20.6～206μg/ml范圍內(nèi)，色譜峰峰面積與濃度之間有良好的線性關(guān)系。
3.2陰性對照試驗取處方藥材(去除丹參)按標(biāo)準(zhǔn)工藝制備陰性對照樣品。將制備的樣品按含量測定項下操作，結(jié)果表明樣品中其他組分對該法丹參酮IIA含量測定無干擾。
3.3穩(wěn)定性試驗取樣品，按含量測定方法制備供試品溶液，分別于第0、2、6、12、24小時依法進(jìn)行測定，結(jié)果見表4。
表4 穩(wěn)定性試驗考察表(丹參酮IIA)測定時間(小時) 0 2 6 1224丹參酮IIA峰面積 5355015 5316051 5286784 5365213 5340252平均峰面積 5332663RSD0.59％結(jié)果表明，供試品溶液在24小時內(nèi)穩(wěn)定性較好。
3.4精密度試驗取丹參酮IIA對照品溶液(41.2μg/ml)，按照高效液相色譜法連續(xù)進(jìn)樣五次，每次10μl，進(jìn)行精密度考察，結(jié)果見表5。
表5 精密度試驗結(jié)果序號 1 23 4 5峰面積1594966 1595608 1591665 1591859 1592424平均峰面積1593304RSD 0.12％結(jié)果表明，本法精密度良好。
3.5重復(fù)性試驗分別取同一樣品(批號030301)約1g，精密稱定五份，按含量測定方法測定，結(jié)果見表6。
表6 重復(fù)性試驗結(jié)果序號 1 2 3 4 5樣品重量(g) 1.0195 1.0339 1.00870.99730.9969峰面積 562904356455295516219 5441537 5437944含量(mg/袋) 3.61 3.57 3.58 3.57 3.57平均含量(mg/袋)3.58RSD0.48％結(jié)果表明，本法重復(fù)性良好。
3.6加樣回收試驗精密稱取已知含量的樣品(批號030301 3.58mg/g)五份，分別加入一定量丹參酮IIA標(biāo)準(zhǔn)品，按含量測定方法測定，結(jié)果見表7
表7 加樣回收試驗結(jié)果序號 1 2 3 4 5取樣量(g) 0.5206 0.53010.53640.51400.5438丹參酮IIA含量(mg) 1.86 1.90 1.92 1.84 1.95標(biāo)準(zhǔn)品加入量(mg) 2.24 2.24 2.30 2.32 2.30測得丹參酮IIA量(mg)4.08 4.10 4.20 4.13 4.22回收率(％) 99.1 98.2 99.1 98.7 98.7平均回收率(％) 98.8RSD 0.38％平均回收率98.8％，RSD0.38％，加樣回收試驗結(jié)果表明本法準(zhǔn)確性較高。
3.7十批樣品的含量測定按含量測定方法對十批樣品進(jìn)行了含量測定，結(jié)果見表8表8 十批樣品的含量測定結(jié)果 下述實施例均能達(dá)到上述實驗例的效果。
實施例1復(fù)方丹參顆粒處方丹參浸膏645g 三七423g 冰片24g制法以上三味，丹參浸膏系取丹參提取三次，第一次加乙醇回流1.5小時，濾過，濾液回收乙醇，濃縮至相對密度為1.30(55-60℃)；第二次加50％乙醇回流1.5小時，濾過；第三次加水回流2小時，濾過，合并第二、三次濾液，回收乙醇，濃縮至相對密度為1.40(55-60℃)，與第一次的濃縮液合并，混勻，制成相對密度為1.35-1.39(55℃)的浸膏。將三七粉碎成細(xì)粉，與丹參浸膏拌勻，干燥，制成顆粒，將冰片用無水乙醇溶解后，均勻地噴霧于顆粒上，制成1000g，即得。
質(zhì)量控制方法鑒別(1)取本品3g，置適宜器皿中，加熱升華，取所得白色升華物，加乙醇0.5ml使溶解，作為供試品溶液。另取冰片對照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB))驗，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點于同一以0.5％羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以苯-氯仿-丙酮(5∶4∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。
(2)取本品1g，研細(xì)，加甲醇30ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水15ml使溶解，加乙醚提取2次，每次20ml，棄去乙醚液，水液加0.1mol/L氫氧化鈉溶液飽和的正丁醇提取2次，每次25ml，合并正丁醇液，用正丁醇飽和的0.1mol/L氫氧化鈉溶液洗滌2次，每次20ml，再用水20ml洗滌，棄去堿液及水液，正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取人參皂苷Rb1，Rg1及三七皂苷R1對照品，加甲醇制成每1ml各含1.5mg的混合溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各4μl，分別點于同一以0.5％羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正丁醇-醋酸乙酯-水(4∶1∶5)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，于100℃烘約10分鐘。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。
(3)取本品1g，研細(xì)，加乙醚5ml，置具塞試管中，振搖5分鐘，再放置1小時，濾過，濾液揮干，殘渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作為供試品溶液。另取丹參對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液。再取丹參酮IIA對照品，加醋酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000版一部附錄VIB)試驗，吸取上述三種溶液各5μl，分別點于同一以0.5％羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以苯-醋酸乙酯(19∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的暗紅色斑點。
含量測定照高效液相色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI D)測定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；82∶18甲醇-水為流動相，檢測波長為270nm，理論板數(shù)按丹參酮IIA計算應(yīng)不低于2000；對照品溶液的制備精密稱取丹參酮IIA對照品適量，加甲醇制成每1ml含80μg的溶液，即得；供試品溶液的制備取裝量差異項下的內(nèi)容物，研細(xì)，取約1g，精密稱定，精密加入甲醇25ml，稱定重量，超聲處理15分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本品每袋含丹參以丹參酮IIA(C19H18O3)計，不得少于2.5mg。
權(quán)利要求
1.一種復(fù)方丹參顆粒劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法中的含量測定方法為照高效液相色譜法測定，色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；70-90∶10-25甲醇-水為流動相，檢測波長為270nm，理論板數(shù)按丹參酮IIA計算應(yīng)不低于2000；對照品溶液的制備精密稱取丹參酮IIA對照品適量，加甲醇制成每1ml含80μg的溶液，即得；供試品溶液的制備取復(fù)方丹參顆粒約1g，精密稱定，精密加入甲醇25ml，稱定重量，超聲處理10-25分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，用微孔濾膜濾過，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
2.如權(quán)利要求1所述的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法中為流動相的甲醇-水的比例為82∶18。
3.如權(quán)利要求1所述的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法中超聲處理15分鐘，微孔濾膜選用0.45μm。
全文摘要
本發(fā)明公開了復(fù)方丹參顆粒質(zhì)量控制方法，該方法采用照高效液相色譜法測定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；70－90∶10－25甲醇－水為流動相，檢測波長為270nm，理論板數(shù)按丹參酮II
文檔編號G01N30/00GK1556405SQ20041000034
公開日2004年12月22日 申請日期2004年1月9日 優(yōu)先權(quán)日2004年1月9日
發(fā)明者肖偉, 戴翔翎, 凌婭, 沈靜, 鐘裔榮, 劉小東, 肖 偉 申請人:江蘇康緣藥業(yè)股份有限公司