專利名稱：體外排除急性冠狀動脈綜合征的診斷方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及在存在胸痛并懷疑有風險的患者中體外排除急性冠狀動脈綜合征(ACS)(通常稱為心肌梗死(MI))的診斷方法，根據(jù)所述方法，將基于樣品來定量選自肌鈣蛋白、CK-MB和肌紅蛋白的至少一種心臟標記物的濃度與定量D-二聚體的濃度相聯(lián)合。
心肌梗死最通常是由于冠狀動脈的突發(fā)閉塞性血栓形成而引起的，導(dǎo)致心肌或多或少廣泛的區(qū)域的缺血性壞死。這種由于血栓引起的急性冠狀動脈閉塞最通常與粥樣斑裂開或破裂相關(guān)。
心肌梗死是在短期或中期具有重大死亡風險的疾病，并構(gòu)成發(fā)病率在全世界仍然很高的絕對的心臟急癥。心肌梗死最通常表現(xiàn)為在夜間或休息時，在胸骨后于胸部突然出現(xiàn)的劇烈疼痛。這種疼痛類似于心絞痛。在實踐中，必須盡快將患急性胸痛的患者轉(zhuǎn)移至急救中心或ED(Emergency Department)，在其中患者在入院后進行一系列檢查和分析，包括患者的病史研究、心電圖和心臟標記物(如肌鈣蛋白和/或CK-MB和/或肌紅蛋白)的含量測定。然而，心臟的酶、CK-MB和肌紅蛋白的含量測定具有對病理狀態(tài)無特異性的缺點，在提出診斷之前，執(zhí)業(yè)醫(yī)生需要進行其他專門檢查，例如連續(xù)性心電圖，成像技術(shù)如心臟多普勒回波描記術(shù)和冠狀動脈造影術(shù)。不是所有的醫(yī)院都能提供這些專門檢查，并且很少是全天24小時的。對于肌鈣蛋白的含量測定，由于在心肌梗死時，在肌鈣蛋白濃度升高之前可能經(jīng)過數(shù)小時，并且由于肌鈣蛋白在血液中僅在胸痛開始6小時之后才可檢測到，因此根據(jù)NACB的建議[“NACB Laboratory Medicine Practice GuidelinesCharacteristics and Utilization of Biochemical Markers in ACSand Heart Failure，CLINICALACUTE CORONARY SYNDROMES-Chapter1，2004”]，在第一次肌鈣蛋白含量測定后4至6小時內(nèi)需要再次進行肌鈣蛋白含量測定，以從具有正常心電圖的患者中排除心肌梗死。
因此，目前實在需要建立非常早期的策略，所述策略用于在他們進入急救中心時排除懷疑具有急性冠狀動脈綜合征的患者。新的策略使得能夠限制產(chǎn)生額外費用的另外的酶含量測定和/或補充的檢查，從而防止浪費時間、改善患者舒適度并任選地根據(jù)其病理狀態(tài)將患者引入的正確的科室。事實上，診斷越早，對患者的處理就越好。在這種方法中，靈敏度和陰性預(yù)報值是最重要的參數(shù)。
在專利申請US 6,309,888中提出了通過以下研究來區(qū)分冠狀動脈綜合征的急性和非急性期(1)第一標記物，如經(jīng)丙二醛修飾的LDL，其超過預(yù)定水平的存在表明對存在ACS急性期的非常高的診斷精確度(即ROC或“觀測者操作特征(Receiver OperatingCharacteristics)”曲線以下的面積為至少0.875)，其后(2)第二標記物，如氧化的LDL，其高于預(yù)定水平的存在表明對存在ACS的非常高的診斷精確度，(2’)或第三標記物，如肌鈣蛋白I，其高于預(yù)定水平的存在表明對存在ACS急性期的高診斷精確度(即ROC或“觀測者操作特征”曲線以下的面積為至少0.70)，(2”)或上文定義的第二和第三標記物。
令人吃驚地，申請人發(fā)現(xiàn)，基于來自存在胸痛的患者的液體樣品，將定量選自肌鈣蛋白、CK-MB和肌紅蛋白的至少一種心臟標記物的濃度與定量D-二聚體的濃度相聯(lián)合，使得能夠以高靈敏度和高陰性預(yù)報值(可達約100％)排除急性冠狀動脈綜合征的診斷，這使得能夠同時降低檢查費用和時間，和加快澄清區(qū)別性診斷的步伐。
因此，本發(fā)明的涉及基于來自懷疑具有風險的患者的液體樣品來排除急性冠狀動脈綜合征的體外診斷方法，根據(jù)所述方法-定量所述樣品中選自肌鈣蛋白、CK-MB和肌紅蛋白的至少一種心臟標記物的濃度，-定量所述樣品中D-二聚體的濃度，-將樣品中所述心臟標記物的濃度與預(yù)定的閾濃度進行比較，-將樣品中D-二聚體的濃度與預(yù)定的D-二聚體閾濃度進行比較，和
-確定樣品中所述心臟標記物的濃度和D-二聚體的濃度是否分別低于預(yù)定的所述心臟標記物閾濃度和預(yù)定的D-二聚體閾濃度；應(yīng)該理解，所述心臟標記物濃度的定量和D-二聚體濃度的定量可依次進行并且不依賴于順序，或者同時進行，如基于定量肌鈣蛋白濃度和定量D-二聚體濃度的實施例而在下文中更詳細解釋的。
根據(jù)本發(fā)明的方法，當心臟標記物和D-二聚體的濃度低于預(yù)定的閾濃度時，就可排除患者患有急性冠狀動脈綜合征。
在本發(fā)明的一個實施方案中，-定量所述樣品中肌鈣蛋白的濃度，-定量所述樣品中D-二聚體的濃度，-將樣品中肌鈣蛋白的濃度與預(yù)定的肌鈣蛋白閾濃度進行比較，-將樣品中D-二聚體的濃度與預(yù)定的D-二聚體閾濃度進行比較，和-確定樣品中肌鈣蛋白的濃度和D-二聚體的濃度是否分別低于預(yù)定的肌鈣蛋白閾濃度和預(yù)定的D-二聚體閾濃度。
根據(jù)本發(fā)明的方法，可以基于來自存在胸痛的患者的液體樣品來排除ACS診斷，其靈敏度和陰性預(yù)報值高于當患者在急救中心時心臟標記物(如肌鈣蛋白)的單獨的起始含量測定的性能水平。
事實上，目前盡管已經(jīng)改善了新一代肌鈣蛋白測試的性能水平，但靈敏度和陰性預(yù)報值并未達到鄰近100％的值。
可以通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何用于測定液體樣品中標記物濃度的方法來進行所述心臟標記物和D-二聚體的濃度的定量。優(yōu)選地，使用至少一種對所述心臟標記物或?qū)-二聚體具有特異性的抗體，或者至少一種對所述心臟標記物具有特異性的抗體片段，來進行這種定量。優(yōu)選地，使用至少一種單克隆抗體，例如抗肌鈣蛋白單克隆抗體。優(yōu)選地，使用至少一種抗D-二聚體抗體或至少一種抗D-二聚體抗體片段來進行D-二聚體的定量。優(yōu)選地，使用至少一種抗D-二聚體單克隆抗體。
特別地，術(shù)語“抗體片段”指天然抗體的F(ab)2、Fab、Fab’或sFv片段[Blazar等人，1997，Journal of Immunology 1595821-5833，和Bird等人，1988，Science 242423-426]。
在說明書的以下部分中以及在權(quán)利要求書中，“抗體”這一通稱用于不加區(qū)分地表示單克隆抗體、單特異性多克隆抗體或抗體片段。
在本發(fā)明方法的一個實施方案中，定量樣品中心臟標記物(優(yōu)選肌鈣蛋白)的濃度，然后定量樣品中D-二聚體的濃度。
在本發(fā)明方法的第二個實施方案中，定量樣品中D-二聚體的濃度，然后定量樣品中心臟標記物(如肌鈣蛋白)的濃度。
在本發(fā)明方法的第三個實施方案中，同時定量樣品中心臟標記物(如肌鈣蛋白)的濃度和D-二聚體的濃度。在此實施方案中，(i)可以將相應(yīng)于上文所給出的定義的至少一種抗心臟標記物抗體(例如抗肌鈣蛋白抗體)和至少一種抗D-二聚體抗體固定在同一固相上，所述固相可以由管、細帶或錐形漏斗構(gòu)成(參見如由申請人銷售的VIDASHIV DUO(參考號30 114)測試原則)，或者(ii)將至少一種抗心臟標記物抗體(例如抗肌鈣蛋白)固定在一固相上，將至少一種抗D-二聚體抗體固定在另一固相上，所述抗體相應(yīng)于上文給出的定義，并且所述固相可以由管、細帶、錐形漏斗或顆粒構(gòu)成。
本發(fā)明還涉及用于定量液體樣品中選自肌鈣蛋白、CK-MB和肌紅蛋白的至少一種心臟標記物濃度的試劑以及用于定量液體樣品中D-二聚體濃度的試劑的用途，所述試劑用于排除急性冠狀動脈綜合征的體外診斷。
在本發(fā)明的一個實施方案中，所述用于定量所述心臟標記物濃度的試劑為至少一種相應(yīng)于前面所給出的定義的抗體，和所述用于定量D-二聚體濃度的試劑為至少一種相應(yīng)于前面所給出的定義的抗體。優(yōu)選地，試劑之一為抗肌鈣蛋白抗體，另一試劑為抗D-二聚體抗體。
液體樣品為可能含有所述心臟標記物和所述D-二聚體的人體的任何液體樣品。優(yōu)選地，其選自血清、血漿和血液。
肌鈣蛋白是橫紋肌的蛋白質(zhì)組分之一。它由參與肌肉收縮的三個亞基I、T和C形成。肌鈣蛋白I和肌鈣蛋白T使得能夠區(qū)分心肌壞死和骨骼肌損傷。肌鈣蛋白的三種亞型之一，肌鈣蛋白Ic，顯示無交叉反應(yīng)的心臟特異性。在本發(fā)明的方法中，定量肌鈣蛋白T的濃度或肌鈣蛋白I的濃度，優(yōu)選定量肌鈣蛋白Ic的濃度。
肌酸激酶(CK)是由稱為M和B的兩個亞基組成的二聚體，這兩個亞基相組合而給出三種同工酶CK-BB、CK-MB和CK-MM。這三種同工酶位于細胞質(zhì)中，每種的分子量約為82,000道爾頓。正常成人血清中的CK主要由同工酶CK-MM組成，僅有痕量的CK-MB。以在大多數(shù)CK含量測定中的檢測極限，血清中一般不存在同工酶CK-BB。在血清中檢測到顯著量的CK-MB通常指示具有ACS。然而，在患有除ACS以外的病癥的患者血清中也發(fā)現(xiàn)了CK-MB。
肌紅蛋白是來自肌細胞血紅素的低分子量蛋白質(zhì)。它構(gòu)成了不可逆的細胞壞死的標記物，其血清水平在梗死開始后在早期升高。其非常短的半衰期使得其能夠密切反映梗死的進展。在正常受試者群體中，血肌紅蛋白水平(myoglobinémie)為6至85ng/ml。診斷閾值設(shè)定在70和90ng/ml之間。在MI病程中，肌紅蛋白在第2和第4小時之間出現(xiàn)，峰值在第9和第12小時之間出現(xiàn)。在峰值后7至20小時它仍可檢測到。假陰性的比例取決于入院與胸痛開始之間的時間間隔，在第4小時以前為45％至67％。肌紅蛋白存在于生物體的所有橫紋肌中。因此，假陽性是由于心臟復(fù)蘇、外部電震、肌內(nèi)注射和某些肌病。升高一般相對不顯著，這種情況經(jīng)常使得能夠鑒定它們。在腎機能不全的情況下和在引起腎小球濾過作用降低的任何狀況(如進行性心機能不全)中肌紅蛋白水平也升高。年齡、體重和性別對血肌紅蛋白水平幾乎沒有影響。同樣，鍛煉后血肌紅蛋白水平一般保持正常。
D-二聚體是纖維蛋白降解的產(chǎn)物，具有非常異質(zhì)的組成的可溶性片段，由兩種同時發(fā)生的現(xiàn)象而產(chǎn)生-在凝血酶與凝血因子XIIIa的作用之后，纖維蛋白原凝固成穩(wěn)定的纖維蛋白，-通過纖溶酶將纖維蛋白凝塊消化成釋放進血液循環(huán)的可溶性片段。凝塊裂解的終產(chǎn)物是D-二聚體。
在血栓形成狀態(tài)的所有標記物中，D-二聚體是能真正證明存在穩(wěn)定的纖維蛋白的唯一標記物。
所述心臟標記物(特別是肌鈣蛋白)和D-二聚體可以使用本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的各種免疫測定原則來進行定量，例如ELISA、ELFA、乳膠凝集、比濁法、顆粒比濁法(turbidimétrie avec desparticules)、濁度法、顆粒濁度法(néphélométrie avec desparticules)或其他適當方法。這些原則和其他方法描述于例如“Laborund Diagnose”，L.Thomas(編者)，TH-Books VerlagsgesellschaftmbH，F(xiàn)rankfurt，1998，第60章；或者“Laboratory Techniques inBiochemistry and Molecular Biology，-An introduction toRadioimmunoassay and Related Techniques”T.Chard(編者)，Elsevier，Amsterdam，1987。
因此，基于選自ELISA、ELFA、比濁法、濁度法、顆粒比濁法、顆粒濁度法和乳膠凝集的測試，通過免疫測定法彼此獨立地進行樣品中所述心臟標記物(特別是肌鈣蛋白)濃度的定量以及D-二聚體濃度的定量。
閾濃度值可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員基于熟知的方法對心臟標記物(如肌鈣蛋白)和D-二聚體各自進行定義。例如，對于D-二聚體可以應(yīng)用以下方法對于來自大量例如通過成像而被診斷為ACS陽性的患者的樣品以及大量來自ACS陰性個體的樣品測定D-二聚體濃度；基于各種不同的閾值對得到的結(jié)果進行評估，并保留使得能夠排除ACS陰性而不排除ACS陽性的閾濃度值。閾濃度值可以根據(jù)用于D-二聚體含量測定的技術(shù)和試劑盒而變化。此方法也可應(yīng)用于心臟標記物。
對于肌鈣蛋白的具體情況，按照國際推薦來確定閾值，并且必須相應(yīng)于參考對照群體的第99百分位數(shù)[“NACB Laboratory MedicinePractice GuidelinesCharacteristics & Utilization ofBiochemical Markers in ACS and Heart Failure，CLINICALACUTECORONARY SYNDROMES-第1章，2004”]。閾濃度值也可以根據(jù)用于肌鈣蛋白含量測定的技術(shù)和試劑盒而變化。
本發(fā)明的優(yōu)選但非限制性的實施方案是如上文所述用于在懷疑具有風險的患者中排除急性冠狀動脈綜合征的體外診斷的方法，其中采用0.1μg/l的閾濃度值，在諸如VIDAS儀器的裝置上，使用夾心免疫酶方法來測試肌鈣蛋白，優(yōu)選肌鈣蛋白Ic。
本發(fā)明的另一個優(yōu)選但非限制性的實施方案是如上文所述用于在懷疑具有風險的患者中排除急性冠狀動脈綜合征的體外診斷的方法，其中采用250ng/ml的閾濃度值，在諸如VIDAS儀器的裝置上，使用夾心免疫酶方法來測試D-二聚體。
通過在6個月中對于來自急救中心的119名胸痛患者所進行的前瞻性研究驗證了如上文所述的用于排除ACS的體外診斷的方法。本發(fā)明的方法使得能夠以非常高的靈敏度和非常高的陰性預(yù)報值來排除心肌壞死診斷，所述靈敏度和陰性預(yù)報值高于當患者在急救中心時單獨的肌鈣蛋白含量測定的性能水平。
下文更詳細地并基于唯一的附圖
描述了本發(fā)明的方法，該唯一的附圖顯示了用于評估肌鈣蛋白Ic和D-二聚體的組合用途并用于將患者診斷為排除在ACS之外的算法。這些詳細內(nèi)容無論如何不應(yīng)理解為以任何方式限制了本發(fā)明。
實施例材料和方法在急救中心中選擇了存在胸痛的119名連續(xù)的患者(88男，31女)。在該研究中平均年齡為59歲，上下差距為13歲。對所有患者制作心電圖。在VIDAS儀器(bioMérieux)上，在不同的時間，用VIDASD-Dimer New試劑盒(bioMérieux)和VIDASTroponin I(TNI)試劑盒(bioMérieux)來測試采集自這些患者的新鮮血漿樣品。
在該研究中，時間T0相應(yīng)于胸痛的出現(xiàn)，時間T1相應(yīng)于患者到達急救中心時第一樣品的采集，時間T2相應(yīng)于T1加上6小時。根據(jù)新的國際推薦(正常群體的第99百分位數(shù))，肌鈣蛋白I的閾值設(shè)置為0.1μg/l以排除心肌梗死。確定D-二聚體的最佳閾值以排除心肌梗死。使用Analyse-It軟件建立D-二聚體的ROC(“觀測者操作特征”)曲線，以預(yù)測心肌梗死。用于排除心肌梗死的D-二聚體ROC曲線給出250ng/ml的最佳閾值(尤登指數(shù)(Index de Youden)14.3％，靈敏度88.5％，特異性25.8％；曲線下面積0.60)。
在唯一的附圖中描述了用于評估肌鈣蛋白Ic和D-二聚體的組合使用的算法，其中DDi＝D-二聚體，TnI＝肌鈣蛋白I，MI＝心肌梗死，UA＝不穩(wěn)定型心絞痛，SA＝穩(wěn)定型心絞痛。
從該圖中可以看出，如果在時間T1處肌鈣蛋白Ic的濃度高于0.1μg/l并且如果在時間T1處D-二聚體的濃度低于250ng/ml，則不能排除心肌梗死。如果在時間T1處肌鈣蛋白Ic的濃度低于0.1μg/l并且如果在時間T1處D-二聚體的濃度低于250ng/ml，則按照本發(fā)明方法可以排除心肌梗死。
靈敏度和特異性
討論26名患者(22％)被診斷為MI陽性。在這些患者中，僅有一名在時間T1處具有陰性的肌鈣蛋白和D-二聚體。然而，關(guān)于在T1處為肌鈣蛋白和D-二聚體陰性的其他25名患者，他們的肌鈣蛋白在T2處仍為陰性。使用上文定義的算法，一旦得到在時間T1處所進行的肌鈣蛋白和D-二聚體含量測定的結(jié)果，就可在MI方面將群體的21％(25/119)從急救中心排除。
與僅使用肌鈣蛋白得到的結(jié)果相比，與肌鈣蛋白陰性結(jié)果相聯(lián)合的D-二聚體陰性結(jié)果(＜250ng/m1)改善了在時間T1處的診斷靈敏度，從46.2％至96.2％。使用這兩種測試的組合，在時間T1處獲得的靈敏度與使用單獨肌鈣蛋白含量測定在時間T2處獲得的靈敏度相等。
肌鈣蛋白與D-二聚體的含量測定的聯(lián)合是這樣一種組合，其允許以非常高的靈敏度和陰性預(yù)報值，在急救中心中非常早地排除懷疑具有MI風險的患者。
權(quán)利要求
1.基于來自懷疑具有風險的患者的液體樣品來排除急性冠狀動脈綜合征的體外診斷方法，根據(jù)所述方法-定量所述樣品中選自肌鈣蛋白、CK-MB和肌紅蛋白的至少一種心臟標記物的濃度，-定量所述樣品中D-二聚體的濃度，-將樣品中所述心臟標記物的濃度與預(yù)定的閾濃度進行比較，-將樣品中D-二聚體的濃度與預(yù)定的D-二聚體閾濃度進行比較，和-確定樣品中所述心臟標記物的濃度和D-二聚體的濃度是否分別低于預(yù)定的所述心臟標記物閾濃度和預(yù)定的D-二聚體閾濃度。
2.權(quán)利要求1的方法，根據(jù)所述方法-定量所述樣品中肌鈣蛋白的濃度，-定量所述樣品中D-二聚體的濃度，-將樣品中肌鈣蛋白的濃度與預(yù)定的肌鈣蛋白閾濃度進行比較，-將樣品中D-二聚體的濃度與預(yù)定的D-二聚體閾濃度進行比較，和-確定樣品中肌鈣蛋白的濃度和D-二聚體的濃度是否分別低于預(yù)定的肌鈣蛋白閾濃度和預(yù)定的D-二聚體閾濃度。
3.權(quán)利要求2的方法，根據(jù)所述方法-定量所述樣品中肌鈣蛋白的濃度，然后-定量所述樣品中D-二聚體的濃度，-將樣品中肌鈣蛋白的濃度與預(yù)定的肌鈣蛋白閾濃度進行比較，-將樣品中D-二聚體的濃度與預(yù)定的D-二聚體閾濃度進行比較，和-確定樣品中肌鈣蛋白的濃度和D-二聚體的濃度是否分別低于預(yù)定的肌鈣蛋白閾濃度和預(yù)定的D-二聚體閾濃度。
4.權(quán)利要求2的方法，根據(jù)所述方法-定量所述樣品中D-二聚體的濃度，然后-定量所述樣品中肌鈣蛋白的濃度，-將樣品中肌鈣蛋白的濃度與預(yù)定的肌鈣蛋白閾濃度進行比較，-將樣品中D-二聚體的濃度與預(yù)定的D-二聚體閾濃度進行比較，和-確定樣品中肌鈣蛋白的濃度和D-二聚體的濃度是否分別低于預(yù)定的肌鈣蛋白閾濃度和預(yù)定的D-二聚體閾濃度。
5.權(quán)利要求2的方法，根據(jù)所述方法-同時定量所述樣品中肌鈣蛋白的濃度和D-二聚體的濃度，-將樣品中肌鈣蛋白的濃度與預(yù)定的肌鈣蛋白閾濃度進行比較，-將樣品中D-二聚體的濃度與預(yù)定的D-二聚體閾濃度進行比較，和-確定樣品中肌鈣蛋白的濃度和D-二聚體的濃度是否分別低于預(yù)定的肌鈣蛋白閾濃度和預(yù)定的D-二聚體閾濃度。
6.權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的方法，其中所述液體樣品選自血清、血漿和血液。
7.權(quán)利要求1的方法，其中通過免疫測定法彼此獨立地進行樣品中所述心臟標記物濃度的定量和D-二聚體濃度的定量。
8.權(quán)利要求2的方法，其中通過免疫測定法彼此獨立地進行樣品中肌鈣蛋白濃度的定量和D-二聚體濃度的定量。
9.權(quán)利要求7的方法，其中基于選自ELISA、ELFA、比濁法、濁度法、顆粒比濁法、顆粒濁度法和乳膠凝集的測試，彼此獨立地進行樣品中所述心臟標記物濃度的定量和D-二聚體濃度的定量。
10.權(quán)利要求8的方法，其中基于選自ELISA、ELFA、比濁法、濁度法、顆粒比濁法、顆粒濁度法和乳膠凝集的測試，彼此獨立地進行樣品中肌鈣蛋白濃度的定量和D-二聚體濃度的定量。
11.用于定量液體樣品中選自肌鈣蛋白、CK-MB和肌紅蛋白的至少一種心臟標記物濃度的試劑以及用于定量液體樣品中D-二聚體濃度的試劑在排除急性冠狀動脈綜合征的體外診斷中的用途。
12.權(quán)利要求11的用途，其中所述用途為用于定量液體樣品中肌鈣蛋白濃度的試劑以及用于定量液體樣品中D-二聚體濃度的試劑在排除急性冠狀動脈綜合征的體外診斷中的用途。
13.權(quán)利要求11的用途，其中所述試劑之一為至少一種心臟標記物的至少一種抗體，所述試劑中另一為至少一種抗D-二聚體抗體。
14.權(quán)利要求12的用途，其中所述試劑之一為至少一種抗肌鈣蛋白抗體，所述試劑中另一為至少一種抗D-二聚體抗體。
15.權(quán)利要求11至14中任一項的用途，其中所述液體樣品選自血清、血漿和血液。
全文摘要
本發(fā)明涉及用于體外排除急性冠狀動脈綜合征(ACS)的診斷方法，根據(jù)該方法，將定量在樣品中選自肌鈣蛋白、CK－MB和肌紅蛋白的至少一種心臟標記物的濃度與定量D－二聚體的濃度相聯(lián)合；還涉及用于定量至少一種所述心臟標記物的濃度的試劑和用于定量D－二聚體的濃度的試劑在排除急性冠狀動脈綜合征的體外診斷中的用途。
文檔編號G01N33/68GK101040187SQ200580034742
公開日2007年9月19日 申請日期2005年10月10日 優(yōu)先權(quán)日2004年10月11日
發(fā)明者E·博納富瓦, G·洛維 申請人:拜奧默里克斯公司