專利名稱：：治療慢性前列腺炎的中藥組合物的質量控制方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及一種中藥組合物的質量控制方法，更特別的是關于一種治療慢性前列腺炎的中藥組合物的質量控制方法。
背景技術：
：前列腺疾病是男性泌尿生殖系常見病，主要包括前列腺炎、前列腺增生及前列腺癌。男性的大多數(shù)一生都要不同程度的受到前列腺疾病的困擾，其中尤以慢性前列腺炎為多見。在20-65歲的男性中均有發(fā)現(xiàn)，22-40歲男子發(fā)病率高，發(fā)病趨勢呈年輕化發(fā)展?？股刂委?，是臨床上治療前列腺炎的常用方法。從理論上講，抗生素只對急性細菌性前列腺炎和慢性細菌性前列腺炎有效。而對非細菌性前列腺炎無效，而且濫用抗生素易導致細菌的耐藥性。中醫(yī)認為該病病因為體內濕熱過盛，積于腎與膀胱，膀胱氣化不利所致，治療上要清熱利濕，通利水道，佐以化瘀通竅，病即可逐漸好轉。但由于質量控制不科學，導致其質量參差不齊，因此發(fā)明一種療效確切，質量穩(wěn)定，療效可靠的中藥制劑是必要并且可行的。
發(fā)明內容本發(fā)明的目的是提供一種提取完全、專屬性強、重現(xiàn)性好、回收率符合要求的治療慢性前列腺炎的中藥組合物質量控制方法，使藥物安全有效，提高藥品質量，便于藥品的標準化、現(xiàn)代化生產。本發(fā)明這-目的將通過下列詳細描述和說明來進一步體現(xiàn)和闡述。本發(fā)明根據(jù)以上發(fā)明目的，該中藥組合物是由金錢草、綿萆蘇、瞿麥、黃柏、三七、桃仁、川楝子、烏藥、牛膝組成，該中藥組合物是通過薄層鑒別方法和含量測定方法進行質量控制，使其更好的發(fā)揮藥效，該方法包括下列a、b、c、d四種檢測中的至少一種檢測a.綿萆蘚的定性檢測取該中藥組合物，加乙醇，置水浴上回流，取上清液，加鹽酸，加熱回流后濃縮，加水，用環(huán)己垸振搖提取，提取液蒸干，殘渣加三氯甲垸使溶解，作為供試品溶液；取綿萆蘚對照藥材，制成對照藥材溶液；取薯蕷皂苷元對照品，制成對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液、對照藥材溶液及對照品溶液，分別點于同一硅膠G薄層板上，以展開劑展開，取出，晾干，噴以磷鉬酸試液，在105'C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材、對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；b.黃柏的定性檢測取該中藥組合物，加甲醇，超聲處理，濾過，濾液濃縮，作為供試品溶液；取黃柏對照藥材，制成對照藥材溶液；7取鹽酸小檗堿對照品，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各，分別點于同一硅膠G薄層板上，以展開劑展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的黃色熒光斑點；c.三七的定性檢測取該中藥組合物，加甲醇超聲處理，靜置，取上清液，蒸干，殘渣加水使溶解，加10%氫氧化鈉溶液，搖勻，用水飽和正丁醇振搖提取，正丁醇液，加水洗滌，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘渣加水使溶解，通過大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，棄去水液，再用70%乙醇洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇使溶解，作為供試品溶液;取三七對照藥材，制成對照藥材溶液。取人參皂苷Rgi及三七皂苷Ri對照品，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各，分別點于同一硅膠G薄層板上，以展開劑展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105'C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材、對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；d.金錢草的定量檢測照高效液相色譜法測定；對照品溶液的制備精密稱取槲皮素對照品及山奈素對照品適量，制成含槲皮素和山奈素的溶液，即得；供試品溶液的制備取裝量差異項下的該中藥組合物，研細，取約5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入2%鹽酸甲醇溶液，密塞，稱定重量，加熱回流，放冷，再稱定重量，用2%鹽酸甲醇溶液補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀，測定，即得；該藥物每lg含金錢草以槲皮素(C15Hu07)和山奈素的總量計，不得少于0.20mg。該中藥組合物通過薄層鑒別方法和含量測定方法的進一步優(yōu)選進行質量控制，該方法包括下列a、b、c、d四種檢測中的至少一種檢測a.綿萆蘚的定性檢測取該中藥組合物5g，加乙醇20ml，置水浴上回流40分鐘，取上清液10ml，加鹽酸lml，加熱回流1小時后濃縮至約5ml，加水10ml，用環(huán)己烷20ml振搖提取，提取液蒸干，殘渣加三氯甲垸2ml使溶解，作為供試品溶液。另取綿萆蘚對照藥材2g，同法制成對照藥材溶液。再取薯蕷皂苷元對照品，加甲醇制成每lml含5mg的溶液，作為對照品溶液。照中國藥典2005年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液5W、對照藥材及對照品溶液各2W，分別點于同一硅膠G薄層板上，以8:2環(huán)己烷一乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以磷鉬酸試液，在105'C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材、對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。b.黃柏的定性檢測8取該中藥組合物2g，加甲醇20ml，超聲處理15分鐘，濾過，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液。另取黃柏對照藥材0.lg，同法制成對照藥材溶液。再取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每lml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照中國藥典2005年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2W，分別點于同一硅膠G薄層板上，以io:6:i:i乙酸乙酯一丁酮一甲酸一水為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的黃色熒光斑點。c.三七的定性檢測取該中藥組合物2g，加甲醇20ml,超聲處理30分鐘，靜置，取上清液10ml，蒸干，殘渣加水25ml使溶解，加1(^氫氧化鈉溶液5ml，搖勻，用水飽和正丁醇振搖提取2次，每次30ml，合并正丁醇液，加水洗滌2次，每次40ml，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘渣加水3ml使溶解，通過D101型大孔吸附樹脂柱，40—60目，濕法裝柱，內徑lcm，長25cm，小玻璃柱內，待樹脂沉淀，覆以脫脂棉少許，再添加棉花少許輕壓，用水沖洗并用水浸沒備用。先用水50ml洗脫，棄去水液，再用70X乙醇25ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液。另取三七對照藥材0.5g，同法制成對照藥材溶液。再取人參皂苷f^及三七皂苷R對照品，加甲醇制成每lml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照中國藥典2005年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各5W，分別點于同一硅膠G薄層板上，以4:1:5正丁醇一乙酸乙酯一水的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105'C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材、對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。d.金錢草的定量檢測照中國藥典2005年版一部附錄VID高效液相色譜法測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以48:52甲醇-O.4%磷酸溶液為流動相；檢測波長為360nm。理論板數(shù)按槲皮素峰計算應不低于2500。對照品溶液的制備精密稱取槲皮素對照品及山奈素對照品適量，加甲醇制成每lml各含槲皮素15Pg,山奈素20lig的溶液，即得。供試品溶液的制備取裝量差異項下的該中藥組合物，研細，取約5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入2。/。鹽酸甲醇溶液50ml，密塞，稱定重量，加熱回流l小時，放冷，再稱定重量，用2%鹽酸甲醇溶液補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測定，即得。該中藥組合物每lg含金錢草以槲皮素(dsHn07)和山奈素(d孔。06)的總量計，不得少于0.20mg。其中該中藥組合物的組方配比可以是:金錢草500-1000克綿萆蘚500-1000克霍麥300-1000克黃柏300-1000克三七180-1000克桃仁450-1000克川楝子450-1000克烏藥600-1000克牛膝400-1000克。該中藥組合物的組方優(yōu)選配比可以是金錢草680克綿萆蘚850克瞿麥330克黃柏880克三七200克桃仁468克川楝子520克烏藥740克牛膝630克。該中藥組合物的組方還可以是金錢草300-500克綿萆蘚300-500克霍麥150-300克黃柏200-300克三七30-55克桃仁150-300克川楝子200-300克烏藥150-250克牛膝200-300克。該中藥組合物的組方配比優(yōu)選是金錢草420克綿萆蘚420克瞿麥210克黃柏250克三七42克桃仁210克川楝子250克烏藥210克牛膝250克。該中藥組合物顆粒劑的制備方法可以是A、取金錢草、綿萆蘚和黃柏加乙醇回流提取，過濾，合并醇提液，放置過夜，再次過濾得乙醇溶液；B、取瞿麥、桃仁、川楝子、烏藥和牛膝，加水煎煮，過濾，濃縮至相對密度為1.151.20，放涼，加酒精使含醇量達70%，冷藏過夜，抽濾，得濾液；C、取三七切碎烘干粉碎過100目篩，得三七粉；將(B)步驟得到的濾液與(A)步驟得到的乙醇溶液合并，回收乙醉，濃縮，減壓干燥，得干浸膏，粉碎，過100目篩，加入(C)步驟得到的三七粉及適量常規(guī)輔料，混勻，制粒，干燥，共制成顆粒劑。該中藥組合物顆粒劑的制備方法優(yōu)選是A、取金錢草、綿萆蘚和黃柏加70%乙醇回流提取2-5次，每次l-2小時，加醇量為藥材量的4-7倍，過濾，合并醇提液，放置過夜，再次過濾得乙醇溶液；10B、取瞿麥、杉fe仁、川楝子、烏藥和牛膝，加水煎煮2-4次，每次0.5-1.5小時，加水量為藥材的6-10倍，過濾，濃縮至相對密度為1.151.20，放涼，加酒精使含醇量達70%，冷藏過夜，抽濾，得濾液；C、取三七切碎烘干粉碎過IOO目篩，得三七粉；將(B)步驟得到的濾液與(A)步驟得到的乙醇溶液合并，回收乙醇，濃縮，減壓干燥，得干浸膏，粉碎，過100目篩，加入(C)步驟得到的三七粉及糊精或淀粉，甜葉菊苷15g，混勻，用乙醇制粒，干燥，共制成顆粒劑。該中藥組合物顆粒劑的制備方法最優(yōu)選是A、取金錢草、綿萆蘚和黃柏加70%乙醇回流提取2次，每次2小時，加醇量為藥材量的6倍，過濾，合并醇提液，放置過夜，再次過濾得乙醇溶液；B、取瞿麥、桃仁、川楝子、烏藥和牛膝，加水煎煮3次，每次1小時，加水量為藥材的8倍，過濾，濃縮至相對密度為1.151.20，放涼，加酒精使含醇量達70%，冷藏過夜，抽濾，得濾液；C、取三七切碎烘干粉碎過IOO目篩，得三七粉；將(B)步驟得到的濾液與(A)步驟得到的乙醇溶液合并，回收乙醇，濃縮，減壓干燥，得干浸膏，粉碎，過100目篩，加入(C)步驟得到的三七粉及糊精或淀粉，甜葉菊苷15g，混勻，用乙醇制粒，干燥，制成顆粒劑。以下通過具體實施例來進一步說明本發(fā)明，但實施例僅用于說明，并不能限制本發(fā)明的范圍。具體實施例方式實驗例l:鑒別試驗篩選——綿萆蘚的鑒別(A)供試品溶液的制備方法(1)取本品5g，加乙醇20ml，置水浴上回流40分鐘，取上清液10ml，加鹽酸lml，加熱回流1小時后濃縮至約5ml，加水10ml，用環(huán)己烷20ml振搖提取，提取液蒸干，殘渣加三氯甲垸2ml使溶解，作為供試品溶液。(2)取本品5g，加乙醇20ml，置水浴上回流40分鐘，取上清液10ml，加鹽酸lml，加熱回流1小時后濃縮至約5ml，用乙醚20ml振搖提取，提取液蒸干，殘渣加三氯甲垸2nd使溶解，作為供試品溶液。(3)取本品5g，加甲醇50ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加水25ml使溶解，用乙醚25ml洗滌，棄去乙醚液，水液加鹽酸2ml，加熱回流1J小時，放冷，用乙醚振搖提取2次，每次25ml，合并乙醚液，揮干，殘渣加三氯甲垸lml使溶解，作為供試品溶液。(B)展開劑的選擇(1)三氯甲垸一丙酮(9:1)(2)環(huán)己垸一乙酸乙酯(8:2)另取綿萆蘚對照藥材2g，同法制成對照藥材溶液。再取薯蕷皂苷元對照品，加甲醇制成每lml含5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取供試品溶液5W、對照藥材及對照品溶液各2W，分別點于同一硅膠G薄層板上，展開劑展開，取出，晾干，噴以磷鉬酸試液，在105'C加熱檢視。表l綿萆蘚的鑒別試驗結果編號AB展開效果顏色拖尾干擾111不清晰——212清晰無無321不清晰一一422清晰無有531清晰無有632不清晰一—注"一"表示無內容，下同根據(jù)以上實驗結果，得出選用AA為綿萆蘚的鑒別試驗方法。實驗例2:鑒別試驗篩選——黃柏的鑒別供試品溶液的制備方法(1)取本品2g，加甲醇20ml，超聲處理15分鐘，濾過，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液。(2)取本品2g，加甲醇20ml，水浴回流15分鐘，濾過，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液。(B)展開劑的選擇(1)乙酸乙酯一丁酮一甲酸一水(io:6:i:i)(2)正丁醇一冰醋酸一水(7:1:2)另取黃柏對照藥材0.lg，同法制成對照藥材溶液。再取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每lml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述三種溶液各2W，分別點于同一硅膠G薄層板上，以展開劑展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。表2黃柏的鑒別試驗結果編號AB展開效果顏色拖尾干擾111不清晰_—212清晰無無321不清晰——422清晰無有12<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>根據(jù)以上實驗結果，得出選用AA為黃柏的鑒別試驗方法。實驗例3:鑒別試驗篩選——三七的鑒別(A)供試品溶液的制備方法(1)取本品2g，加甲醇20ml,超聲處理30分鐘，靜置，取上清液10ml，蒸干，殘渣加水25ml使溶解，加1(m氫氧化鈉溶液5ml，搖勻，用水飽和正丁醇振搖提取2次，每次30ml，合并正丁醇液，加水洗滌2次，每次40ml，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘渣加水3ml使溶解，通過DIOI型大孔吸附樹脂柱，40—60目，濕法裝柱，內徑lcm，長25cm，小玻璃柱內，待樹脂沉淀，覆以脫脂棉少許，再添加棉花少許輕壓，用水沖洗并用水浸沒備用。先用水50ml洗脫，棄去水液，再用70%乙醇25ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液。(2)取本品2g,加甲醇20ml,超聲處理30分鐘，靜置，取上清液lOral,蒸干，殘渣加水25ml使溶解，加l(W氫氧化鈉溶液5ml，搖勻，用水飽和正丁醇振搖提取2次，每次30ml，合并正丁醇液，加水洗滌2次，每次40ml，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘渣加水3ml使溶解，通過AB_8型大孔吸附樹脂柱，先用水50ml洗脫，棄去水液，再用70%乙醇25ral洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液。(3)取本品5g，加水2。5tnl，攪勻，再加以水飽和的正丁醇50ml，密塞，振搖10min，放置2小時，離心，取上清液，加3倍量以正丁醇飽和的水，搖勻，放置使分層(必要時離心)，取正丁醇層，蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液。(B)展開劑的選擇(1)三氯甲烷一乙酸乙酯一甲醇一水(15:40:22:10)l(TC以下放置(2)正丁醇一乙酸乙酯一水(4:1:5)的上層溶液另取三七對照藥材0.5g，同法制成對照藥材溶液。再取人參皂苷Rg,及三七皂苷R,對照品，加甲醇制成每lml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述三種溶液各5W，分別點于同一硅膠G薄層板上，以展開劑展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105'C加熱至斑點顯色清晰檢視。表3三七的鑒別試驗結果<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>根據(jù)以上實驗結果，得出選用A,B2為三七的鑒別試驗方法。實驗例4:含量測定的方法學——金錢草的含量測定本品是由金錢草、綿萆蘇、瞿麥、黃柏、三七、等九味中藥組成的復方制劑。金錢草為處方中的君藥，具有清利濕熱，通淋，消腫的功效。金錢草中以槲皮素和山奈素為主要有效成分，同時測定金錢草中的槲皮素和山奈素2個成分即金錢草中以槲皮素和山奈素的總量，提高了質量可控性。經過大量試驗摸索，最終采用高效液相檢測手段建立了適合本制劑的含量測定方法，并制定出合理的含量限度。經過方法學考察，測定方法提取完全、專屬性強、重現(xiàn)性好、回收率符合要求。1.儀器與試藥1.l試驗儀器島津-高效液相色譜儀、LC-10Atvp溶劑輸送泵SPD-10Avp紫外-可見檢測器、電子天平。1.2試藥槲皮素購于中國藥品生物制品檢定所批號100081-200406山奈素購于中國藥品生物制品檢定所批號110861-200304水為重蒸水，甲醇為色譜純，其他試劑為分析純。2.色譜條件與系統(tǒng)適用性色譜柱迪瑪公司(ZorbaxC184,6X150mm,5Wn)流動相甲醇_0.4%磷酸溶液(48:52)檢測波長360nm流速1.Oml/min柱溫室溫理論板數(shù)按槲皮素峰計算應不低于2500。3.提取條件考察3.1提取溶劑選擇槲皮素與山奈素溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯等有機溶劑。取供試品粉末三份，每份5g，精密稱定，分別精密加入2%鹽酸甲醇溶液、2%鹽酸乙醇溶液、2%鹽酸乙酸乙酯溶液各50ml，加熱回流1小時，照含量測定項下方法測定槲皮素與山奈素含量總量，結果見表4:表4提取溶劑考察<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>由以上結果可知槲皮素與山奈素的總含量甲醇提取樣品〉乙醇提取樣品〉乙酸乙酯提取樣品，且甲醇提取雜質少，槲皮素與山奈素色譜峰峰形好，故選定甲醇為提取溶劑。3.2提取方法選擇取供試品粉末兩份，每份5g，精密稱定，分別精密加入2%鹽酸甲醇溶液50ml，一份回流提取l小時，另一份超聲處理l小時后，分別取續(xù)濾液備用，再分別取續(xù)濾液25ml再水解1小時。照含量測定項下方法測定槲皮素與山奈素含量總和，結果見表5:表5提取方法考察<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>由以上結果可知兩種方法所測得含量無明顯差異，但由于第一份直接回流時就已達到提取最佳效果，所用時間短，提取完全，故選單一回流提取方法。3.3水解加入鹽酸量的選擇取供試品粉末5份，每份5g,精密稱定，分別精密加入甲醇溶液50ml，回流提取1小時，取續(xù)濾液25ml分別加入鹽酸0.2ml、0.4ml、0.5ml、0.6ml、0.8ml，再水解1小時。照含量測定項下方法測定槲皮素與山奈素含量總和，結果見表6:表6水解<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>由以上結果可知故選定水解加入鹽酸量為lml。后經試驗證明，提取水解可以一步完成，故折算為加入2M鹽酸甲醇溶液50ml。3.4提取及水解時間的選擇3.4.1取供試品粉末15份，每份5g,精密稱定，前5份分別精密加入甲醇50ml，分別回流提取15分鐘、30分鐘、45分鐘、60分鐘、90分鐘，取續(xù)濾液25ml加鹽酸0.5ml水解1小時，照含量測定項下方法測定槲皮素與山奈素含量總和，檢測結果見表7:表7回流不同時間，后加入lmL鹽酸水角<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>結果表明回流提取45分鐘、60分鐘、90分鐘的樣品測得槲皮素與山奈素含量總和無顯著差異，且大于回流提取15分鐘、30分鐘的樣品。3.4.2另取5份，分別精密加入甲醇50ml,回流提取45分鐘后,取續(xù)濾液25ml各加鹽酸0.5ml分別水解15分鐘、30分鐘、45分鐘、60分鐘、75分鐘，照含量測定項下方法測定槲皮素與山奈素含量總和，檢測結果表8:表8先回流45分鐘，后加lml鹽酸水解不同時間的測定結果<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>結果表明水解60分鐘測得槲皮素與山奈素含量總和最高。3.4.3最后5份樣品分別精密加入2W鹽酸甲醇溶液各50ml，分別回流30分鐘、45分鐘、60分鐘、75分鐘、90分鐘，照含量測定項下方法測定槲皮素與山奈素含量總和，檢測結果見表9:表9加2%鹽酸甲醇水解不同時間的測定結果水解時間(分鐘)3045607590槲皮素和山奈素含量總和(mg/g)0,2610.3150.3740.3710.362結果表明2%鹽酸甲醇溶液回流提取60分鐘樣品測得的槲皮素與山奈素含量總和最高，表明選擇0.2%鹽酸甲醇溶液回流提取1小時即可完全提取，又達到最佳水解時間，操作簡單又節(jié)約時間，故選定提取、水解同時進行，吋間為1小時。3.5提取溶劑用量選擇取供試品粉末5份，每份5g，精密稱定，分別精密加入2%鹽酸甲醇溶液25ml、40ml、50ml、60ml、75ml，回流1小時，照含量測定項下方法測定槲皮素與山奈素含量總和。結果見表IO。表IO加2%鹽酸甲醇不同量的測定結果加2%鹽酸甲醇(ml)2540506075槲皮素和山奈素含量總和(mg/g)0.1800.2660.3740.3740.376結果表明加入50ml、60ml、75ml2%鹽酸甲醇溶液樣品測得槲皮素與山奈素含量總和無顯著差異，且大于加入25ml、40ml2X鹽酸甲醇溶液樣品，故提取溶劑用量選定為50ml。4.空白試驗空白溶液的制備是按處方中藥味的比例，自配不含金錢草的群藥，按其工藝制成空白制劑，再按供試品溶液制備方法制備，上述色譜條件測定，結果空白溶液在與槲皮素和山奈素對照品相同保留時間處未顯色譜峰，故認為無干擾。5.線性關系考察分別精密吸取槲皮素對照品和山奈素對照品溶液(槲皮素15.03Pg/ml，山奈素22.6^/ml)5W、8W、腿、15W、18W注入液相色譜儀，按上述色譜條件，測定峰面積(結果見表ll、表12)。以對照品進樣量(ug)為橫坐標，以峰面積為縱坐標繪制標準曲線，結果表明槲皮素在O.07515^g~0.27054化間呈線性關系，其回歸方程為y=3660406.62x-3125.21(r=0.9999)。山奈素在O.113Mg0.4068^g間呈線性關系，其回歸方程為y=3548618.57x—30176.13(r=0.9999)。表ll標準曲線結果序號12345槲皮素0.075150.120240.15030.225450.27054峰面積27200443795254719781829798981516表12標準曲線結果<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>6.穩(wěn)定性試驗取同一供試品溶液(批號04100101)，分別于配制后0、2、4、6、8、10、16、20、24小時依法測定，結果見表13。表13穩(wěn)定'fe<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>結果表明槲皮素在8小時內基本穩(wěn)定，山奈素在24小時內基本穩(wěn)定。7.精密度試驗精密吸取同一槲皮素對照品溶液和山奈素對照品溶液10yl，連續(xù)進樣5次，記錄峰面積，結果見表14。表14精密度試驗結果表<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>結果表明，精密度良好。8.重復性試驗對同一批號(批號04100101)樣品5份，按正文供試品溶液制備方法制備，依法測定槲皮素和山奈素含量，結果見表15、表16、表17。表15槲皮素重復性試驗結果<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>15.00336098636039276068950.16725.00686100246048716074480.16735.00626099426041276070340.1670.1661.245.00365970045920655945340.16455.00296005025872315938660.163表16山奈素重復性試驗結果序號取樣量(g)面積1面積2平均面積含量(mg/g)均值(mg/g)RSD(%)15.00337150617132407141500.20925.00687184027103987144000.20935.00627163027123247143130.2090.2100.445.00367084567286027185290.21155.00297176647137377157000.210表17槲皮素+山奈素總含量重復性試驗結果序號取樣量(g)含量(mg/g)均值(mg/'g)RSD(%)15.00330.37625.00680.37635.00620.3760.3750.345.00360.37555.00290.373結果表明，本方法重現(xiàn)性良好。9.回收率試驗采用加樣回收，精密稱取已知含量的同一批號(批號04100101)的樣品約2.5g，分別精密加入槲皮素對照品溶液(0.0501mg/ml)和山奈素對照品溶液(0.0452mg/ml)各10ml，按正文供試品溶液的制備方法及上述色譜條件測定，以下式分別計算回收率，結果見表18、表19、表20。測出槲皮素含量-樣品中槲皮素的含量回收率(％)=-X100%加入槲皮素對照品量18回收率(％)=J出山奈素含量-樣品中山奈素的含量加入山奈素對照品景X100%表18槲皮素加樣回收試驗結果序號取樣量(g)樣品槲皮素量加入槲皮素量測出槲皮素量回收率(%)平均回收率RSD(%)(mg)(mg)(mg)(%)12.50140.4150.5010.90197.022.50020.4150.5010.90397.432.50630.4160.5010.90196.897.10.442.50310.4160.5010.■96.652.50280.4150.5010.90497.662.50140.4150.5010.90297.2表19山奈素加樣回收試驗結果序號取樣量(g)樣品山柰素量加入山柰素量測出山柰素量回收率a)平均回收率RSD(%)(mg)(mg)(mg)(%)12.50140.5250.4520.96797.822.50020.5250.4520.97198.732.50630.5260.452。.96998.097.90.642.50310.5260.4520.97098.252.50280.5260.4520.96897.862.50140.5250.4520.96396.9表20槲皮素+山奈素總和加樣回收試驗結果序號取樣』(g)樣品槲皮素+山奈素(mg)加入槲皮素+山奈素測出槲皮素+山回收率(%)(mg)量(mg)平均回收率(%)RSD(%)2.50142.50020.9400.9400.9530.9531.8681.87497.498.01932.50630.9420.9531.87097.497.50.342.50310.9420.9531.87097.452.50280.9410.9531.87297.762.50140.9400.9531.86597.1結果表明，回收率符合要求。根據(jù)以上數(shù)據(jù)，制定本品每lg含金錢草以槲皮素(dsHu07)和山奈素(d孔。06)的總量計，不得少于0.20mg。發(fā)明的該中藥組合物質量控制方法，便于藥品的標準化、現(xiàn)代化生產，有利于提高生產效率，提高藥品質量，保證了藥品的安全性和有效性。為了更好地理解本發(fā)明，現(xiàn)在結合具體實施例對本發(fā)明進行詳細的說明。實施例1金錢草680克綿萆蘚850克瞿麥330克黃柏880克三七200克桃仁468克川楝子520克烏藥740克牛膝630克。A、取金錢草、綿萆蘇和黃柏加70%乙醇回流提取2次，每次2小時，加醇量為藥材量的6倍，過濾，合并醇提液，放置過夜，再次過濾得乙醇溶液；B、取瞿麥、桃仁、川楝子、烏藥和牛膝，加水煎煮3次，每次1小時，加水量為藥材的8倍，過濾，濃縮至相對密度為1.151.20，放涼，加酒精使含醇量達70%，冷藏過夜，抽濾，得濾液；C、取三七切碎烘干粉碎過IOO目篩，得三七粉；將(B)步驟得到的濾液與(A)步驟得到的乙醇溶液合并，回收乙醇，濃縮，減壓干燥，得干浸膏，粉碎，過100目篩，加入(C)步驟得到的三七粉及糊精或淀粉，甜葉菊苷15g，混勻，用乙醇制粒，干燥，共制成顆粒劑1000g。實施例2金錢草420克綿萆蘚420克霍麥210克黃柏250克三七42克桃仁210克川楝子250克烏藥210克牛膝250克。A、取金錢草、綿萆蘚和黃柏加70%乙醇回流提取2次，每次2小時，加醇量為藥材量的6倍，過濾，合并醇提液，放置過夜，再次過濾得乙醇溶液；B、取瞿麥、桃仁、川楝子、烏藥和牛膝，加水煎煮3次，每次1小時，加水量為藥材的8倍，過濾，濃縮至相對密度為1.151.20，放涼，加酒精使含醇量達70%，冷藏過夜，抽濾，得濾液；C、取三七切碎烘干粉碎過100目篩，得三七粉；將(B)歩驟得到的濾液與(A)歩驟得到的乙醇溶液合并，回收乙醇，濃縮，減壓干燥，得干浸膏，粉碎，過100目篩，加入(C)步驟得到的三七粉及糊精或淀粉，甜葉菊苷15g，混勻，用乙醇制粒，干燥，共制成顆粒劑1000g。實施例3金錢草320克綿萆蘇320克瞿麥160克黃柏220克三七35克桃仁160克川楝子220克烏藥160克牛膝200克。A、取金錢草、綿萆蘇和黃柏加70%乙醇回流提取4次，每次1小時，加醇量為藥材量的6倍，過濾，合并醇提液，放置過夜，再次過濾得乙醇溶液；B、取瞿麥、桃仁、川楝子、烏藥和牛膝，加水煎煮4次，每次L2小時，加水量為藥材的8倍，過濾，濃縮至相對密度為1.151.20，放涼，加酒精使含醇量達70%，冷藏過夜，抽濾，得濾液；C、取三七切碎烘干粉碎過IOO目篩，得三七粉；將(B)步驟得到的濾液與(A)步驟得到的乙醇溶液合并，回收乙醇，濃縮，減壓干燥，得干浸膏，粉碎，過100目篩，加入(C)步驟得到的三七粉及糊精或淀粉，甜葉菊苷15g，混勻，用乙醇制粒，干燥，共制成顆粒劑1000g。實施例4金錢草480克綿萆蘇480克霍麥280克黃柏280克三七50克桃仁280克川楝子280克烏藥220克牛膝280克。A、取金錢草、綿萆蘚和黃柏加70%乙醇回流提取3次，每次1.5小時，加醇量為藥材量的6倍，過濾，合并醇提液，放置過夜，再次過濾得乙醇溶液；B、取瞿麥、桃仁、川楝子、烏藥和牛膝，加水煎煮2次，每次1小時，加水量為藥材的8倍，過濾，濃縮至相對密度為1.151.20，放涼，加酒精使含醇量達70%，冷藏過21夜，抽濾，得濾液；C、取三七切碎烘干粉碎過100目篩，得三七粉；將(B)步驟得到的濾液與(A)步驟得到的乙醇溶液合并，回收乙醇，濃縮，減壓干燥，得干浸膏，粉碎，過100目篩，加入(C)步驟得到的三七粉及糊精或淀粉，甜葉菊苷15g，混勻，用乙醇制粒，干燥，共制成顆粒劑1000g。實施例5金錢草400克綿萆蘚400克瞿麥230克黃柏220克三七40克桃仁240克川楝子260克烏藥230克牛膝220克。A、取金錢草、綿萆蘚和黃柏加70%乙醇回流提取2次，每次1.5小時，加醇量為藥材量的6倍，過濾，合并醇提液，放置過夜，再次過濾得乙醇溶液；B、取瞿麥、桃仁、川楝子、烏藥和牛膝，加水煎煮3次，每次1小時，加水量為藥材的8倍，過濾，濃縮至相對密度為1.151.20，放涼，加酒精使含醇量達70%，冷藏過夜，抽濾，得濾液；C、取三七切碎烘干粉碎過IOO目篩，得三七粉；將(B)步驟得到的濾液與(A)步驟得到的乙醇溶液合并，回收乙醇，濃縮，減壓干燥，得干浸膏，粉碎，過100目篩，加入(C)步驟得到的三七粉及糊精或淀粉，甜葉菊苷15g，混勻，用乙醇制粒，干燥，共制成顆粒劑1000g。實施例6金錢草980克綿萆蘚520克瞿麥775克黃柏285克三七580克桃仁698克川楝子835克烏藥715克牛膝410克。A、取金錢草、綿萆蘇和黃柏加70%乙醇回流提取5次，每次L2小時，加醇量為藥材量的6倍，過濾，合并醇提液，放置過夜，再次過濾得乙醇溶液；B、取瞿麥、桃仁、川楝子、烏藥和牛膝，加水煎煮3次，每次l小時，加水量為藥材的8倍，過濾，濃縮至相對密度為1.151.20，放涼，加酒精使含醇量達70%，冷藏過夜，抽濾，得濾液；C、取三七切碎烘干粉碎過IOO目篩，得三七粉；將(B)步驟得到的濾液與(A)步驟得到的乙醇溶液合并，回收乙醇，濃縮，減壓干燥，22得干浸膏，粉碎，過100目篩，加入(C)步驟得到的三七粉及糊精或淀粉，甜葉菊苷15g，混勻，用乙醇制粒，干燥，共制成顆粒劑1000g。實施例7-12將實施例l-6所制備的制劑進行質量控制方法(1)取本品5g，加乙醇20ml，置水浴上回流40分鐘，取上清液10ml，加鹽酸lml，加熱回流1小時后濃縮至約5ml，加水10ml，用環(huán)己垸20ml振搖提取，提取液蒸干，殘渣加三氯甲烷2ml使溶解，作為供試品溶液。另取綿萆蘚對照藥材2g，同法制成對照藥材溶液。再取薯蕷皂苷元對照品，加甲醇制成每lml含5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取供試品溶液5W、對照藥材及對照品溶液各2W，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷一乙酸乙酯(8:2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以磷鉬酸試液，在105'C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材、對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。(2)取本品2g，加甲醇20ml，超聲處理15分鐘，濾過，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液。另取黃柏對照藥材O.lg，同法制成對照藥材溶液。再取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每lml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述三種溶液各2W，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯一丁酮一甲酸_水(10:6:1:1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的黃色熒光斑點。(3)取本品2g，加甲醇20ml,超聲處理30分鐘，靜置，取上清液10ml，蒸干，殘渣加水25ml使溶解，加1(M氫氧化鈉溶液5ml，搖勻，用水飽和正丁醇振搖提取2次，每次30ml，合并正丁醇液，加水洗滌2次，每次40ml，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘渣加水3ml使溶解，通過D101型大孔吸附樹脂柱，40—60目，濕法裝柱，內徑lcm，長25cm，小玻璃柱內，待樹脂沉淀，覆以脫脂棉少許，再添加棉花少許輕壓，用水沖洗并用水浸沒備用。先用水50ml洗脫，棄去水液，再用70X乙醇25ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液。另取三七對照藥材0.5g，同法制成對照藥材溶液。再取人參皂苷Rgl及三七皂苷R1對照品，加甲醇制成每lml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述三種溶液各5W，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇一乙酸乙酯一水(4:1:5)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105'C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材、對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。(4)照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VID)測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑以甲醇-O.鄉(xiāng)磷酸溶液(48:52)為流動相；檢測波長為360nm。理論板數(shù)按槲皮素峰計算應不低于2500。對照品溶液的制備精密稱取槲皮素對照品及山奈素對照品適量，加甲醇制成每lml各23含槲皮素15Pg，山奈素20Hg的溶液，即得。供試品溶液的制備取裝量差異項下的本品，研細，取約5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入2呢鹽酸甲醇溶液5(M，密塞，稱定重量，加熱回流l小時，放冷，再稱定重量，用2%鹽酸甲醇溶液補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10wl，注入液相色譜儀，測定，即得。本品每lg含金錢草以槲皮素(C15Hu07)和山奈素的總量計，不得少于0.20mg。實施例7-12所制得的顆粒劑完全符合本發(fā)明的質量控制標準。表21實施例7-12中槲皮素和山奈素的總量測定結果組別槲皮素含量(mg/g)山奈素含量(mg/g)總量(mg/g)實施例10.2670.3420.609實施例20.1670.2100.377實施例30.1240.1620.286實施例40.1900.2380.428實施例50.1530.1970.350實施例60.3920.4950.8872權利要求1、治療慢性前列腺炎的中藥組合物的質量控制方法，其中所述的組方是金錢草、綿萆薢、瞿麥、黃柏、三七、桃仁、川楝子、烏藥、牛膝，其特征在于該質量控制方法包括下列a、b、c、d四種檢測中的至少一種檢測a.綿萆薢的定性檢測取該中藥組合物，加乙醇，置水浴上回流，取上清液，加鹽酸，加熱回流后濃縮，加水，用環(huán)己烷振搖提取，提取液蒸干，殘渣加三氯甲烷使溶解，作為供試品溶液；取綿萆薢對照藥材，制成對照藥材溶液；取薯蕷皂苷元對照品，制成對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液、對照藥材溶液及對照品溶液，分別點于同一硅膠G薄層板上，以展開劑展開，取出，晾干，噴以磷鉬酸試液，在105℃加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材、對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；b.黃柏的定性檢測取該中藥組合物，加甲醇，超聲處理，濾過，濾液濃縮，作為供試品溶液；取黃柏對照藥材，制成對照藥材溶液；取鹽酸小檗堿對照品，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各，分別點于同一硅膠G薄層板上，以展開劑展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的黃色熒光斑點；c.三七的定性檢測取該中藥組合物，加甲醇超聲處理，靜置，取上清液，蒸干，殘渣加水使溶解，加10％氫氧化鈉溶液，搖勻，用水飽和正丁醇振搖提取，正丁醇液，加水洗滌，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘渣加水使溶解，通過大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，棄去水液，再用70％乙醇洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇使溶解，作為供試品溶液；取三七對照藥材，制成對照藥材溶液；取人參皂苷Rg1及三七皂苷R1對照品，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各，分別點于同一硅膠G薄層板上，以展開劑展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材、對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；d.金錢草的定量檢測照高效液相色譜法測定；對照品溶液的制備精密稱取槲皮素對照品及山奈素對照品適量，制成含槲皮素和山奈素的溶液，即得；供試品溶液的制備取裝量差異項下的該中藥組合物，研細，取約5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入2％鹽酸甲醇溶液，密塞，稱定重量，加熱回流，放冷，再稱定重量，用2％鹽酸甲醇溶液補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀，測定，即得；該中藥組合物每1g含金錢草以槲皮素(C15H11O7)和山奈素(C15H10O6)的總量計，不得少于0.20mg。2、如權利要求1所述的中藥組合物的質量控制方法，其特征在于該中藥組合物的組方配比是金錢草500-1000克綿萆蘇500-1000克瞿麥300-1000克黃柏300-1000克三七180-1000克桃仁450-1000克川楝子450-1000克烏藥600-1000克牛膝400-1000克。3、如權利要求2所述的中藥組合物，其特征在于該中藥組合物的組方配比優(yōu)選是金錢草680克綿萆蘚850克瞿麥330克黃柏880克三七200克桃仁468克川楝子520克烏藥740克牛膝630克。4、如權利要求l所述的中藥組合物，其特征在于該中藥組合物的組方配比還可以是金錢草300-500克綿萆蘚300-500克瞿麥150-300克黃柏200-300克三七30-55克桃仁150-300克川楝子200-300克烏藥150-250克牛膝200-300克。5、如權利要求4所述的中藥組合物，其特征在于該中藥組合物的組方配比優(yōu)選是金錢草420克綿萆蘇420克瞿麥210克黃柏250克三七42克桃仁210克川楝子250克烏藥210克牛膝250克。6、如權利要求1所述的中藥組合物的質量控制方法，其特征在于該中藥組合物顆粒劑的制備方法是A、取金錢草、綿萆蘚和黃柏加乙醇回流提取，過濾，合并醇提液，放置過夜，再次過濾得乙醇溶液；B、取瞿麥、桃仁、川楝子、烏藥和牛膝，加水煎煮，過濾，濃縮至相對密度為1.151.20，放涼，加酒精使含醇量達70%，冷藏過夜，抽濾，得濾液；C、取三七切碎烘干粉碎過100目篩，得三七粉；將(B)步驟得到的濾液與(A)步驟得到的乙醇溶液合并，回收乙醇，濃縮，減壓干燥，得干浸膏，粉碎，過100目篩，加入(C)步驟得到的三七粉及適量常規(guī)輔料，混勻，制粒，干燥，共制成顆粒劑。7、如權利要求6所述的中藥組合物顆粒劑的制備方法，其特征在于該顆粒劑的制備方法優(yōu)選是A、取金錢草、綿萆蘚和黃柏加70%乙醇回流提取2-5次，每次l-2小時，加醇量為藥材量的4-7倍，過濾，合并醇提液，放置過夜，再次過濾得乙醇溶液；B、取瞿麥、杉t仁、川楝子、烏藥和牛膝，加水煎煮2-4次，每次0.5-1.5小時，加水量為藥材的6-10倍，過濾，濃縮至相對密度為1.15~1.20，放涼，加酒精使含醇量達70%，冷藏過夜，抽濾，得濾液；C、取三七切碎烘干粉碎過IOO目篩，得三七粉；將(B)歩驟得到的濾液與(A)步驟得到的乙醇溶液合并，回收乙醇，濃縮，減壓干燥，得干浸膏，粉碎，過100目篩，加入(C)步驟得到的三七粉及糊精或淀粉，甜葉菊苷15g，混勻，用乙醇制粒，干燥，共制成顆粒劑。8、如權利要求7所述的中藥組合物，其特征在于該中藥組合物的制備方法最優(yōu)選是A、金錢草420克綿萆蘚420克瞿麥210克黃柏250克三七42克桃仁210克川楝子250克烏藥210克牛膝250克B、取金錢草、綿萆蘚和黃柏加70%乙醇回流提取2次，每次2小時，加醇量為藥材量的6倍，過濾，合并醇提液，放置過夜，再次過濾得乙醇溶液；C、取瞿麥、桃仁、川楝子、烏藥和牛膝，加水煎煮3次，每次1小時，加水量為藥材的8倍，過濾，濃縮至相對密度為1.151.20，放涼，加酒精使含醇量達70%，冷藏過夜，抽濾，得濾液；D、取三七切碎烘干粉碎過IOO目篩，得三七粉；將(B)步驟得到的濾液與(A)步驟得到的乙醇溶液合并，回收乙醇，濃縮，減壓干燥，得干浸膏，粉碎，過IOO目篩，加入(C)步驟得到的三七粉及糊精或淀粉，甜葉菊苷15g，混勻，用乙醇制粒，干燥，共制成顆粒劑1000g。9、如權利要求1所述的中藥組合物的質量控制方法，其特征在于該方法優(yōu)選包括下列a、b、c、d四種檢測中的至少一種檢測a.綿萆蘚的定性檢測取該中藥組合物5g，加乙醇20ml，置水浴上回流40分鐘，取上清液10ml，加鹽酸lml，加熱回流l小時后濃縮至約5ml,加水10ml,用環(huán)己垸20ml振搖提取，提取液蒸干，殘渣加三氯甲垸2ml使溶解，作為供試品溶液；另取綿萆蘚對照藥材2g，同法制成對照藥材溶液；再取薯蕷皂苷元對照品，加甲醇制成每lml含5mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液5jlU、對照藥材及對照品溶液各2pl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以8:2環(huán)己烷一乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以磷鉬酸試液，在105'C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材、對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；b.黃柏的定性檢測取該中藥組合物2g，加甲醇20ml，超聲處理15分鐘，濾過，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液；另取黃柏對照藥材O.lg，同法制成對照藥材溶液；再取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2pl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以io:6:i:i乙酸乙酯—丁酮—甲酸—水為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的黃色熒光斑點；c.三七的定性檢測取該中藥組合物2g，加甲醇20ml,超聲處理30分鐘，靜置，取上清液10ml，蒸干，殘渣加水25ml使溶解，加10%氫氧化鈉溶液5ml，搖勻，用水飽和正丁醇振搖提取2次，每次30ml，合并正丁醇液，加水洗滌2次，每次40ml，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘渣加水3ml使溶解，通過DIOI型大孔吸附樹脂柱，40—60目，濕法裝柱，內徑lcm,長25cm，小玻璃柱內，待樹脂沉淀，覆以脫脂棉少許，再添加棉花少許輕壓，用水沖洗并用水浸沒備用；先用水50ml洗脫，棄去水液，再用70X乙醇25ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液；另取三七對照藥材0.5g，同法制成對照藥材溶液；再取人參皂苷Rgi及三七皂苷Ri對照品，加甲醇制成每lml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各5pl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以4:1:5正丁醇一乙酸乙酯一水的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105'C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材、對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；d.金錢草的定量檢測照中國藥典2005年版一部附錄VID高效液相色譜法測定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以48:52甲醇-0.4%磷酸溶液為流動相；檢測波長為360nm;理論板數(shù)按槲皮素峰計算應不低于2500;對照品溶液的制備精密稱取槲皮素對照品及山奈素對照品適量，加甲醇制成每lml各含槲皮素15pg，山奈素20ng的溶液，即得；供試品溶液的制備取裝量差異項下的該中藥組合物，研細，取約5g,精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入2n/。鹽酸甲醇溶液50ml，密塞，稱定重量，加熱回流l小時，放冷，再稱定重量，用2%鹽酸甲醇溶液補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各l(HJ，注入液相色譜儀，測定，即得;該中藥組合物每lg含金錢草以槲皮素(dsHn07)和山奈素(d5HK)06)的總量計，不得少于0.20mg。全文摘要本發(fā)明公開了一種治療慢性前列腺炎的中藥組合物的質量控制方法，其特征是增加了對綿萆薢、黃柏、三七的薄層定性鑒定，還增加了金錢草含量的定量測定，保證了藥品的安全性和有效性，提高了產品質量，便于藥品的標準化生產。文檔編號G01N30/36GK101537096SQ20081010225公開日2009年9月23日申請日期2008年3月19日優(yōu)先權日2008年3月19日發(fā)明者付建家,付立家申請人:北京亞東生物制藥有限公司