專(zhuān)利名稱(chēng)：一種治療急、慢性前列腺炎的中藥組合物的檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于制藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種治療急、慢性前列腺炎的中藥組合物的檢測(cè)方法，特別是涉及一種用于治療急、慢性前列腺炎的膠囊劑(前列平膠囊)的檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
治療急、慢性前列腺炎的中藥組合物(前列平膠囊)由敗醬草、丹參、赤芍、桃仁、紅花、澤蘭、石韋、乳香、沒(méi)藥九味中藥材組成，具有協(xié)同作用，符合中藥組方原則，達(dá)到標(biāo)本兼治的目的。該制劑結(jié)合中西醫(yī)對(duì)急、慢性前列腺炎發(fā)病機(jī)理的認(rèn)識(shí)，吸收了經(jīng)典古方之精華，具有清熱利濕，化瘀止痛之功效。在全國(guó)各地醫(yī)院臨床應(yīng)用治療濕熱瘀阻所致的急、慢性前列腺炎的過(guò)程中，已證明具有顯著的臨床療效，深得廣大醫(yī)務(wù)工作者和患者的信任。在現(xiàn)有的前列平膠囊的檢測(cè)方法中，只對(duì)藥物組合物中的丹參、赤芍進(jìn)行TLC鑒另IJ。為進(jìn)一步控制該產(chǎn)品的質(zhì)量，需要建立新的檢測(cè)方法，對(duì)該產(chǎn)品的質(zhì)量控制方法進(jìn)行完善，從而更進(jìn)一步保證該產(chǎn)品的質(zhì)量和療效。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是，提供一種治療急、慢性前列腺炎的中藥組合物的檢測(cè)方法。本發(fā)明的目的是采用如下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的。一種治療急、慢性前列腺炎的中藥組合物的檢測(cè)方法，所述中藥組合物由敗醬草、丹參、赤芍、桃仁、紅花、澤蘭、石韋、乳香、沒(méi)藥制成，所述檢測(cè)方法包括采用薄層色譜法鑒定乳香，采用高效液相色譜檢測(cè)丹參中的丹酚酸B。優(yōu)選地，所述薄層色譜鑒定乳香的條件如下采用體積比為15-20 1-5，優(yōu)選為17 3的環(huán)己烷-乙酸乙酯作為展開(kāi)劑；采用加熱顯色，顯色劑為3% -8% (w/v)的香草醛濃硫酸溶液，加熱溫度為80-120°C，優(yōu)選為105°C，至斑點(diǎn)清晰即可。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，采用薄層色譜法鑒定所述中藥組合物中的乳香包括如下步驟I)供試品溶液的制備取中藥組合物，加60%乙醇10ml，超聲10分鐘，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液；2)對(duì)照品溶液的制備取乳香O. 4g，加60%乙醇10ml，超聲10分鐘，濾過(guò)，濾液作為對(duì)照品溶液；3)陰性對(duì)照溶液的制備按中藥組合物的處方比例和工藝制備不含乳香的陰性對(duì)照樣品，同供試品溶液的制法制成陰性對(duì)照溶液；4)鑒定吸取上述溶液各10ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯(17 3)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干。噴以5%香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰。在供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點(diǎn)。結(jié)果顯示，上述鑒定方法陰性無(wú)干擾，樣品重性形良好，可以作為鑒別前列平膠囊中乳香的依據(jù)。優(yōu)選地，所述高效液相色譜檢測(cè)丹參中的丹酚酸B的色譜條件如下采用十八烷基硅烷鍵合硅膠的填充劑，柱溫為30°C ；采用體積比為30 10 I 59的甲醇-乙腈-甲酸-水為流動(dòng)相，流速為Iml/min ;以及采用286nm的檢測(cè)波長(zhǎng)。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，采用高效液相色譜法檢測(cè)丹參中的丹酚酸B包括如下步驟I)對(duì)照品溶液的制備取丹酚酸B對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加75%甲醇制成每Iml含40 μ g的溶液，即得；2)供試品溶液的制備取中藥組合物，研細(xì)，取O. 34g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入75%甲醇50ml，稱(chēng)定重量，加熱回流I小時(shí)，放冷，再稱(chēng)定重量，用75%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用微孔濾膜(0.45um)濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。3)測(cè)定以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，柱溫30°C，以體積比為30 10 I 59的甲醇-乙腈-甲酸-水為流動(dòng)相，流速為lml/min，分別精密吸取上述兩種溶液各20 μ I，注入液相色譜儀，在286nm檢測(cè)波長(zhǎng)下測(cè)定，即得；理論板數(shù)按丹酚酸B峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。在進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述治療急、慢性前列腺炎的中藥組合物的檢測(cè)方法，包括采用薄層色譜法分別鑒定丹參、赤芍和乳香，以及采用高效液相色譜檢測(cè)丹參中的丹酚酸B。

優(yōu)選地，所述中藥組合物中各原料藥的重量份數(shù)如下敗醬草60-90份、丹參20-30份、赤芍20-30份、桃仁20-30份、紅花20-30份、澤蘭20-30份、石韋20-30份、乳香4-6份、沒(méi)藥4-6份。優(yōu)選地，所述中藥組合物中各原料藥的重量份數(shù)如下敗醬草70. 2份、丹參23. 4份、赤芍23. 4份、桃仁23. 4份、紅花23. 4份、澤蘭23. 4份、石韋23. 4份、乳香4. 7份、沒(méi)藥4. 7 份。優(yōu)選地，所述中藥組合物為膠囊劑。在本發(fā)明提供的方法檢測(cè)的中藥組合物中，丹參為處方中的主藥，丹酚酸B為其中含量較高的成分。中藥組合物膠囊(前列平膠囊)的功能主治為清熱利濕，化瘀止痛，用于治療急、慢性前列腺炎。文獻(xiàn)報(bào)道丹酚酸B有明顯擴(kuò)張血管充血的作用，具有活血化瘀作用，為制劑中的活性成分。為了更好地控制制劑質(zhì)量，本發(fā)明對(duì)丹酚酸B的含量進(jìn)行了測(cè)定。經(jīng)過(guò)方法學(xué)考察證明本法靈敏度高，重復(fù)性好，回收率良好，且陰性對(duì)照無(wú)干擾。整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程可操作性強(qiáng)，可以作為控制相關(guān)藥物內(nèi)在質(zhì)量的指標(biāo)之一。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明至少存在以下有益效果1、本發(fā)明增加了乳香的薄層色譜測(cè)定，此方法陰性無(wú)干擾，樣品重性形良好，可以作為鑒別前列平膠囊中乳香的依據(jù)。2、本發(fā)明增加了丹酚酸B的液相色譜檢測(cè)方法，試驗(yàn)過(guò)程可操作性強(qiáng)，經(jīng)過(guò)方法學(xué)考察證明本法靈敏度高，重復(fù)性好，回收率良好，且陰性對(duì)照無(wú)干擾，可以作為控制本品內(nèi)在質(zhì)量的指標(biāo)之一。
本發(fā)明能夠有效控制前列平膠囊的質(zhì)量，使前列平膠囊質(zhì)量達(dá)到穩(wěn)定、可控、高效及安全，是對(duì)產(chǎn)品的投料要求及原料的質(zhì)量控制嚴(yán)格，克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提高產(chǎn)品的質(zhì)量、療效、生物利用度，更好的滿足醫(yī)療的需要。該檢測(cè)方法能夠有效控制前列平膠囊的質(zhì)量，使前列平膠囊質(zhì)量達(dá)到穩(wěn)定、可控、高效及安全，從而更好地滿足醫(yī)療需要。


以下，結(jié)合附圖來(lái)詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明的實(shí)施方案，其中圖1是實(shí)施例2的薄層色譜鑒定圖，其中，1、2表示乳香對(duì)照藥材；3、4表示兩批樣品；5、6表不陰性對(duì)照樣品。圖2是實(shí)施例3中測(cè)定10批樣品的色譜圖。圖3是實(shí)施例3中專(zhuān)屬性試驗(yàn)的色譜圖。圖4是實(shí)施例3中的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。圖5是實(shí)施例3中精密度試驗(yàn)的色譜圖。圖6是實(shí)施例3中穩(wěn)定性試驗(yàn)的色譜圖。圖7是實(shí)施例3中重復(fù)性試驗(yàn)的色譜圖。圖8是實(shí)施例3中回收率試驗(yàn)的色譜圖。
具體實(shí)施例方式以下參照具體的實(shí)施例來(lái)說(shuō)明本發(fā)明。本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠理解，這些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明，其不以任何方式限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例1本實(shí)施例提供適用于本發(fā)明提供的方法檢測(cè)的治療急、慢性前列腺炎的中藥組合物的處方及其制備方法。處方如下敗醬草702g 丹參234g 赤芍234g桃仁234g 紅花234g 澤蘭234g石韋234g 乳香47g 沒(méi)藥47g制備方法如下按處方量取以上九味，取乳香、沒(méi)藥粉碎成細(xì)粉，備用。丹參、赤芍粉碎成粗粉，加乙醇提取二次，每次2小時(shí)，合并提取液，濾過(guò)，濾液回收乙醇并濃縮至相對(duì)密度1. 32 1. 36 (600C )的稠膏，其余敗醬草等五味及醇提后的藥渣加水煎煮二次，第一次2小時(shí)，第二次1. 5小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度為1. 32 1. 36 (600C )的稠膏，加入上述細(xì)粉及清膏，混勻，制成顆粒，干燥，裝入膠囊，即得。所制備的膠囊劑，內(nèi)容物為棕紅色至棕褐色的顆粒及粉末；氣香，味哭、微酸。所述中藥組合物還可以以前列平膠囊的商品名直接購(gòu)自西安千禾藥業(yè)有限責(zé)任公司。實(shí)施例2本實(shí)施例提供了采用薄層色譜鑒定前列平膠囊中的乳香。1、試驗(yàn)條件雙槽展開(kāi)缸(上海信誼藥業(yè)有限公司)；硅膠G (薄層色譜用，青島海洋化工廠)；羧甲基纖維素鈉(國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；薄層板自制，厚度0.3_。其余試劑均為分析純。2、樣品的制備取實(shí)施例1所制前列平膠囊10粒的內(nèi)容物，加60%乙醇10ml，超聲10分鐘，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液。取乳香O. 4g，加60% (v/v)乙醇10ml，超聲10分鐘，濾過(guò)，濾液作為對(duì)照藥材溶液。再取按處方比例和工藝制備的不含沒(méi)藥的陰性樣品，同供試品溶液的制法制成陰性對(duì)照溶液。3、鑒定吸取上述溶液各10 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯(17 3)為展開(kāi)劑,展開(kāi),取出，晾干。噴以5% (w/v, g/ml)香草醒硫酸溶液,熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰。三批供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點(diǎn)。而陰性樣品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)位置上，未顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性無(wú)干擾。結(jié)果如圖1所示，表明方中其它藥味不影響乳香的檢出，因此，可以作為鑒別前列平膠囊中乳香的依據(jù)。在薄層色譜鑒定乳香的預(yù)實(shí)驗(yàn)中，發(fā)明人對(duì)制備樣品的溶劑進(jìn)行了篩選。經(jīng)試驗(yàn)，用水、無(wú)水乙醇及20% (v/v),40% (v/v),80% (v/v)的乙醇溶液作為制備樣品的溶劑，其提取效果明顯不如以60% (v/v)乙醇作為溶劑的提取效果。此外，通過(guò)比較不同體積比的環(huán)己烷-乙酸乙酯展開(kāi)劑，發(fā)現(xiàn)當(dāng)環(huán)己烷-乙酸乙酯的體積比為17 3時(shí)，可以得到更好的分離，且分離的靈敏度較高，無(wú)斑點(diǎn)干擾。實(shí)施例3本實(shí)施例提供了采用液相色譜法檢測(cè)前列平膠囊成份丹參中的丹酚酸B的含量。1、色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八燒基娃燒鍵合 娃膠為填充劑(生產(chǎn)廠家Agilent Technologies,規(guī)格4.6X250mm);以甲醇-乙腈-甲酸-水(30 10 I 59)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)286nm，柱溫30°C,流速lml/min。理論板數(shù)按丹酹酸B峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。2、對(duì)照品溶液的制備取丹酚酸B對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加75%甲醇制成每Iml含40 μ g的溶液，即得。3、供試品溶液的制備取前列平膠囊的內(nèi)容物，研細(xì)，取O. 34g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入75% (v/v)甲醇50ml，稱(chēng)定重量，加熱回流I小時(shí)，放冷，再稱(chēng)定重量，用75%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用微孔濾膜(0.45um)濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。4、測(cè)定分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各20μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定。對(duì)10批樣品制備的供試品溶液的測(cè)定色譜圖結(jié)果見(jiàn)圖2，含量測(cè)定結(jié)果如表I所示。表110批樣品含量測(cè)定結(jié)果
權(quán)利要求
1.一種治療急、慢性前列腺炎的中藥組合物的檢測(cè)方法，所述中藥組合物由敗醬草、丹參、赤芍、桃仁、紅花、澤蘭、石韋、乳香、沒(méi)藥制成，所述檢測(cè)方法包括采用薄層色譜法測(cè)定乳香，采用高效液相色譜法檢測(cè)丹參中的丹酚酸B。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述薄層色譜測(cè)定乳香的條件如下展開(kāi)劑為體積比為15-20 1-5，優(yōu)選為17 3的環(huán)己烷-乙酸乙酯；顯色劑為3-8% (w/v)的香草醛濃硫酸溶液；加熱顯色的溫度為80-120°C，優(yōu)選為105°C。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述薄層色譜測(cè)定乳香的方法包括以下步驟.1)供試品溶液的制備取中藥組合物，加60%乙醇10ml，超聲10分鐘，濾過(guò)，即得；.2)對(duì)照品溶液的制備取乳香0.4g，加60%乙醇10ml，超聲10分鐘，濾過(guò)，即得；.3)陰性對(duì)照溶液的制備按中藥組合物的處方比例和工藝制備不含乳香的陰性對(duì)照樣品，同供試品溶液的制法制成陰性對(duì)照溶液；.4)測(cè)定吸取上述溶液各10μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為17 3 的環(huán)己烷-乙酸乙酯為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干；再噴以顯色劑5% (w/v)的香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰。
4.根據(jù)權(quán)利要1至3中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述高效液相色譜檢測(cè)丹參中的丹酚酸B的色譜條件如下填充劑為十八烷基硅烷鍵合硅膠；柱溫為30℃；流動(dòng)相為體積比為30 10 1 59的甲醇-乙腈-甲酸-水；流速為lml/min ；檢測(cè)波長(zhǎng)為286nm ；按丹酚酸B峰計(jì)算理論板數(shù)應(yīng)不低于2000。
5.根據(jù)權(quán)利要1至4中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述高效液相色譜檢測(cè)丹參中的丹酚酸B的方法包括以下步驟.1)對(duì)照品溶液的制備取丹酚酸B對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加75%甲醇制成每1ml含 40μg的溶液，即得；.2)供試品溶液的制備取中藥組合物，研細(xì)，取0.34g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入75%甲醇50ml，稱(chēng)定重量，加熱回流I小時(shí)，放冷，再稱(chēng)定重量，用75%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用O. 45 μ m微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。.3)測(cè)定以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，柱溫30°C，以體積比為3010 1 59 的甲醇-乙腈-甲酸-水為流動(dòng)相，流速為lml/min，分別精密吸取上述兩種溶液各20 μ 1， 注入液相色譜儀，在286nm檢測(cè)波長(zhǎng)下測(cè)定。
6.根據(jù)權(quán)利要1至5中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述方法還包括采用薄層色譜法測(cè)定丹參和赤芍的步驟。
7.根據(jù)權(quán)利要1至5中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述中藥組合物中各原料藥的重量份數(shù)如下敗醬草60-90份、丹參20-30份、赤芍20-30份、桃仁20-30份、紅花20-30份、澤蘭.20-30份、石韋20-30份、乳香4-6份、沒(méi)藥4-6份。
8.根據(jù)權(quán)利要1至5中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述中藥組合物中各原料藥的重量份數(shù)如下敗醬草70. 2份、丹參23. 4份、赤芍23. 4份、桃仁23. 4份、紅花23. 4份、澤蘭23.4份、 石韋23. 4份、乳香4. 7份、沒(méi)藥4. 7份。
全文摘要
本發(fā)明提供一種治療急、慢性前列腺炎的中藥組合物的檢測(cè)方法。本發(fā)明提供的方法包括采用薄層色譜法鑒定乳香，采用高效液相色譜檢測(cè)丹參中的丹酚酸B。經(jīng)過(guò)方法學(xué)考察證明本發(fā)明提供的方法靈敏度高，重復(fù)性好，回收率良好，且陰性對(duì)照無(wú)干擾。整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程可操作性強(qiáng)，可以作為控制相關(guān)藥物內(nèi)在質(zhì)量的指標(biāo)之一。
文檔編號(hào)G01N30/02GK103048416SQ20111031131
公開(kāi)日2013年4月17日 申請(qǐng)日期2011年10月14日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月14日
發(fā)明者胡小虎, 王鎖剛, 張瓊 申請(qǐng)人:西安千禾藥業(yè)有限責(zé)任公司