專(zhuān)利名稱(chēng)：：青鵬膏劑及其制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種藥物組合物制劑的質(zhì)量控制方法及檢測(cè)方法，特別涉及青鵬膏劑及其制劑的質(zhì)量控制方法及其檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
：青鵬膏劑為藏族傳統(tǒng)經(jīng)典驗(yàn)方，藏文名稱(chēng)"秀巴恰瓊恩保"。該藥成方于公元16世紀(jì)，始載于五世達(dá)賴(lài)時(shí)期攝政王第司桑杰嘉措所著《藏醫(yī)醫(yī)訣補(bǔ)遺》，迄今已有500多年的藏醫(yī)臨床用藥歷史，是藏族人民在長(zhǎng)期的醫(yī)療實(shí)踐中摸索出來(lái)的止痛消腫良藥。青鵬膏劑收載于藏藥部頒標(biāo)準(zhǔn)，標(biāo)準(zhǔn)編號(hào)為WS3BC031995，原料藥組成為鐮形棘豆100g、亞大黃50g、鐵棒錘75g、訶子100g、毛訶子100g、余甘子100g、安息香35g、寬筋藤150g、麝香25g，主要用于痛風(fēng)、濕痹、"岡巴"、"黃水"病等引起的腫痛發(fā)燒，皰疹，瘟癘發(fā)燒等。2001年列入國(guó)家基本醫(yī)療保險(xiǎn)藥品目錄，但目前尚沒(méi)有明確的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)及檢測(cè)方法，不能有效的控制產(chǎn)品質(zhì)量。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于公開(kāi)青鵬膏劑及其制劑的質(zhì)量控制方法及其檢測(cè)方法。本發(fā)明目的是通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)本發(fā)明青鵬膏劑及其制劑的質(zhì)量控制方法包括如下鑒別和/或含量測(cè)定中的一種或幾種鑒別-A、顯微鑒別取本發(fā)明藥物組合物制劑，加水合氯醛透化13次，制片，置顯微鏡下觀察草酸鈣簇晶眾多，屬亞大黃里的主要特征結(jié)構(gòu)；韌皮纖維成束，木化周?chē)”诩?xì)胞含方晶成晶鞘纖維，為寬筋藤藥材中的主要特征結(jié)構(gòu)；石細(xì)胞類(lèi)圓形或卵形、長(zhǎng)方形，孔溝明顯，中央有紋孔，油滴淺黃色，管狀厚壁細(xì)胞木化，非腺毛14細(xì)胞，為藥材毛訶子中的主要特征結(jié)構(gòu)；見(jiàn)附圖l;B、薄層鑒別取本發(fā)明藥物組合物制劑1030重量份，加石油醚2060體積份，充分振搖，棄去石油醚，殘?jiān)右宜嵋阴?030體積份，充分振搖，取上清液，蒸干，殘?jiān)铀?030體積份溶解，濾過(guò)；將濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?3體積份使溶解，作為供試品溶液；另取余甘子對(duì)照藥材13重量份，加甲醇1030體積份，超聲處理2040分鐘，濾過(guò)，濾液作為對(duì)照藥材溶液；按照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各O.Ol體積份，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以體積比為609(TC石油醚乙酸乙酯甲酸=39:26:37的溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，在254nm紫外光燈下觀察；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；見(jiàn)附圖2;含量測(cè)定按照高效液相色譜法色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積比為甲醇水三氯甲烷二乙胺二6080:2040:24:0.10.3的溶液為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為235nm;理論塔板數(shù)按烏頭堿峰計(jì)應(yīng)不低于1000;對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取烏頭堿對(duì)照品，加二氯甲烷制成每l體積份含0.000100.00030重量份的溶液，即得；供試品溶液的制備精密稱(chēng)定本發(fā)明藥物組合物制劑1030重量份，加無(wú)水乙醇3070體積份，置水浴上加熱回流12小時(shí)，濾過(guò)，殘?jiān)脽o(wú)水乙醇37體積份多次洗滌，至洗凈；合并無(wú)水乙醇液，揮干，殘?jiān)?.52%鹽酸2040體積份溶解，置冰浴中放置1030分鐘，濾過(guò)，濾液加氨水調(diào)pH至812，用乙醚提取兩次，每次1030體積份，合并乙醚提取液，室溫?fù)]去乙醚，殘?jiān)枚燃淄槭谷芙獠⒍ㄈ葜?3體積份，搖勻，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液及供試品溶液各0.02體積份，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本發(fā)明藥物組合物膏劑每100重量份含鐵棒錘以烏頭堿C34H450nN計(jì)，應(yīng)不得超過(guò)0.005重量份；本發(fā)明藥物組合物口服制劑按日服用劑量含鐵棒錘以烏頭堿CmH450uN計(jì)，應(yīng)不得超過(guò)0.005重量份。本發(fā)明藥物組合物制劑的質(zhì)量控制方法優(yōu)選如下鑒別和/或含量測(cè)定中的一種或幾種鑒別A、顯微鑒別取本發(fā)明藥物組合物制劑，加水合氯醛透化2次，制片，置顯微鏡下觀察草酸鈣簇晶眾多，屬亞大黃里的主要特征結(jié)構(gòu)；韌皮纖維成束，木化周?chē)”诩?xì)胞含方晶成晶鞘纖維，為寬筋藤藥材中的主要特征結(jié)構(gòu)；石細(xì)胞類(lèi)圓形或卵形、長(zhǎng)方形，孔溝明顯，中央有紋孔，油滴淺黃色，管狀厚壁細(xì)胞木化，非腺毛1細(xì)胞，為藥材毛訶子中的主要特征結(jié)構(gòu)；見(jiàn)附圖1;B、薄層鑒別取本發(fā)明藥物組合物制劑12重量份，加石油醚35體積份，充分振搖，棄去石油醚，殘?jiān)右宜嵋阴?5體積份，充分振搖，取上清液，蒸干，殘?jiān)铀?5體積份溶解，濾過(guò)；濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?體積份使溶解，作為供試品溶液；另取余甘子對(duì)照藥材2重量份，加甲醇25體積份，超聲處理25分鐘，濾過(guò)，濾液作為對(duì)照藥材溶液；按照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各0.01體積份，分別點(diǎn)于同一硅膠F254薄層板上，以體積比為6090°C石油醚乙酸乙酯甲酸=8:3:6的溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，在254nm紫外光燈下觀察；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；見(jiàn)附圖2;含量測(cè)定按照高效液相色譜法色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八垸基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積比為甲醇水三氯甲垸二乙胺=70:30:3:0.2的溶液為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為235nm;理論塔板數(shù)按烏頭堿峰計(jì)應(yīng)不低于1000;對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取烏頭堿對(duì)照品，加二氯甲烷制成每l體積份含0.00012重量份的溶液，即得；供試品溶液的制備精密稱(chēng)定本發(fā)明藥物組合物制劑25重量份，加無(wú)水乙醇35體積份，置水浴上加熱回流1.5小時(shí)，濾過(guò)，殘?jiān)脽o(wú)水乙醇4體積份多次洗滌，至洗凈；合并無(wú)水乙醇液，揮干，殘?jiān)?.5%鹽酸25體積份溶解，置冰浴中放置25分鐘，濾過(guò)，濾液加氨水調(diào)pH至9，用乙醚提取兩次，每次25體積份，合并乙醚提取液，室溫?fù)]去乙醚，殘?jiān)枚燃淄槭谷芙獠⒍ㄈ葜?體積份，搖勻，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液及供試品溶液各0.02體積份，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本發(fā)明藥物組合物膏劑每100重量份含鐵棒錘以烏頭堿C3晶50uN計(jì)，應(yīng)不得超過(guò)0.005重量份；本發(fā)明藥物組合物口服制劑按日服用劑量含鐵棒錘以烏頭堿C3凡50uN計(jì)，應(yīng)不得超過(guò)0.005重量份。本發(fā)明藥物組合物制劑的質(zhì)量控制方法優(yōu)選如下鑒別和/或含量測(cè)定中的一種或幾種鑒別A、顯微鑒別取本發(fā)明藥物組合物制劑，加水合氯醛透化1次，制片，置顯微鏡下觀察草酸鈣簇晶眾多，屬亞大黃里的主要特征結(jié)構(gòu)；韌皮纖維成束，木化周?chē)”诩?xì)胞含方晶成晶鞘纖維，為寬筋藤藥材中的主要特征結(jié)構(gòu)；石細(xì)胞類(lèi)圓形或卵形、長(zhǎng)方形，孔溝明顯，中央有紋孔，油滴淺黃色，管狀厚壁細(xì)胞木化，非腺毛3細(xì)胞，為藥材毛訶子中的主要特征結(jié)構(gòu)；見(jiàn)附圖1;B、薄層鑒別取本發(fā)明藥物組合物制劑20重量份，加石油醚30體積份，充分振搖，棄去石油醚，殘?jiān)右宜嵋阴?0體積份，充分振搖，取上清液，蒸干，殘?jiān)铀?0體積份溶解，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状糽體積份使溶解，作為供試品溶液；另取余甘子對(duì)照藥材1重量份，加甲醇20體積份，超聲處理30分鐘，濾過(guò)；濾液作為對(duì)照藥材溶液；按照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各0.01體積份，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以體積比為609(TC石油醚乙酸乙酯甲酸=6:4:5的溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，在254nm紫外光燈下觀察；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；見(jiàn)附圖2;含量測(cè)定按照高效液相色譜法色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積比為甲醇水.*三氯甲垸二乙胺=70:30:3:0.2的溶液為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為235mn;理論塔板數(shù)按烏頭堿峰計(jì)應(yīng)不低于1000;對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取烏頭堿對(duì)照品適量，加二氯甲烷制成每體積份含0.00015重量份的溶液，即得；供試品溶液的制備精密稱(chēng)定本發(fā)明藥物組合物制劑20重量份，加無(wú)水乙醇50體積份，置水浴上加熱回流1小時(shí)，濾過(guò)，殘?jiān)脽o(wú)水乙醇5體積份多次洗滌，至洗凈；合并無(wú)水乙醇液，揮干，殘?jiān)?%鹽酸30體積份溶解，置冰浴中放置20分鐘，濾過(guò)，濾液加氨水調(diào)pH至lO,用乙醚提取兩次，每次20體積份，合并乙醚提取液，室溫?fù)]去乙醚，殘?jiān)枚燃淄槭谷芙獠⒍ㄈ葜?體積份，搖勻，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液及供試品溶液各0.02體積份，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本發(fā)明藥物組合物膏劑每100重量份含鐵棒錘以烏頭堿UH^OuN計(jì)，應(yīng)不得超過(guò)0.005重量份；本發(fā)明藥物組合物口服制劑按日服用劑量含鐵棒錘以烏頭堿CmH450hN計(jì)，應(yīng)不得超過(guò)0.005重量份。其中，本發(fā)明所述的藥物組合物制劑是按《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》藏藥的第一冊(cè)中所述的青鵬膏劑制劑的配方，按照常規(guī)方法加入常規(guī)輔料制成的片劑、膠囊劑、散劑、軟膠囊劑、滴丸、蜜丸、丸劑、顆粒劑、蜜煉膏劑、緩釋制劑、速釋制劑、控釋制劑、口服液體制劑或注射制劑。本發(fā)明所述的重量份與體積份的比例為克/毫升。本發(fā)明藥物組合物質(zhì)量控制方法可以應(yīng)用于組合物的各種劑型，如片劑、膠囊、口服液、滴丸、噴霧劑、顆粒劑等臨床可接受的劑型，由于不同劑型的制劑其中所含的相當(dāng)生藥量是相同的，因此各個(gè)劑型在進(jìn)行質(zhì)量控制時(shí)，所選用樣品量可統(tǒng)一折算為相當(dāng)生藥量，本質(zhì)量控制方法中外用膏劑每100重量份含相當(dāng)生藥量10-50重量份，根據(jù)藥用部分不同用量有所差異；口服制劑日服用劑量的相當(dāng)生藥量為2-6g。本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題在發(fā)明一種本發(fā)明所述藥物組合物制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，提高產(chǎn)品質(zhì)量的可控性。并建立了鐵棒錘中烏頭堿以C34H450uN的限量檢查。通過(guò)本發(fā)明的質(zhì)量控制，提高了產(chǎn)品穩(wěn)定性，有利于工業(yè)化生產(chǎn)的質(zhì)量控制。圖l:青鵬膏劑粉末鑒別其中l(wèi)為草酸鈣簇晶、2為晶鞘纖維、3為石細(xì)胞、4為管狀厚壁細(xì)胞、5為油滴、6為非腺毛。圖2:余甘子薄層色譜從左到右斑點(diǎn)依次為樣品、樣品、樣品、余甘子對(duì)照藥材、余甘子對(duì)照藥材、余甘子對(duì)照藥材、缺余甘子的陰性對(duì)照?qǐng)D3:烏頭堿波長(zhǎng)選擇圖譜；其中圖3-1為235nm波長(zhǎng)圖譜，圖3-2為230nm波長(zhǎng)圖譜圖4:青鵬膏劑烏頭堿高效液相色譜其中圖4-1為樣品圖譜、圖4-2為烏頭堿對(duì)照品圖譜圖4-3為鐵棒錘陰性對(duì)照?qǐng)D譜、圖4-4為鐵棒棰藥材圖譜圖5:烏頭堿對(duì)照品濃度與峰面積。下述實(shí)驗(yàn)例用于進(jìn)一步說(shuō)明但不限于本發(fā)明。實(shí)驗(yàn)例烏頭堿的限度檢査按照國(guó)家對(duì)藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的相關(guān)規(guī)定，含有毒性藥材的產(chǎn)品應(yīng)建立相關(guān)成分的限量控制，本發(fā)明藥物組合物制劑中含有鐵棒錘，因鐵棒錘為毒性藥材，主含烏頭堿(CmH4s0uN)，故成品中增加了限度檢査，以烏頭堿為對(duì)照品，用高效液相色譜法測(cè)定制劑中的烏頭堿，結(jié)果表明，該方法簡(jiǎn)便可行、靈敏度高。根據(jù)測(cè)定結(jié)果及進(jìn)一步積累數(shù)據(jù)，制定更合理的限度，完善該標(biāo)準(zhǔn)。具體如下1.儀器與材料SP1000型高效液相色譜儀(美國(guó)SP公司)，SP100UVVIS紫外檢測(cè)器，浙江智達(dá)N2000色譜工作站，3300H型超聲波振蕩儀，METTLERAE240電子天平，烏頭堿對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品鑒定所提供，批號(hào)03112005)，供試品(本公司提供)；處方中其他藥材由本公司提供，經(jīng)檢驗(yàn)鑒定，符合原藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求。除甲醇為色譜醇外，其余試劑均為分析純。2.實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果2.l提取方法的選擇由于青鵬膏劑中水溶性基質(zhì)成分比較大，采用超聲提取無(wú)法使基質(zhì)完全溶解，這就影響了有效成分的提取，結(jié)果見(jiàn)表l。表1不同提取方法提取結(jié)果提取方法12樣品(烏頭堿)3mg/100g45回流超聲1小時(shí)2小時(shí)15分鐘30分鐘0.400.400.230.290.390.390.230.290.390.390.230.290.400.400.230.290.400.400.230.29通過(guò)以上結(jié)果比較，回流1小時(shí)與回流2小時(shí)區(qū)別不大，而回流與超聲區(qū)別較大。故采用回流l小時(shí)提取以提高提取率。2.2不同溶媒溶解效果比較烏頭堿標(biāo)準(zhǔn)品采用甲醇及二氯甲烷溶解后放置24小時(shí)比較，甲醇溶解液極不穩(wěn)定，進(jìn)樣后保留時(shí)間提前且雜質(zhì)峰增多，二氯甲烷溶解液放置后沒(méi)有變化，故采用二氯甲浣作為溶媒溶解烏頭堿。2.3最大吸收波長(zhǎng)的選擇烏頭堿在流動(dòng)相中最大吸收為230nm，但雜質(zhì)干擾大，故在235nm處檢測(cè)。結(jié)果見(jiàn)附圖3。2.4供試品溶液的制備取本發(fā)明藥物組合物制劑20g,精密稱(chēng)定，加無(wú)水乙醇50ml，置水浴上加熱回流l小時(shí)，濾過(guò)，殘?jiān)?ml無(wú)水乙醇分次洗滌，合并無(wú)水乙醇液，揮干，殘?jiān)?%鹽酸30ml溶解，置冰浴中20分鐘，濾過(guò)，濾液加氨水調(diào)pH至10，用乙醚提取兩次，每次20ml，合并乙醚提取液，室溫?fù)]干，殘?jiān)佣燃综谷芙獠⒍ㄈ葜?ml量瓶中，即得。2.5對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取烏頭堿對(duì)照品適量，加二氯甲烷制成每lml含0.78mg的溶液，即得。2.6鐵棒錘陰性對(duì)照液的制備按處方比例，另取缺鐵棒錘的陰性對(duì)照藥材，同法制備陰性對(duì)照溶液。2.7色譜條件的選擇用十八烷基鍵合硅膠為填充劑；色譜柱KromasilC18柱(4.6X250mm，Zirchrom色譜技術(shù)中心);甲醇水三氯甲垸二乙胺(70:30:3:0.2)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為235nm，流速1.0ml/min;進(jìn)樣體積為20ul，檢測(cè)器靈敏度1.OOOmu。2.8系統(tǒng)適用性試驗(yàn)2.8.1理論塔板數(shù)(n)n=5.54(tR/W0.5h)2=1000規(guī)定理論塔板數(shù)應(yīng)不低于1000。2.8.2分離度(R)R=2(tR2tRl)/(Wl+W2)=2.1分離度大于1.5，符合規(guī)定要求。2.8.3拖尾因子(T)T二WO.05h/2dl=0.97拖尾因子在0.951.05之間，符合規(guī)定要求。2.8.4陰性干擾試驗(yàn)精密吸取供試品溶液、陰性液和對(duì)照品溶液各20ul注入液相色譜儀中，由色譜圖可知，在與對(duì)照品色譜峰保留時(shí)間相應(yīng)的位置上，供試品液具有相同保留時(shí)間的色譜峰出現(xiàn)；而陰性液在此峰位無(wú)吸收，對(duì)本發(fā)明藥物組合物制劑中烏頭堿的含量測(cè)定無(wú)干擾。見(jiàn)附圖4。2.9標(biāo)準(zhǔn)曲線與線性范圍精密吸取烏頭堿對(duì)照品溶液1.Onil、2.Oml、3.0ml、5.0ml、7.0ml、7.Oml至10ml量瓶中，分別用二氯甲烷制成78.Oug/ml、156.Oug/ml、234.Oug/ml、390.0ug/ml、546.0ug/ml、780.Oug/ml的對(duì)照溶液，各精密吸取20nl，注入液相色譜儀，測(cè)定峰面積，結(jié)果見(jiàn)附圖5。以峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)樣濃度為橫坐標(biāo)，進(jìn)行線形回歸分析，回歸方程為Y=6870.2X343024，r=0.9991，烏頭堿在78.0780.Oug/ml范圍內(nèi)呈良好的線形關(guān)系。2.10精密度試驗(yàn)精密吸取對(duì)照品溶液20ul，注入色譜儀，連續(xù)進(jìn)樣5次，測(cè)定峰面積，計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，結(jié)果見(jiàn)表2。<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>2.11重現(xiàn)性試驗(yàn)取20011105批樣品，按樣品的制備方法制備6份，同法制成供試品溶液，測(cè)定，記錄峰面積，計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，結(jié)果見(jiàn)表3。結(jié)果表明該方法重復(fù)性較好，RSDy。符合規(guī)定。<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>2.11穩(wěn)定性試驗(yàn)取含量測(cè)定項(xiàng)下(20011105批)的樣品溶液，放置0、2h、4h、6h、8h、10h、12h，分別測(cè)定峰面積，計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，結(jié)果見(jiàn)表5，表明樣品在12小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。表4穩(wěn)定性試驗(yàn)<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>2.12加樣回收試驗(yàn)精密稱(chēng)定已知含量的20011105批(O.43mg/100g)樣品6份(每份約20g),精密加入烏頭堿對(duì)照品溶液(78.0ug/ml)lml，同樣品制備方法和烏頭堿含量測(cè)定方法操作，測(cè)定峰面積，計(jì)算回收率，結(jié)果見(jiàn)表5。表5加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>2.13樣品的含量測(cè)定精密吸取供試品溶液20ul，注入液相色譜儀,記錄峰面積，計(jì)算，即得，結(jié)果見(jiàn)表6。表6<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>根據(jù)10批樣品含量測(cè)定結(jié)果，本發(fā)明藥物組合物制劑每100g烏頭堿含量在O.260.78之間，故暫定樣品中每100g含鐵棒錘以烏頭堿C34H450nN計(jì)，應(yīng)不得過(guò)1.0mg。下述實(shí)施例均能實(shí)現(xiàn)上述實(shí)驗(yàn)例的效果。具體實(shí)施例方式實(shí)施例1:本發(fā)明藥物組合物膏劑的鑒別方法和含量測(cè)定方法鑒別A、顯微鑒別取本發(fā)明藥物組合物膏劑，加水合氯醛透化l次，制片，置顯微鏡下觀察草酸鈣簇晶眾多，屬亞大黃里的主要特征結(jié)構(gòu)；韌皮纖維成束，木化周?chē)”诩?xì)胞含方晶成晶鞘纖維，為寬筋藤藥材中的主要特征結(jié)構(gòu)；石細(xì)胞類(lèi)圓形或卵形、長(zhǎng)方形，孔溝明顯，中央有紋孔，油滴淺黃色，管狀厚壁細(xì)胞木化，非腺毛4細(xì)胞，為藥材毛訶子中的主要特征結(jié)構(gòu)；B、薄層鑒別取本發(fā)明藥物組合物膏劑25g，加石油醚25ml，充分振搖，棄去石油醚，殘?jiān)右宜嵋阴?5ml，充分振搖，取上清液，蒸干，殘?jiān)铀?5ml溶解，濾過(guò)；濾液蒸干，殘?jiān)蛹状技slml使溶解，作為供試品溶液。另取余甘子對(duì)照藥材2g，加甲醇15ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)；濾液作為對(duì)照藥材溶液。按照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各10ul，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以體積比為6090'C石油醚乙酸乙酯甲酸=4:5:4的溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，在254mn紫外光燈下觀察。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。含量測(cè)定按照高效液相色譜法測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八垸基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積比為甲醇水三氯甲烷二乙胺=70:30:3:0.2的溶液為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為235rnn;理論塔板數(shù)按烏頭堿峰計(jì)應(yīng)不低于1000。對(duì)照品溶液的制備:精密稱(chēng)取烏頭堿對(duì)照品適量，加二氯甲垸制成每lml含0.00020g的溶液，即得。供試品溶液的制備取本發(fā)明藥物組合物膏劑15g，精密稱(chēng)定，加無(wú)水乙醇60ml，置水浴上加熱回流1小時(shí)，濾過(guò)，殘?jiān)脽o(wú)水乙醇6ml多次洗滌，至洗凈；合并無(wú)水乙醇液，揮干，殘?jiān)?%鹽酸30ml溶解，置冰浴中放置15分鐘，濾過(guò)，濾液加氨水調(diào)pH至ll，用乙醚提取兩次，每次12ml，合并乙醚提取液，室溫?fù)]去乙醚，殘?jiān)枚燃淄槭谷芙獠⒍ㄈ葜?ml，搖勻，即得。測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液及供試品溶液各20ul，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。每100g本發(fā)明藥物組合物膏劑含生藥量10-50g，含鐵棒錘以烏頭堿C34H450uN計(jì)，應(yīng)不得過(guò)0.005g。實(shí)施例2:本發(fā)明藥物組合物片劑的鑒別方法和含量測(cè)定方法鑒別A、顯微鑒別取本發(fā)明藥物組合物片劑，加水合氯醛透化2次，制片置顯微鏡下觀察草酸鈣簇晶眾多，屬亞大黃里的主要特征結(jié)構(gòu)；韌皮纖維成束，木化周?chē)”诩?xì)胞含方晶成晶鞘纖維，為寬筋藤藥材中的主要特征結(jié)構(gòu)；石細(xì)胞類(lèi)圓形或卵形、長(zhǎng)方形，孔溝明顯，中央有紋孔，油滴淺黃色，管狀厚壁細(xì)胞木化，非腺毛3細(xì)胞；B、薄層鑒別取本發(fā)明藥物組合物片劑15g，加石油醚30ml，充分振搖，棄去石油醚，殘?jiān)右宜嵋阴?5ml，充分振搖，取上清液，蒸干，殘?jiān)铀?5ml溶解，濾過(guò)；濾液蒸干，殘?jiān)蛹状技s2ml使溶解，作為供試品溶液。另取余甘子對(duì)照藥材1.5g，加甲醇25ml，超聲處理25分鐘，濾過(guò)，濾液作為對(duì)照藥材溶液。按照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各10ul，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以體積比為6090'C石油醚乙酸乙酯甲酸=8:3:5的溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，在254nm紫外光燈下觀察。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。含量測(cè)定含量測(cè)定按照高效液相色譜法色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅垸鍵合硅膠為填充劑；以體積比為甲醇水三氯甲垸二乙胺=70:30:3:0.2的溶液為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為235mn;理論塔板數(shù)按烏頭堿峰計(jì)應(yīng)不低于1000。對(duì)照品溶液的制備:精密稱(chēng)取烏頭堿對(duì)照品適量，加二氯甲垸制成每lml含0.00015g的溶液，即得。供試品溶液的制備取本發(fā)明藥物組合物片劑25g，精密稱(chēng)定，加無(wú)水乙醇40ml，置水浴上加熱回流2小時(shí)，濾過(guò)，殘?jiān)脽o(wú)水乙醇4ml多次洗滌，至洗凈；合并無(wú)水乙醇液，揮干，殘?jiān)?.5%鹽酸25ml溶解，置冰浴中放置25分鐘，濾過(guò)，濾液加氨水調(diào)pH至9，用乙醚提取兩次，每次25ml，合并乙醚提取液，室溫?fù)]去乙醚，殘?jiān)枚燃综谷芙獠⒍ㄈ葜羖ml，搖勻，即得。測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液及供試品溶液各20ul，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。本發(fā)明藥物組合物片劑按日服用劑量含鐵棒錘以烏頭堿CmH450hN計(jì)，應(yīng)不得過(guò)0.005g;日服用劑量的相當(dāng)生藥量為2-6g，每片重0.5g，每日口服4-8片。實(shí)施例3:本發(fā)明藥物藥物組合物口服液的鑒別方法A、顯微鑒別取本發(fā)明藥物組合物口服液，加水合氯醛透化3次，制片，置顯微鏡下觀察草酸鈣簇晶眾多，屬亞大黃里的主要特征結(jié)構(gòu)；韌皮纖維成束，木化周?chē)”诩?xì)胞含方晶成晶鞘纖維，為寬筋藤藥材中的主要特征結(jié)構(gòu)；石細(xì)胞類(lèi)圓形或卵形、長(zhǎng)方形，孔溝明顯，中央有紋孔，油滴淺黃色，管狀厚壁細(xì)胞木化，非腺毛l細(xì)胞；B、薄層鑒別取本發(fā)明藥物組合物口服液25ml，加石油醚25ml，充分振搖，棄去石油醚，殘?jiān)右宜嵋阴?5ml，充分振搖，取上清液，蒸干，殘?jiān)铀?5ml溶解，濾過(guò)；濾液蒸干，殘?jiān)蛹状技s1.5ml使溶解，作為供試品溶液。另取余甘子對(duì)照藥材2g，加甲醇15ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液作為對(duì)照藥材溶液。按照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各10ul，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以體積比為609(TC石油醚乙酸乙酯甲酸=4:5:4的溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，在254nm紫外光燈下觀察。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。實(shí)施例4:本發(fā)明藥物組合物顆粒劑的含量測(cè)定方法含量測(cè)定按照高效液相色譜法測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積比為甲醇水三氯甲垸二乙胺二70:30:3:0.2的溶液為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為235nm;理論塔板數(shù)按烏頭堿峰計(jì)應(yīng)不低于1000。對(duì)照品溶液的制備:精密稱(chēng)取烏頭堿對(duì)照品適量，加二氯甲垸制成每lml含0.00025g的溶液，即得。供試品溶液的制備取本發(fā)明藥物組合物顆粒劑15g，精密稱(chēng)定，加無(wú)水乙醇60ml，置水浴上加熱回流l小時(shí)，濾過(guò)，殘?jiān)脽o(wú)水乙醇6ml多次洗滌，至洗凈；合并無(wú)水乙醇液，揮干，殘?jiān)?%鹽酸30ml溶解，置冰浴中放置15分鐘，濾過(guò)，濾液加氨水調(diào)pH至10，用乙醚提取兩次，每次12ml,合并乙醚提取液，室溫?fù)]去乙醚，殘?jiān)枚燃淄槭谷芙獠⒍ㄈ葜?ml，搖勻，即得。測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液及供試品溶液各20ul，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。本發(fā)明藥物組合物顆粒劑按日服用劑量含鐵棒錘以烏頭堿C34H45OuN計(jì)，應(yīng)不得過(guò)0.005g，日服用劑量為10g，日服用劑量的相當(dāng)生藥量為2-6g。實(shí)施例5:本發(fā)明藥物組合物膠囊制劑的鑒別方法A、顯微鑒別取本發(fā)明藥物組合物膠囊制劑，加水合氯醛透化2次，制片，置顯微鏡下觀察置顯微鏡下觀察草酸鈣簇晶眾多，屬亞大黃里的主要特征結(jié)構(gòu)；韌皮纖維成束，木化周?chē)”诩?xì)胞含方晶成晶鞘纖維，為寬筋藤藥材中的主要特征結(jié)構(gòu)；石細(xì)胞類(lèi)圓形或卵形、長(zhǎng)方形，孔溝明顯，中央有紋孔，油滴淺黃色，管狀厚壁細(xì)胞木化，非腺毛3細(xì)胞；B、薄層鑒別本發(fā)明藥物組合物膠囊制劑15g，加石油醚340ml，充分振搖，棄去石油醚，殘?jiān)右宜嵋阴?0ml，充分振搖，取上清液，蒸干，殘?jiān)铀?0ml溶解，濾過(guò)；濾液蒸干，殘?jiān)蛹状技s2ml使溶解，作為供試品溶液。另取余甘子對(duì)照藥材lg，加甲醇20ml，超聲處理300分鐘，濾過(guò)，濾液作為對(duì)照藥材溶液。按照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各10ul，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以體積比為609(TC石油醚乙酸乙酯甲酸=5:4:5的溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，在254nm紫外光燈下觀察。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。權(quán)利要求1、一種藥物組合物制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法包括如下鑒別和/或含量測(cè)定中的一種或幾種鑒別A、顯微鑒別取本發(fā)明藥物組合物制劑，加水合氯醛透化1～3次，制片，置顯微鏡下觀察草酸鈣簇晶眾多，屬亞大黃里的主要特征結(jié)構(gòu)；韌皮纖維成束，木化周?chē)”诩?xì)胞含方晶成晶鞘纖維，為寬筋藤藥材中的主要特征結(jié)構(gòu)；石細(xì)胞類(lèi)圓形或卵形、長(zhǎng)方形，孔溝明顯，中央有紋孔，油滴淺黃色，管狀厚壁細(xì)胞木化，非腺毛1～4細(xì)胞，為藥材毛訶子中的主要特征結(jié)構(gòu)；B、薄層鑒別取本發(fā)明藥物組合物制劑10～30重量份，加石油醚20～60體積份，充分振搖，棄去石油醚，殘?jiān)右宜嵋阴?0～30體積份，充分振搖，取上清液，蒸干，殘?jiān)铀?0～30體積份溶解，濾過(guò)；將濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?～3體積份使溶解，作為供試品溶液；另取余甘子對(duì)照藥材1～3重量份，加甲醇10～30體積份，超聲處理20～40分鐘，濾過(guò)，濾液作為對(duì)照藥材溶液；按照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各0.01體積份，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以體積比為60～90℃石油醚∶乙酸乙酯∶甲酸＝3～9∶2～6∶3～7的溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，在254nm紫外光燈下觀察；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；含量測(cè)定按照高效液相色譜法測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積比為甲醇∶水∶三氯甲烷∶二乙胺＝60～80∶20～40∶2～4∶0.1～0.3的溶液為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為235nm；理論塔板數(shù)按烏頭堿峰計(jì)應(yīng)不低于1000；對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取烏頭堿對(duì)照品，加二氯甲烷制成每1體積份含0.00010～0.00030重量份的溶液，即得；供試品溶液的制備精密稱(chēng)定本發(fā)明藥物組合物制劑10～30重量份，加無(wú)水乙醇30～70體積份，置水浴上加熱回流1～2小時(shí)，濾過(guò)，殘?jiān)脽o(wú)水乙醇3～7體積份多次洗滌，至洗凈；合并無(wú)水乙醇液，揮干，殘?jiān)?.5～2％鹽酸20～40體積份溶解，置冰浴中放置10～30分鐘，濾過(guò)，濾液加氨水調(diào)pH至8～12，用乙醚提取兩次，每次10～30體積份，合并乙醚提取液，室溫?fù)]去乙醚，殘?jiān)枚燃淄槭谷芙獠⒍ㄈ葜?～3體積份，搖勻，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液及供試品溶液各0.02體積份，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本發(fā)明藥物組合物膏劑每100重量份含鐵棒錘以烏頭堿C34H45O11N計(jì)，應(yīng)不得超過(guò)0.005重量份；本發(fā)明藥物組合物口服制劑按日服用劑量含鐵棒錘以烏頭堿C34H45O11N計(jì)，應(yīng)不得超過(guò)0.005重量份。2、如權(quán)利要求1所述的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法包括如下鑒別和/或含量測(cè)定中的一種或幾種-鑒別A、顯微鑒別取本發(fā)明藥物組合物制劑，加水合氯醛透化2次，制片，置顯微鏡下觀察草酸鈣簇晶眾多，屬亞大黃里的主要特征結(jié)構(gòu)；韌皮纖維成束，木化周?chē)”诩?xì)胞含方晶成晶鞘纖維，為寬筋藤藥材中的主要特征結(jié)構(gòu)；石細(xì)胞類(lèi)圓形或卵形、長(zhǎng)方形，孔溝明顯，中央有紋孔，油滴淺黃色，管狀厚壁細(xì)胞木化，非腺毛1細(xì)胞，為藥材毛訶子中的主要特征結(jié)構(gòu)；B、薄層鑒別取本發(fā)明藥物組合物制劑12重量份，加石油醚35體積份，充分振搖，棄去石油醚，殘?jiān)右宜嵋阴?5體積份，充分振搖，取上清液，蒸干，殘?jiān)铀?5體積份溶解，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?體積份使溶解，作為供試品溶液；另取余甘子對(duì)照藥材2重量份，加甲醇25體積份，超聲處理25分鐘，濾過(guò)，濾液作為對(duì)照藥材溶液；按照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各0.01體積份，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以體積比為609(TC石油醚乙酸乙酯甲酸=8:3:6的溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，在254nm紫外光燈下觀察；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；含量測(cè)定按照高效液相色譜法測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積比為甲醇水三氯甲烷二乙胺=70:30:3:0.2的溶液為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為235nm;理論塔板數(shù)按烏頭堿峰計(jì)應(yīng)不低于1000;對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取烏頭堿對(duì)照品，加二氯甲烷制成每l體積份含0.00012重量份的溶液，即得；供試品溶液的制備精密稱(chēng)定本發(fā)明藥物組合物制劑25重量份，加無(wú)水乙醇35體積份，置水浴上加熱回流1.5小時(shí)，濾過(guò)，殘?jiān)脽o(wú)水乙醇4體積份多次洗滌，至洗凈；合并無(wú)水乙醇液，揮干，殘?jiān)?.5%鹽酸25體積份溶解，置冰浴中放置25分鐘，濾過(guò)，濾液加氨水調(diào)pH至9，用乙醚提取兩次，每次25體積份，合并乙醚提取液，室溫?fù)]去乙醚，殘?jiān)枚燃淄槭谷芙獠⒍ㄈ葜?體積份，搖勻，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液及供試品溶液各0.02體積份，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本發(fā)明藥物組合物膏劑每100重量份含鐵棒錘以烏頭堿C34H450uN計(jì)，應(yīng)不得超過(guò)0.005重量份；本發(fā)明藥物組合物口服制劑按日服用劑量含鐵棒錘以烏頭堿C34H450uN計(jì)，應(yīng)不得超過(guò)0.005重量份。3、如權(quán)利要求1所述的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法包括如下鑒別和/或含量測(cè)定中的一種或幾種鑒別A、顯微鑒別取本發(fā)明藥物組合物制劑，加水合氯醛透化1次，制片，置顯微鏡下觀察草酸鈣簇晶眾多，屬亞大黃里的主要特征結(jié)構(gòu)；韌皮纖維成束，木化周?chē)”诩?xì)胞含方晶成晶鞘纖維，為寬筋藤藥材中的主要特征結(jié)構(gòu)；石細(xì)胞類(lèi)圓形或卵形、長(zhǎng)方形，孔溝明顯，中央有紋孔，油滴淺黃色，管狀厚壁細(xì)胞木化，非腺毛3細(xì)胞；B、薄層鑒別取本發(fā)明藥物組合物制劑20重量份，加石油醚30體積份，充分振，棄去石油醚，殘?jiān)右宜嵋阴?0體積份，充分振搖，取上清液，蒸干，殘?jiān)铀?0體積份溶解，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状糽體積份使溶解，作為供試品溶液；另取余甘子對(duì)照藥材1重量份，加甲醇20體積份，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液作為對(duì)照藥材溶液；按照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各0.01體積份，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以體積比為609(TC石油醚乙酸乙酯甲酸二6:4:5的溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，在254nm紫外光燈下觀察；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；含量測(cè)定按照高效液相色譜法測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積比為甲醇水三氯甲垸二乙胺=70:30:3:0.2的溶液為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為235nm;理論塔板數(shù)按烏頭堿峰計(jì)應(yīng)不低于1000;對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取烏頭堿對(duì)照品適量，加二氯甲垸制成每體積份含0.00015重量份的溶液，即得；供試品溶液的制備精密稱(chēng)定本發(fā)明藥物組合物制劑20重量份，加無(wú)水乙醇50體積份，置水浴上加熱回流1小時(shí)，濾過(guò)，殘?jiān)脽o(wú)水乙醇5體積份多次洗滌，至洗凈；合并無(wú)水乙醇液，揮干，殘?jiān)?%鹽酸30體積份溶解，置冰浴中放置20分鐘，濾過(guò)，濾液加氨水調(diào)pH至lO，用乙醚提取兩次，每次20體積份，合并乙醚提取液，室溫?fù)]去乙醚，殘?jiān)枚燃淄槭谷芙獠⒍ㄈ葜?體積份，搖勻，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液及供試品溶液各0.02體積份，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本發(fā)明藥物組合物膏劑每100重量份含鐵棒錘以烏頭堿C34H450nN計(jì)，應(yīng)不得超過(guò)0.005重量份；本發(fā)明藥物組合物口服制劑按日服用劑量含鐵棒錘以烏頭堿CmH^OhN全文摘要本發(fā)明公開(kāi)了一種藥物組合物制劑的質(zhì)量控制方法及檢測(cè)方法，特別涉及青鵬膏劑及其制劑的質(zhì)量控制方法及其檢測(cè)方法。本發(fā)明質(zhì)量控制方法提高了青鵬膏劑及其制劑產(chǎn)品質(zhì)量的可控性，并建立了鐵棒錘中烏頭堿C₃₄H₄₅O₁₁N的含量測(cè)定；通過(guò)本發(fā)明的質(zhì)量控制方法，提高產(chǎn)品的穩(wěn)定性，有利于工業(yè)化生產(chǎn)的質(zhì)量控制。文檔編號(hào)G01N30/00GK101336972SQ20081011813公開(kāi)日2009年1月7日申請(qǐng)日期2008年8月13日優(yōu)先權(quán)日2008年8月13日發(fā)明者包旭宏,張櫻山,陳麗娟申請(qǐng)人:甘肅奇正藏藥有限公司