專(zhuān)利名稱(chēng)：一種測(cè)試強(qiáng)陰離子交換固相萃取柱性能的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及色譜分析技術(shù)，具體的說(shuō)是一種測(cè)試強(qiáng)陰離子交換固相萃取柱性能的方法。
背景技術(shù)：
固相萃取(Solid Phase Extraction,簡(jiǎn)稱(chēng)SPE)是從20世紀(jì)80年代中期開(kāi)始發(fā)展起來(lái)的一種樣品前處理技術(shù)。它是通過(guò)固體吸附劑的選擇性吸附和洗脫將液體樣品(固體樣品也可先制成液體樣品)中的目標(biāo)化合物與干擾化合物分離，以達(dá)到富集、分離、凈化樣品的目的。SPE是一個(gè)包括液相和固相的物理萃取過(guò)程，在固相萃取過(guò)程中，吸附劑對(duì)目標(biāo)化合物的吸附力大于樣品母液，當(dāng)樣品通過(guò)SPE柱時(shí)，目標(biāo)化合物被吸附在固體表面，其他組分則隨樣品母液通過(guò)柱子，最后再用適當(dāng)?shù)娜軇⒛繕?biāo)化合物洗脫并收集，然后進(jìn)行色譜分析。固相萃取與傳統(tǒng)的液液萃取相比有以下4個(gè)優(yōu)點(diǎn)(1)可以獲得高的回收率和高的富集倍數(shù)；(2)減少了高純有機(jī)溶劑的用量，減少了對(duì)環(huán)境的污染，同時(shí)減少了有機(jī)溶劑中的雜質(zhì)對(duì)被測(cè)分析物的影響；(3)無(wú)相分離操作，避免了乳化影響，易于收集分析物組分；(4)操作簡(jiǎn)單、快速、易于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化。在過(guò)去的二十多年里，SPE已經(jīng)成為最有用的樣品前處理技術(shù)，用于色譜分析之前的快速、選擇性的樣品制備，從而延長(zhǎng)色譜系統(tǒng)的壽命，改善定性和定量分析性能。它也可將目標(biāo)分析物的原始基質(zhì)環(huán)境變成較為簡(jiǎn)單以適合后續(xù)分析的體系，從而一定程度上緩解了對(duì)分析儀器的要求。固相萃取技術(shù)是目前環(huán)境、食品、生物等領(lǐng)域廣泛應(yīng)用的樣品前處理方法。但是由于SPE柱與材料種類(lèi)繁多，不同種類(lèi)、不同品牌間性能存在很大差異，使得測(cè)量結(jié)果不確定性增加。針對(duì)SPE柱及材料的評(píng)價(jià)目前還沒(méi)有形成體系，缺乏行之有效的測(cè)試方法。因此，研究SPE柱與SPE材料的評(píng)價(jià)方法，建立SPE柱測(cè)試評(píng)價(jià)的方法與參數(shù)， 對(duì)于保證產(chǎn)品質(zhì)量，正確選擇與使用SPE柱非常必要。強(qiáng)陰離子交換固相萃取柱主要應(yīng)用于濫用藥物和生物體液中的藥物化合物、除去食品/農(nóng)產(chǎn)品樣品中的脂肪酸、尿液中的有機(jī)酸、土壤中的除草劑等醫(yī)藥和環(huán)境樣品前處理。所以，評(píng)價(jià)強(qiáng)陰離子交換固相萃取柱有很大的現(xiàn)實(shí)意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種測(cè)試強(qiáng)陰離子交換固相萃取柱性能的方法。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案為一種測(cè)試強(qiáng)陰離子交換固相萃取柱性能的方法將強(qiáng)陰離子交換固相萃取柱特異性吸附目標(biāo)化合物磺基水楊酸或鳥(niǎo)苷5'-磷酸二鈉，而后檢測(cè)目標(biāo)化合物在固相萃取柱上的有效保留，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)對(duì)強(qiáng)陰離子交換固相萃取柱性能的測(cè)試。首先強(qiáng)陰離子交換固相萃取柱活化，將強(qiáng)陰離子交換固相萃取柱依次用甲醇、蒸餾水和乙酸鈉水溶液沖洗萃取柱，以?xún)艋腿≈?，并提高其活性；其次上樣將目?biāo)化合物溶液逐漸加入到固相萃取柱迫使目標(biāo)化合物溶液通過(guò)固定相，使目標(biāo)化合物保留在固定相上；最后通過(guò)洗脫液氨水水溶液和甲醇的混合溶液洗脫，使目標(biāo)化合物洗脫下來(lái)，而后進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算回收率。所述強(qiáng)陰離子交換固相萃取柱活化，對(duì)強(qiáng)陰離子交換固相萃取柱沖洗，依次采用 3ml甲醇、3ml水、3ml的0. 05mol/L乙酸鈉水溶液活化，控制的液體流速在0. 3 1. Oml/ min。所述目標(biāo)化合物溶液為0. 6 1. 3mg/ml的磺基水楊酸或0. 6 1. 3mg/ml鳥(niǎo)苷5'-磷酸二鈉，上樣體積為3 6ml。所述目標(biāo)化合物洗脫前將固相萃取柱依次用3ml蒸餾水、3ml 甲醇淋洗固相萃取柱，控制的液體流速在0. 3 1. Oml/min。所述洗脫液為5%氨水的水溶液和甲醇，5%氨水的水溶液和甲醇的體積比為50-100 50-0，控制的液體流速在0. 3 1. Oml/min。所述測(cè)定回收率，將收集的洗脫液定容后通過(guò)液相色譜進(jìn)行分析其濃度，而后計(jì)算回收率

回收率 ％= c/c。X100%式中，c為洗脫溶液的濃度，C0為上樣標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度。所述液相色譜分析條件當(dāng)目標(biāo)化合物為磺基水楊酸時(shí)流動(dòng)相為按體積比為 70 30的乙腈和濃度為0. 05mol/L的磷酸二氫鉀；流速為1. O 1. 8ml/min ；柱溫為30°C; 紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為215nm ；進(jìn)樣量為10 20 μ L ；當(dāng)目標(biāo)化合物為鳥(niǎo)苷5’-磷酸二鈉時(shí)流動(dòng)相為按體積比為30 70的乙腈和濃度為0. 05mol/L磷酸二氫鉀；流速為1. O 1. 8ml/min ； 柱溫為30°C ；紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為253nm ；進(jìn)樣量為10 20 μ L。本發(fā)明所具有的優(yōu)點(diǎn)1.本發(fā)明分別采用磺基水楊酸和鳥(niǎo)苷5’_磷酸二鈉為目標(biāo)化合物，建立了測(cè)試評(píng)價(jià)強(qiáng)陰離子交換固相萃取柱的方法。2.本發(fā)明通過(guò)優(yōu)化上樣溶劑、淋洗溶劑組成與條件，能夠保證在測(cè)試中檢測(cè)化合物在固相萃取柱上的有效保留。3.本發(fā)明建立了洗脫保留于固相萃取柱上的目標(biāo)化合物的溶劑組成條件，能夠?qū)⑽接诠滔噍腿≈系哪繕?biāo)物全部洗脫，用于液相色譜檢測(cè)。4.本發(fā)明建立了液相色譜分離條件，并通過(guò)測(cè)試計(jì)算上樣回收率的方法進(jìn)行不同品牌固相萃取柱性能綜合比較分析評(píng)價(jià)。該測(cè)試方法的建立，能夠有效評(píng)價(jià)強(qiáng)陰離子交換固相萃取柱的吸附性能、重復(fù)性等性能。


圖1為磺基水楊酸在不同流動(dòng)相比例的色譜圖。圖2為磺基水楊酸在不同品牌強(qiáng)陰離子交換固相萃取柱上回收率結(jié)果圖。圖3為鳥(niǎo)苷5'-磷酸二鈉在不同品牌強(qiáng)陰離子交換固相萃取柱上回收率結(jié)果圖。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1用磺基水楊酸作為目標(biāo)化合物對(duì)圖2中Agela Cleanert強(qiáng)陰離子交換固相萃取柱進(jìn)行測(cè)試
強(qiáng)陰離子交換固相萃取柱依次采用3ml甲醇、3ml水、3ml的0. 05mol/L乙酸鈉水溶液活化，流速為0. 5ml/min,然后取目標(biāo)化合物1. 000mg/ml磺基水楊酸5ml上樣。而后依次采用3ml水、3ml甲醇淋洗固相萃取柱，速度為0. 5ml/min，最后用5ml體積比為50/50的 5%氨水溶液和甲醇洗脫，速度為0. 5ml/min，收集洗脫溶液，定容于5ml，過(guò)水相濾膜之后， 進(jìn)行高效液相色譜分析。流動(dòng)相為按體積比為70 30的乙腈和濃度為0.05mol/L的磷酸二氫鉀；流速為 1. 7ml/min ；柱溫為30°C;紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為215nm ；進(jìn)樣量為20 μ L(參見(jiàn)圖1)。所述測(cè)定回收率，將收集的洗脫液定容后通過(guò)液相色譜進(jìn)行分析其濃度。每個(gè)溶液進(jìn)行3次分析取平均值。重復(fù)上述實(shí)驗(yàn)共兩次。而后計(jì)算回收率回收率c/cQX100%，式中，c和Cq(Cq為1.000mg/ml)分別為洗脫溶液和上樣標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度。按照上述步驟，改變洗脫溶劑中5%氨水溶液和甲醇比例分別為70/30和100/0， 重復(fù)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。測(cè)試濃度數(shù)據(jù)和回收率數(shù)據(jù)見(jiàn)表1和圖2。表1 5%氨水水溶液-甲醇不同體積比時(shí)磺基水楊酸的回收率
權(quán)利要求
1.一種測(cè)試強(qiáng)陰離子交換固相萃取柱性能的方法，其特征在于將強(qiáng)陰離子交換固相萃取柱特異性吸附目標(biāo)化合物磺基水楊酸或鳥(niǎo)苷5'-磷酸二鈉，而后檢測(cè)目標(biāo)化合物在固相萃取柱上的有效保留，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)對(duì)強(qiáng)陰離子交換固相萃取柱性能的測(cè)試。
2.按權(quán)利要求1所述的測(cè)試強(qiáng)陰離子交換固相萃取柱性能的方法，其特征在于首先強(qiáng)陰離子交換固相萃取柱活化，將強(qiáng)陰離子交換固相萃取柱依次用甲醇、蒸餾水和乙酸鈉水溶液沖洗萃取柱，以?xún)艋腿≈?，并提高其活性；其次上樣將目?biāo)化合物溶液逐漸加入到固相萃取柱迫使目標(biāo)化合物溶液通過(guò)固定相，使目標(biāo)化合物保留在固定相上；最后通過(guò)洗脫液氨水水溶液和甲醇的混合溶液洗脫，使目標(biāo)化合物洗脫下來(lái)，而后進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算回收率。
3.按權(quán)利要求2所述的測(cè)試強(qiáng)陰離子交換固相萃取柱性能的方法，其特征在于所述強(qiáng)陰離子交換固相萃取柱活化，對(duì)強(qiáng)陰離子交換固相萃取柱沖洗，依次采用Siil甲醇、3ml 水、3ml的0. 05mol/L乙酸鈉水溶液活化，控制的液體流速在0. 3 1. Oml/min。
4.按權(quán)利要求2所述的測(cè)試強(qiáng)陰離子交換固相萃取柱性能的方法，其特征在于所述目標(biāo)化合物溶液為0. 6 1. 3mg/ml的磺基水楊酸或0. 6 1. 3mg/ml鳥(niǎo)苷5'-磷酸二鈉， 上樣體積為3 6ml。
5.按權(quán)利要求2所述的測(cè)試強(qiáng)陰離子交換固相萃取柱性能的方法，其特征在于所述目標(biāo)化合物洗脫前將固相萃取柱依次用3ml蒸餾水、3ml甲醇淋洗固相萃取柱，控制的液體流速在 0. 3 1. Oml/min。
6.按權(quán)利要求2所述的測(cè)試強(qiáng)陰離子交換固相萃取柱性能的方法，其特征在于所述洗脫液為5%氨水的水溶液和甲醇，5%氨水的水溶液和甲醇的體積比為50-100 50-0，控制的液體流速在0. 3 1. Oml/min。
7.按權(quán)利要求2所述的測(cè)試強(qiáng)陰離子交換固相萃取柱性能的方法，其特征在于所述測(cè)定回收率，將收集的洗脫液定容后通過(guò)液相色譜進(jìn)行分析其濃度，而后計(jì)算回收率回收率 ％= c/c0X100%式中，c為洗脫溶液的濃度，C0為上樣標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度。
8.按權(quán)利要求2所述的測(cè)試強(qiáng)陰離子交換固相萃取柱性能的方法，其特征在于所述液相色譜分析條件當(dāng)目標(biāo)化合物為磺基水楊酸時(shí)流動(dòng)相為按體積比為70 30的乙腈和濃度為0. 05mol/L的磷酸二氫鉀；流速為1. O 1. 8ml/min ；柱溫為30°C ；紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為 215nm ；進(jìn)樣量為10 20 μ L ；當(dāng)目標(biāo)化合物為鳥(niǎo)苷5’ -磷酸二鈉時(shí)流動(dòng)相為按體積比為 30 70的乙腈和濃度為0. 05mol/L磷酸二氫鉀；流速為1. O 1. 8ml/min ；柱溫為30°C ； 紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為253nm ；進(jìn)樣量為10 20 μ L。
全文摘要
本發(fā)明涉及色譜分析技術(shù)，具體的說(shuō)是一種測(cè)試強(qiáng)陰離子交換固相萃取柱性能的方法。將強(qiáng)陰離子交換固相萃取柱特異性吸附目標(biāo)化合物磺基水楊酸或鳥(niǎo)苷5′-磷酸二鈉，而后檢測(cè)目標(biāo)化合物在固相萃取柱上的有效保留，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)對(duì)強(qiáng)陰離子交換固相萃取柱性能的測(cè)試。發(fā)明建立了液相色譜分離條件，并通過(guò)測(cè)試計(jì)算上樣回收率的方法進(jìn)行不同品牌固相萃取柱性能綜合比較分析評(píng)價(jià)。該測(cè)試方法的建立，能夠有效評(píng)價(jià)強(qiáng)陰離子交換固相萃取柱的性能。
文檔編號(hào)G01N30/02GK102192957SQ201010118320
公開(kāi)日2011年9月21日 申請(qǐng)日期2010年3月5日 優(yōu)先權(quán)日2010年3月5日
發(fā)明者張慶合, 馬康 申請(qǐng)人:中國(guó)計(jì)量科學(xué)研究院