專利名稱：基于免疫納米晶的現(xiàn)場快速體外即時(shí)多疾病同時(shí)診斷石英熒光傳感器的研究與應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及現(xiàn)場快速體外即時(shí)多疾病同時(shí)診斷和監(jiān)測技術(shù)領(lǐng)域，更具體地說是一 種現(xiàn)場快速體外即時(shí)多疾病同時(shí)診斷和監(jiān)測的免疫納米晶石英熒光傳感器的制備，本發(fā)明 還涉及采用所述的免疫納米晶石英熒光傳感器現(xiàn)場快速體外即時(shí)診斷和監(jiān)測甲、乙、丙類 傳染病的方法。
背景技術(shù)：
傳染病infectious Diseases〕是由各種病原體引起的能在人與人、動(dòng)物與動(dòng)物 或人與動(dòng)物之間相互傳播的一類疾病。病原體中大部分是微生物，小部分為寄生蟲，寄生蟲 引起者又稱寄生蟲病。傳染病的特點(diǎn)是有病原體，有傳染性和流行性，感染后常有免疫性。 有些傳染病還有季節(jié)性或地方性。傳染病的分類尚未統(tǒng)一，有人按病原體分類，有人按傳播 途徑分類。傳染病的預(yù)防應(yīng)采取以切斷主要傳播環(huán)節(jié)為主導(dǎo)的綜合措施。傳染病的傳播和 流行必須具備3個(gè)環(huán)節(jié)，即傳染源(能排出病原體的人或動(dòng)物)、傳播途徑(病原體傳染他 人的途徑)及易感者(對(duì)該種傳染病無免疫力者)。若能完全切斷其中的一個(gè)環(huán)節(jié)，即可防 止該種傳染病的發(fā)生和流行。
中國日前的法定傳染病有甲、乙、丙3類，共38種。甲類傳染病也稱為強(qiáng)制管理傳 染病，包括鼠疫、霍亂。乙類傳染病也稱為嚴(yán)格管理傳染病，包括傳染性非典型肺炎、艾 滋病、病毒性肝炎、脊髓灰質(zhì)炎、人感染高致病性禽流感、麻疹、流行性出血熱、狂犬病、流行 性乙型腦炎、登革熱、炭疽、細(xì)菌性和阿米巴性痢疾、肺結(jié)核、傷寒和副傷寒、流行性腦脊髓 膜炎、百日咳、白喉、新生兒破傷風(fēng)、猩紅熱、布魯氏菌病、淋病、梅毒、鉤端螺旋體病、血吸蟲 病、瘧疾、甲型Hmi流感(原稱人感染豬流感)。對(duì)此類傳染病要嚴(yán)格按照有關(guān)規(guī)定和防 治方案進(jìn)行預(yù)防和控制。其中，傳染性非典型肺炎、炭疽中的肺炭疽、人感染高致病性禽流 感和甲型Hmi流感這四種傳染病雖被納入乙類，但可直接采取甲類傳染病的預(yù)防、控制措 施。丙類傳染病也稱為監(jiān)測管理傳染病，包括流行性感冒、流行性腮腺炎、風(fēng)疹、急性出血 性結(jié)膜炎、麻風(fēng)病、流行性和地方性斑疹傷寒、黑熱病、包蟲病、絲蟲病，除霍亂、細(xì)菌性和阿 米巴性痢疾、傷寒和副傷寒以外的感染性腹瀉病。對(duì)此類傳染病要按國務(wù)院衛(wèi)生行政部門 規(guī)定的監(jiān)測管理方法進(jìn)行管理。
除以上傳染病并外，國內(nèi)近幾年多發(fā)新型傳染病。新型傳染病是指在通常情況下， 有些微生物和宿主和諧共生共存或互不侵犯，常見于熱帶地區(qū)發(fā)源之病毒、某些昆蟲、猿、 猴或其它物種，由于兩方在平衡中共同演化，通常宿主已具備相當(dāng)程度之抵抗力，同時(shí)這些 微生物也演化出更有力的致病能力，但當(dāng)這些微生物由長期共同演化的物種傳染至其它毫 無抵抗能力之物種時(shí)，可能會(huì)產(chǎn)生疾病，卻對(duì)原先共存之物種不造成實(shí)質(zhì)影響，尤其當(dāng)轉(zhuǎn)移 的物種之間基因表現(xiàn)相似度越高，生物體內(nèi)的辨識(shí)能力也較相似，此時(shí)受感染的機(jī)會(huì)也會(huì) 大幅提升。換句話說，對(duì)于新接觸微生物的物種若因此染病，則這個(gè)微生物對(duì)新的宿主而言 是一種病原，對(duì)于原先共存之物種，這種微生物不造成疾病，則不為其病原。多數(shù)人類新興傳染病及其傳播都與人為活動(dòng)有關(guān)，由于環(huán)境受到改變，某些區(qū)域性的微生物可藉此取得 新的生態(tài)平衡，甚至引發(fā)大流行。病原毒力和傳染之間的關(guān)系相當(dāng)復(fù)雜，而且也深深影響著 病原的長期演化，由于微生物和宿主之間的共同演化出新病原需要時(shí)間，在一般情況下，病 原要找上先鋒的攻擊目標(biāo)并非易事，通常需要直接地破壞環(huán)境平衡，或是藉生態(tài)變化，引發(fā) 物種遷徙，甚至人為消滅之病原，可由實(shí)驗(yàn)室演化后釋出。通常首次流行時(shí)，由于醫(yī)療、公共 衛(wèi)生經(jīng)驗(yàn)不足，死亡率將最為嚴(yán)重，但若是快速致死的疾病，宿主很可能在病原開始蔓延之 前死亡，而毒力對(duì)宿主生理運(yùn)作的改變，也將影響傳播的結(jié)果，例如呼吸道感染可促使患者 將病原咳至空氣散布。
再者，近幾年來，我國各地災(zāi)情頻發(fā)，地震和洪澇災(zāi)害極易導(dǎo)致各種傳染病大流 行，因此，發(fā)展能現(xiàn)場及時(shí)的發(fā)現(xiàn)、預(yù)防、快速診斷傳染性疾病的方法對(duì)于控制其發(fā)生與流 行、減少經(jīng)濟(jì)損失具有重要意義。傳統(tǒng)的傳染病診斷和監(jiān)測方法主要是通過流行病學(xué)和臨 床診斷來實(shí)現(xiàn)。最主要的診斷監(jiān)測工具是微生物培養(yǎng)，但是有些傳染病的不同病原種群之 間的毒力變化差異較大，或在不同地區(qū)、不同人群中的臨床癥狀表現(xiàn)不一樣，嚴(yán)重程度和病 程也不同。尤其是近幾年來爆發(fā)的新型傳染病，如甲流、禽流感、手足口病、Hmi豬流感等。 此外有些傳染病之間崔在極為相似的臨床癥狀，同時(shí)有些傳染病還會(huì)伴發(fā)多種病原的混合 感染和繼發(fā)感染，因此，僅僅根據(jù)流行病學(xué)和臨床癥狀很難對(duì)患者進(jìn)行確診，必須通過實(shí)驗(yàn) 室診斷監(jiān)測才能做出客觀、準(zhǔn)確的診斷和監(jiān)測結(jié)果。
目前最新的實(shí)驗(yàn)室診斷監(jiān)測技術(shù)就是直接診斷監(jiān)測環(huán)境樣品、血液、體液或分泌 物中所含病毒或病原相關(guān)蛋白質(zhì)的免疫診斷技術(shù)。免疫診斷是應(yīng)用免疫學(xué)的理論、技術(shù)和 方法診斷監(jiān)測各種疾病和測定免疫狀態(tài)。在醫(yī)學(xué)上，它是確定疾病的病因和病變部位，或是 確定機(jī)體免疫狀態(tài)是否正常的重要方法?？稍隗w內(nèi)和體外進(jìn)行。從免疫學(xué)的角度免疫診斷 可應(yīng)用于①檢查免疫器官和功能發(fā)生改變的疾病如免疫缺陷病、自身免疫??；②由免疫 機(jī)制引起的疾病如輸血反應(yīng)、移植排斥反應(yīng)；③一些內(nèi)分泌性的疾病從臨床學(xué)的角度來 說，免疫診斷可應(yīng)用于檢查傳染性疾病、免疫性疾病、腫瘤和其他臨床各科疾病。免疫診斷 具有特異性強(qiáng)、敏度高、簡便、快速、安全等特點(diǎn)。但是以往的免疫診斷技術(shù)還是在實(shí)驗(yàn)室中 進(jìn)行，依托于實(shí)驗(yàn)室的重型設(shè)備，無法滿足疫情現(xiàn)場快速診斷監(jiān)測的要求。在疾病的控制預(yù) 防環(huán)節(jié)更顯薄弱。因此建立一種能隨到隨用的高靈敏度和高特異性的現(xiàn)場快速同時(shí)診斷監(jiān) 測多種傳染疾病的方法，便成為當(dāng)前傳染病發(fā)現(xiàn)、控制、預(yù)防、診斷領(lǐng)域亟需解決的問題之發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供了一種無需特殊樣品前處理、診斷監(jiān)測速度快、 靈敏度高、特異性強(qiáng)，現(xiàn)場體外即時(shí)多疾病同時(shí)診斷監(jiān)測的免疫納米晶石英熒光傳感器的 制備及現(xiàn)場快速體外即時(shí)多疾病同時(shí)診斷監(jiān)測的方法。
為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明是通過以下措施來實(shí)現(xiàn)的
一種現(xiàn)場快速體外即時(shí)多疾病同時(shí)診斷監(jiān)測的免疫納米晶石英熒光傳感器制備 方法，其特征是包括以下步驟
(1)制備高量子產(chǎn)率的不同粒徑的油相納米晶，然后利用親水配基對(duì)其表面進(jìn)行 改性，將其轉(zhuǎn)成水相納米晶，并將其分別進(jìn)行純化處理，配制成單分散溶液；
(2)選擇甲、乙、丙類傳染病的病原相關(guān)蛋白質(zhì)或其標(biāo)志物作為抗原，并制備與抗 原特異性一一對(duì)應(yīng)的抗體；
(3)按一定摩爾比將制備的(一種)抗體修飾到(一種粒徑的)納米晶表面上制 成免疫納米晶；
(4)如圖所示設(shè)計(jì)制作梳形多探針結(jié)構(gòu)的石英片(探針數(shù)為1-10個(gè))和密封的石 英熒光激發(fā)皿，皿內(nèi)裝有短波發(fā)射的飽和熒光試劑；
(5)利用層層自組裝表面修飾技術(shù)，將(一種粒徑的)免疫納米晶修飾到梳形多探 針石英片的(一個(gè))探針表面上，制作多探針免疫納米晶石英熒光感受器。
(6)診斷監(jiān)測時(shí)，將修飾有多層免疫納米晶梳形多探針石英片浸入到環(huán)境樣品溶 液、體液、血液或分泌物樣品中3-5分鐘，然后取出清洗，并置于密封石英激發(fā)皿發(fā)射光路 中，制得所述多探針免疫納米晶石英熒光傳感器。
本發(fā)明所述油相納米晶轉(zhuǎn)水相的改性試劑為巰基乙酸，巰基丙酸，L-半胱氨酸；
本發(fā)明所述抗體與納米晶的摩爾比為10 50 1 ；
本發(fā)明所述多層免疫納米晶修飾到梳形多探針石英片探針表面包括以下步驟
(1)將所用石英片用0. lmol/L H202/H2504溶液清洗，然后用超純水徹底清洗數(shù)次， 吹干；
(2)將清洗并干燥的梳形多探針石英片用硅烷偶聯(lián)劑處理IOmin ；
(3)將制備的免疫納米晶溶液超聲處理10-40min，得到分散的免疫納米晶溶液；
(4)將步驟O)中處理好的梳形多探針石英片浸入經(jīng)步驟( 處理過的免疫納米 晶溶液中；每一根探針進(jìn)入到一種抗體的免疫納米晶溶液中，將按上述方法制備的免疫納 米晶分別修飾至三探針梳形石英片的探針表面上，
(5)將步驟(4)中制備的修飾梳形多探針石英片用超純水徹底清洗數(shù)次，吹干；
(6)重復(fù)步驟(X)至步驟( 過程3-6次，制得所述多層免疫納米晶修飾的石英 片；
本發(fā)明還包括以下步驟
將修飾有多層免疫納米晶的梳形多探針石英片放置4 后使用
本發(fā)明所述為Cdk/CdS納米晶溶液、CdTe/CdS納米晶溶液；
本發(fā)明所述熒光試劑為7-氨基-4-甲基香豆素、羥基香豆素、粒藍(lán)相似物、4， 4' - 二異硫氰酸基_2，2' -二苯乙烯磺酸二鈉、熒光增白劑134、甲基綠焦寧二苯乙烯或 芘。
本發(fā)明所述硅烷偶聯(lián)劑為十八烷基三氯硅烷、甲基三甲氧基硅烷、辛基三甲氧基 硅烷、正辛基三乙氧基硅烷、巰丙基三甲氧基硅烷、正癸基三甲氧基硅烷、正己基三乙氧基 硅烷3-氯丙基三甲氧基硅烷3-巰丙基三乙氧基硅烷、3-脲丙基三甲氧基硅烷、十二烷基 三甲氧基硅烷、十八烷基三甲氧基硅烷、十六烷基三甲氧基硅烷、十二烷基三乙氧基硅烷、 3-氨基丙基三乙氧基硅烷、gamma-脲丙基三乙氧基硅烷、N-氨乙基-3-氨丙基三乙氧基 硅烷、二乙烯三胺基丙基三甲氧基硅烷、3-氨丙基三羥基硅烷、3-氨基丙基三甲氧基硅烷、 十八烷基三乙氧基硅烷、3-脲基丙基三乙氧基硅烷、巰丙基甲基二甲氧基硅烷、N-(3-三甲 氧基硅基)甲基)-1，6-己二胺、N- (3-三甲氧基甲硅基)丙基)-1，6-己二胺；
本發(fā)明所述甲類傳染病抗原為鼠疫抗原、霍亂抗原；
本發(fā)明所述乙類傳染病抗原為傳染性非典型肺炎抗原，艾滋病抗原，病毒性肝炎 抗原，脊髓灰質(zhì)炎抗原，人感染高致病性禽流感抗原，麻疹抗原，流行性出血熱抗原，狂犬病 抗原，流行性乙型腦炎抗原，登革熱抗原，炭疽抗原，細(xì)菌性和阿米巴性痢疾抗原，肺結(jié)核抗 原，傷寒與副傷寒抗原，流行性腦脊髓膜炎抗原，百日咳抗原，白喉抗原，新生兒破傷風(fēng)抗 原，猩紅熱抗原，布魯氏菌病抗原，淋病抗原，梅毒抗原，鉤端螺旋體病抗原，血吸蟲病抗原， 瘧疾抗原；
本發(fā)明所述丙類傳染病抗原為流行性感冒抗原、流行性腮腺炎抗原、風(fēng)疹抗原、急 性出血性結(jié)膜炎抗原、麻風(fēng)病抗原、流行性和地方性斑診傷寒抗原、黑熱病抗原、絲蟲病抗 原、包蟲病抗原。
本發(fā)明所述抗體為上述抗原特異性對(duì)應(yīng)的抗體。
一種現(xiàn)場快速體外即時(shí)多疾病同時(shí)診斷監(jiān)測的方法，其特征是包括如下步驟將 按上述任意一種方法制得的多層免疫納米晶修飾的梳形多探針石英片浸入到環(huán)境樣品溶 液、體液、血液或分泌物樣品中3-5分鐘，然后取出清洗，置于密封石英熒光激發(fā)皿的發(fā)射 光路中，并配合手提式熒光分光光度計(jì)，對(duì)多種甲、乙、丙類傳染病同時(shí)進(jìn)行診斷監(jiān)測。
本發(fā)明的有益效果
1.免疫納米晶的制備方法，將抗體的高選擇性與納米晶的高靈敏度結(jié)合，使得所 制備的免疫納米晶具有更高的靈敏度、選擇性和診斷監(jiān)測范圍。
2.本發(fā)明的梳形多探針石英片是具有多探針結(jié)構(gòu)的石英片，可以同時(shí)用于診斷監(jiān) 測多種疾病抗原。利用納米晶的顏色多樣性可將多種疾病抗原同時(shí)區(qū)分。修飾后的梳形多 探針石英可直接浸入到未經(jīng)任何處理的環(huán)境樣品溶液、體液、血液或分泌物樣品進(jìn)行識(shí)別， 無需任何其他特殊試劑，使得診斷監(jiān)測步驟更加簡單，更易于非專業(yè)人士操作。且該傳感器 可以多次反復(fù)使用，大大降低了診斷監(jiān)測成本。
2.將表面層層修飾技術(shù)應(yīng)用到免疫納米晶石英熒光傳感器的制備當(dāng)中，使得納米 晶增效的現(xiàn)場快速體外即時(shí)多疾病同時(shí)診斷監(jiān)測免疫納米晶石英熒光傳感器的制備具有 可控性，提高了免疫納米晶石英熒光傳感器的靈敏度、選擇性和準(zhǔn)確性。
3.本發(fā)明所的石英熒光激發(fā)皿內(nèi)密封有特定的飽和熒光試劑，利用納米晶的寬帶 激發(fā)特性，激發(fā)皿可同時(shí)激發(fā)所有免疫納米晶，并且光源是一均勻的面光源，進(jìn)一步提高了 該免疫石英熒光傳感器的準(zhǔn)確性和靈敏度。
4.本發(fā)明所得到的現(xiàn)場快速體外即時(shí)多疾病同時(shí)診斷監(jiān)測免疫納米晶石英熒光 傳感器，可以實(shí)現(xiàn)樣本中多種疾病抗原的高特異性、高靈敏度、同時(shí)快速診斷監(jiān)測。
5.本發(fā)明的現(xiàn)場快速體外即時(shí)多疾病同時(shí)診斷監(jiān)測免疫納米晶石英熒光傳感器 的特異性強(qiáng)，樣品中其它非特異性物質(zhì)對(duì)診斷監(jiān)測結(jié)果無影響；靈敏度高，可以達(dá)到ng級(jí)； 診斷監(jiān)測速度快，完成一個(gè)基本診斷監(jiān)測過程僅需1-2分鐘的時(shí)間，可在短時(shí)間內(nèi)實(shí)現(xiàn)大 量樣本的高通量篩選，無需任何試劑，成本低。
6.本發(fā)明的現(xiàn)場快速體外即時(shí)多疾病同時(shí)診斷監(jiān)測免疫納米晶石英熒光傳感器 診斷監(jiān)測疾病抗原的方法，操作快速簡單，反應(yīng)及結(jié)果均由儀器自動(dòng)完成和記錄，避免了主 觀因素的影響，并保證有很好的重復(fù)性，便于現(xiàn)場診斷監(jiān)測。
7.本發(fā)明的現(xiàn)場快速體外即時(shí)多疾病同時(shí)診斷監(jiān)測免疫納米晶石英熒光傳感器 可以用于環(huán)境樣品溶液、體液、血液或分泌物樣品等多種樣品的診斷監(jiān)測，這就是使得該免疫納米晶石英熒光傳感器可用于傳染病的傳播和流行3個(gè)重要環(huán)節(jié)的診斷和監(jiān)測，并能現(xiàn) 場及時(shí)的發(fā)現(xiàn)、預(yù)防、快速診斷傳染性疾病。


下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)描述。
附圖為梳形石英片表面修飾過程及現(xiàn)場快速體外即時(shí)多疾病同時(shí)診斷監(jiān)測免疫 納米晶石英熒光傳感器原理示意圖。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1(甲類傳染病，如鼠疫、霍亂)
一種現(xiàn)場快速體外即時(shí)診斷監(jiān)測鼠疫、霍亂的免疫納米晶石英熒光傳感器制備方 法，包括以下步驟
(1)在體液、血液或分泌物樣品中提取鼠疫病原相關(guān)蛋白質(zhì)或特異性標(biāo)志物作為 抗原；在體液、血液或分泌物樣品中提取霍亂病原相關(guān)蛋白質(zhì)或特異性標(biāo)志物作為抗原； 然后通過動(dòng)物體內(nèi)注射方法制備上述抗原對(duì)應(yīng)的抗體。
(2)制備兩種不同粒徑Cdk/CdS納米晶溶液在N2保護(hù)下，將％粉溶于三辛基膦 中制備％前驅(qū)體，將S粉溶于三辛基膦中制備S前驅(qū)體，然后與制得的Cd(OA)2,反應(yīng)，油酸 作為穩(wěn)定劑的條件下，制得油溶性兩種不同粒徑的Cdk/CdS納米晶溶液；然后將制得的納 米晶用巰基乙酸進(jìn)行表面改性，制備水溶性的Cdk/CdS納米晶溶液。
(3)分別取兩種不同粒徑的Cdk/CdS納米晶水溶液20 μ L，超聲分散20min。然后 將一種粒徑的納米晶對(duì)應(yīng)一種抗體分子，按照摩爾比合成制備不同抗體分子修飾的免疫納 米晶。鼠疫抗體分子，對(duì)應(yīng)粒徑的Cdk/CdS納米晶水溶液按摩爾比為14 1混合均勻，得 到鼠疫免疫納米晶；霍亂抗體分子，對(duì)應(yīng)粒徑的Cdk/CdS納米晶水溶液按摩爾比為21 1 混合均勻，得到霍亂免疫納米晶；然后對(duì)所有的免疫納米晶進(jìn)行必要的分離提純。
(4)如圖所示，設(shè)計(jì)制作二探針梳形石英片。將所用石英片用0. lmol/L H2O2M2SO4 溶液清洗，然后用超純水徹底清洗數(shù)次，吹干；將清洗并干燥的梳形二探針石英片用3-氨 基丙基三乙氧基硅烷處理IOmin ；將處理好的梳形多探針石英片浸入經(jīng)步驟C3)提純過的 免疫納米晶溶液中；每一根探針浸入到一種疾病抗體的免疫納米晶溶液中，將按上述方法 制備的免疫納米晶分別修飾至二探針梳形石英片的探針表面上；將修飾有免疫納米晶梳形 二探針石英片用超純水徹底清洗數(shù)次，吹干；重復(fù)上述過程5次，制得所述多層免疫納米晶 修飾的二探針石英片。
(6)將修飾好的梳形二探針石英片用80 μ L超純水清洗石英片及其修飾層4遍，將 石英片及修飾層中的殘留溶液完全清洗干凈。
(7)如圖所示，將修飾有鼠疫、霍亂免疫納米晶的梳形二探針石英片在未經(jīng)任何處 理的環(huán)境樣品溶液、體液、血液或分泌物樣品中浸泡細(xì)in后，用超純水清洗干凈，置于石英 熒光激發(fā)皿發(fā)射光路中，構(gòu)成體外即時(shí)同時(shí)診斷監(jiān)測甲類傳染病鼠疫、霍亂的免疫納米晶 石英熒光傳感器。將制得體外即時(shí)同時(shí)診斷監(jiān)測甲類傳染病鼠疫、霍亂的免疫納米晶石英 熒光傳感器配合手提式熒光儀，根據(jù)二個(gè)不同粒徑免疫納米晶發(fā)射峰位置的熒光強(qiáng)度對(duì)甲 類傳染病鼠疫、霍亂進(jìn)行準(zhǔn)確診斷監(jiān)測。
實(shí)施例2(乙類傳染病，如傳染性非典型肺炎，艾滋病，病毒性肝炎)
一種現(xiàn)場快速體外即時(shí)同時(shí)診斷監(jiān)測傳染性非典型肺炎，艾滋病，病毒性肝炎的 免疫納米晶石英熒光傳感器制備方法，包括以下步驟
(1)在體液、血液或分泌物樣品中提取傳染性非典型肺炎病原相關(guān)蛋白質(zhì)或特異 性標(biāo)志物作為抗原。在體液、血液或分泌物樣品中提取艾滋病病原相關(guān)蛋白質(zhì)或特異性標(biāo) 志物作為抗原。在體液、血液或分泌物樣品中提取病毒性肝炎病原相關(guān)蛋白質(zhì)或特異性標(biāo) 志物作為抗原。然后通過動(dòng)物體內(nèi)注射方法制備上述抗原對(duì)應(yīng)的抗體。
(2)制備三種不同粒徑CdTe/CdS納米晶溶液在隊(duì)保護(hù)下，將Te粉溶于三辛基膦 中制備Te前驅(qū)體，將S粉溶于三辛基膦中制備S前驅(qū)體，然后與制得的Cd (OA)2,反應(yīng)，油酸 作為穩(wěn)定劑的條件下，制得油溶性三種不同粒徑的CdTe/CdS納米晶溶液；然后將制得的納 米晶用巰基丙酸進(jìn)行表面改性，制備水溶性的CdTe/CdS納米晶溶液。
(3)分別取三種不同粒徑的CdTe/CdS納米晶水溶液20 μ L，超聲分散20min。然后 將一種粒徑的納米晶對(duì)應(yīng)一種抗體分子，按照摩爾比合成制備不同抗體分子修飾的免疫納 米晶。傳染性非典型肺炎抗體分子，對(duì)應(yīng)粒徑的CdTe/CdS納米晶水溶液按摩爾比為15 1 混合均勻，得到傳染性非典型肺炎免疫納米晶；艾滋病抗體分子，對(duì)應(yīng)粒徑的CdTe/CdS納 米晶水溶液按摩爾比為17 1混合均勻，得到艾滋病免疫納米晶；病毒性肝炎抗體分子，對(duì) 應(yīng)粒徑的CdTe/CdS納米晶水溶液按摩爾比為12 1混合均勻，得到病毒性肝炎免疫納米 晶，然后對(duì)所有的免疫納米晶進(jìn)行必要的分離提純。
(4)如圖所示，設(shè)計(jì)制作三探針梳形石英片。將所用石英片用0. lmol/L H2O2M2SO4 溶液清洗，然后用超純水徹底清洗數(shù)次，吹干；將清洗并干燥的梳形多探針石英片用3-氨 丙基三羥基硅烷處理lOmin。將處理好的梳形三探針石英片浸入經(jīng)步驟( 處理過的免疫 納米晶溶液中；，每一根探針浸入到一種疾病抗體的免疫納米晶溶液中，將按上述方法制 備的免疫納米晶分別修飾至三探針梳形石英片的探針表面上，將修飾有免疫納米晶梳形三 探針石英片用超純水徹底清洗數(shù)次，吹干；重復(fù)上述過程5次，制得所述多層免疫納米晶修 飾的三探針石英片。
(6)將修飾好的梳形三探針石英片用80 μ L超純水清洗石英片及其修飾層4遍，將 石英片及修飾層中的殘留溶液完全清洗干凈。
(7)如圖所示，將修飾有傳染性非典型肺炎、艾滋病、病毒性肝炎免疫納米晶的 梳形三探針石英片在未經(jīng)任何處理的環(huán)境樣品溶液、體液、血液或分泌物樣品溶液中浸泡 細(xì)in后，用超純水清洗干凈，置于石英熒光激發(fā)皿發(fā)射光路中，構(gòu)成體外即時(shí)同時(shí)診斷監(jiān)測 乙類傳染病傳染性非典型肺炎、艾滋病、病毒性肝炎的免疫納米晶石英熒光傳感器。將制得 的體外即時(shí)同時(shí)診斷監(jiān)測乙類傳染病傳染性非典型肺炎、艾滋病、病毒性肝炎的免疫納米 晶石英熒光傳感器配合手提式熒光儀，根據(jù)三個(gè)不同粒徑免疫納米晶發(fā)射峰位置的熒光強(qiáng) 度對(duì)乙類傳染病傳染性非典型肺炎、艾滋病、病毒性肝炎進(jìn)行準(zhǔn)確診斷監(jiān)測。
實(shí)施例3(乙類傳染病，如脊髓灰質(zhì)炎、人感染高致病性禽流感、麻疹、流行性出血執(zhí))
一種現(xiàn)場快速體外即時(shí)診斷監(jiān)測脊髓灰質(zhì)炎、人感染高致病性禽流感、麻疹、流行 性出血熱的免疫納米晶石英熒光傳感器制備方法，包括以下步驟
(1)在體液、血液或分泌物樣品溶液中提取脊髓灰質(zhì)炎病原相關(guān)蛋白質(zhì)或特異性標(biāo)志物作為抗原。在體液、血液或分泌物中提取人感染高致病性禽流感病原相關(guān)蛋白質(zhì)或 特異性標(biāo)志物作為抗原。在體液、血液或分泌物中提取麻疹病原相關(guān)蛋白質(zhì)或特異性標(biāo)志 物作為抗原。在體液、曲液或分泌物中提取流行性出血熱病原相關(guān)蛋白質(zhì)或特異性標(biāo)志物 作為抗原。然后通過動(dòng)物體內(nèi)注射方法制備上述抗原對(duì)應(yīng)的抗體。
(2)制備四種不同粒徑Cdk/CdS納米晶溶液在隊(duì)保護(hù)下，將義粉溶于三辛基膦 中制備％前驅(qū)體，將S粉溶于三辛基膦中制備S前驅(qū)體，然后與制得的Cd(OA)2,反應(yīng)，油酸 作為穩(wěn)定劑的條件下，制得油溶性四種不同粒徑的Cdk/CdS納米晶溶液；然后將制得的納 米晶用L-半胱氨酸進(jìn)行表面改性，制備水溶性的Cdk/CdS納米晶溶液。
(3)分別取四種不同粒徑的Cdk/CdS納米晶水溶液20μ L，超聲分散20min。然后 將一種粒徑的納米晶對(duì)應(yīng)一種抗體分子，按照摩爾比合成制備不同抗體分子修飾的免疫納 米晶。脊髓灰質(zhì)炎抗體分子，對(duì)應(yīng)粒徑的Cdk/CdS納米晶水溶液按摩爾比為23 1混合均 勻，得到脊髓灰質(zhì)炎免疫納米晶；人感染高致病性禽流感抗體分子，對(duì)應(yīng)粒徑的Cdk/CdS 納米晶水溶液按摩爾比為37 1混合均勻，得到人感染高致病性禽流感免疫納米晶；麻疹 抗體分子，對(duì)應(yīng)粒徑的Cdk/CdS納米晶水溶液按摩爾比為34 1混合均勻，得到麻疹免疫 納米晶；流行性出血熱抗體分子，對(duì)應(yīng)粒徑的Cdk/CdS納米晶水溶液按摩爾比為25 1混 合均勻，得到流行性出血熱免疫納米晶；然后對(duì)所有的免疫納米晶進(jìn)行必要的分離提純。
(4)如圖所示，設(shè)計(jì)制作四探針梳形石英片。將所用石英片用0. lmol/L H2O2M2SO4 溶液清洗，然后用超純水徹底清洗數(shù)次，吹干；將清洗并干燥的梳形多探針石英片用巰丙基 三甲氧基硅烷處理lOmin。將處理好的梳形四探針石英片浸入經(jīng)步驟C3)處理過的免疫納 米晶溶液中；，每一根探針進(jìn)入到一種疾病抗體的免疫納米晶溶液中，將按上述方法將制 備的免疫納米晶分別修飾至四探針梳形石英片的探針表面上，將修飾有免疫納米晶梳形多 探針石英片用超純水徹底清洗數(shù)次，吹干；重復(fù)上述過程6次，制得所述多層免疫納米晶修 飾的四探針石英片。
(6)將修飾好的梳形四探針石英片用80 μ L超純水清洗石英片及其修飾層5遍，將 石英片及修飾層中的殘留溶液完全清洗干凈。
(7)如圖所示，將修飾有脊髓灰質(zhì)炎、人感染高致病性禽流感、麻疹、流行性出血熱 免疫納米晶的梳形四探針石英片在未經(jīng)任何處理的環(huán)境樣品溶液、體液、血液或分泌物樣 品溶液中浸泡5min后，用超純水清洗干凈，置于石英熒光激發(fā)皿發(fā)射光路中，構(gòu)成體外即 時(shí)同時(shí)診斷監(jiān)測乙類傳染病脊髓灰質(zhì)炎、人感染高致病性禽流感、麻疹、流行性出血熱的免 疫納米晶石英熒光傳感器。將制得體外即時(shí)同時(shí)診斷監(jiān)測乙類傳染病脊髓灰質(zhì)炎、人感染 高致病性禽流感、麻疹、流行性出血熱的免疫納米晶石英熒光傳感器配合手提式熒光儀，根 據(jù)四個(gè)不同粒徑免疫納米晶發(fā)射峰位置的熒光強(qiáng)度對(duì)乙類傳染病脊髓灰質(zhì)炎、人感染高致 病性禽流感、麻疹、流行性出血熱進(jìn)行準(zhǔn)確診斷監(jiān)測。
實(shí)施例4(乙類傳染病，如狂犬病、流行性乙型腦炎、登革熱、炭疽、細(xì)菌性和阿米 巴性痢疾)
一種現(xiàn)場快速體外即時(shí)診斷監(jiān)測狂犬病、流行性乙型腦炎、登革熱、炭疽、細(xì)菌性 和阿米巴性痢疾的免疫納米晶石英熒光傳感器制備方法，包括以下步驟
(1)在體液、血液或分泌物中提取狂犬病病原相關(guān)蛋白質(zhì)或特異性標(biāo)志物作為抗 原。在體液、血液或分泌物中提取流行性乙型腦炎病原相關(guān)蛋白質(zhì)或特異性標(biāo)志物作為抗原。在體液、血液或分泌物中提取登革熱病原相關(guān)蛋白質(zhì)或特異性標(biāo)志物作為抗原。在體 液、血液或分泌物中提取炭疽病原相關(guān)蛋白質(zhì)或特異性標(biāo)志物作為抗原。在體液、血液或分 泌物中提取細(xì)菌性和阿米巴性痢疾病原相關(guān)蛋白質(zhì)或特異性標(biāo)志物作為抗原。然后通過動(dòng) 物體內(nèi)注射方法制備上述抗原對(duì)應(yīng)的抗體。
(2)制備五種不同粒徑CdTe/CdS納米晶溶液在隊(duì)保護(hù)下，將Te粉溶于三辛基膦 中制備Te前驅(qū)體，將S粉溶于三辛基膦中制備S前驅(qū)體，然后與制得的Cd (OA)2,反應(yīng)，油酸 作為穩(wěn)定劑的條件下，制得油溶性五種不同粒徑的CdTe/CdS納米晶溶液；然后將制得的納 米晶用L-半胱氨酸進(jìn)行表面改性，制備水溶性的CdTe/CdS納米晶溶液。
(3)分別取五種不同粒徑的CdTe/CdS納米晶水溶液20 μ L，超聲分散20min。然 后將一種粒徑的納米晶對(duì)應(yīng)一種抗體分子，按照摩爾比合成制備不同抗體分子修飾的免疫 納米晶?？袢】贵w分子，對(duì)應(yīng)粒徑的CdTe/CdS納米晶水溶液按摩爾比為22 1混合均 勻，得到狂犬病免疫納米晶；流行性乙型腦炎抗體分子，對(duì)應(yīng)粒徑的CdTe/CdS納米晶水溶 液按摩爾比為四1混合均勻，得到流行性乙型腦炎免疫納米晶；登革熱抗體分子，對(duì)應(yīng) 粒徑的CdTe/CdS納米晶水溶液按摩爾比為12 1混合均勻，得到登革熱免疫納米晶；炭疽 抗體分子，對(duì)應(yīng)粒徑的CdTe/CdS納米晶水溶液按摩爾比為17 1混合均勻，得到炭疽免疫 納米晶；細(xì)菌性和阿米巴性痢疾抗體分子，對(duì)應(yīng)粒徑的CdTe/CdS納米晶水溶液按摩爾比為 45 1混合均勻，得到細(xì)菌性和阿米巴性痢疾免疫納米晶；然后對(duì)所有的免疫納米晶進(jìn)行 必要的分離提純。
(4)如圖所示，設(shè)計(jì)制作五探針梳形石英片。將所用石英片用0. lmol/L H2O2M2SO4 溶液清洗，然后用超純水徹底清洗數(shù)次，吹干；將清洗并干燥的梳形多探針石英片用N-氨 乙基-3-氨丙基三乙氧基硅烷處理lOmin。將處理好的梳形五探針石英片浸入經(jīng)步驟(3) 處理過的免疫納米晶溶液中；，每一根探針進(jìn)入到一種疾病抗體的免疫納米晶溶液中，將 按上述方法制備的免疫納米晶分別修飾至五探針梳形石英片的探針表面上；將修飾有免疫 納米晶梳形多探針石英片用超純水徹底清洗數(shù)次，吹干；重復(fù)上述過程5次，制得所述多層 免疫納米晶修飾的多探針石英片。
(6)將修飾好的梳形五探針石英片用60 μ L超純水清洗石英片及其修飾層4遍，將 石英片及修飾層中的殘留溶液完全清洗干凈。
(7)如圖所示，將修飾有狂犬病、流行性乙型腦炎、登革熱、炭疽、細(xì)菌性和阿米巴 性痢疾免疫納米晶的梳形五探針石英片在未經(jīng)任何處理的體液、血液或分泌物樣品中浸泡 8min后，用超純水清洗干凈，置于石英熒光激發(fā)皿發(fā)射光路中，構(gòu)成體外即時(shí)同時(shí)診斷監(jiān)測 乙類傳染病狂犬病、流行性乙型腦炎、登革熱、炭疽、細(xì)菌性和阿米巴性痢疾的免疫納米晶 石英熒光傳感器。將制得體外即時(shí)同時(shí)診斷監(jiān)測乙類傳染病狂犬病、流行性乙型腦炎、登革 熱、炭疽、細(xì)菌性和阿米巴性痢疾的免疫納米晶石英熒光傳感器配合手提式熒光儀，根據(jù)五 個(gè)不同粒徑免疫納米晶發(fā)射峰位置的熒光強(qiáng)度對(duì)乙類傳染病狂犬病、流行性乙型腦炎、登 革熱、炭疽、細(xì)菌性和阿米巴性痢疾進(jìn)行準(zhǔn)確診斷監(jiān)測。
實(shí)施例5(丙類傳染病，如，流行性腮腺炎、風(fēng)疹、急性出血性結(jié)膜炎、麻風(fēng)病抗原 黑熱病、絲蟲病、包蟲病)
—種現(xiàn)場快速體外即時(shí)診斷監(jiān)測流行性腮腺炎、風(fēng)疹、急性出血性結(jié)膜炎、麻風(fēng) 病、絲蟲病、包蟲病的免疫納米晶石英熒光傳感器制備方法，包括以下步驟
(1)在體液、血液或分泌物中提取流行性腮腺炎病原相關(guān)蛋白質(zhì)或特異性標(biāo)志物 作為抗原。在體液、血液或分泌物中提取風(fēng)疹病原相關(guān)蛋白質(zhì)或特異性標(biāo)志物作為抗原。在 體液、血液或分泌物中提取急性出血性結(jié)膜炎病原相關(guān)蛋白質(zhì)或特異性標(biāo)志物作為抗原。 在體液、血液或分泌物中提取麻風(fēng)病病原相關(guān)蛋白質(zhì)或特異性標(biāo)志物作為抗原。在體液、血 液或分泌物中提取絲蟲病病原相關(guān)蛋白質(zhì)或特異性標(biāo)志物作為抗原。在體液、血液或分泌 物中提取包蟲病病原相關(guān)蛋白質(zhì)或特異性標(biāo)志物作為抗原。然后通過動(dòng)物體內(nèi)注射方法制 備上述抗原對(duì)應(yīng)的抗體。
(2)制備六種不同粒徑CdTe/CdS納米晶溶液在隊(duì)保護(hù)下，將Te粉溶于三辛基膦 中制備Te前驅(qū)體，將S粉溶于三辛基膦中制備S前驅(qū)體，然后與制得的Cd (OA)2,反應(yīng)，油酸 作為穩(wěn)定劑的條件下，制的油溶性六種不同粒徑的CdTe/CdS納米晶溶液；然后將制得的納 米晶用巰基丙酸進(jìn)行表面改性，制備水溶性的CdTe/CdS納米晶溶液。
(3)分別取六種不同粒徑的CdTe/CdS納米晶水溶液20 μ L，超聲分散20min。然后 將一種粒徑的納米晶對(duì)應(yīng)一種抗體分子，按照摩爾比合成制備不同抗體分子修飾的免疫納 米晶。流行性腮腺炎抗體分子，對(duì)應(yīng)粒徑的CdTe/CdS納米晶水溶液按摩爾比為43 1混 合均勻，得到流行性腮腺炎免疫納米晶；風(fēng)疹抗體分子，對(duì)應(yīng)粒徑的CdTe/CdS納米晶水溶 液按摩爾比為觀1混合均勻，得到風(fēng)疹免疫納米晶；急性出血性結(jié)膜炎抗體分子，對(duì)應(yīng)粒 徑的CdTe/CdS納米晶水溶液按摩爾比為33 1混合均勻，得到急性出血性結(jié)膜炎免疫納 米晶；麻風(fēng)病抗體分子，對(duì)應(yīng)粒徑的CdTe/CdS納米晶水溶液按摩爾比為39 1混合均勻， 得到麻風(fēng)病免疫納米晶；絲蟲病抗體分子，對(duì)應(yīng)粒徑的CdTe/CdS納米晶水溶液按摩爾比為 31 1混合均勻，得到絲蟲病免疫納米晶；包蟲病抗體分子，對(duì)應(yīng)粒徑的CdTe/CdS納米晶 水溶液按摩爾比為42 1混合均勻，得到包蟲病免疫納米晶；然后對(duì)所有的免疫納米晶進(jìn) 行必要的分離提純。
(4)如圖所示，設(shè)計(jì)制作六探針梳形石英片。將所用石英片用0. lmol/LH202/H2S04 溶液清洗，然后用超純水徹底清洗數(shù)次，吹干；將清洗并干燥的梳形多探針石英片用3-氨 基丙基三甲氧基硅烷處理lOmin。將處理好的梳形多探針石英片浸入經(jīng)步驟C3)純化過的 免疫納米晶溶液中；，每一根探針進(jìn)入到一種疾病抗體的免疫納米晶溶液中，將按上述方 法制備的免疫納米晶分別修飾至六探針梳形石英片的探針表面上；將修飾有免疫納米晶梳 形多探針石英片用超純水水徹底清洗數(shù)次，吹干；重復(fù)上述過程5次，制得所述多層免疫納 米晶修飾的六探針石英片。
(6)將修飾好的梳形六探針石英片用50 μ L超純水清洗石英片及其修飾層6遍，將 石英片及修飾層中的殘留溶液完全清洗干凈。
(7)如圖所示，將修飾有流行性腮腺炎、風(fēng)疹、急性出血性結(jié)膜炎、麻風(fēng)病抗原黑熱 病、絲蟲病、包蟲病免疫納米晶的梳形六探針石英片在未經(jīng)任何處理的體液、血液或分泌物 樣品中浸泡7min后，用超純水清洗干凈，置于石英熒光激發(fā)皿發(fā)射光路中，構(gòu)成體外即時(shí) 同時(shí)診斷監(jiān)測丙類傳染病流行性腮腺炎、風(fēng)疹、急性出血性結(jié)膜炎、麻風(fēng)病抗原黑熱病、絲 蟲病、包蟲病的免疫納米晶石英熒光傳感器。將制得體外即時(shí)同時(shí)診斷監(jiān)測丙類傳染病流 行性腮腺炎、風(fēng)疹、急性出血性結(jié)膜炎、麻風(fēng)病抗原黑熱病、絲蟲病、包蟲病的免疫納米晶石 英熒光傳感器配合手提式熒光儀，根據(jù)六種不同粒徑免疫納米晶發(fā)射峰位置的熒光強(qiáng)度對(duì) 丙類傳染病進(jìn)行流行性腮腺炎、風(fēng)疹、急性出血性結(jié)膜炎、麻風(fēng)病抗原黑熱病、絲蟲病、包蟲病診斷監(jiān)測。
權(quán)利要求
1.一種現(xiàn)場快速體外即時(shí)多疾病同時(shí)診斷監(jiān)測的免疫納米晶石英熒光傳感器制備方 法，其特征是包括以下步驟(1)制備高量子產(chǎn)率的不同粒徑的油相納米晶，然后利用親水配基對(duì)其表面進(jìn)行改性， 將其轉(zhuǎn)成水相納米晶，并將其分別進(jìn)行純化處理，配制成單分散溶液；(2)選擇甲、乙、丙類傳染病的病原相關(guān)蛋白質(zhì)或其標(biāo)志物作為抗原，并制備與抗原特 異性一一對(duì)應(yīng)的抗體；(3)按一定摩爾比將制備的(一種)抗體修飾到(一種粒徑的)納米晶表面上制成免 疫納米晶；(4)如圖所示設(shè)計(jì)制作梳形多探針結(jié)構(gòu)的石英片(探針數(shù)為1-10個(gè))和密封的石英熒 光激發(fā)皿，皿內(nèi)裝有短波發(fā)射的飽和熒光試劑；(5)利用層層自組裝表面修飾技術(shù)，將(一種粒徑的)免疫納米晶修飾到梳形多探針石 英片的(一個(gè))探針表面上，制作多探針免疫納米晶石英熒光感受器；(6)診斷監(jiān)測時(shí)，將修飾有多層免疫納米晶梳形多探針石英片浸入到環(huán)境樣品溶液、體 液、血液或分泌物樣品中3-5分鐘，然后取出清洗，并置于密封石英激發(fā)皿發(fā)射光路中，制 得所述多探針免疫納米晶石英熒光傳感器。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述水溶性納米晶制備方法，其特征是所述油相納米晶轉(zhuǎn)水相的 改性試劑為巰基乙酸，巰基丙酸，L-半胱氨酸。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述免疫納米晶制備方法，其特征是所述抗體與納米晶的摩爾比 為 10 50 1。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述現(xiàn)場快速體外即時(shí)多疾病同時(shí)診斷監(jiān)測的免疫納米晶石英熒 光傳感器制備方法，其特征是所述的梳形多探針石英片為長方形，探針數(shù)為2 10個(gè)探 針。所述的密封熒光激發(fā)皿為長方體形石英皿，內(nèi)裝有飽和的短波發(fā)射熒光試劑7-氨 基-4-甲基香豆素、羥基香豆素、粒監(jiān)相似物、4，4' -二異硫氰酸基_2，2' -二苯乙烯磺酸 二鈉、熒光增白劑134、甲基綠焦寧二苯乙烯或芘。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述現(xiàn)場快速體外即時(shí)多疾病同時(shí)診斷監(jiān)測的免疫納米晶石英熒 光傳感器制備方法，其特征是所述多層免疫納米晶修飾到梳形多探針石英片探針表面包 括以下步驟(1)將所用石英片用0.lmol/L H2O2M2SO4溶液清洗，然后用超純水徹底清洗數(shù)次，吹干；(2)將清洗并干燥的梳形多探針石英片用硅烷偶聯(lián)劑處理IOmin；(3)將制備的免疫納米晶溶液超聲處理10-40min，得到分散的免疫納米晶溶液；(4)將步驟O)中處理好的梳形多探針石英片浸入經(jīng)步驟( 處理過的免疫納米晶溶 液中；每一根探針進(jìn)入到一種抗體的免疫納米晶溶液中，將按上述方法制備的免疫納米晶 分別修飾至三探針梳形石英片的探針表面上，(5)將步驟中制備的修飾梳形多探針石英片用超純水徹底清洗數(shù)次，吹干；(6)重復(fù)步驟( 至步驟( 過程3-6次，制得所述多層免疫納米晶修飾的石英片。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述現(xiàn)場快速體外即時(shí)多疾病同時(shí)診斷監(jiān)測的免疫納米晶石英熒 光傳感器制備方法，其特征是所述硅烷偶聯(lián)劑為十八烷基三氯硅烷、甲基三甲氧基硅烷、 辛基三甲氧基硅烷、正辛基三乙氧基硅烷、巰丙基三甲氧基硅烷、正癸基三甲氧基硅烷、正己基三乙氧基硅烷3-氯丙基三甲氧基硅烷3-巰丙基三乙氧基硅烷、3-脲丙基三甲氧基硅 烷、十二烷基三甲氧基硅烷、十八烷基三甲氧基硅烷、十六烷基三甲氧基硅烷、十二烷基三 乙氧基硅烷、3-氨基丙基三乙氧基硅烷、gamma-脲丙基三乙氧基硅烷、N-氨乙基-3-氨丙基 三乙氧基硅烷、二乙烯三胺基丙基三甲氧基硅烷、3-氨丙基三羥基硅烷、3-氨基丙基三甲 氧基硅烷、十八烷基三乙氧基硅烷、3-脲基丙基三乙氧基硅烷、巰丙基甲基二甲氧基硅烷、 N-(3-三甲氧基硅基)甲基)-1，6_己二胺、N-(3-三甲氧基甲硅基)丙基)-1，6_己二胺。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述現(xiàn)場快速體外即時(shí)多疾病同時(shí)診斷監(jiān)測的免疫納米晶石英熒 光傳感器制備方法，其特征是所述甲類傳染病抗原為鼠疫抗原、霍亂抗原；所述乙類傳染 病抗原為傳染性非典型肺炎抗原，艾滋病抗原，病毒性肝炎抗原，脊髓灰質(zhì)炎抗原，人感染 高致病性禽流感抗原，麻疹抗原，流行性出血熱抗原，狂犬病抗原，流行性乙型腦炎抗原，登 革熱抗原，炭疽抗原，細(xì)菌性和阿米巴性痢疾抗原，肺結(jié)核抗原，傷寒與副傷寒抗原，流行性 腦脊髓膜炎抗原，百日咳抗原，白喉抗原，新生兒破傷風(fēng)抗原，猩紅熱抗原，布魯氏菌病抗 原，淋病抗原，梅毒抗原，鉤端螺旋體病抗原，血吸蟲病抗原，瘧疾抗原；所述丙類傳染病抗 原為流行性感冒抗原、流行性腮腺炎抗原、風(fēng)疹抗原、急性出血性結(jié)膜炎抗原、麻風(fēng)病抗原、 流行性和地方性斑診傷寒抗原、黑熱病抗原、絲蟲病抗原、包蟲病抗原。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述現(xiàn)場快速體外即時(shí)多疾病同時(shí)診斷監(jiān)測的免疫納米晶石英熒 光傳感器制備方法，其特征是所述抗體為上述抗原特異性對(duì)應(yīng)的抗體。
9.一種現(xiàn)場快速體外即時(shí)多疾病同時(shí)診斷監(jiān)測的方法，其特征是包括如下步驟將按 權(quán)利要求1-8方法制得的多層免疫納米晶修飾的梳形多探針石英片浸入到環(huán)境樣品溶液、 體液、血液或分泌物樣品中3-5分鐘，然后取出清洗，置于密封石英熒光激發(fā)皿的發(fā)射光路 中，并配合手提式熒光分光光度計(jì)，對(duì)多種甲、乙、丙類傳染病同時(shí)進(jìn)行診斷監(jiān)測。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種現(xiàn)場快速體外即時(shí)多疾病同時(shí)診斷監(jiān)測的免疫納米晶石英熒光傳感器及其診斷監(jiān)測傳染類疾病的方法。免疫納米晶梳形多探針石英片制備方法，包括以下步驟選擇傳染病的病原相關(guān)蛋白質(zhì)或其標(biāo)志物作為抗原；制備納米晶及按照文獻(xiàn)制備免疫納米晶；利用層層累積表面修飾技術(shù)，將不同抗體的免疫納米晶修飾到梳形石英片不同探針的表面上。一種多疾病同時(shí)診斷監(jiān)測的方法，包括如下步驟將修飾好的石英片侵入到環(huán)境樣品溶液、體液、血液或分泌物樣品中，置于密封石英激發(fā)皿發(fā)射光路中，對(duì)傳染疾病進(jìn)行診斷監(jiān)測。本發(fā)明的特異性強(qiáng)，靈敏度高；診斷監(jiān)測時(shí)間短；成本低。
文檔編號(hào)G01N21/64GK102033125SQ20101052418
公開日2011年4月27日 申請(qǐng)日期2010年10月29日 優(yōu)先權(quán)日2010年10月29日
發(fā)明者于京華, 張叢叢, 楊萍, 王壽梅, 王珊, 葛磊, 顏梅, 黃加棟 申請(qǐng)人:濟(jì)南大學(xué)