專利名稱：一種珍龍醒腦制劑的質(zhì)量檢測方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于藥物的質(zhì)量檢測方法，尤其涉及一種珍龍醒腦制劑的質(zhì)量檢測方法。
背景技術(shù)：
腦中風、語言蹇澀，半身不遂、口眼歪斜是臨床上的常見病、多發(fā)病，治療方法頗多，但療效不一，珍龍醒腦制是藏醫(yī)傳統(tǒng)古驗方，經(jīng)藏醫(yī)長期臨床應用，該藥具有開竅醒神、 消熱通絡的作用，對腦組織缺血、缺氧引起的局限性神經(jīng)功能障礙所致的偏癱、失語等癥狀功效顯著。珍龍醒腦膠囊記載于國家藥品標準，標準編號WS-10708(ZD-0708)-2002。具有開竅醒神、消熱通絡的作用，用于痰瘀阻絡所致的中風，語言蹇澀，半身不遂，口眼歪斜。珍龍醒腦制劑由于效果良好，且劑型較為先進，經(jīng)臨床驗證，療效顯著，在臨床上備受患者青睞?，F(xiàn)行珍龍醒腦膠囊的質(zhì)量檢測標準包括西紅花、珍珠、膽酸和桂皮醛的鑒別，對制劑的質(zhì)量不能充分控制。目前無珍龍醒腦制劑含量測定的相關(guān)文獻及專利報道，其質(zhì)量標準中含量測定只有肉桂的含量測定，無法很好的控制其質(zhì)量。亟需研究一套關(guān)于珍龍醒腦制劑的更準確、嚴密的質(zhì)量檢測方法。為更好的控制珍龍醒腦制劑的成品質(zhì)量，使之達到穩(wěn)定、可控、均一，我們對原珍龍醒腦膠囊進行標準提高。通過試驗研究在原質(zhì)量標準基礎(chǔ)上增加了薄層色譜法定性鑒別產(chǎn)品中蓽茇、木香、肉桂、沒食子酸、豆蔻、丁香的專屬性較強的鑒別方法。增加了蓽茇、牛黃和西紅花的含量測定方法。通過改進質(zhì)量標準，對本品的工藝要求更嚴格，同時質(zhì)量標準更嚴謹、科學、適用、準確。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于，克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供了一種珍龍醒腦制劑的質(zhì)量檢測方法。本發(fā)明公開了 6個處方中藥材鑒定及4個主要指標成分的含量測定，目的在于提供一種珍龍醒腦制劑的質(zhì)量標準及其檢測方法，可增強該藥的有效性、質(zhì)量可控性及穩(wěn)定性。 通過試驗研究可增加藥材蓽茇、牛黃和西紅花的含量測定，可以更好的控制藥品質(zhì)量。本發(fā)明珍龍醒腦制劑包括下列成份
珍珠17. 3g、天竺黃2. 2g、西紅花8. 7g、丁香9. 7g、肉豆蔻8. 7g、豆蔻8. 7g、草果6. 5g、 檀香8. 7g、紫檀香21. 6g、沉香17. 3g、訶子28. lg、毛訶子17. 3g、余甘子21. 6g、木香21. 6g、 肉桂17. 3g、蓽茇8. 7g、螃蟹10. Sg、金礞石8. 7g、香旱芹5. 4g、人工牛黃2. 2g、麝香2. 2g、廣棗6. 5g、烈香杜鵑6. 5g、塞北紫堇13. 0g、短穗兔耳草43. 3g、鐵粉(制)4. 3g、冬葵果17. 3g、 甘草13. 0g、黑種草子5. 4g。本發(fā)明的珍龍醒腦制劑可以為上述處方藥材直接粉碎制成或經(jīng)提取加工后制成的膠囊劑、顆料劑、散劑或片劑等口服劑型，都適用于本發(fā)明的檢測方法。本發(fā)明珍龍醒腦膠囊制劑為珍珠17. 3g、天竺黃2. 2g、西紅花8. 7g、丁香9. 7g、 肉豆蔻8. 7g、豆蔻8. 7g、草果6. 5g、檀香8. 7g、紫檀香21. 6g、沉香17. 3g、訶子28. lg、毛訶子17. 3g、余甘子21. 6g、木香21. 6g、肉桂17. 3g、蓽茇8. 7g、螃蟹10. 8g、金礞石8. 7g、香旱芹5. 4g、人工牛黃2. 2g、麝香2. 2g、廣棗6. 5g、烈香杜鵑6. 5g、塞北紫堇13. 0g、短穗兔耳草
643. 3g、鐵粉(制)4. 3g、冬葵果17. 3g、甘草13. 0g、黑種草子5. 4g。以上二十九味，取人工牛黃、麝香、西紅花研成細粉，其余珍珠等二十六味粉碎成細粉，過篩，與上述細粉配研，混勻， 裝入膠囊，每粒裝0. 3g，即得。為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明的技術(shù)方案為一種珍龍醒腦制劑的質(zhì)量檢測方法， 所述蓽茇、木香、肉桂、沒食子酸、豆蔻、丁香的定性鑒別方法。蓽茇鑒別方法
取產(chǎn)品內(nèi)容物粉末2、g，分別加乙醇溶液20ml，超聲提取30分鐘，濾過，濾液濃縮至 10ml，作為供試品溶液。取蓽茇對照藥材0. 5g，同法制成對照藥材溶液。另取胡椒堿對照品適量，置棕色量瓶中，加無水乙醇制成每Iml含0. 5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法中國藥典2010年版一部附錄VI B試驗，吸取上述3種溶液各10" IUO// 1,5// 1，點于同一硅膠G薄層板上，以二甲苯-醋酸乙酯-丙酮(體積分數(shù)比為壙8 2飛0. 5^1.5) 為展開劑，展開，取出，晾干，噴以體積百分比為10%的硫酸乙醇溶液顯色。供試品色譜中， 在與對照藥材、對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色斑點。木香鑒別方法
取產(chǎn)品內(nèi)容物粉末0. 5^1. 5g，加甲醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液濃縮至5ml，作為供試品溶液。另取木香對照藥材0. 5g，加甲醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液濃縮至 5ml，作為對照藥材溶液。另取去氫木香內(nèi)酯對照品，加甲醇制成每Iml含0. 5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法中國藥典2010年版一部附錄VI B試驗，吸取上述供試品溶液10//1，對照品及對照藥材溶液各5// 1，點于同一硅膠G薄層板上，以二甲苯-醋酸乙酯-二氯甲烷體(積分數(shù)比為疒10 0. 3^2 0.5 1)為展開劑，展開，取出，晾干，用體積百分比為1%香草醛硫酸溶液噴霧顯色，加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品及對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。肉桂鑒別方法
取產(chǎn)品內(nèi)容物粉末0.5 1.5g，加醋酸乙酯10ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液濃縮至 lml，作為供試品溶液。另取肉桂對照藥材0.25g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法中國藥典2010年版一部附錄VI B試驗，分別吸取上述3種溶液各10// 1點于同一硅膠G 薄層板上，以石油醚(60 90°C)_醋酸乙酯(體積比為8.5 85 廣15)為展開劑，取出，晾干，噴以二硝基苯胼試液顯色，加熱至斑點清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上顯相同顏色斑點。沒食子酸鑒別方法
取產(chǎn)品內(nèi)容物粉末l.(T3.0g，加無水乙醇10ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。另取沒食子酸對照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法中國藥典2010年版一部附錄VI B試驗，吸取上述對照品溶液5// 1，供試品溶液5// 1分別點于同一硅膠G薄層板上，分別以三氯甲烷-醋酸乙酯-甲酸(體積分數(shù)比為 5^8 3飛0.5 1)為展開劑，展開取出，晾干，噴以體積百分比為1%三氯化鐵乙醇溶液。 供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。豆蔻鑒別方法
取產(chǎn)品內(nèi)容物粉末ι. (Γ3. 0g，加二氯甲烷10ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。另取豆蔻對照品藥材l.Og，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法中國藥典2010年版一部附錄VI B試驗，吸取供試品溶液和對照藥材溶液各5// 1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以苯-醋酸乙酯(體積分數(shù)比為19 1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以體積百分比為5%香草醛試液，加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中。在與對照品藥材相應的位置上， 顯相同的顏色斑點。丁香鑒別方法
取產(chǎn)品內(nèi)容物粉末2 5g，加二氯甲烷10ml，振搖數(shù)分鐘，濾過，濾液濃縮至anl。取丁香酚對照品，加二氯甲烷制成每Iml含5// 1的丁香酚作為對照品溶液。另取丁香對照藥材 Ig,加二氯甲烷IOml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液濃縮至Iml，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法中國藥典2010年版一部附錄VI B試驗，吸取上述3種溶液各15// 1，點于同一硅膠 G薄層板上，以石油醚(6(T90°C)-醋酸乙酯(體積分數(shù)比為4.5 15 0. 5 1. 5)為展開劑， 展開，取出，晾干，用體積百分比為5%香草醛硫酸溶液噴霧顯色，加熱至斑點清晰。在供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。珍珠的鑒別
取產(chǎn)品內(nèi)容物粉末l.(T2.0g，置具塞錐形瓶中，加稀鹽酸試液IOml (按中國藥典2010 年版一部附錄109頁稀鹽酸配制方法配制)，在105°C加熱20小時，取出，取上清液作為供試品溶液。另取珍珠對照藥材20mg，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法中國藥典2010 年版一部附錄VI B試驗，吸取上述兩種溶液各10// 1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以苯酚-水(體積分數(shù)比為7 2)為展開劑，展開，取出，晾干，立即噴以0. 茚三酮乙醇溶液， 在105°C加熱5 10分鐘。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同的紫紅色斑點。膽酸的鑒別
取產(chǎn)品內(nèi)容物粉末1. 5^2. 5g，加三氯甲烷20ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇使溶解，作為供試品溶液。另取膽酸對照品，加乙醇制成每Iml含aiig的溶液， 作為對照品溶液。照薄層色譜法中國藥典2010年版一部附錄VI B試驗，吸取上述兩種溶液各10// 1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以異辛烷-醋酸乙酯-冰醋酸(體積分數(shù)比為 15 7 5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點顯色清晰，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。西紅花的鑒別
取產(chǎn)品內(nèi)容物粉末1. 5^2. 5g，加濃氨試液(按中國藥典2010年版一部附錄108頁濃氨試液配制方法配制)潤濕，加無水乙醇5ml，超聲5分鐘，靜置，濾過，濾液作為供試品溶液。 另取西紅花對照藥材0. 2g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法中國藥典2010年版一部附錄VI B試驗，吸取上述兩種溶液各10// 1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-甲酸-水(體積分數(shù)比為4 1 1)為展開劑，展開，取出，晾干。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。桂皮醛的鑒別
取產(chǎn)品內(nèi)容物粉末2 3g，加乙醇10ml，冷浸1小時，時時振搖，靜置，取上清液作為供試品溶液。另取桂皮醛對照品，加乙醇制成每Iml含l//g的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法中國藥典2010年版一部附錄VI B試驗，吸取供試品溶液10// 1、對照品溶液2// 1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(6(T90°C)-醋酸乙酯(體積分數(shù)比為17 3)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以二硝基苯胼乙醇試液(按中國藥典2010年版一部附錄107頁二硝基苯胼乙醇試液配制方法配制)，加熱至斑點清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。本發(fā)明還提供了通過測定珍龍醒腦制劑中蓽茇、牛黃和西紅花的含量的方法，控制珍龍醒腦膠囊的質(zhì)量。珍龍醒腦膠囊中蓽茇的含量是采用高效液相色譜法測定蓽茇中胡椒堿的含量確定；牛黃含量是采用高效液相色譜法測定牛黃中膽酸的含量確定；西紅花含量是采用高效液相色譜法測定西紅花中西紅花苷-I、西紅花苷-II的含量確定。蓽茇中胡椒堿的測定方法為
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水體積分數(shù)比8(Γ60 2(Γ40為流動相；檢測波長為343nm。理論板數(shù)按胡椒堿峰計算應不低于 1500。對照品溶液的制備取胡椒堿對照品適量，精密稱定，置棕色瓶中，加無水乙醇制成每Iml含10// g 50// g的溶液，即得。供試品溶液的制備取產(chǎn)品或產(chǎn)品內(nèi)容物研細，取粉末0. Tl. 5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入無水乙醇50ml，密塞，稱定重量，超聲30分鐘 50分鐘，放冷，用無水乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10// 1，注入液相色譜儀，測定， 即得。HPLC法測定珍龍醒腦膠囊蓽茇中胡椒堿的含量
1.儀器、試藥和供試樣品
儀器高效液相色譜儀日立L-2100泵，日立檢測器L-MOO檢測器；島津AUW220D電子天平
對照品胡椒堿對照品(中國藥品生物制品檢定所)批號0775-200203
樣品珍龍醒腦膠囊(青海金訶藏藥藥業(yè)股份有限公司)批號095001、090502、090503
2.流動相選擇
經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn)以流動相甲醇-水(70 30)，能達到含量檢查要求。3.對照品制備
取胡椒堿對照品適量，精密稱定，置棕色瓶中，加無水乙醇制成每Iml含的溶液， 即得。4.供試品制備
本品研細后，取粉末1. 5g，精密稱定，置具塞的錐形瓶中，精密加入無水乙醇50ml，密塞，稱定重量，超聲20分鐘 50分鐘，放冷，用無水乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。提取時間考察試驗結(jié)果
超聲時間(分鐘)20304050胡椒堿含量Ong/粒)0. 1770. 1890. 1900. 190
結(jié)果表明按藥典中蓽茇的含量測定超聲時間為30分鐘，無法保證如意珍寶丸制劑中胡椒堿充分溶出，故選擇40分鐘，超聲提取。
5.系統(tǒng)適用性試驗及陰性干擾的考察
在上述色譜條件下，分別精密吸取對照品溶液、供試品溶液及陰性對照溶液各10// 1， 注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)果表明，供試品色譜中胡椒堿與其相鄰色譜峰的分離度大于1. 5，且陰性對照無干擾。見附圖
Ι-aU-b和I-C06.標準曲線的制備和線性關(guān)系的考察
精密量取胡椒堿對照品貯備液溶液(40. 15//g/ml) lml、2 ml,3 ml,5 ml、8ml、10ml，分別置IOml容量瓶中，無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，各精密進樣10// 1，以峰面積(A)對對照品濃度(C)進行線性回歸，得回歸方程A = 44933C - 12366，相關(guān)系數(shù)R=O. 9997。結(jié)果表明在4. 02// g/m廣40. 15// g/ml范圍內(nèi)，胡椒堿的峰面積(A)與濃度(C)線性關(guān)系良好。
胡椒堿標準曲線結(jié)果
權(quán)利要求
1.一種珍龍醒腦制劑的質(zhì)量檢測方法，其特征在于通過測定珍龍醒腦制劑中蓽茇、 牛黃、肉桂和西紅花含量的方法，通過定性鑒別蓽茇、木香、肉桂、沒食子酸、豆蔻、丁香、珍珠、西紅花、膽酸、桂皮醛的方法，控制珍龍醒腦制劑的質(zhì)量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種珍龍醒腦制劑的質(zhì)量檢測方法，其特征在于采用以下含量測定方法的一種或幾種采用高效液相色譜法，測定蓽茇中胡椒堿的含量確定蓽茇的含量，測定人工牛黃中膽酸的含量確定人工牛黃的含量，測定西紅花中西紅花苷-I、西紅花苷-II含量確定西紅花的含量，測定肉桂中桂皮醛的含量，確定肉桂的含量。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種珍龍醒腦制劑的質(zhì)量檢測方法，其特征在于測定蓽茇中胡椒堿含量的測定方法為色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水為流動相，甲醇水的體積份數(shù)比為80-60:20-40 ；檢測波長為343nm，理論板數(shù)按胡椒堿峰計算應不低于1500 ；對照品溶液的制備取胡椒堿對照品適量，精密稱定，置棕色瓶中，加無水乙醇制成每 Iml含10// g 50// g的溶液，即得；供試品溶液的制備取產(chǎn)品或產(chǎn)品內(nèi)容物研細，取粉末0.7 2. 5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入無水乙醇50ml，密塞，稱定重量，超聲3(Γ50分鐘，放冷，用無水乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10// 1，注入液相色譜儀，測定，即得。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種珍龍醒腦制劑的質(zhì)量檢測方法，其特征在于測定牛黃中膽酸含量的測定方法為色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-體積比為 1%冰醋酸為流動相，甲醇體積百分比為1%冰醋酸水溶液的體積份數(shù)比為90-60:10-40 ； 用蒸發(fā)光散射檢測器，理論板數(shù)按膽酸峰計算應不低于3000 ；對照品溶液的制備精密稱取膽酸對照品適量，加甲醇制成每Iml含0. IOmg^O. 40mg 的溶液，即得；供試品溶液的制備取產(chǎn)品或產(chǎn)品內(nèi)容物研細，取粉末4 8g，精密稱定，置具塞的錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，稱定重量，超聲30分鐘，放冷，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液25ml，揮干溶劑，轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，稀釋至刻度，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液10// 1,20// 1，供試品溶液10// 1，分別注入液相色譜儀，測定，以外標兩點法對數(shù)方程計算，即得。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種珍龍醒腦制劑的質(zhì)量檢測方法，其特征在于測定西紅花中西紅花苷-I、西紅花苷-II的含量測定方法為色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-體積比1% 冰醋酸水溶液為流動相，乙腈體積百分比1%冰醋酸水溶液的體積份數(shù)比為15-35:85-65 ； 檢測波長為440nm，理論板數(shù)按西紅花苷-I峰計算應不低于3500 ；對照品溶液的制備精密稱取西紅花苷-I、西紅花苷-II對照品適量，加甲醇制成每 Iml含20-40// g和10-20// g的溶液，即得；供試品溶液的制備取產(chǎn)品或產(chǎn)品內(nèi)容物研細，取粉末0. 3^0. 6g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，避光，精密加入甲醇50ml，密塞，稱定重量，冰浴中超聲30分鐘，放至室溫，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10// 1，注入液相色譜儀，測定，即得。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種珍龍醒腦制劑的質(zhì)量檢測方法，其特征在于測定肉桂中桂皮醛的含量測定方法為色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水-醋酸體積份數(shù)比45-35 35-45 0. 5_2為流動相；檢測波長為270nm，理論板數(shù)按桂皮醛峰計算應不低于3000 ；對照品溶液的制備精密稱取桂皮醛對照品適量，用甲醇制成每Iml含2μ g的溶液， 即得；供試品溶液的制備取產(chǎn)品或產(chǎn)品內(nèi)容物研細，取0.5 2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加三氯甲烷20ml，超聲提取40分鐘，濾過，用三氯甲烷IOml分次洗滌，合并濾液，揮干溶劑，殘渣加甲醇溶解，轉(zhuǎn)移至IOml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10// 1，注入液相色譜儀，測定，即得。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種珍龍醒腦制劑的質(zhì)量檢測方法，其特征在于包括下列一種或幾種定性鑒別方法蓽茇的鑒別取產(chǎn)品或產(chǎn)品內(nèi)容物粉末2、g，分別加乙醇溶液20ml，超聲提取30分鐘， 濾過，濾液濃縮至10ml，作為供試品溶液；取蓽茇對照藥材0. 5g，同法制成對照藥材溶液； 另取胡椒堿對照品適量，置棕色量瓶中，加無水乙醇制成每Iml含0. 5mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述3種溶液各10// IUO// 1,5// 1，點于同一硅膠G薄層板上，以二甲苯-醋酸乙酯-丙酮體積份數(shù)比為壙8 2飛0.5 1.5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以體積百分比為10%的硫酸乙醇溶液顯色；供試品色譜中，在與對照藥材、對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色斑點；木香的鑒別取產(chǎn)品或產(chǎn)品內(nèi)容物粉末0. 5^1. 5g，加甲醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液濃縮至5ml，作為供試品溶液，另取木香對照藥材0. 5g，加甲醇20ml，超聲處理30 分鐘，濾過，濾液濃縮至5ml，作為對照藥材溶液；另取去氫木香內(nèi)酯對照品，加甲醇制成每 Iml含0. 5mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法中國藥典2010年版一部附錄VI B試驗，吸取上述供試品溶液10// 1，對照品及對照藥材溶液各5// 1，點于同一硅膠G薄層板上， 以二甲苯-醋酸乙酯-二氯甲烷體積分數(shù)比為疒10 0. 3^2 0.5 1為展開劑，展開，取出，晾干，用體積百分比為1%香草醛硫酸溶液噴霧顯色，加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品及對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；肉桂的鑒別取產(chǎn)品或產(chǎn)品內(nèi)容物粉末0. 5 1.5g，加醋酸乙酯10ml，超聲處理30分鐘， 濾過，濾液濃縮至1ml，作為供試品溶液；另取肉桂對照藥材0. 25g，同法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法中國藥典2010年版一部附錄VI B試驗，分別吸取上述3種溶液各10// 1 點于同一硅膠G薄層板上，以沸程6(T90°C石油醚-醋酸乙酯體積比為8. 5 85 廣15為展開劑，取出，晾干，噴以二硝基苯胼試液顯色，加熱至斑點清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上顯相同顏色斑點；沒食子酸的鑒別取產(chǎn)品或產(chǎn)品內(nèi)容物粉末l.(T3. 0g，加無水乙醇10ml，超聲處理20 分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液；另取沒食子酸對照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液， 作為對照品溶液；照薄層色譜法中國藥典2010年版一部附錄VI B試驗，吸取上述對照品溶液5" 1，供試品溶液5// 1分別點于同一硅膠G薄層板上，分別以三氯甲烷-醋酸乙酯-甲酸體積分數(shù)比為5、 3飛0.5 1為展開劑，展開取出，晾干，噴以體積百分比為1%三氯化鐵乙醇溶液；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；豆蔻鑒別取產(chǎn)品或產(chǎn)品內(nèi)容物粉末1. (Γ3. 0g，加二氯甲烷10ml，超聲處理20分鐘， 濾過，濾液作為供試品溶液；另取豆蔻對照品藥材1. Og,同法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法中國藥典2010年版一部附錄VI B試驗，吸取供試品溶液和對照藥材溶液各5// 1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以苯-醋酸乙酯體積分數(shù)比為15 20 0.5 1.5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以體積百分比為5%香草醛試液，加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中；在與對照品藥材相應的位置上，顯相同的顏色斑點；丁香的鑒別取產(chǎn)品或產(chǎn)品內(nèi)容物粉末2 5g，加二氯甲烷10ml，振搖數(shù)分鐘，濾過， 濾液濃縮至2ml ；取丁香酚對照品，加二氯甲烷制成每ml含5// 1的丁香酚作為對照品溶液；另取丁香對照藥材lg，加二氯甲烷10ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液濃縮至1ml，作為對照藥材溶液；照薄層色譜法中國藥典2010年版一部附錄VI B試驗，吸取上述3種溶液各15// 1，點于同一硅膠G薄層板上，以沸程6(T90°C石油醚-醋酸乙酯體積分數(shù)比為 4. 5^15 0.5 1.5為展開劑，展開，取出，晾干，用體積百分比為5%香草醛硫酸溶液噴霧顯色，加熱至斑點清晰；在供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑占.珍珠的鑒別取產(chǎn)品或產(chǎn)品內(nèi)容物粉末l.(T2. 0g，置具塞錐形瓶中，加質(zhì)量比10%HCL 水溶液10ml，在105°C加熱20小時，取出，取上清液作為供試品溶液；另取珍珠對照藥材 40mg,同法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法中國藥典2010年版一部附錄VI B試驗，吸取上述兩種溶液各10//1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以苯酚-水體積分數(shù)比為5、 Γ2 為展開劑，展開，取出，晾干，立即噴以0. 2%茚三酮乙醇溶液，在105°C加熱5 10分鐘；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同的紫紅色斑點；膽酸的鑒別取產(chǎn)品或產(chǎn)品內(nèi)容物粉末1. 5^2. 5g，加三氯甲烷20ml，超聲處理30分鐘， 濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇4ml使溶解，作為供試品溶液；另取膽酸對照品，加乙醇制成每 Iml含2mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法中國藥典2010年版一部附錄VI B試驗， 吸取上述兩種溶液各10// 1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以異辛烷-醋酸乙酯-冰醋酸體積分數(shù)比為12-18 5、 3飛為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在 105°C加熱至斑點顯色清晰，置紫外光燈365nm下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；西紅花的鑒別取產(chǎn)品或產(chǎn)品內(nèi)容物粉末1.5 2. 5g，加濃氨試液潤濕，加無水乙醇 5ml，超聲處理5分鐘，靜置，濾過，濾液作為供試品溶液；另取西紅花對照藥材0.2g，同法制成對照藥材溶液，照薄層色譜法中國藥典2010年版一部附錄VI B試驗，吸取上述兩種溶液各10// 1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-甲酸-水體積分數(shù)比為 3^5 O.fl. 2 O.fl. 2為展開劑，展開，取出，晾干；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；桂皮醛的鑒別取產(chǎn)品或產(chǎn)品內(nèi)容物粉末纊3g，加乙醇10ml，冷浸1小時，時時振搖，靜置，取上清液作為供試品溶液；另取桂皮醛對照品，加乙醇制成每Iml含Ip g的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法中國藥典2010年版一部附錄VI B試驗，吸取供試品溶液10// 1、 對照品溶液2μ 1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以沸程6(T90°C石油醚-醋酸乙酯(體積分數(shù)比為15 20 2飛為展開劑，展開，取出，晾干，噴以二硝基苯胼乙醇試液，加熱至斑點清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種關(guān)于珍龍醒腦制劑的質(zhì)量檢測方法，該方法包括蓽茇、木香、肉桂、沒食子酸、豆蔻、丁香、珍珠、膽酸、西紅花、桂皮醛的鑒別方法，還包括蓽茇中胡椒堿、牛黃中膽酸、肉桂中桂皮醛、西紅花中西紅花苷-I、西紅花苷-II的含量測定方法。經(jīng)過試驗研究，本發(fā)明質(zhì)量檢測方法中的鑒別方法在樣品的供試品色譜中，與對照品色譜相應的位置上，均顯相同顏色的斑點，陰性對照無干擾，方法簡便可行，特征性強。用本發(fā)明所述的含量測定方法測定珍龍醒腦制劑中的胡椒堿、膽酸、西紅花苷-I、西紅花苷-II的含量，結(jié)果表明，方法線性關(guān)系良好，回收率試驗準確度較高，具有極好的重復性和穩(wěn)定性，可以準確、嚴密地控制珍龍醒腦制劑的質(zhì)量。
文檔編號G01N30/90GK102353732SQ20111019170
公開日2012年2月15日 申請日期2011年7月11日 優(yōu)先權(quán)日2011年7月11日
發(fā)明者單玉剛, 周忠山, 孫泰俊, 孫緒丁, 邵成雷 申請人:山東阿如拉藥物研究開發(fā)有限公司