專利名稱：用于酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)實(shí)驗(yàn)的取膜器的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型涉及一種在醫(yī)學(xué)教學(xué)及科研實(shí)驗(yàn)中用于酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)法(enzyme linked immunospot assay, ELISP0T)實(shí)驗(yàn)的簡(jiǎn)易自動(dòng)取膜器。
背景技術(shù)：
在免疫學(xué)領(lǐng)域中，對(duì)于疾病以及疫苗研究不僅僅局限于體液免疫應(yīng)答，細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答也是人們所關(guān)灃的，而T細(xì)胞在CMI中起關(guān)鍵作用。近年來隨著抗體制備、PVDF 膜材等技術(shù)改良，酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)(enzyme linked immunospot assay，ELISP0T)分析技術(shù)已成為公認(rèn)的最靈敏抗原特定T細(xì)胞的體外檢測(cè)技術(shù)。ELISP0T作為一項(xiàng)新型的免疫酶技術(shù)源自酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(enzyme-linked immunosorbent assy, ELISA)，又突破傳統(tǒng)ELISA 法，是定量ELISA技術(shù)的延伸和新的發(fā)展，是從單細(xì)胞水平檢測(cè)分泌抗體細(xì)胞(ASC)或分泌細(xì)胞因子(CK)細(xì)胞的一項(xiàng)細(xì)胞免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)。由于該方法具有較高的特異性和敏感性， 易操作，成本相對(duì)流式細(xì)胞分析術(shù)也較低，已被廣泛用于分泌CK細(xì)胞檢測(cè)或ASC測(cè)定中，對(duì)探索自身免疫系統(tǒng)疾病發(fā)病機(jī)制具有重要意義。ELISP0T板是一種特殊的96孔板，底面介質(zhì)是PVDF (聚偏氟乙烯)膜，利用膜的多孔結(jié)構(gòu)可以讓單個(gè)細(xì)胞坐到其中，然后分泌細(xì)胞因子或特定抗體，產(chǎn)生紫色(AKP和底物的產(chǎn)物)或紅色(HRP和底物的產(chǎn)物)斑點(diǎn)，最后要將布滿斑點(diǎn)的膜取出分析計(jì)數(shù)以利保存和采集圖像。以往實(shí)驗(yàn)室常用的方法是卸掉ELISP0T 板底托后，用針頭或尖鑷從孔底邊緣處小心揭起膜片，然后按順序平貼于紙張上，進(jìn)行立體解剖顯微鏡或計(jì)算機(jī)輔助成像分析系統(tǒng)計(jì)算斑點(diǎn)數(shù)。在此過程中，常常由于操作不細(xì)致、針頭或鑷子進(jìn)入位置受影響等因素的困擾，稍有不慎便會(huì)導(dǎo)致膜的殘缺，不僅影響到圖片的美觀，更主要的是極大的影響了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判定，如何將斑點(diǎn)膜完整取出并長(zhǎng)期保存成為實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員的關(guān)鍵問題。
發(fā)明內(nèi)容本實(shí)用新型針對(duì)背景技術(shù)所存在的問題，提供了一種簡(jiǎn)易、方便的自動(dòng)取膜器，可以實(shí)現(xiàn)簡(jiǎn)便、快速、輕松、完整取膜。為達(dá)到以上目的，本發(fā)明是采取如下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)的一種用于酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)實(shí)驗(yàn)的取膜器，其特征在于，包括一個(gè)柄套，其一端連接柱頭伸縮器，柱頭伸縮器上設(shè)置有至少一排不少于8個(gè)伸縮柱頭，每個(gè)伸縮柱頭的直徑與 ELISP0T實(shí)驗(yàn)用96孔板的加樣孔完全吻合，各伸縮柱頭相互間的距離與96孔板每列加樣孔8各孔之間的距離相同；所述柱頭伸縮器內(nèi)設(shè)有驅(qū)動(dòng)伸縮柱頭動(dòng)作的電機(jī)，柄套內(nèi)設(shè)置有給電機(jī)供電的電源裝置。上述方案中，所述的柱頭伸縮器上設(shè)置有1 4排伸縮柱頭，每排伸縮柱頭的個(gè)數(shù)為八個(gè)；每排伸縮柱頭之間的距離與96孔板加樣孔的列距相同。伸縮柱頭高度在1. 5 2cm之間。所述的電源裝置包括柄套內(nèi)置的裝有電池的電池盒，柄套外設(shè)有控制電池通斷的開關(guān)；柄套另一端設(shè)置連接電池的充電接口。本實(shí)用新型的優(yōu)點(diǎn)是柱頭伸縮器上設(shè)置伸縮柱頭直徑、排列與ELISP0T實(shí)驗(yàn)用 96孔板的加樣孔完全吻合，保證了取膜的完整性；將取下的膜順序平貼于紙上夾于書中可長(zhǎng)期保存，解決了長(zhǎng)期大量存放96孔板的不便問題；通過至少一排8孔柱頭伸縮器的設(shè)計(jì)可以實(shí)現(xiàn)一次獲取8個(gè)實(shí)驗(yàn)斑點(diǎn)孔膜，達(dá)到了省時(shí)高效的目的。

圖1為ELISP0T法96孔板組合圖。圖2為本實(shí)用新型的取膜器結(jié)構(gòu)圖。圖1、圖2中1、96孔板；2、加樣孔；3、底托；4、柱頭伸縮器；5、柄套；6、開關(guān)；7、充
電接口 ；8、電池盒；9、8孔伸縮柱頭。
具體實(shí)施方式
如圖1所示，ELISP0T實(shí)驗(yàn)用96孔板的加樣孔2共12列，每列8個(gè)孔，每個(gè)加樣孔底面(96孔板1與底托3之間)都貼有PVDF膜。如圖2所示，一種用于酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)實(shí)驗(yàn)的取膜器，包括圓柱型柄套5，其一端嵌入柱頭伸縮器4中，柱頭伸縮器4上設(shè)置有一排伸縮柱頭9 (八個(gè))，每個(gè)伸縮柱頭的直徑與加樣孔2完全吻合。伸縮柱頭高度在1. 5 2cm之間，可以使其具有足夠的伸縮空間，順利彈出和回縮，實(shí)現(xiàn)將膜頂出的目的。柄套5內(nèi)置裝有電池的電池盒8，柄套末端(自由端) 設(shè)3V充電接口 7，可接充電器對(duì)電池充電。柄套外設(shè)有控制電池通斷的開關(guān)6。柱頭伸縮器4上的各伸縮柱頭9相互間的距離與96孔板每列加樣孔8之間的距離相同，使用時(shí)，將該排伸縮柱頭相對(duì)96孔板的任一列需要取膜的加樣孔，開啟開關(guān)6，讓電池給柱頭伸縮器4中的直流電機(jī)供電，直流電機(jī)驅(qū)動(dòng)伸縮柱頭9在該列加樣孔內(nèi)上下移動(dòng)，將膜順利頂出。本實(shí)用新型不限于以上實(shí)施列，例如柱頭伸縮器4上還可設(shè)置有2 4排伸縮柱頭9 (每排八個(gè))，每排伸縮柱頭9中各柱頭相互間的距離與96孔板每列加樣孔8各孔之間的距離相同，同時(shí)每排伸縮柱頭之間的距離與96孔板加樣孔的列距相同，因此可同時(shí)對(duì) 2 4列加樣孔取膜。
權(quán)利要求1.一種用于酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)實(shí)驗(yàn)的取膜器，其特征在于，包括一個(gè)柄套，其一端連接柱頭伸縮器，柱頭伸縮器上設(shè)置有至少一排不少于8個(gè)伸縮柱頭，每個(gè)伸縮柱頭的直徑與 ELISP0T實(shí)驗(yàn)用96孔板的加樣孔完全吻合，各伸縮柱頭相互間的距離與96孔板每列加樣孔之間的距離相同；所述柱頭伸縮器內(nèi)設(shè)有驅(qū)動(dòng)伸縮柱頭動(dòng)作的電機(jī)，柄套內(nèi)設(shè)置有給電機(jī)供電的電源裝置。
2.如權(quán)利要求1所述的用于酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)實(shí)驗(yàn)的取膜器，其特征在于，所述的柱頭伸縮器上設(shè)置有1 4排伸縮柱頭，每排伸縮柱頭的個(gè)數(shù)為八個(gè)；每排伸縮柱頭之間的距離與 96孔板加樣孔的列距相同。
3.如權(quán)利要求1或2所述的用于酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)實(shí)驗(yàn)的取膜器，其特征在于，伸縮柱頭高度在1. 5 2cm之間。
4.如權(quán)利要求1所述的用于酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)實(shí)驗(yàn)的取膜器，其特征在于，所述的電源裝置包括柄套內(nèi)置的裝有電池的電池盒，柄套外設(shè)有控制電池通斷的開關(guān)；柄套另一端設(shè)置連接電池的充電接口。
專利摘要本實(shí)用新型公開了一種用于酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)實(shí)驗(yàn)的取膜器，其特征在于，包括一個(gè)柄套，其一端連接柱頭伸縮器，柱頭伸縮器上設(shè)置有至少一排不少于8個(gè)伸縮柱頭，每個(gè)伸縮柱頭的直徑與ELISPOT實(shí)驗(yàn)用96孔板的加樣孔完全吻合，各伸縮柱頭相互間的距離與96孔板每列加樣孔8各孔之間的距離相同；所述柱頭伸縮器內(nèi)設(shè)有驅(qū)動(dòng)伸縮柱頭動(dòng)作的電機(jī)，柄套內(nèi)設(shè)置有給電機(jī)供電的電源裝置。
文檔編號(hào)G01N33/545GK202133667SQ201120209720
公開日2012年2月1日 申請(qǐng)日期2011年6月21日 優(yōu)先權(quán)日2011年6月21日
發(fā)明者葉菁, 張秀敏, 曲萍, 曹云新, 李增山, 林慧, 袁媛, 隋延仿, 黃楊 申請(qǐng)人:中國(guó)人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)