專利名稱：抗鏈球菌溶血素濃度檢測試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
[0001]本實(shí)用新型涉及ー種檢測試劑盒，特別是涉及一種抗鏈球菌溶血素濃度檢測試劑盒。
背景技術(shù)：
抗鏈球菌溶血素濃度檢測試劑盒用于檢測人血液中的抗鏈球菌溶血素(ASO)。A族溶血性鏈球菌能產(chǎn)生各種毒素抗原，其中ー種外毒素便是鏈球菌溶血素。受感染的器官能夠產(chǎn)生抗這些外毒素的抗體。病人血清中抗鏈球菌溶血素抗體的濃度能判定β_溶血性鏈球菌的感染程度。高膽固醇血癥、巨球蛋白血癥患者也可能出現(xiàn)ASO升高。鏈球菌溶血素是A族溶血性鏈球菌的代謝產(chǎn)物之一。它是ー種具有溶血活性的蛋白質(zhì)，具有抗原性。A族溶血性鏈球菌在人體中作為正常菌群存在，正常人體內(nèi)的抗鏈球菌溶血素(ASO)具有一定基礎(chǔ)值。溶血性鏈球菌感染后，ASO升高，因此ASO成為判斷鏈球菌感染的重要指標(biāo)。據(jù)研究報(bào)告高膽固醇血癥、巨球蛋白癥患者也可能出現(xiàn)ASO升高。我國是ー個(gè)流行病多發(fā)的地區(qū)，各種傳染病發(fā)病的幾率非常高，面對這種迫切的形式，就需要大量的診斷產(chǎn)品。另外人民生活水平的提高，對疾病的預(yù)防和早期診斷提出了更高的要求，也需要大量能早期診斷疾病的產(chǎn)品。所以這些產(chǎn)品的研究和開發(fā)就意義重大。而這類產(chǎn)品的基礎(chǔ)就是免疫學(xué)。免疫學(xué)有幾大類產(chǎn)品，ELISA、放射免疫、化學(xué)發(fā)光法、比濁法，而ELISA法是批量檢測，需要的時(shí)間長，操作繁瑣，不利臨床檢測，而化學(xué)發(fā)光免疫分析和放射免疫分析需要昂貴分析設(shè)備和儀器，并且要專業(yè)人員操作檢測，這些的檢測方法具有很高的靈敏度和特異性，但卻因?yàn)榘嘿F、不方便攜帯、專業(yè)性太強(qiáng)、對操作人員身體傷害大等原因，而無法滿足臨床需求。免疫比濁法，能結(jié)合臨床的需求且操作簡單無污染。因此，對于免疫學(xué)檢測來說，免疫比濁法具有免疫學(xué)抗原，抗體結(jié)合的特異性，又具有生物化學(xué)反應(yīng)動力學(xué)特點(diǎn)，可以在自動生化分析儀上檢測體液中，特別是血液中的微量待測物質(zhì)，是ー種非常有應(yīng)用前途的臨床檢驗(yàn)實(shí)用免疫比濁法，具有試劑穩(wěn)定，操作簡便，流程短，重復(fù)性和精確性好的優(yōu)勢。其重復(fù)性好、特異性強(qiáng)且操作簡便，明顯優(yōu)于其他方法。該試劑盒主要應(yīng)用單位是各級醫(yī)院的急診及門診檢驗(yàn)室，目前作為鏈球菌感染的常規(guī)檢測手法，國內(nèi)外有多家単位生產(chǎn)，但國外試劑盒較貴，不適合一般性醫(yī)院開展，國內(nèi)試劑盒相對較便宜，但一部分存在產(chǎn)品的質(zhì)量問題，所以在提高產(chǎn)品質(zhì)量的同時(shí)又增加產(chǎn)品的穩(wěn)定性及靈敏度是擴(kuò)大普及率的最有效方法，這也是我公司研發(fā)該產(chǎn)品的方向所在，而且從經(jīng)濟(jì)效益方面考慮也具有可行性。國內(nèi)外此類產(chǎn)品的方法學(xué)主要以下幾種I、乳膠凝集法檢測，此種方法缺乏精確度，樣品的滴度是靠稀釋血清的陽性結(jié)果來確定的，不能定量地表示檢測結(jié)果，而且對于少量低濃度的ASO不夠敏感，現(xiàn)在臨床上基本已被淘汰。2、ELISA法，該法操作較為復(fù)雜，特異性和重復(fù)性不好，非主流產(chǎn)品。3、放射免疫(RIA)，該法操作較為復(fù)雜，有放射污染性，很少有此類產(chǎn)品。[0010]4、膠乳增強(qiáng)免疫透射比濁法，此類方法是現(xiàn)在比較流行的ー種方法，國外應(yīng)用此方法較國內(nèi)要早，但試劑價(jià)格較貴。

實(shí)用新型內(nèi)容本實(shí)用新型所要解決的技術(shù)問題是提供一種抗鏈球菌溶血素濃度檢測試劑盒，其結(jié)構(gòu)簡單，使用方便。本實(shí)用新型是通過下述技術(shù)方案來解決上述技術(shù)問題的一種抗鏈球菌溶血素濃度檢測試劑盒，其特征在于，其包括盒蓋、盒體、第一試劑單元、第二試劑單元、稀釋液單元，第一試劑單元、第二試劑單元、稀釋液單元都由ー個(gè)可密封的試劑瓶組成，試劑瓶的形狀為圓柱狀，盒蓋和盒體連接，第一試劑單元、第二試劑單元、稀釋液單元順序放置于盒體中，盒體的形狀長方體形狀。本實(shí)用新型的積極進(jìn)步效果在于本實(shí)用新型成本低，操作簡單，比進(jìn)ロ的抗鏈球菌溶血素測定試劑盒使用方便，而且與市售產(chǎn)品檢測結(jié)果有很強(qiáng)的相關(guān)性，經(jīng)過校正后，可以得到與市售產(chǎn)品相似的結(jié)果，符合臨床檢測的需要，為預(yù)防人體鏈球菌感染、控制病人病情起到的積極作用。

圖I為本實(shí)用新型盒蓋打開時(shí)的立體結(jié)構(gòu)圖。圖2為連接為一體的三個(gè)試劑單元的結(jié)構(gòu)圖。
具體實(shí)施方式
以下結(jié)合附圖給出本實(shí)用新型較佳實(shí)施例，以詳細(xì)說明本實(shí)用新型的技術(shù)方案。如圖I所示，本實(shí)用新型抗鏈球菌溶血素濃度檢測試劑盒包括盒蓋I、盒體2、第一試劑單元3、第二試劑單元4、稀釋液單元5，第一試劑單元3、第二試劑單元4、稀釋液單元5都由ー個(gè)可密封的試劑瓶組成，試劑瓶的形狀為圓柱狀，第一試劑單元3、第二試劑單元4、稀釋液單元5分別盛裝有第一抗鏈球菌溶血素R1、第二抗鏈球菌溶血素R2、稀釋液，盒蓋I和盒體2連接，第一試劑單元3、第二試劑單元4、稀釋液單元5順序放置于盒體2中，本實(shí)用新型盒蓋I和盒體2可密封，使用前打開。盒體2的形狀長方體形狀。以下結(jié)合在Beckman生化分析儀上使用本產(chǎn)品對本實(shí)用新型作進(jìn)ー步說明。首先設(shè)定生化分析儀參數(shù)，測量樣本中抗鏈球菌溶血素的濃度，具體如下預(yù)處理，取本實(shí)用新型稀釋液單元5中盛裝的稀釋液，加入第二試劑單元4中，與第二抗鏈球菌溶血素R2充分混勻。檢測樣品時(shí)，第一試劑單兀3中盛裝第一抗鏈球菌溶血素Rl,加入樣本6ul，混勻后，37°C孵育5分鐘，加入第二試劑單元4中盛裝的測試試劑R2 70ul，在波長為600nm下檢測，混勻后，立即讀取吸光度A1, 300秒后，讀取吸光度A2計(jì)算ΛΑ/min。Λ A=(A2-A1)。使本實(shí)用新型檢測的結(jié)果與市售產(chǎn)品檢測結(jié)果相近。本實(shí)施例采用如下的式
(I)ASO濃度(IU/mL) = ΛΑ樣本/ΛΑ標(biāo)準(zhǔn)X標(biāo)準(zhǔn)品濃度..................式(I)本實(shí)用新型抗鏈球菌溶血素濃度檢測試劑盒的三個(gè)試劑単元的密封容器形成一體，如圖2所示。組成第一試劑單元3、第二試劑單元4、稀釋液單元5的獨(dú)立密封容器的外壁借助外部固定支架7連接為一體。本實(shí)用新型試劑盒的設(shè)計(jì)原理如下通過原理分析，以獨(dú)特技術(shù)將抗原(鏈球菌溶血素)錨定在膠乳表面。血清中的ASO與試劑中的抗原在液相中結(jié)合成抗原抗體復(fù)合物，產(chǎn)生濁度變化，膠乳試劑可以特異的增大該濁度變化，増大試劑的靈敏度。該濁度變化的高低與樣本中ASO的含量成正比。測定該濁度，與校準(zhǔn)血清比較，即能得出樣本血清中ASO的含量。本項(xiàng)目采用膠乳微粒增強(qiáng)技木，是把純化抗原通過特殊的化學(xué)交聯(lián)劑的作用連接到聚苯こ烯乳膠顆粒的表面，制備成具有免疫活性的免疫膠乳，從而使其體積擴(kuò)大了近百倍。當(dāng)此膠乳與樣本中的ASO相遇時(shí)，發(fā)生凝集反應(yīng)，這時(shí)抗原拉動此乳膠顆粒一起參與了對抗體的反應(yīng)，由于乳膠的存在，凝集反應(yīng)時(shí)反應(yīng)液的濁度變化増大，即便遇到微量的抗體，其產(chǎn)生的團(tuán)塊將足夠大到能用儀器精確地檢測出來，從而提高反應(yīng)的靈敏度。所以其反應(yīng)原理簡述為樣品中的ASO抗體與反應(yīng)液中Latex-ASO抗原，在ー個(gè)最佳反應(yīng)條件下，形成抗原-抗體-Latex聚合物，使反應(yīng)液產(chǎn)生濁度變化，產(chǎn)生的濁度與樣品中的ASO在一定的含量下呈一定的相關(guān)性，通過測定吸光度變化，與ASO標(biāo)準(zhǔn)曲線比較，得出ASO含量。本實(shí)用新型結(jié)構(gòu)緊湊，拆取方便，操作簡單，應(yīng)用靈活，可滿足不同檢測目的和儀器的需求。而且由于使用膠乳增強(qiáng)免疫比濁法，因此使本產(chǎn)品的成本大大降低，為產(chǎn)品市場推廣奠定基礎(chǔ)。本實(shí)用新型成本低，操作簡單，比進(jìn)ロ的抗鏈球菌溶血素測定試劑盒使用方便，而且與市售產(chǎn)品檢測結(jié)果有很強(qiáng)的相關(guān)性，經(jīng)過校正后，可以得到與市售產(chǎn)品相似的結(jié)果，符合臨床檢測的需要，為預(yù)防人體鏈球菌感染、控制病人病情起到的積極作用。上述實(shí)施例不作為對本實(shí)用新型的限定，凡在本實(shí)用新型的范圍內(nèi)所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均屬于本實(shí)用新型的保護(hù)范圍。
權(quán)利要求1. 一種抗鏈球菌溶血素濃度檢測試劑盒，其特征在于，其包括盒蓋、盒體、第一試劑單元、第二試劑單元、稀釋液單元，第一試劑單元、第二試劑單元、稀釋液單元都由ー個(gè)可密封的試劑瓶組成，試劑瓶的形狀為圓柱狀，盒蓋和盒體連接，第一試劑單元、第二試劑單元、稀釋液單元順序放置于盒體中，盒體的形狀長方體形狀。
專利摘要本實(shí)用新型公開了一種抗鏈球菌溶血素濃度檢測試劑盒，其包括盒蓋、盒體、第一試劑單元、第二試劑單元、稀釋液單元，第一試劑單元、第二試劑單元、稀釋液單元都由一個(gè)可密封的試劑瓶組成，試劑瓶的形狀為圓柱狀，盒蓋和盒體連接，第一試劑單元、第二試劑單元、稀釋液單元順序放置于盒體中，盒體的形狀長方體形狀。本實(shí)用新型的結(jié)構(gòu)簡單，使用方便。
文檔編號G01N33/536GK202404095SQ20112056386
公開日2012年8月29日 申請日期2011年12月28日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月28日
發(fā)明者信煒, 衛(wèi)君超, 梁望鴿 申請人:上海豐匯醫(yī)學(xué)科技有限公司