專利名稱：一種白花益肝排毒顆粒及其制備方法和檢測方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種白花益肝排毒顆粒及其制備方法和檢測方法，屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
肝臟是重要的解毒器官，各種毒素經(jīng)過肝臟的一系列化學(xué)反應(yīng)后，變成無毒或低毒物質(zhì)。肝臟一旦發(fā)生病變，引發(fā)肝病，其危害性極大，常見的肝病有乙肝、甲肝、丙肝、肝硬化、脂肪化、肝癌、酒精肝等。因此具有益肝排毒功效的中藥制劑能發(fā)揮良好作用。申請?zhí)枮椤?00410022730. 8”的專利申請公開了一種益肝排毒藥物及其制備方法，該制備方法是將11味藥材全部用水煎煮提?。唤?jīng)進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，該處方中的熟大黃含有的游離羥基蒽醌類物質(zhì)、五味子中含有的大量聯(lián)苯環(huán)辛烯型木質(zhì)素成分、澤瀉中的有效成分等都是對抗病毒性肝炎的主要活性物質(zhì)，而用水煎煮時提取率低，沒有將這些主要活性物質(zhì)充分提取出來，從而使得該復(fù)方的療效受到影響。此外，目前對益肝排毒藥品還沒有一套嚴(yán)格可靠的質(zhì)量檢測標(biāo)準(zhǔn)。如果沒有嚴(yán)格的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，得到的產(chǎn)品不能確保其質(zhì)量，結(jié)果必將影響該藥物的臨床療效；所以為提高益肝排毒藥物的治療作用，確保用藥的安全、有效及產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定，制定一個嚴(yán)格可靠的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)成為保證藥品質(zhì)量的基本要求。隨著現(xiàn)代儀器分析技術(shù)的發(fā)展，高效液相色譜法、薄層色譜鑒別法等分析方法在藥品的質(zhì)量控制中得到了越來越廣泛的應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于，提供一種白花益肝排毒顆粒及其制備方法和檢測方法。本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，對白花益肝排毒顆粒的制備工藝進(jìn)行了優(yōu)化，使其對病毒性肝炎的療效更為顯著，并建立了系統(tǒng)的、完整的、有效的成分鑒別和含量測定方法，可有效控制該藥品的質(zhì)量，從而確保其臨床療效。本發(fā)明的技術(shù)方案一種白花益肝排毒顆粒，它是以白花蛇舌草5 25kg、靈芝2 15kg、黃精I(xiàn) 10kg、黃芪2 15kg、澤瀉I 10kg、熟大黃I 10kg、肉蓯蓉I 5kg、鱉甲2 15kg、五味子f 10kg、銀杏葉f IOkg和甘草f6kg為原料藥，提取后加入適量可溶性淀粉和阿斯巴甜，并以80%乙醇為潤濕劑制成的。優(yōu)選的白花益肝排毒顆粒是以白花蛇舌草20kg、靈芝10kg、黃精8kg、黃芪10kg、澤灣8kg、熟大黃8kg、肉灰蓉4kg、鳘甲10kg、五味子8kg、銀杏葉8kg和甘草6kg為原料藥，提取后加入適量可溶性淀粉和阿斯巴甜，并以80%乙醇為潤濕劑制成的。前述白花益肝排毒顆粒的制備方法為將熟大黃、五味子、澤瀉藥材加6倍量70%乙醇提取3次，每次2h，過濾，醇提液70°C減壓濃縮至密度I. 2，稠浸膏于80°C真空減壓干燥36h，得干膏，粉碎過篩，得醇提粉末；其余8味原料藥與醇提藥渣混合加6倍量水浸泡O. 5h，再加6倍量水先煎O. 5h，共計加水12倍量，煎煮三次，煎煮時間分別為3h、3h和Ih，85°C減壓濃縮至密度I. 2，80°C減壓干燥48h，得干膏，粉碎過篩，得水提粉末；將醇提粉末和水提粉末混合，按I : I的重量比例加入輔料可溶性淀粉和O. 2%阿斯巴甜做甜味劑，以80%乙醇做潤濕劑，濕法制粒，顆粒75°C干燥4-6h，整粒，過篩，包裝，即得。前述白花益肝排毒顆粒的檢測方法包括性狀、鑒別、檢查和含量測定項目；其中鑒別是對制劑中的銀杏葉、甘草、大黃、五味子的薄層色譜鑒別；含量測定是用高效液相色譜法分別測定制劑中大黃所含總游離蒽醌類成分和五味子所含五味子醇甲的含量。銀杏葉的鑒別方法是以銀杏葉對照藥材為對照，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水=5 3 1 1為展開劑的薄層色譜法；甘草的鑒別方法是以甘草對照藥材和甘草酸銨對照品為對照，以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水=15 1 1 :2為展開劑的薄層色譜法；大黃的鑒別方法是 以大黃對照藥材為對照，以30 60°C石油醚-甲酸乙酯-甲酸=15 5 1的上層溶液為展開劑的薄層色譜法；五味子的鑒別方法是以五味子對照藥材和五味子甲素對照品為對照，以30 60°C石油醚-甲酸乙酯-甲酸=15 5 1的上層溶液為展開劑的薄層色譜法。具體鑒別方法為(I)銀杏葉的薄層色譜鑒別取本顆粒劑4g，加40%甲醇20mL，加熱回流30min，放冷，濾過，取濾液IOmL濃縮至2mL，作為供試品溶液；另取銀杏葉對照藥材lg，同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液10 μ L及對照藥材溶液6 μ L分別點于同一含4%醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水=5 3 1 :1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以3%三氯化鋁乙醇溶液，熱風(fēng)吹干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點；(2)甘草的薄層色譜鑒別取本顆粒劑4g，加乙醚40mL，加熱回流I h，濾過，藥渣加甲醇30mL，加熱回流lh，濾過，濾液蒸干，殘渣加水40mL使溶解，用正丁醇提取3次，每次20mL，合并正丁醇液，用水洗滌3次，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇5mL使溶解，作為供試品溶液；另取甘草對照藥材lg，同法制成對照藥材溶液；再取甘草酸銨對照品，力口甲醇制成每ImL含2mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液8 μ L，另吸取上述對照品溶液、對照藥材溶液各I 2 μ L，分別點于同一用1%氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水=15:1 I 2為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點顯色清晰，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的橙黃色熒光斑點；(3)大黃的薄層色譜鑒別取本顆粒劑4g，加甲醇20mL，浸泡lh，濾過，取濾液5mL，蒸干，殘渣加水IOmL使溶解，再加鹽酸lmL，加熱回流30min，立即冷卻，用乙醚分2次萃取，每次20mL，合并乙醚液，蒸干，殘渣加三氯甲烷ImL使溶解，作為供試品溶液；另取大黃對照藥材O. Ig,同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液、對照藥材溶液各4μ L，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠H薄層板上，以30 60°C石油醚-甲酸乙酯-甲酸=15 5 1的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的五個橙黃色突光主斑點；(4)五味子的薄層色譜鑒別取本顆粒劑3g，加三氯甲烷20mL，加熱回流30min，濾過，濾液蒸干，殘渣加三氯甲烷ImL使溶解，作為供試品溶液；另取五味子對照藥材lg，同法制成對照藥材溶液；再取五味子甲素對照品，加三氯甲烷制成每ImL含Img的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取五味子對照藥材溶液、五味子甲素對照品溶液各2 μ L和供試品溶液6 μ L分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以30 60°C石油醚-甲酸乙酯-甲酸=15 5 :1的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。大黃中總游離蒽醌類成分的含量測定方法是以蘆薈大黃素對照品、大黃酸對照品、大黃素對照品和大黃酚對照品為對照，以乙腈0. 1%磷酸=58%-85% 42%-15%為流動相的高效液相色譜法；五味子中五味子醇甲的含量測定方 法是以五味子醇甲對照品為對照，以乙腈水=45% 55%為流動相的高效液相色譜法。具體含量測定方法為(I)總游離蒽醌類成分含量測定參照2010版《中國藥典》一部附錄VI D高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，DiamonsilC18 (250mmX4. 6mm, 5 μ m);以乙腈0. 1% 磷酸=58%_85% 42%-15% 為流動相；流速 I. OmL · HiirT1 ;檢測波長為254 nm ;柱溫為25°C ;理論塔板數(shù)以大黃酚峰計算不低于6000 ；對照品溶液的制備分別精密稱取蘆薈大黃素對照品、大黃酸對照品、大黃素對照品和大黃酚對照品，加甲醇制成每ImL各含O. 0145mg、0. 0277mg、0. 0283mg、0. 0655mg的對照品溶液；供試品溶液的制備取裝量差異項下的本顆粒劑O. 6g，精密稱定，置50mL圓底燒瓶中，加8%鹽酸溶液10mL，超聲處理5min，再加三氯甲烷10mL，加熱回流I h，放冷，置分液漏斗中，用少量三氯甲烷洗滌容器，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷層，酸水層再用三氯甲烷萃取4次，每次10mL，合并三氯甲烷液，減壓回收溶劑至干，殘余物加甲醇使溶解，轉(zhuǎn)移至IOmL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；測定法分別精密吸取對照品溶液5 μ L與供試品溶液10 μ L，注入高效液相色譜儀，測定，即得；本顆粒劑每袋含大黃以包括蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚的總游離蒽醌類成分計，不得低于4. 9mg ；(2)五味子醇甲含量測定參照2010版《中國藥典》一部附錄VI D高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，DiamonsilC18 (250mmX4. 6mm，5 μ m);乙腈:水=45% :55% 為流動相；流速為 I. O mL .mirT1 ;柱溫 25°C;檢測波長為250 nm ;理論塔板數(shù)以五味子醇甲峰計算不低于2000 ；對照品溶液的制備精密稱取五味子醇甲對照品，加甲醇制成每ImL含五味子醇甲7. 8 μ g的對照品溶液；供試品溶液的制備取裝量差異項下的本顆粒劑O. 6g，精密稱定，置25mL容量瓶中，加甲醇20mL，在功率250W、頻率20HZ條件下超聲處理45min后取出，加甲醇至刻度，搖勻，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；測定法分別精密吸取對照品溶液10 μ L與供試品溶液10 μ L，注入高效液相色譜儀，測定，即得；本顆粒劑每袋含五味子以五味子醇甲計，不得低于I. 56mg。本發(fā)明所述的檢測方法包括性狀本制劑為掠揭色顆粒，氣方香，味微甜略帶Ife ;鑒別(1)銀杏葉的薄層色譜鑒別取本顆粒劑4g，加40%甲醇20mL，加熱回流30min,放冷，濾過，取濾液IOmL濃縮至2mL，作為供試品溶液；另取銀杏葉對照藥材lg，同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液10 μ L及對照藥材溶液6 μ L，分別點于同一含4%醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水=5 :3 :1 :1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以3%三氯化鋁乙醇溶液，熱風(fēng)吹干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點；(2)甘草的薄層色譜鑒別取本顆粒劑4g，加乙醚40mL，加熱回流I h，濾過，藥渣加甲醇30mL，加熱回流lh，濾過，濾液蒸干，殘渣加水40mL使溶解，用正丁醇提取3次，每次20mL，合并正丁醇液，用水洗滌3次，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇5mL使溶解，作為供試品溶液；另取甘草對照藥材lg，同法制成對照藥材溶液；再取甘草酸銨對照品，力口甲醇制成每ImL含2mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液8 μ L，另吸取上述對照品溶液、對照藥材溶液各I 2 μ L，分別點于同一用1%氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水=15:1 I 2為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點顯色清晰，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的橙黃色熒光斑點；(3)大黃的薄層色譜鑒別取本顆粒劑4g，加甲醇20mL，浸泡lh，濾過，取濾液5mL，蒸干，殘渣加水IOmL使溶解，再加鹽酸lmL，加熱回流30min，立即冷卻，用乙醚分2次萃取，每次20mL，合并乙醚液，蒸干，殘渣加三氯甲烷ImL使溶解，作為供試品溶液；另取大黃對照藥材O. Ig,同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液、對照藥材溶液各4μ L，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠H薄層板上，以30 60°C石油醚-甲酸乙酯-甲酸=15 5 1的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的五個橙黃色突光主斑點；(4)五味子的薄層色譜鑒別取本顆粒劑3g，加三氯甲烷20mL，加熱回流30min，濾過，濾液蒸干，殘渣加三氯甲烷ImL使溶解，作為供試品溶液；另取五味子對照藥材lg，同法制成對照藥材溶液；再取五味子甲素對照品，加三氯甲烷制成每ImL含Img的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取五味子對照藥材溶液、五味子甲素對照品溶液各2 μ L和供試品溶液6 μ L分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以30 60°C石油醚-甲酸乙酯-甲酸=15 5 :1的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑
占. 檢查應(yīng)符合《中國藥典》2010年版一部附錄I C顆粒劑項下有關(guān)的各項規(guī)定；含量測定(I)總游離蒽醌類成分含量測定參照2010版《中國藥典》一部附錄VID高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈0. 1%磷酸=58%-85% 42%-15%為流動相；流速I. O mL · min—1 ;檢測波長為254 nm ;柱溫為25°C ；理論塔板數(shù)以大黃酚峰計算不低于6000 ；對照品溶液的制備分別精密稱取蘆薈大黃素對照品、大黃酸對照品、大黃素對照品和大黃酚對照品對照品，加甲醇制成每ImL各含O. 0145mg、O. 0277mg、O. 0283mg、
O.0655mg的對照品溶液；供試品溶液的制備取裝量差異項下的本顆粒劑O. 6g，精密稱定，置50mL圓底燒瓶中，加8%鹽酸溶液10mL，超聲處理5min，再加三氯甲烷10mL，加熱回流I h，放冷，置分液漏斗中，用少量三氯甲烷洗滌容器，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷層，酸水層再用三氯甲烷萃取4次，每次10mL，合并三氯甲烷液，減壓回收溶劑至干，殘余物加甲醇使溶解，轉(zhuǎn)移至 IOmL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；測定法分別精密吸取對照品溶液5 μ L與供試品溶液10 μ L，注入高效液相色譜儀，測定，即得；本顆粒劑每袋含大黃以包括蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚的總游離蒽醌類成分計，不得低于4. 9mg ；(2)五味子醇甲含量測定參照2010版《中國藥典》一部附錄VI D高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，Diamonsil C18(250mmX 4. 6mm, 5 μ m);乙腈水=45% :55% 為流動相；流速為 I. O mL · mirT1 ;柱溫 25°C ;檢測波長為250 nm ;理論塔板數(shù)以五味子醇甲峰計算不低于2000 ；對照品溶液的制備精密稱取五味子醇甲對照品，加甲醇制成每ImL含五味子醇甲7. 8 μ g的對照品溶液；供試品溶液的制備取裝量差異項下的本顆粒劑O. 6g，精密稱定，置25mL容量瓶中，加甲醇20mL，在功率250W、頻率20HZ條件下超聲處理45min后取出，加甲醇至刻度，搖勻，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；測定法分別精密吸取對照品溶液10 μ L與供試品溶液10 μ L，注入高效液相色譜儀，測定，即得；本顆粒劑每袋含五味子以五味子醇甲計，不得低于I. 56mg。白花益肝排毒方由銀杏葉、五味子、熟大黃、甘草等11味藥組成，具有清熱解毒，滋陰潛陽，軟堅散結(jié)，益氣生津功用，該處方在經(jīng)驗方基礎(chǔ)上，以辨病與辨證相結(jié)合，通過補(bǔ)益肝體、軟堅散結(jié)、調(diào)暢肝用、防止傳變、利膽退黃等多個環(huán)節(jié)，用于治療濕熱蘊(yùn)久成毒，結(jié)于肝膽的各種肝炎，如病毒性肝炎、慢性乙肝、丙型肝炎、黃疸型肝炎等，療效顯著。白花益肝排毒方由11味藥材組成，藥物組成較多，化學(xué)成分較復(fù)雜。大量文獻(xiàn)表明，處方中的熟大黃含有的游離羥基蒽醌類物質(zhì)、五味子中含有的大量聯(lián)苯環(huán)辛烯型木質(zhì)素成分(五味子素、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯乙等)、澤瀉中有效成分等都是對抗病毒性肝炎的主要活性物質(zhì)，用水煎時提取率低，故通過查閱文獻(xiàn)綜合考慮采用醇提。根據(jù)該處方在臨床使用的情況，查閱文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)該方其余8味藥材所含的有效成分均具有較好的水溶性，宜采用水提。
發(fā)明人根據(jù)11味藥材的化學(xué)成分與臨床療效結(jié)合，設(shè)計了 4種不同的提取方案。方案一將11味藥材組合用蒸餾水煎煮三次，第一次按總量加6倍量純凈水浸泡30min，加熱煮沸2h，得煎煮液備用；第二次加4倍量純凈水，加熱煮沸I. 5h得煎煮液備用；第三次加2倍量純凈水，加熱煮沸45min得煎煮液備用；合并三次煎煮液，靜置4_6h，過200目篩，溶液加熱蒸發(fā)濃縮至稠膏狀，60°C減壓干燥，得干膏，粉碎，即得。方案二 將熟大黃、五味子、澤瀉三味藥采用乙醇回流法，第一次按總量加9倍量70%乙醇浸泡30min，回流提取I. 5h，得醇提液備用；第二次加7倍量70%乙醇，回流提取Ih得醇提液備用；第三次加5倍量70%乙醇，回流提取O. 5h得醇提液備用；合并三次醇提液，濃縮，干燥，粉碎得粉末。其余8味藥材與醇提藥渣混合，按“方案一”加水煎煮，60°C減壓干燥，得干膏，粉碎，與醇提粉末混合，即得。方案三熟大黃、五味子、澤瀉三味藥采用乙醇回流法，方法同“方案二”，合并三次醇提液，濃縮，干燥，粉碎得粉末。其余8味藥材與醇提藥渣混合，按“方案一”水提，合并三 次煎煮液，濃縮至一定密度，加6倍量80%乙醇，靜置24h，過200目篩，溶液加熱蒸發(fā)至稠膏狀，60°C減壓干燥，得干膏，粉碎，與醇提粉末混合，即得。方案四11味藥材組合用蒸餾水煎煮三次，第一次按總量加9倍量純凈水浸泡30min，加熱煮沸2h，得煎煮液備用；第二次加7倍量純凈水，加熱煮沸I. 5h得煎煮液備用；第三次加5倍量純凈水，加熱煮沸45min得煎煮液備用；合并三次煎煮液，濃縮至一定密度，加6倍量80%乙醇，靜置24h，用200目篩過濾，溶液加熱蒸發(fā)至稠膏狀，60°C減壓干燥，得干膏，粉碎，即得。通過將四種不同的提取方案提取的白花益肝排毒復(fù)方對CCl4所致的急性肝損傷小鼠血清AST、ALT的影響與正常對照組比較，優(yōu)選最佳提取工藝。實驗結(jié)果表明4個不同提取方案的白花益肝排毒復(fù)方對抑制AST及ALT升高(P〈0. 05)的程度不同(方案二 >方案三 > 方案一 > 方案四)。比較了處方醇沉前后對O. 5%CCL4致小鼠急性肝損傷血清ALT、AST含量的影響，方案四該處方11味藥經(jīng)過水提醇沉的復(fù)方基本沒有抑制AST、ALT的作用，而方案三3味藥材醇提，藥渣與其他8味藥材水提后醇沉復(fù)方對小鼠急性肝損傷血清ALT、AST的影響，雖能看出高劑量有顯著的抑制作用，但低劑量卻沒有降低的趨向。據(jù)文獻(xiàn)報道該處方11味藥材中具有保肝、抗免疫作用的多糖等有效成分在醇沉的過程中被去除，從而造成該復(fù)方的療效受影響，也再一次證明水提醇沉法并不是中藥最理想的提取分離方法。而本實驗根據(jù)該處方藥材的化學(xué)成分并結(jié)合臨床療效的方案二對O. 5%CCL4致小鼠急性肝損傷血清的ALT、AST含量表現(xiàn)出極為顯著的影響。因此，結(jié)合上述藥理實驗研究，篩選出最佳提取方案為熟大黃、五味子、澤瀉三味藥材醇提，藥渣與其余8味藥材合并水提，濃縮，干燥，粉碎得干膏粉，加入輔料制粒，干燥，整粒，即得白花益肝排毒顆粒。另外，為了確保本發(fā)明檢測方法科學(xué)、合理、可行，申請人進(jìn)行了一系列試驗研究和考察。(一)鑒別I、儀器與試藥儀器采用超聲波清洗器(寧波新芝生物科技股份)、電熱鼓風(fēng)干燥箱(上海精宏實驗設(shè)備有限公司DHG9070A)和ZF三用紫外分析儀；試劑均為分析純，薄層層析用硅膠為化學(xué)純。2、鑒別方法與結(jié)果(I)大黃的薄層色譜鑒別方法本試驗基本參照《中國藥典》2010版一部中大黃的薄層色譜鑒別方法，取三批樣品顆粒(批號20111201、20111202、20111203)各4g，缺大黃的粉末約2g，各加甲醇20mL，浸泡Ih,濾過,取濾液5mL,蒸干,殘洛加水IOmL使溶解,再加鹽酸ImL,加熱回流30min,立即冷卻，用乙醚分2次萃取，每次20mL，合并乙醚液，蒸干，殘渣加三氯甲烷ImL使溶解，作為3份供試品溶液和I份陰性溶液；另取大黃對照藥材O. Ig,同法制成I份對照藥材溶液；照《中國藥典》一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液、陰性溶液、對照藥材溶液 各4μ L,分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的娃膠H薄層板上，以30 60°C石油醚-甲酸乙酯-甲酸=15 5 :1的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的五個橙黃色熒光主斑點；在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的橙黃色熒光斑點。經(jīng)多次試驗，方法靈敏，重復(fù)性好，方便可行，陰性液無干擾，結(jié)果見

圖1，其中，I :大黃對照藥材，2 :批號為20111201的供試品溶液，3 :批號為20111202的供試品溶液，4 :批號為20111203的供試品溶液，5 :缺大黃陰性溶液。故將其列入本發(fā)明檢測項目。(2)五味子的薄層色譜鑒別方法本試驗基本參照《中國藥典》2010版一部中五味子的薄層色譜鑒別方法，取三批樣品(批號20111201、20111202、20111203)顆粒各3g，缺五味子的陰性粉末約2g，各加三氯甲烷20mL，加熱回流30min，濾過，濾液蒸干，殘渣加三氯甲烷ImL使溶解，作為3份供試品溶液和I份陰性溶液；另取五味子對照藥材lg，同法制成對照藥材溶液；再取五味子甲素對照品，加三氯甲烷制成每ImL含Img的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取五味子對照藥材溶液、五味子甲素對照品溶液各2 μ L和供試品溶液、陰性溶液各6 μ L分別點于同一娃膠GF254薄層板上，以30 60°C石油醚-甲酸乙酯-甲酸=15 5 1的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。經(jīng)多次試驗，方法靈敏，重復(fù)性好，方便可行，陰性液無干擾，結(jié)果見圖2，其中，I :五味子甲素對照品溶液，2 :五味子對照藥材溶液，3 :批號為20111201的供試品溶液，4 :批號為20111202的供試品溶液，5 批號為20111203的供試品溶液，6 :缺五味子陰性溶液。故將其列入本發(fā)明檢測項目。(3)甘草的薄層色譜鑒別方法本試驗基本參照《中國藥典》2010版一部中甘草的薄層色譜鑒別方法，取三批樣品(批號20111201,20111202,20111203)顆粒各4g，缺甘草的粉末約2g，各加乙醚40mL，加熱回流I h，濾過，藥渣加甲醇30mL，加熱回流lh，濾過，濾液蒸干，殘渣加水40mL使溶解，用正丁醇提取3次，每次20mL，合并正丁醇液，用水洗滌3次，棄去水液，正丁醇蒸干，殘渣加甲醇5mL使溶解，作為3份供試品溶液和I份陰性溶液；另取甘草對照藥材lg，同法制成對照藥材溶液；再取甘草酸銨對照品，加甲醇制成每ImL含2mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液、陰性溶液各8 μ L，另吸取上述對照品溶液、對照藥材溶液各I 2 μ L，分別點于同一用1%氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水=15 1 1 :2為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點顯色清晰，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的橙黃色熒光斑點，陰性無干擾。經(jīng)多次試驗，方法靈敏，重復(fù)性好，方便可行，陰性液無干擾，結(jié)果見圖3，其中，I :甘草酸銨對照品溶液，2 :甘草對照藥材溶液，3 :批號為20111201的供試品溶液，4 :批號為20111202的供試品溶液，5 :批號為20111203的供試品溶液，6 :缺甘草陰性溶液。故將其列入本發(fā)明檢測項目。(4)銀杏葉的 薄層色譜鑒別方法本試驗基本參照《中國藥典》2010版一部中銀杏葉的薄層色譜鑒別方法，取三批樣品(批號20111201,20111202,20111203)顆粒4g，缺銀杏葉的粉末約2g，各加40%甲醇20mL,加熱回流30min，放冷，濾過，取濾液IOmL濃縮至2mL，作為3份供試品溶液和I份陰性溶液；另取銀杏葉對照藥材lg，同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液、陰性溶液各10 μ L及對照藥材溶液6 μ L，分別點于同一含4%醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水=5 3 1 1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以3%三氯化鋁乙醇溶液，熱風(fēng)吹干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點，陰性無干擾。經(jīng)多次試驗，方法靈敏，重復(fù)性好，方便可行，陰性液無干擾，結(jié)果見圖4，其中，I :銀杏葉對照藥材溶液，2 :批號為20111201的供試品溶液，3 :批號為20111202的供試品溶液，4 :批號為20111203的供試品溶液，5 :缺銀杏葉陰性溶液。故將其列入本發(fā)明檢測項目。(二)檢查I、粒度檢查粒度測定法參照《中國藥典》2010年版一部附錄XI B第二法測定。取本品顆粒劑5袋，稱定重量，置規(guī)定的藥篩內(nèi)過篩，保持水平狀態(tài)，左右往返輕輕篩動3min。取不能通過一號篩與能通過五號篩的總和稱定重量，計算所占百分比。經(jīng)檢測三批樣品均少于15%，符合規(guī)定，結(jié)果見表I。表I三批樣品粒度檢查
批號__
201112014.3%
20IU2024.7%
201112034.8%2、裝量差異檢查取本品顆粒劑10袋，分別稱定每袋內(nèi)容物的重量，每袋裝量與標(biāo)示量相比較，不得超出標(biāo)示量的±10%，經(jīng)測定三批樣品均符合規(guī)定，結(jié)果見表2。表2三批樣品裝量差異檢查
權(quán)利要求
1.一種白花益肝排毒顆粒，其特征在于它是以白花蛇舌草5 25kg、靈芝f 15kg、黃精I(xiàn) 10kg、黃芪2 15kg、澤瀉I 10kg、熟大黃I 10kg、肉蓯蓉I 5kg、鱉甲2 15kg、五味子f 10kg、銀杏葉f IOkg和甘草f 6kg為原料藥，提取后加入適量可溶性淀粉和阿斯巴甜，并以80%乙醇為潤濕劑制成的。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的白花益肝排毒顆粒，其特征在于它是以白花蛇舌草20kg、靈芝10kg、黃精8kg、黃苗10kg、澤灣8kg、熟大黃8kg、肉灰蓉4kg、鳘甲10kg、五味子8kg、銀杏葉8kg和甘草6kg為原料藥，提取后加入適量可溶性淀粉和阿斯巴甜，并以80%乙醇為潤濕劑制成的。
3.如權(quán)利要求1-2中任一項所述的白花益肝排毒顆粒的制備方法，其特征在于將熟大黃、五味子、澤瀉藥材加6倍量70%乙醇提取3次，每次2h，過濾，醇提液70°C減壓濃縮至密度I. 2，稠浸膏于80°C真空減壓干燥36h，得干膏，粉碎過篩，得醇提粉末；其余8味原料藥與醇提藥渣混合加6倍量水浸泡0. 5h，再加6倍量水先煎0. 5h，共計加水12倍量，煎煮三次，煎煮時間分別為3h、3h和lh，85°C減壓濃縮至密度1.2，801減壓干燥481!，得干膏，粉碎過篩，得水提粉末；將醇提粉末和水提粉末混合，按I : I的重量比例加入輔料可溶性淀粉和0. 2%阿斯巴甜做甜味劑，以80%乙醇做潤濕劑，濕法制粒，顆粒75°C干燥4-6h，整粒，過篩，包裝，即得。
4.如權(quán)利要求I或2所述的白花益肝排毒顆粒的檢測方法，其特征在于所述的檢測方法包括性狀、鑒別、檢查和含量測定項目；其中鑒別是對制劑中的銀杏葉、甘草、大黃、五味子的薄層色譜鑒別；含量測定是用高效液相色譜法分別測定制劑中大黃所含總游離蒽醌類成分和五味子所含五味子醇甲的含量。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的白花益肝排毒顆粒的檢測方法，其特征在于銀杏葉的鑒別方法是以銀杏葉對照藥材為對照，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水=5 :3 :1 :1為展開劑的薄層色譜法；甘草的鑒別方法是以甘草對照藥材和甘草酸銨對照品為對照，以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水=15 1 1 2為展開劑的薄層色譜法；大黃的鑒別方法是以大黃對照藥材為對照，以30 60°C石油醚-甲酸乙酯-甲酸=15 5 1的上層溶液為展開劑的薄層色譜法；五味子的鑒別方法是以五味子對照藥材和五味子甲素對照品為對照，以30 60°C石油醚-甲酸乙酯-甲酸=15 5 1的上層溶液為展開劑的薄層色譜法。
6.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的白花益肝排毒顆粒的檢測方法，其特征在于具體鑒別方法為 (1)銀杏葉的薄層色譜鑒別取本顆粒劑4g，加40%甲醇20mL，加熱回流30min，放冷，濾過，取濾液IOmL濃縮至2mL，作為供試品溶液；另取銀杏葉對照藥材lg，同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液10 及對照藥材溶液6 y L，分別點于同一含4%醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水=5 3 1 :1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以3%三氯化鋁乙醇溶液，熱風(fēng)吹干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點； (2)甘草的薄層色譜鑒別取本顆粒劑4g，加乙醚40mL，加熱回流Ih，濾過，藥渣加甲醇30mL，加熱回流lh，濾過，濾液蒸干，殘渣加水40mL使溶解，用正丁醇提取3次，每次20mL,合并正丁醇液，用水洗滌3次，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇5mL使溶解，作為供試品溶液；另取甘草對照藥材lg，同法制成對照藥材溶液；再取甘草酸銨對照品，加甲醇制成每ImL含2mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液8 u L，另吸取上述對照品溶液、對照藥材溶液各I 2 ii L，分別點于同一用.1%氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水=15 :1 :1 :2為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點顯色清晰，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的橙黃色熒光斑點； (3)大黃的薄層色譜鑒別取本顆粒劑4g，加甲醇20mL，浸泡lh，濾過，取濾液5mL，蒸干，殘渣加水IOmL使溶解，再加鹽酸lmL，加熱回流30min，立即冷卻，用乙醚分2次萃取，每次20mL，合并乙醚液，蒸干，殘渣加三氯甲烷ImL使溶解，作為供試品溶液；另取大黃對照藥材0. lg，同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液、對照藥材溶液各4yL，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠H薄層板上，以30 60°C石油醚-甲酸乙酯-甲酸=15 5 1的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的五個橙黃色熒光主斑點； (4)五味子的薄層色譜鑒別取本顆粒劑3g，加三氯甲烷20mL，加熱回流30min，濾過，濾液蒸干，殘渣加三氯甲烷ImL使溶解，作為供試品溶液；另取五味子對照藥材lg，同法制成對照藥材溶液；再取五味子甲素對照品，加三氯甲烷制成每ImL含Img的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取五味子對照藥材溶液、五味子甲素對照品溶液各2 u L和供試品溶液6 u L分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以30 60°C石油醚-甲酸乙酯-甲酸=15 :5:1的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的白花益肝排毒顆粒的檢測方法，其特征在于大黃中總游離蒽醌類成分的含量測定方法是以蘆薈大黃素對照品、大黃酸對照品、大黃素對照品和大黃酚對照品為對照，以乙腈0. 1%磷酸=58%-85% 42%-15%為流動相的高效液相色譜法；五味子中五味子醇甲的含量測定方法是以五味子醇甲對照品為對照，以乙腈水=45% 55%為流動相的高效液相色譜法。
8.根據(jù)權(quán)利要求4或7所述的白花益肝排毒顆粒的檢測方法，其特征在于具體含量測定方法為 (I)總游離蒽醌類成分含量測定參照2010版《中國藥典》一部附錄VI D高效液相色譜法測定 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈0. 1%磷酸=58%-85% 42%-15%為流動相；流速1.0 mL min—1 ;檢測波長為254 nm ;柱溫為25 °C ;理論塔板數(shù)以大黃酚峰計算不低于6000 ； 對照品溶液的制備分別精密稱取蘆薈大黃素對照品、大黃酸對照品、大黃素對照品和大黃酹對照品，加甲醇制成每ImL各含0. 0145mg、0. 0277mg、0. 0283mg、0. 0655mg的對照品溶液； 供試品溶液的制備取裝量差異項下的本顆粒劑0. 6g，精密稱定，置50mL圓底燒瓶中，加8%鹽酸溶液10mL，超聲處理5min，再加三氯甲烷10mL，加熱回流I h，放冷，置分液漏斗中，用少量三氯甲烷洗滌容器，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷層，酸水層再用三氯甲烷萃取4次，每次IOmL,合并三氯甲烷液，減壓回收溶劑至干，殘余物加甲醇使溶解，轉(zhuǎn)移至IOmL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液； 測定法分別精密吸取對照品溶液5 u L與供試品溶液10 u L，注入高效液相色譜儀，測定，即得； 本顆粒劑每袋含大黃以包括蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚的總游離蒽醌類成分計，不得低于4. 9mg ； (2)五味子醇甲含量測定參照2010版《中國藥典》一部附錄VI D高效液相色譜法測定 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈水=45% 55% 為流動相；流速為I. 0 mL HiirT1 ;柱溫25°C ;檢測波長為250 nm ;理論塔板數(shù)以五味子醇 甲峰計算不低于2000 ； 對照品溶液的制備精密稱取五味子醇甲對照品，加甲醇制成每ImL含五味子醇甲.7.8ug的對照品溶液； 供試品溶液的制備取裝量差異項下的本顆粒劑0. 6g，精密稱定，置25mL容量瓶中，力口甲醇20mL，超聲處理45min后取出，加甲醇至刻度，搖勻，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；測定法分別精密吸取對照品溶液10 y L與供試品溶液10 u L，注入高效液相色譜儀，測定，即得； 本顆粒劑每袋含五味子以五味子醇甲計，不得低于I. 56mg。
9.根據(jù)權(quán)利要求4、5或7所述的白花益肝排毒顆粒的檢測方法，其特征在于所述的檢測方法包括 性狀本制劑為棕褐色顆粒，氣芳香，味微甜略帶酸； 鑒別(I)銀杏葉的薄層色譜鑒別取本顆粒劑4g，加40%甲醇20mL，加熱回流30min，放冷，濾過，取濾液IOmL濃縮至2mL，作為供試品溶液；另取銀杏葉對照藥材lg，同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液10 y L及對照藥材溶液6 y L，分別點于同一含4%醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水=5 :3 :1 :1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以3%三氯化鋁乙醇溶液，熱風(fēng)吹干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點； (2)甘草的薄層色譜鑒別取本顆粒劑4g，加乙醚40mL，加熱回流I h，濾過，藥渣加甲醇30mL，加熱回流lh，濾過，濾液蒸干，殘渣加水40mL使溶解，用正丁醇提取3次，每次20mL,合并正丁醇液，用水洗滌3次，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇5mL使溶解，作為供試品溶液；另取甘草對照藥材lg，同法制成對照藥材溶液；再取甘草酸銨對照品，加甲醇制成每ImL含2mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液8 u L，另吸取上述對照品溶液、對照藥材溶液各I 2 ii L，分別點于同一用1%氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水=15 :1 :1 :2為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點顯色清晰，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的橙黃色熒光斑點；(3)大黃的薄層色譜鑒別取本顆粒劑4g，加甲醇20mL，浸泡lh，濾過，取濾液5mL，蒸干，殘渣加水IOmL使溶解，再加鹽酸lmL，加熱回流30min，立即冷卻，用乙醚分2次萃取，每次20mL，合 并乙醚液，蒸干，殘渣加三氯甲烷ImL使溶解，作為供試品溶液；另取大黃對照藥材0. Ig,同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液、對照藥材溶液各4yL，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠H薄層板上，以30 60°C石油醚-甲酸乙酯-甲酸=15 5 1的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的五個橙黃色熒光主斑點； (4)五味子的薄層色譜鑒別取本顆粒劑3g，加三氯甲烷20mL，加熱回流30min，濾過，濾液蒸干，殘渣加三氯甲烷ImL使溶解，作為供試品溶液；另取五味子對照藥材lg，同法制成對照藥材溶液；再取五味子甲素對照品，加三氯甲烷制成每ImL含Img的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取五味子對照藥材溶液、五味子甲素對照品溶液各2 u L和供試品溶液6 u L分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以30 60°C石油醚-甲酸乙酯-甲酸=15 :5:1的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點； 檢查應(yīng)符合《中國藥典》2010年版一部附錄I C顆粒劑項下有關(guān)的各項規(guī)定； 含量測定(I)總游離蒽醌類成分含量測定參照2010版《中國藥典》一部附錄VI D高效液相色譜法測定 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈0. 1%磷酸=58%-85% 42%-15%為流動相；流速1.0 mL min—1 ;檢測波長為254 nm ;柱溫為25 °C ;理論塔板數(shù)以大黃酚峰計算不低于6000 ； 對照品溶液的制備分別精密稱取蘆薈大黃素對照品、大黃酸對照品、大黃素對照品和大黃酹對照品，加甲醇制成每ImL各含0. 0145mg、0. 0277mg、0. 0283mg、0. 0655mg的對照品溶液； 供試品溶液的制備取裝量差異項下的本顆粒劑0. 6g，精密稱定，置50mL圓底燒瓶中，加8%鹽酸溶液10mL，超聲處理5min，再加三氯甲烷10mL，加熱回流I h，放冷，置分液漏斗中，用少量三氯甲烷洗滌容器，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷層，酸水層再用三氯甲烷萃取4次，每次10mL，合并三氯甲烷液，減壓回收溶劑至干，殘余物加甲醇使溶解，轉(zhuǎn)移至IOmL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液； 測定法分別精密吸取對照品溶液5 u L與供試品溶液10 u L，注入高效液相色譜儀，測定，即得； 本顆粒劑每袋含大黃以包括蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚的總游離蒽醌類成分計，不得低于4. 9mg ； (2)五味子醇甲含量測定參照2010版《中國藥典》一部附錄VI D高效液相色譜法測定 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈水=45% 55%為流動相；流速為I. 0 mL HiirT1 ;柱溫25°C ;檢測波長為250 nm ;理論塔板數(shù)以五味子醇甲峰計算不低于2000 ； 對照品溶液的制備精密稱取五味子醇甲對照品，加甲醇制成每ImL含五味子醇甲.7.8ug的對照品溶液； 供試品溶液的制備取裝量差異項下的本顆粒劑0. 6g，精密稱定，置25mL容量瓶中，力口甲醇20mL，超聲處理45min后取出，加甲醇至刻度，搖勻，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；測定法分別精密吸取對照品溶液10 y L與供試品溶液10 u L，注入高效液相色譜儀，測定，即得； 本顆粒劑每袋含五味子以五味子醇甲計，不得低于I. 56mg。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種白花益肝排毒顆粒及其制備方法和檢測方法，所述白花益肝排毒顆粒是以白花蛇舌草5~25kg、靈芝2~15kg、黃精1~10kg、黃芪2~15kg、澤瀉1~10kg、熟大黃1~10kg、肉蓯蓉1~5kg、鱉甲2~15kg、五味子1~10kg、銀杏葉1~10kg和甘草1~6kg為原料藥，提取后加入適量可溶性淀粉和阿斯巴甜，并以80%乙醇為潤濕劑制成的。本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，對白花益肝排毒顆粒的制備工藝進(jìn)行了優(yōu)化，使其對病毒性肝炎的療效更為顯著，并建立了系統(tǒng)的、完整的、有效的成分鑒別和含量測定方法，可有效控制該藥品的質(zhì)量，從而確保其臨床療效。
文檔編號G01N30/02GK102698083SQ20121022807
公開日2012年10月3日 申請日期2012年7月4日 優(yōu)先權(quán)日2012年7月4日
發(fā)明者張欣, 王祥培, 靳鳳云 申請人:貴陽中醫(yī)學(xué)院