專(zhuān)利名稱(chēng)：一種鱗莖繁殖類(lèi)植物根系分泌物的收集方法及裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于植物培育技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種植物根系分泌物的收集方法及裝置，具體涉及一種鱗莖繁殖類(lèi)植物根系分泌物的收集方法及裝置。
背景技術(shù)：
目前根系分泌物的收集方法多種多樣，與其對(duì)應(yīng)的收集裝置也是不計(jì)其數(shù)，但對(duì)于根系分泌物的收集方法并沒(méi)有進(jìn)行系統(tǒng)劃分。主要包括溶液培收集法、水浸提培養(yǎng)基質(zhì)(蛭石培、砂培、瓊脂培、土培等)收集法、分根裝置收集法、自動(dòng)連續(xù)裝置收集法、多孔陶頭塑料管減壓原位收集法、層析濾紙或纖維素膜定位收集法、土壤溶液取樣器收集法、同位素標(biāo)記結(jié)合土壤溶液取樣器收集法及其一些衍生的方法等。這些方法各具優(yōu)缺點(diǎn)，因而采取何種收集方式很大程度上取決于研究對(duì)象及用途。鱗莖，某些種子植物，尤其是多年生單子葉植物的處于休眠階段的變態(tài)莖。鱗莖主要有兩種類(lèi)型，一種類(lèi)型以洋蔥為代表，肉質(zhì)葉外覆以紙樣的薄膜以資保護(hù)；另一種類(lèi)型見(jiàn)于典型的百合科(Liliaceae)植物，貯藏葉裸露，無(wú)紙樣薄膜覆蓋，外觀似由許多有稜角的鱗片構(gòu)成。鱗莖為地下變態(tài)莖的一種。變態(tài)莖非常短縮，呈盤(pán)狀，其上著生肥厚多肉的鱗葉，內(nèi)貯藏極為豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和水分。有幾種具鱗莖的植物因其肉質(zhì)葉味佳或營(yíng)養(yǎng)豐富，對(duì)人類(lèi)有重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值，例如洋蔥及與其有親緣關(guān)系的青蔥、蒜、韭蔥等。另外，蔥蒜類(lèi)植物的根系能分泌一種修養(yǎng)菌素，對(duì)多種細(xì)菌、真菌等具有較強(qiáng)的抑制作用，對(duì)后茬作物比較好，常用于間作或套種。因此，對(duì)其根系分泌物的研究也越來(lái)越得到重視，由此產(chǎn)生一種針對(duì)此類(lèi)植物的特定根系分泌物收集方法及裝置是至關(guān)重要的。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服上述技術(shù)缺陷，提供一種鱗莖繁殖類(lèi)植物根系分泌物的收集方法及裝置。該方法簡(jiǎn)單易行，該裝置收集時(shí)間長(zhǎng)且效率高。其技術(shù)方案為一種鱗莖繁殖類(lèi)植物根系分泌物的收集方法，包括以下步驟I)破除鱗莖休眠選擇長(zhǎng)勢(shì)均勻、無(wú)病蟲(chóng)害的鱗莖，將其放于0_15°C的低溫環(huán)境處理0-30天以打破其生理休眠；2)鱗莖根系預(yù)培養(yǎng)將鱗莖首先用0. 2% -I. 0%高錳酸鉀溶液浸泡20-40分鐘，然后種植在滅過(guò)菌的基質(zhì)(珍珠巖)中，待鱗莖根系生長(zhǎng)到3-8厘米，取出，清洗，轉(zhuǎn)移到鱗莖類(lèi)植物根系分泌物收集和粗分離裝置；3)根系分泌物收集 將已生根的鱗莖放置在裝有蒸餾水的水培槽中，水培槽中固定有泡沫板，泡沫板固定前，鉆上適宜鱗莖大小的孔，將鱗莖鑲嵌到上面，根系浸到蒸餾水中，在室溫下用充氣泵連續(xù)通氣培養(yǎng)，充氣泵的引流管穿過(guò)泡沫板伸到蒸餾水中，定期導(dǎo)出含有根系分泌物的培養(yǎng)液，并向水培槽注入槽底液深3-5厘米蒸餾水；4)根系分泌物粗分離經(jīng)過(guò)濾棉和活性炭實(shí)現(xiàn)根系分泌物的粗過(guò)濾和粗分離，收集吸附根系分泌物的活性炭。步驟3)中培養(yǎng)期間為30-45天。步驟3)中培養(yǎng)期間每5-10天收集一次培養(yǎng)液。一種鱗莖繁殖類(lèi)植物根系分泌物的收集裝置，主要包括鱗莖植株培養(yǎng)、根系分泌物收集和根系分泌物粗分離三部分，所述鱗莖植株培養(yǎng)部分由水培槽I、泡沫板2、進(jìn)液器3和充氣泵4依次連接而成；所述根系分泌物收集部分由引流管5和閥門(mén)6依次連接而成；所述根系分泌物粗分離部分由過(guò)濾器7、分離柱9、廢水槽10依次連接而成。進(jìn)一步優(yōu)選，所述過(guò)濾器7內(nèi)填充過(guò)濾棉。進(jìn)一步,所述分離柱9內(nèi)填充活性炭8。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果為 本發(fā)明的技術(shù)方案針對(duì)性比較強(qiáng)，培養(yǎng)期間不需添加任何營(yíng)養(yǎng)成分，收集周期可長(zhǎng)達(dá)30-45天。通過(guò)活性炭吸附，同時(shí)實(shí)現(xiàn)了根系分泌物的粗分離，通過(guò)特定的有機(jī)溶劑的提取可直接用于后續(xù)的研究，例如根系分泌物的生物測(cè)試、抑菌試驗(yàn)及物質(zhì)鑒定等。


圖I為本發(fā)明鱗莖繁殖類(lèi)植物根系分泌物的收集裝置結(jié)構(gòu)示意圖；圖2為不同濃度大蒜根系分泌物對(duì)辣椒疫霉菌菌絲生長(zhǎng)的抑制效果圖備注T0 對(duì)照 Tl : (0. 02% w/v)25% T2 (0. 04% w/v)50% T3 (0. 06% w/v)75% T4 (0. 08% w/v) 100% ；圖3為不同階段收集的百合根系分泌物化感綜合作用強(qiáng)度對(duì)比效果圖。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合附圖與具體實(shí)施方式
對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步詳細(xì)地說(shuō)明。參照?qǐng)D1，一種鱗莖繁殖類(lèi)植物根系分泌物的收集裝置，主要包括鱗莖植株培養(yǎng)、根系分泌物收集和根系分泌物粗分尚三部分，所述鱗莖植株培養(yǎng)部分由水培槽I、泡沫板
2、進(jìn)液器3和充氣泵4依次連接而成；所述根系分泌物收集部分由引流管5和閥門(mén)6依次連接而成；所述根系分泌物粗分離部分由過(guò)濾器7、分離柱9、廢水槽10依次連接而成。進(jìn)一步優(yōu)選，所述過(guò)濾器7內(nèi)填充過(guò)濾棉。進(jìn)一步,所述分離柱9內(nèi)填充活性炭8。收集培養(yǎng)液時(shí)通過(guò)水培槽右側(cè)的引流管5，打開(kāi)閥門(mén)6，液體便通過(guò)引流管流出。流出液首先經(jīng)過(guò)引流管中的過(guò)濾棉7進(jìn)行粗過(guò)濾，過(guò)濾棉孔徑根據(jù)研究需要可以自行調(diào)整，然后液體流入裝有活性炭8的分離柱9中，活性炭吸附根系分泌物，廢液排到廢水槽10。這樣便收集到了鱗莖根系分泌物的粗分離物。根據(jù)后續(xù)研究需要，采用特定的有機(jī)溶劑提取出特定物質(zhì)。實(shí)施例I大蒜根系分泌物對(duì)萵苣種子發(fā)芽和幼苗生長(zhǎng)的影響采用種子發(fā)芽試驗(yàn)對(duì)兩個(gè)大蒜品種根系分泌物的化感作用進(jìn)行生物測(cè)定。
試驗(yàn)具體步驟為取不同濃度的大蒜根系收集液9mL加入鋪有2層定性濾紙的塑料容器中(直徑為12cm)進(jìn)行種子發(fā)芽試驗(yàn)，每皿播種100粒均勻一致的萵苣種子，以蒸餾水為對(duì)照，各處理3次重復(fù)，在22±l°C、4000Lx光照下培養(yǎng)，每天補(bǔ)充收集液2mL。每天調(diào)查其發(fā)芽數(shù)，最后計(jì)算發(fā)芽率、發(fā)芽指數(shù)，IOd后測(cè)量地上部和根部的長(zhǎng)度，稱(chēng)量幼苗鮮重。鮮重的測(cè)定以10棵苗為一個(gè)重復(fù)，種子發(fā)芽標(biāo)準(zhǔn)為種子長(zhǎng)度的一半。
權(quán)利要求
1.一種鱗莖繁殖類(lèi)植物根系分泌物的收集方法，其特征在于，包括以下步驟 1)破除鱗莖休眠 選擇長(zhǎng)勢(shì)均勻、無(wú)病蟲(chóng)害的鱗莖，將其放于0-15°C的低溫環(huán)境處理0-30天以打破其生理休眠； 2)鱗莖根系預(yù)培養(yǎng) 將鱗莖首先用0. 2% -I. 0%高錳酸鉀溶液浸泡20-40分鐘，然后種植在滅過(guò)菌的基質(zhì)珍珠巖中，待鱗莖根系生長(zhǎng)到3-8厘米，取出，清洗，轉(zhuǎn)移到鱗莖類(lèi)植物根系分泌物收集和粗分離裝置； 3)根系分泌物收集 將已生根的鱗莖放置在裝有蒸餾水的水培槽中，水培槽中固定有泡沫板，泡沫板固定前，鉆上適宜鱗莖大小的孔，將鱗莖鑲嵌到上面，根系浸到蒸餾水中，在室溫下用充氣泵連續(xù)通氣培養(yǎng)，充氣泵的引流管穿過(guò)泡沫板伸到蒸餾水中，定期導(dǎo)出含有根系分泌物的培養(yǎng)液，并向水培槽注入槽底液深3-5厘米蒸餾水； 4)根系分泌物粗分尚 經(jīng)過(guò)濾棉和活性炭實(shí)現(xiàn)根系分泌物的粗過(guò)濾和粗分離，收集吸附根系分泌物的活性炭。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的鱗莖繁殖類(lèi)植物根系分泌物的收集方法，其特征在于，步驟3)中培養(yǎng)期間為30-45天。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的鱗莖繁殖類(lèi)植物根系分泌物的收集方法，其特征在于，步驟3)中培養(yǎng)期間每5-10天收集一次培養(yǎng)液。
4.一種鱗莖繁殖類(lèi)植物根系分泌物的收集裝置，其特征在于，主要包括鱗莖植株培養(yǎng)、根系分泌物收集和根系分泌物粗分離三部分， 所述鱗莖植株培養(yǎng)部分由水培槽(I)、泡沫板(2)、進(jìn)液器(3)和充氣泵(4)依次連接而成； 所述根系分泌物收集部分由引流管(5)和閥門(mén)(6)依次連接而成； 所述根系分泌物粗分離部分由過(guò)濾器(7)、分離柱(9)、廢水槽(10)依次連接而成。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的鱗莖繁殖類(lèi)植物根系分泌物的收集裝置，其特征在于，所述過(guò)濾器(X)內(nèi)填充過(guò)濾棉。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的鱗莖繁殖類(lèi)植物根系分泌物的收集裝置，其特征在于，所述分離柱(9)內(nèi)填充活性炭(8)。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種鱗莖繁殖類(lèi)植物根系分泌物的收集方法及裝置，該方法包括以下步驟1)破除鱗莖休眠；2)鱗莖根系預(yù)培養(yǎng)；3)根系分泌物收集；4)根系分泌物粗分離。該裝置主要包括鱗莖植株培養(yǎng)、根系分泌物收集和根系分泌物粗分離三部分，該方法簡(jiǎn)單易行，該裝置收集時(shí)間長(zhǎng)且效率高。
文檔編號(hào)G01N1/10GK102749222SQ20121024575
公開(kāi)日2012年10月24日 申請(qǐng)日期2012年7月17日 優(yōu)先權(quán)日2012年7月17日
發(fā)明者周艷麗, 徐鵬, 程智慧, 肖雪梅, 艾德 申請(qǐng)人:西北農(nóng)林科技大學(xué)