專利名稱：注射用阿奇霉素中有關(guān)物質(zhì)的檢查方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥物領(lǐng)域，具體而言，涉及注射用阿奇霉素中有關(guān)物質(zhì)的檢查方法。
背景技術(shù)：
注射用阿奇霉素中有關(guān)物質(zhì)的檢查是評價其安全性的一個重要指標。注射用阿奇霉素中有關(guān)物質(zhì)王要指阿奇霉素B、阿奇霉素Gx、紅霉素A偕亞胺釀等。相關(guān)技術(shù)中，注射用阿奇霉素中有關(guān)物質(zhì)的檢查是采用薄層色譜法(TLC):將供試品(注射用阿奇霉素)和對照液分別在硅膠G薄層板上點樣，通過比較兩者的斑點數(shù)量和顏色深淺來判斷有關(guān)物質(zhì)含量是否達到安全水平。各種檢查方法只是將對照液的種類和濃度稍作改變，所用的原理都相同，例如，國家藥品標準WS1- (X-296) -2003Z:取供試品(注射用阿奇霉素)，用無水乙醇溶解并稀釋制成每Iml含阿奇霉素20mg的溶液，作為供試品溶液；取供試品溶液和紅霉素標準品，用無水乙醇溶解并稀釋制成每Iml中含阿奇霉素和紅霉素各0.4mg的溶液，作為對照溶液(I);另取供試品溶液二份，分別用無水乙醇制成每Iml含阿奇霉素0.6mg和0.2mg的溶液，作為對照溶液(2)和(3)。精密吸取上述四種溶液各10 μ 1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-正己烷-二乙胺(10:10:2)為展開劑，展開后晾干，噴以顯色劑(取鑰酸鈉2.5g、硫酸鈰lg，加10%硫酸溶液溶解并稀釋至100ml)，置105°C加熱數(shù)分鐘。當對照溶液(I)中阿奇霉素與紅霉素斑點完全分離，供試品溶液的雜質(zhì)斑點不超過3個，且各雜質(zhì)斑點的顏色與對照溶液的主斑點比較，最大的一個雜質(zhì)斑點不深于對照溶液(2)的主斑點(3% )，其他兩個雜質(zhì)斑點均分別不深于對照溶液(3)的主斑點(I %)時，該供試品有關(guān)物質(zhì)含量達到安全水平，否則達不到安全水平。

由上文可知，相關(guān)技術(shù)中的檢查方法只能實現(xiàn)半定量評價有關(guān)物質(zhì)含量的目的，無法實現(xiàn)定量評價，因而不能進行更科學地研究，例如影響其注射劑安全性的原因分析等。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供注射用阿奇霉素中有關(guān)物質(zhì)的檢查方法，以解決上述的問題。在本發(fā)明的實施例中提供了注射用阿奇霉素中有關(guān)物質(zhì)的檢查方法，包括下列步驟:步驟A:取阿奇霉素B對照品，并用氯化鈉注射液將其稀釋為同一濃度或不同濃度的溶液，再用這些溶液按照阿奇霉素B注入量遞增的順序依次進行異常毒性檢查法試驗，直至某一阿奇霉素B注入量的試驗的復試中出現(xiàn)小鼠死亡結(jié)果時，將該試驗的前一個試驗中所用的阿奇霉素B注入量定為阿奇霉素B的注入量限度；步驟B:取阿奇霉素Gx對照品，并用氯化鈉注射液將其稀釋為同一濃度或不同濃度的溶液，再用這些溶液按照阿奇霉素Gx注入量遞增的順序依次進行異常毒性檢查法試驗，直至某一阿奇霉素Gx注入量的試驗的復試中出現(xiàn)小鼠死亡結(jié)果時，將該試驗的前一個試驗中所用的阿奇霉素Gx注入量定為阿奇霉素Gx的注入量限度；步驟C:取紅霉素A偕亞胺醚對照品，并用氯化鈉注射液將其稀釋為同一濃度或不同濃度的溶液，再用這些溶液按照紅霉素A偕亞胺醚注入量遞增的順序依次進行異常毒性檢查法試驗，直至某一紅霉素A偕亞胺醚注入量的試驗的復試中出現(xiàn)小鼠死亡結(jié)果時，將該試驗的前一個試驗中所用的紅霉素A偕亞胺醚注入量定為紅霉素A偕亞胺醚的注入量限度；步驟D:定量分析待測注射用阿奇霉素中阿奇霉素B的含量C1、阿奇霉素Gx的含量C2、紅霉素A偕亞胺醚的含量C3、阿奇霉素的含量C ；步驟E:根據(jù)待測注射用阿奇霉素的每次最大用量m，以及下列公式計算，得到阿奇霉素B的雜質(zhì)限度W1、阿奇霉素Gx的雜質(zhì)限度W2和紅霉素A偕亞胺醚的雜質(zhì)限度W3:
權(quán)利要求
1.注射用阿奇霉素中有關(guān)物質(zhì)的檢查方法，其特征在于，包括下列步驟: 步驟A:取阿奇霉素B對照品，并用氯化鈉注射液將其稀釋為同一濃度或不同濃度的溶液，再用這些溶液按照阿奇霉素B注入量遞增的順序依次進行異常毒性檢查法試驗，直至某一阿奇霉素B注入量的試驗的復試中出現(xiàn)小鼠死亡結(jié)果時，將該試驗的前一個試驗中所用的阿奇霉素B注入量定為阿奇霉素B的注入量限度； 步驟B:取阿奇霉素Gx對照品，并用氯化鈉注射液將其稀釋為同一濃度或不同濃度的溶液，再用這些溶液按照阿奇霉素Gx注入量遞增的順序依次進行異常毒性檢查法試驗，直至某一阿奇霉素Gx注入量的試驗的復試中出現(xiàn)小鼠死亡結(jié)果時，將該試驗的前一個試驗中所用的阿奇霉素Gx注入量定為阿奇霉素Gx的注入量限度； 步驟C:取紅霉素A偕亞胺醚對照品，并用氯化鈉注射液將其稀釋為同一濃度或不同濃度的溶液，再用這些溶液按照紅霉素A偕亞胺醚注入量遞增的順序依次進行異常毒性檢查法試驗，直至某一紅霉素A偕亞胺醚注入量的試驗的復試中出現(xiàn)小鼠死亡結(jié)果時，將該試驗的前一個試驗中所用的紅霉素A偕亞胺醚注入量定為紅霉素A偕亞胺醚的注入量限度； 步驟D:定量分析待測注射用阿奇霉素中阿奇霉素B的含量C1、阿奇霉素Gx的含量C2、紅霉素A偕亞胺醚的含量C3、阿奇霉素的含量C ； 步驟E:根據(jù)待測注射用阿奇霉素的每次最大用量m，以及下列公式計算，得到阿奇霉素B的雜質(zhì)限度W1、阿奇霉素Gx的雜質(zhì)限度W2和紅霉素A偕亞胺醚的雜質(zhì)限度W3: ` 步驟F:將分別——對應地與所述W1, W2，W3進行比較,且 且則所述待測注射用阿奇霉素中有關(guān)物質(zhì)含量達到安全水平，否則達不到安全水平。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟A至C中，用氯化鈉注射液將每步對應的對照品稀釋為不同濃度的溶液，再取相同劑量的這些溶液按照濃度遞增的順序依次進行異常毒性檢查法試驗。
3.根據(jù)權(quán)利要求1-2任一項所述的方法，其特征在于，所述步驟D中的定量分析的方法為: 高效液相色譜分析法。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述高效液相色譜法檢測CpC2, C3、C所用的填充劑均為十八烷基硅烷鍵合硅膠，所用的流動相均為體積比為45:55的磷酸鹽緩沖液-乙腈；檢測波長為210nm。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，所述磷酸鹽緩沖液的pH值為8.0-8.4。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述磷酸鹽緩沖液的pH值為8.2。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述磷酸鹽緩沖液的配制方法為:取0.05mol/L磷酸氫二鉀溶液，用0.2g/mL的磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至8.2。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，所述高效液相色譜法為:用乙腈將待測注射用阿奇霉素稀釋為一定濃度的溶液，作為第一樣品；再將第一檢測樣品稀釋η倍作為第二樣品；向高效液相色譜儀注入所述第一樣品，檢測C1, C2, C3 ;向高效液相色譜儀中注入所述第二樣品，檢測C ； 所述η為50-150。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述第一樣品中注射用阿奇霉素的濃度為 8-10mg/mL,且所述 n=100。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其特征在于，所述第一樣品和第二樣品的注入量均為.50 μ L
全文摘要
本發(fā)明涉及藥物領(lǐng)域，具體涉及注射用阿奇霉素中有關(guān)物質(zhì)的檢查方法。其包括取阿奇霉素B對照品，并用氯化鈉注射液稀釋為溶液，再用這些溶液按照注入量遞增的順序依次進行異常毒性檢查法試驗，直至某一阿奇霉素B注入量的試驗的復試中出現(xiàn)小鼠死亡結(jié)果時，將該試驗的前一個試驗中所用注入量定為阿奇霉素B的注入量限度；按照同樣方法，測量阿奇霉素Gx和紅霉素A偕亞胺醚的注入量限度；定量分析待測藥中上述三種物質(zhì)和阿奇霉素的含量C；根據(jù)每次最大用量以及公式計算，得到三種有關(guān)物質(zhì)的雜質(zhì)限度W1、W2和W3；若≤W1，且≤W2，且≤W3，則藥物的有關(guān)物質(zhì)含量達到安全水平，否則達不到安全水平。本發(fā)明實現(xiàn)了定量評價的目的。
文檔編號G01N30/02GK103245744SQ201310172819
公開日2013年8月14日 申請日期2013年5月10日 優(yōu)先權(quán)日2013年5月10日
發(fā)明者陳果, 梁仁興, 王曉玲, 魯成憲, 張寒煦 申請人:峨眉山通惠制藥有限公司