電泳托盤(pán)和進(jìn)行電泳實(shí)驗(yàn)的方法
【專利摘要】一種電泳托盤(pán)布置成支承用于進(jìn)行電泳實(shí)驗(yàn)的電泳盒，電泳盒包括在殼體中的凝膠部件，殼體具有正面和背面，其中，托盤(pán)包括用于在電泳期間至少支承電泳盒的分離區(qū)的盒支承表面，以及其中，盒支承表面在側(cè)邊有一對(duì)緩沖劑墊保持器，每一個(gè)緩沖劑墊保持器都布置成使緩沖劑墊相對(duì)于電泳盒的背面處的緩沖劑連接區(qū)段保持在匹配位置上。
【專利說(shuō)明】電泳托盤(pán)和進(jìn)行電泳實(shí)驗(yàn)的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及用于電泳實(shí)驗(yàn)的電泳托盤(pán)，并且更特別地，涉及具有新穎設(shè)計(jì)的電泳托盤(pán)。

【背景技術(shù)】
[0002]電泳是常用于分析的方法，其中，帶電荷的分子和微粒在分離介質(zhì)(通常是凝膠)中遷移，分離介質(zhì)在兩個(gè)電極之間經(jīng)受電場(chǎng)?？捎玫入婞c(diǎn)(PD、分子量、電荷或這些因素的組合來(lái)使蛋白質(zhì)分離。
[0003]分離凝膠通常置于支承件上，并且凝膠的兩個(gè)相對(duì)的端部接觸呈溶液形式或剛性形式的電極緩沖劑。電極可插入包含電極緩沖劑的容器中。來(lái)自電解介質(zhì)和離子儲(chǔ)存器的緩沖溶液使PH值和其它參數(shù)保持恒定。在分離之后，用不同的方式檢測(cè)和識(shí)別分子:例如通過(guò)對(duì)凝膠著色直觀地檢測(cè)和識(shí)別，或者用光學(xué)手段，諸如用激光掃描儀等掃描經(jīng)著色的凝膠或帶標(biāo)記樣本，或者對(duì)它們成像。
[0004]凝膠電泳如今在常規(guī)上用來(lái)分離生物分子，諸如蛋白質(zhì)、縮氨酸、核酸等。在不同類型的篩選、識(shí)別(細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、表達(dá)&凈化)或臨床試驗(yàn)中操作樣本。蛋白質(zhì)樣本可源自例如人體、哺乳動(dòng)物組織、細(xì)胞溶菌或細(xì)菌、昆蟲(chóng)或酵母細(xì)胞系統(tǒng)。不同類型的分子的電泳條件是不同的，而且必須適應(yīng)許多情況。因而，通常必須針對(duì)各個(gè)類型的樣本來(lái)選擇凝膠和緩沖溶液兩者。
[0005]電泳過(guò)程的準(zhǔn)備包括幾個(gè)非常費(fèi)力的步驟。選擇適當(dāng)?shù)哪z，并且將其置于或模制在支承件上。凝膠與緩沖溶液接觸。常用方式是使玻璃盒或塑料盒中的凝膠厚片接觸緩沖劑罐中的緩沖溶液。對(duì)于各次運(yùn)行，凝膠必須置于支承件或準(zhǔn)備好的盒上。然后對(duì)緩沖劑罐填充緩沖溶液，并且將樣本施用到凝膠上。為了避免對(duì)緩沖劑罐中的緩沖溶液的操作，已經(jīng)在WO 87/04948中提議，在凝膠材料中結(jié)合緩沖劑物質(zhì)，由此獲得呈緩沖劑條的形式的緩沖劑。另外，US 6368481公開(kāi)了一種預(yù)澆鑄電泳盒，其中，結(jié)合緩沖劑條作為盒的組成部分。
[0006]在電泳分離之后，以及為了檢測(cè)給定樣本中的特定蛋白質(zhì)，可將蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到膜片(典型地硝化纖維或PVDF)，其中使用對(duì)目標(biāo)蛋白質(zhì)專有的抗體來(lái)探測(cè)(檢測(cè))它們，這是通常被稱為蛋白質(zhì)印跡或免疫印跡的過(guò)程。將蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到膜片的主要方法被稱為電印跡，并且使用電流來(lái)將蛋白質(zhì)從凝膠拉到膜片中。蛋白質(zhì)從凝膠內(nèi)移動(dòng)到膜片上，同時(shí)保持它們?cè)谀z內(nèi)所具有的組織結(jié)構(gòu)，由此蛋白質(zhì)暴露在薄表層上供檢測(cè)。蛋白質(zhì)由于膜片的非專有的蛋白質(zhì)結(jié)合屬性(即，同樣良好地結(jié)合所有蛋白質(zhì))而結(jié)合到膜片的表面上。為了避免不明確地結(jié)合探測(cè)抗體，可擋住膜片上的其余結(jié)合位點(diǎn)。
[0007]在探測(cè)(檢測(cè))過(guò)程期間，膜片與轉(zhuǎn)移蛋白質(zhì)一起被針對(duì)關(guān)注的蛋白質(zhì)的特定的第一抗體和例如關(guān)注的蛋白質(zhì)的第二抗體(其具有與報(bào)告酶關(guān)聯(lián)的經(jīng)改性的抗體)孵化；當(dāng)暴露于合適的基底時(shí)，這個(gè)酶驅(qū)動(dòng)比色反應(yīng)，并且產(chǎn)生顏色或帶熒光標(biāo)記的目標(biāo)(染料)，這可由適當(dāng)?shù)某上窦夹g(shù)檢測(cè)。
[0008]電泳和接下來(lái)的印跡步驟在傳統(tǒng)上的特征在于對(duì)凝膠和膜片，以及一系列液體(例如緩沖劑、試劑、洗液等)進(jìn)行許多人工操作。在過(guò)去作出了許多嘗試來(lái)促進(jìn)工作流以及/或者使工作流自動(dòng)化，但這樣的工作很少成功。
[0009]US 5674006公開(kāi)了用于使流體高效地循環(huán)和移動(dòng)穿過(guò)工件的設(shè)備的一個(gè)示例。該設(shè)備可對(duì)使用的流體提供自動(dòng)化操作，而且很適合用來(lái)對(duì)諸如電泳凝膠的生物試樣進(jìn)行著色和固定。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0010]本發(fā)明的目標(biāo)是提供一種新型電泳托盤(pán)，該電泳托盤(pán)克服了現(xiàn)有技術(shù)中的一個(gè)或多個(gè)缺點(diǎn)。這由獨(dú)立權(quán)利要求中限定的電泳托盤(pán)實(shí)現(xiàn)。進(jìn)一步提供一種電泳設(shè)備、緩沖劑杯、緩沖劑墊、電泳盒和進(jìn)行電泳實(shí)驗(yàn)的方法。
[0011]電泳托盤(pán)的一個(gè)優(yōu)點(diǎn)在于，它改進(jìn)了電泳實(shí)驗(yàn)中的操作性，以及改進(jìn)了對(duì)電泳盒的接近。
[0012]根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，提供一種電泳托盤(pán)，其布置成支承用于進(jìn)行電泳實(shí)驗(yàn)的電泳盒，電泳盒包括在殼體中的凝膠部件，殼體具有正面和背面，
其中，托盤(pán)包括用于在電泳期間至少支承電泳盒的分離區(qū)的盒支承表面，以及其中，盒支承表面在側(cè)邊有一對(duì)緩沖劑墊保持器，每一個(gè)緩沖劑墊保持器都布置成使緩沖劑墊相對(duì)于電泳盒的背面處的緩沖劑連接區(qū)段保持在匹配位置上。
[0013]根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，電泳托盤(pán)包括熱傳遞單元，熱傳遞單元連接到盒支承表面上，以在電泳期間，通過(guò)與電泳盒的背面的區(qū)段進(jìn)行熱傳遞接觸，來(lái)控制電泳盒的溫度。
[0014]根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，電泳托盤(pán)形成為對(duì)緩沖劑墊和電泳盒的背面處的緩沖劑連接區(qū)段提供偏壓匹配。
[0015]根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，緩沖劑墊沿偏壓方向加載了彈簧。
[0016]根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，緩沖劑墊由彈性材料構(gòu)成。
[0017]根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，各個(gè)緩沖劑墊保持器包括緩沖劑杯，緩沖劑杯具有用于保持緩沖劑墊的隔室。
[0018]根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，緩沖劑杯包括用于與置于隔室中的緩沖劑墊進(jìn)行電交互的電極組件。
[0019]根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，緩沖劑杯包括在隔室外部的、用于將電極組件連接到電源上的至少一個(gè)電連接器。
[0020]根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，緩沖劑杯布置成接收連接到電源上的電極組件。
[0021]根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，緩沖劑杯包括用于接收電極組件的一個(gè)或多個(gè)開(kāi)口。
[0022]根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，緩沖劑杯隔室和緩沖劑墊相互楔合，以相對(duì)于彼此以預(yù)定定向配合。
[0023]根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，盒支承表面和緩沖劑墊保持器的匹配位置基本布置在共同的平面上，以支承具有基本平坦的背面的電泳盒。
[0024]根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，電泳托盤(pán)形成為扁平托盤(pán)單元，其具有在托盤(pán)單元中形成為凹部的緩沖劑墊保持器。
[0025]根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，熱傳遞表面在熱的方面由固態(tài)熱泵單元控制。
[0026]根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，通過(guò)與冷卻介質(zhì)的熱傳遞來(lái)在熱的方面控制熱傳遞表面。
[0027]根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，電泳托盤(pán)包括與電泳盒的對(duì)齊結(jié)構(gòu)互補(bǔ)的對(duì)齊結(jié)構(gòu)，以確保盒在托盤(pán)上有恰當(dāng)定向。
[0028]根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，電泳托盤(pán)包括用于使電泳盒固定在托盤(pán)上的位置上的夾持器件。
[0029]根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，提供一種電泳設(shè)備，其包括根據(jù)以上所述的電泳托盤(pán)。
[0030]根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，電泳設(shè)備包括布置成對(duì)布置在托盤(pán)上的電泳盒成像的光學(xué)成像單元。
[0031]根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，提供用于根據(jù)以上所述的電泳托盤(pán)的緩沖劑杯。
[0032]根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，提供用于根據(jù)以上所述的電泳托盤(pán)的緩沖劑墊。
[0033]根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，提供適于與根據(jù)以上所述的電泳托盤(pán)一起使用的電泳盒。
[0034]根據(jù)一個(gè)實(shí)施例提供一種用于進(jìn)行電泳實(shí)驗(yàn)的方法，包括以下步驟，
提供電泳盒，其包括在殼體中的凝膠部件，殼體具有正面和背面，
提供電泳托盤(pán)，其布置成支承電泳盒，以進(jìn)行電泳實(shí)驗(yàn)，其中，托盤(pán)包括用于在電泳期間至少支承電泳盒的分離區(qū)的盒支承表面，以及其中，盒支承表面在側(cè)邊有一對(duì)緩沖劑墊保持器，每一個(gè)緩沖劑墊保持器都布置成使緩沖劑墊相對(duì)于電泳盒的背面處的緩沖劑連接區(qū)段保持在匹配位置上，
將緩沖劑墊布置在緩沖劑墊保持器中，
將電泳盒置于托盤(pán)上的位置上，
將樣本裝載到電泳盒的一個(gè)或多個(gè)樣本井中，以及在緩沖劑墊之間施加電場(chǎng)。
[0035]通過(guò)參照以下詳細(xì)描述和附圖，將更完整地理解本發(fā)明，及其另外的特征和優(yōu)點(diǎn)。

【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0036]圖1是根據(jù)一個(gè)實(shí)施例的電泳盒的示意性透視圖。
[0037]圖2a至2f顯示圖1的電泳盒的構(gòu)件。
[0038]圖3a至3c示意性地顯示用于填充圖1的電泳盒的過(guò)程。
[0039]圖4顯示根據(jù)一個(gè)實(shí)施例的盒的下部端的放大部分。
[0040]圖5顯示電泳凝膠單元，其具有附連到支承框架的頂面上的凝膠部件。
[0041]圖6顯示電泳托盤(pán)的示意圖，電泳托盤(pán)與電泳盒相容，以使用電泳盒來(lái)進(jìn)行電泳實(shí)驗(yàn)。
[0042]圖7a和7b顯示用于圖6的電泳托盤(pán)的緩沖劑墊的示意圖。
[0043]圖8a至8c顯示電泳托盤(pán)、緩沖劑墊和電泳盒之間的相互作用的示意圖。
[0044]圖9至11示意性地顯示使用電泳盒和相容的電泳設(shè)備來(lái)執(zhí)行電泳分離實(shí)驗(yàn)所包括的步驟。
[0045]圖12a至12c示意性地顯示從盒殼體上移除附連到支承框架上的凝膠部件的步驟。
[0046]圖13顯示電泳凝膠單元的示例。
[0047]圖14顯示用于免疫印跡的膜片單元。
[0048]圖15顯示用來(lái)建立用于電印跡的轉(zhuǎn)移夾層的海綿部件。
[0049]圖16顯示用于電印跡的夾層保持器的示例。
[0050]圖17a至17e示意性地顯示用于電印跡的轉(zhuǎn)移夾層的組件。
[0051]圖18示意性地顯示置于聯(lián)合式電泳和成像設(shè)備的托盤(pán)上的膜片單元。
[0052]圖19a和19b顯示提供單獨(dú)的電泳通道的盒殼體的兩個(gè)示意性示例。
[0053]圖20a_h顯示電泳盒的另一個(gè)示意性實(shí)施例。
[0054]圖21a_h顯示電泳盒的另一個(gè)示意性實(shí)施例。
[0055]圖22示意性地顯示剛性凝膠支承框架，其具有可滲透或半透性背襯。
[0056]圖23a_23g顯示根據(jù)另一個(gè)示意性實(shí)施例的示意性蛋白質(zhì)分析概念。

【具體實(shí)施方式】
[0057]在本公開(kāi)中，將電泳凝膠的分離區(qū)限定為凝膠的一部分，在電泳運(yùn)行完成之后，樣本的分離出的個(gè)體位于該部分中。
[0058]圖1是根據(jù)一個(gè)示意性實(shí)施例的電泳盒10的透視圖。盒10包括盒殼體20、可脫開(kāi)的凝膠支承框架30、可分段移除式背襯膜40和可移除式樣本井蓋50。圖1顯示處于組裝狀態(tài)的電泳盒。凝膠盒10在其中限定凝膠隔室，凝膠隔室用于模制扁平凝膠部件36，以進(jìn)行電泳分離。根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，電泳盒10是預(yù)澆鑄盒，但備選地，盒10可為空的，并且準(zhǔn)備好例如由最終顧客在凝膠隔室中模制定制的凝膠。
[0059]圖2a和2b顯示盒殼體20，其中移除了盒10的其它構(gòu)件。圖2a是俯視圖，而圖2b則從下面顯示盒殼體20。盒殼體20大體由薄上壁60和緣邊70組成，薄上壁60具有上部面65和下部面66，緣邊70從上壁60向下突出，緣邊70在其周緣周圍具有底面80和內(nèi)壁75。上壁60的下部面66和緣邊70的內(nèi)壁75基本限定凝膠隔室，通過(guò)將支承框架30和可移除式背襯膜40附連到緣邊70的下部面80上，可從下面封閉凝膠隔室，如圖1中顯示和將在下面更詳細(xì)地論述的那樣。在公開(kāi)的實(shí)施例中，模制在盒10中的凝膠部件36的厚度(如圖4中示意性地公開(kāi)的那樣)將與緣邊的內(nèi)壁75的高度基本相同。在公開(kāi)的實(shí)施例中，上壁60具有均勻的厚度，而凝膠部件36也將具有均勻的厚度，只要支承框架30和可移除式背襯膜40如公開(kāi)的實(shí)施例中那樣平坦即可。凝膠的厚度優(yōu)選適合所使用的特定凝膠類型和緩沖劑系統(tǒng)，以及電泳步驟中所涉及的期望電流。另外，如下面更詳細(xì)地公開(kāi)的那樣，在備選實(shí)施例中，盒殼體20的結(jié)構(gòu)可形成為使凝膠部件36在其不同區(qū)段中具有不同厚度。
[0060]由于盒殼體20應(yīng)在存儲(chǔ)和使用期間對(duì)盒10提供剛性結(jié)構(gòu)，所以盒殼體20應(yīng)當(dāng)由剛性合適的材料制成。此外，如將在下面詳細(xì)地公開(kāi)的那樣，盒10設(shè)計(jì)成用于進(jìn)行電泳分離，因此盒殼體20應(yīng)當(dāng)是電絕緣的。在其中待模制在盒中的凝膠由于UV輻射而聚合的一些實(shí)施例中，可選擇盒材料，以便使其基本不會(huì)由于經(jīng)受與聚合相應(yīng)的劑量的UV輻射而退化或脫色。此外，可選擇盒材料，以便不妨礙凝膠聚合，而且可取決于盒10的設(shè)計(jì)來(lái)選擇材料，以便對(duì)凝膠展示適當(dāng)?shù)恼澈闲裕缭谀z部件36布置成被從盒殼體20移除時(shí)的低粘合性，或者在凝膠部件36布置成固持在盒殼體20中時(shí)的高粘合性。根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，盒10進(jìn)一步設(shè)計(jì)成在聯(lián)合式電泳和熒光成像設(shè)備中使用，其中，凝膠部件36可在電泳步驟期間或之后成像，同時(shí)凝膠部件36仍然在盒中，如將在下面詳細(xì)地公開(kāi)的那樣。因此，至少上壁60的覆蓋凝膠部件36的分離區(qū)的區(qū)段對(duì)于有關(guān)波長(zhǎng)的電磁輻射應(yīng)當(dāng)是充分透明的。根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，整個(gè)盒殼體20以相同材料注射模制而成。此外，可選擇盒10的所有構(gòu)件，以便使其無(wú)熒光性/熒光性低。根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，盒殼體20由剛性聚合物制成，諸如環(huán)烯烴聚合物(COP)、環(huán)烯烴共聚物(COC)、聚丙烯(PP)、聚對(duì)苯二甲酸乙二酯(PET)、聚碳酸酯、聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)、它們的組合、變型等。
[0061]在公開(kāi)的實(shí)施例中，提供橫向壁90，其布置成將凝膠隔室分成電泳隔室和過(guò)填充腔室100，過(guò)填充腔室100布置成在模制凝膠部件36的步驟期間接收多余的凝膠溶液。此夕卜，在電泳隔室的與過(guò)填充腔室100相對(duì)的端部處存在填充端口 120，以及在過(guò)填充腔室100中存在通氣口 130。將在下面參照?qǐng)D3a至3c更詳細(xì)地公開(kāi)將凝膠模制在盒20中的過(guò)程。
[0062]公開(kāi)的盒10設(shè)有10個(gè)樣本井開(kāi)口 110，以使得能夠?qū)颖炯虞d到凝膠部件36上，以進(jìn)行分離，各個(gè)樣本井開(kāi)口 110在分離期間對(duì)應(yīng)于一個(gè)電泳通道。樣本井開(kāi)口 110的數(shù)量和形狀可取決于電泳盒的實(shí)際尺寸、分離類型和電泳凝膠類型等而改變。在I和例如100之間，可存在任何適當(dāng)數(shù)量的樣本井開(kāi)口 110。在一個(gè)實(shí)施例中，盒設(shè)有一個(gè)較寬的樣本加載開(kāi)口，其延伸基本跨過(guò)凝膠部件的全部寬度，代替單獨(dú)的樣本井開(kāi)口。在這種實(shí)施例中，用戶例如可使用井梳(comb)等直接在凝膠中形成井，或者可提供一個(gè)或多個(gè)樣本加載杯，它們可附連到盒10上，與凝膠部件36接觸，以提供數(shù)量靈活的分離通道，例如像圖20e和20g中示意性地公開(kāi)以及將在下面更詳細(xì)地公開(kāi)的那樣。
[0063]在圖1中，樣本井開(kāi)口 110由可移除式樣本井蓋50覆蓋，在圖2c和2d中更詳細(xì)地公開(kāi)可移除式樣本井蓋50。樣本井蓋50布置成配合在井開(kāi)口 110上面，以及在模制過(guò)程和存儲(chǔ)期間使井開(kāi)口 110保持封閉。在將樣本加載到樣本井110中之前，移除井蓋50，以打開(kāi)樣本井110。在公開(kāi)的實(shí)施例中，井蓋50包括井形成突起52，突起52形成為以匹配關(guān)系配合在樣本井開(kāi)口 110中，以基本對(duì)樣本井開(kāi)口 110提供密封性相互作用，以避免凝膠溶液在模制期間泄漏到盒中，以及避免空氣在存儲(chǔ)期間泄漏到盒中。根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，井形成突起52設(shè)計(jì)成在上壁60的下部面66下面延伸到凝膠部件36中，以在被移除時(shí)形成延伸到凝膠部件36中的樣本井。在另一個(gè)實(shí)施例中，井形成突起52設(shè)計(jì)成使得它們與上壁60的下部面66齊平，以對(duì)凝膠部件36提供基本平坦的表面，以及其中，樣本井由樣本井開(kāi)口 110形成。在一個(gè)實(shí)施例中，樣本井蓋50布置成抵靠著上壁60的上部面65或它們的組合進(jìn)行密封。為了促進(jìn)進(jìn)行移除同時(shí)提供充分高效的密封，樣本井蓋50由適當(dāng)?shù)膹椥圆牧现瞥?，諸如例如乙烯丙烯橡膠(EPM)、三元乙丙橡膠(EPDM)、聚丙烯酸酯橡膠、氟橡膠等及其變型和不同的改良。為了實(shí)現(xiàn)高效生產(chǎn)以及所需密封效率，樣本井蓋50可與盒殼體20共同模制而成，使得盒殼體20在第一步驟中以第一剛性材料模制，在此之后，樣本井蓋50在第二步驟中以第二彈性材料模制，其中，盒殼體部分地用作模具。由于恰當(dāng)?shù)剡x擇材料特性和模具設(shè)計(jì)，例如與剛性材料的非永久粘合，可選擇性地移除共模制式樣本井蓋50。在一個(gè)實(shí)施例中，可在盒殼體20和樣本井蓋50之間設(shè)置提供適當(dāng)?shù)恼澈咸匦缘闹虚g材料，例如熔化溫度低的熱塑性材料等。
[0064]根據(jù)公開(kāi)的實(shí)施例，可脫開(kāi)的凝膠支承框架30可脫開(kāi)地附連到緣邊70的底面80上，并且可分段移除式背襯膜40又附連/層疊到凝膠支承框架30的底部上。凝膠支承框架30和背襯膜40共同提供下壁，下壁使電泳隔室和過(guò)填充腔室100封閉，以進(jìn)行模制和存儲(chǔ)。如圖2e中顯示的那樣，凝膠支承框架30的公開(kāi)的實(shí)施例包括兩個(gè)緩沖劑緩沖狹槽150a和150b和分離區(qū)窗160，它們各自從下面被背襯膜40的相應(yīng)的可移除區(qū)段210a-c (在圖2f中顯示)覆蓋。通過(guò)選擇適當(dāng)?shù)牟牧辖M合和粘合劑技術(shù)，背襯膜40可層疊到凝膠支承框架30的底面上，使得例如操作者可通過(guò)抓住和拉相應(yīng)的撕片211a-c來(lái)移除相應(yīng)的區(qū)段210a-c。如將在下面更詳細(xì)地論述的那樣，為了進(jìn)行電泳實(shí)驗(yàn)，移除背襯膜40的區(qū)段210a和210b，以便使凝膠與相應(yīng)的緩沖劑源接觸，例如電泳設(shè)備中的緩沖劑墊。在進(jìn)行電泳之后，以及為了允許接近凝膠部件36的分離區(qū)來(lái)進(jìn)行轉(zhuǎn)移/印跡和探測(cè)，移除區(qū)段210b，以通過(guò)分離區(qū)窗160露出凝膠部件36的底面。為了允許在不損傷凝膠部件36的情況下移除背襯膜40的區(qū)段210a-c，至少膜40的與凝膠直接接觸的區(qū)段應(yīng)與凝膠具有足夠低的表面粘合性?？赏ㄟ^(guò)對(duì)整個(gè)膜選擇適當(dāng)?shù)牟牧虾捅砻鎸傩?，以?或者改變特定的交互區(qū)處的表面屬性(例如低的表面光潔度、表面涂層)和將其它材料層疊到所述區(qū)上，來(lái)實(shí)現(xiàn)低的表面粘合性。根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，凝膠支承框架30由在兩個(gè)面上施用有粘合劑層的剛性聚合物膜構(gòu)成，而背襯膜40由普通的聚合物膜構(gòu)成，聚合物膜通過(guò)粘合劑層而結(jié)合到剛性聚合物膜上。由于這個(gè)布置，凝膠支承框架30的殼體側(cè)上的粘合劑層可布置成對(duì)盒殼體20提供可移除但基本不透氣的結(jié)合，以及提供比盒殼體20的凝膠粘合性和背襯膜40的聚合物膜的凝膠粘合性更高的凝膠粘合性。根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，凝膠支承框架30的剛性聚合物膜可為聚對(duì)苯二甲酸乙二醇酯(PET)膜，在兩個(gè)面施用有呈熱熔型粘合劑(諸如醋酸乙烯酯共聚物(EVA))或具有適合可撕開(kāi)地結(jié)合的屬性的另一種粘合劑的形式的粘合劑層，并且背襯膜40的聚合物膜可為PET膜。在這個(gè)實(shí)施例中，具有粘合劑層的支承框架30僅覆蓋凝膠部件36的不必從其底部接近的部分，并且因此支承框架30具有對(duì)應(yīng)于背襯膜40的相應(yīng)的可移除區(qū)段的開(kāi)口。支承框架30具有薄粘合劑材料層，例如EVA或比PET箔本身在更低的溫度下熔化的另一種可撕開(kāi)粘合劑，并且因此，可使用熱層疊工藝將背襯膜40和支承框架30層疊在一起，并且通過(guò)熱結(jié)合工藝等，最終將背襯膜40和支承框架30可釋放地附連到盒殼體20上。已經(jīng)在實(shí)驗(yàn)上證實(shí)，EVA層滿足對(duì)于被測(cè)試的凝膠成分的高凝膠粘合性的關(guān)鍵屬性，不干擾凝膠聚合或?qū)Υ烁拍顏?lái)說(shuō)必要的其它特性。
[0065]根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，箔片堆在大約100_115°C下層疊，而且此過(guò)程應(yīng)產(chǎn)生平坦、無(wú)皺折或皺紋的箔片。通過(guò)使用較低的溫度，背襯膜40的可移除區(qū)段210a-c可較輕易地打開(kāi)。背襯膜40可足夠厚，以提供穩(wěn)定的感覺(jué)，即，不會(huì)太有彈性或脆弱，而且也足夠薄，以允許在電泳期間冷卻，如將在下面更詳細(xì)地公開(kāi)的那樣。根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，背襯膜40可為例如0.1mm至0.4_厚，或者它們之間的任何值，這取決于膜的材料。對(duì)盒的粘合性必須足夠強(qiáng)，以防止泄漏，但還必須允許用手花較小的力氣打開(kāi)箔片。
[0066]為了大大改進(jìn)在電泳運(yùn)行后面的步驟中對(duì)凝膠部件36的操作，凝膠支承框架30設(shè)計(jì)成在從盒10移除之后保持附連到凝膠部件36上。支承框架30由適當(dāng)?shù)膭傂圆牧闲纬?，以保持凝膠的形狀，以及通過(guò)提供可接近抓持部分(未被凝膠部件覆蓋)來(lái)促進(jìn)對(duì)凝膠部件36的操作。在移除背襯膜40的區(qū)段210c之后，可通過(guò)分離區(qū)窗160接近凝膠部件36的分離區(qū)的下部面。為了使凝膠部件36恰當(dāng)?shù)馗竭B到支承框架30上，支承框架30應(yīng)設(shè)計(jì)成對(duì)凝膠部件具有高表面粘合性?？赏ㄟ^(guò)選擇適當(dāng)?shù)牟牧蠈傩?，以?或者通過(guò)改變表面(例如表面光潔度、表面涂層等，如上面論述的那樣)來(lái)實(shí)現(xiàn)這一點(diǎn)。
[0067]支承框架30附連到緣邊70的底面80上，使得它可輕易地脫開(kāi)，但仍然提供圍繞緣邊70的充分密封，以使凝膠隔室在模制和存儲(chǔ)期間保持密封。例如可通過(guò)選擇適當(dāng)?shù)牟牧蠀?shù)，以及例如使用粘合劑或熱焊接來(lái)實(shí)現(xiàn)這一點(diǎn)。根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，盒殼體20由剛性聚合物制成，而支承框架30則由在兩個(gè)面上施用有粘合劑層的剛性聚合物膜制成。支承框架30設(shè)有用于拉支承框架30的至少一個(gè)撕片170，以使支承框架30和凝膠部件一起與盒殼體20脫開(kāi)。根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，支承框架30包括在暴露區(qū)段(例如撕片等)處的一個(gè)或多個(gè)加強(qiáng)層(未顯示)。為了確保凝膠部件36從盒殼體20中釋放，至少盒殼體20的內(nèi)壁應(yīng)當(dāng)與凝膠具有低的表面粘合性?？赏ㄟ^(guò)對(duì)整個(gè)膜選擇適當(dāng)?shù)牟牧虾捅砻鎸傩院?或修改表面屬性(例如低的表面光潔度、表面涂層等，如上面論述的那樣)來(lái)實(shí)現(xiàn)低的表面粘合性。
[0068]此外，凝膠隔室中的某些結(jié)構(gòu)的形狀可設(shè)計(jì)成避免凝膠附連到其上，以進(jìn)一步促進(jìn)釋放凝膠部件，例如圓角、非豎向壁和開(kāi)口等。
[0069]支承框架30進(jìn)一步包括對(duì)齊翼片(tag) 180，其具有預(yù)先限定的對(duì)齊結(jié)構(gòu)，對(duì)齊結(jié)構(gòu)限定用于對(duì)齊支承框架30的位置基準(zhǔn)。在公開(kāi)的實(shí)施例中，以兩個(gè)對(duì)齊孔190a和190b的形式提供對(duì)齊結(jié)構(gòu)，對(duì)齊孔布置成確保盒10和/或支承框架30相對(duì)于電泳設(shè)備等中的互補(bǔ)對(duì)齊結(jié)構(gòu)(例如包括2個(gè)銷)恰當(dāng)?shù)貙?duì)齊?？紤]到提供對(duì)齊結(jié)構(gòu)190a-b作為支承框架30 (在電泳運(yùn)行和接下來(lái)的轉(zhuǎn)移步驟之后，凝膠部件36也附連到支承框架30上)的一部分，可重復(fù)地定位凝膠，這在許多情形中是非常有價(jià)值的，如將在下面更詳細(xì)地公開(kāi)的那樣。另外，對(duì)齊結(jié)構(gòu)可不對(duì)稱，使得它僅可按一種獨(dú)特的方式配合到儀器等的互補(bǔ)對(duì)齊結(jié)構(gòu)中，由此它不可按錯(cuò)誤的方式、上下倒置等方式插入。
[0070]另外，適當(dāng)?shù)貙?duì)支承框架30提供識(shí)別碼200等，識(shí)別碼200將使得在以可靠方式從盒10移除之后，讀取凝膠部件36的身份成為可能。識(shí)別碼200例如可為機(jī)器可讀的代碼，例如條形碼、點(diǎn)陣碼等，并且對(duì)用戶和/或儀器提供有關(guān)信息。
[0071]在公開(kāi)的實(shí)施例中，凝膠支承框架30由電絕緣材料的剛性膜構(gòu)成，例如聚合物材料。在此語(yǔ)境中，用語(yǔ)剛性表示膜比凝膠剛度更高，而且尤其是在避免膜輪廓變形的平面上。膜沿其它方向可能較具柔性且可彎曲(這是膜的共有特性)，而且膜不易碎，因?yàn)樗仨毮軌蛲ㄟ^(guò)拉支承框架30的撕片170，從盒殼體中釋放凝膠部件36。實(shí)際上對(duì)于當(dāng)前設(shè)計(jì)有益的是，支承框架30在平面方向之外是柔性的，因?yàn)樗鼘⒋龠M(jìn)通過(guò)下者來(lái)移除凝膠部件36:主要沿著膜的延伸施加釋放力，以逐漸從盒殼體20中釋放凝膠。在其它實(shí)施例中，如在下面更詳細(xì)地示意性地公開(kāi)的那樣，支承框架30可為較像框架的剛性結(jié)構(gòu)，其限定凝膠隔室的大部分，并且上壁60和下壁40可從框架狀剛性結(jié)構(gòu)的緣邊70的緣邊移除。
[0072]圖3a至3c示意性地顯示對(duì)盒10填充凝膠溶液210以模制凝膠部件的順序。在圖3a至3c中，為了說(shuō)明性目的，未顯示支承框架30和可移除式背襯膜40。如圖中指示的那樣，盒10設(shè)計(jì)成以底朝上的抬起位置填充凝膠溶液。根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，盒10布置在支承固定件(未顯示)中，支承固定件布置成在模制過(guò)程期間，支承凝膠隔室的較薄的上壁和下壁，直到凝膠部件36已經(jīng)凝固，以便確保凝膠具有均勻的厚度，以及確保不會(huì)發(fā)生泄漏。當(dāng)置于抬起位置時(shí)，適當(dāng)?shù)奶畛鋰娮?未顯示)連接到盒10的下部端處的填充端口上，并且凝膠溶液被推到凝膠隔室中，并且開(kāi)始從下面填充凝膠隔室。由于填充端口的入口在凝膠隔室中布置在基本最低的位置處，所以可填充凝膠溶液，而不夾帶氣泡。在圖3b中，凝膠溶液前鋒正要到達(dá)過(guò)填充腔室100的橫向壁90。如在圖2b中最佳地看到的那樣，橫向壁90為基本“W”形，并且相對(duì)于填充方向在其最上部位置處朝過(guò)填充端口 140漸縮，其中，一個(gè)或多個(gè)中間凸脊限定各個(gè)過(guò)填充端口 140的單獨(dú)的漸縮區(qū)段。借助于橫向壁90的形狀，在凝膠溶液前鋒到達(dá)過(guò)填充端口 140之前，空氣通過(guò)過(guò)填充端口 140有效地從電泳隔室中排出。在功能方面，通過(guò)取決于盒的寬度將凝膠溶液前鋒分成兩個(gè)或更多個(gè)節(jié)段，來(lái)實(shí)現(xiàn)改進(jìn)的空氣排出，各個(gè)節(jié)段在最上部位置處具有溢流端口。此外，通過(guò)對(duì)過(guò)填充端口 140選擇合適的形狀和橫截面積，可對(duì)凝膠溶液提供與空氣的排出不同的限流，由此節(jié)段中的凝膠溶液流率將在凝膠溶液前鋒已經(jīng)到達(dá)一個(gè)過(guò)填充端口 140時(shí)降低，并且流率將在其它節(jié)段中提高，以平衡節(jié)段之間的流前峰位置中的任何不平衡。根據(jù)公開(kāi)的實(shí)施例，過(guò)填充端口 140由橫向壁90中的凹部形成，凹部被支承框架30從下面包圍，以形成具有預(yù)先限定的橫截面的狹窄端口。在其它實(shí)施例中，過(guò)填充端口 140可由橫向壁90中的模制貫通孔形成。當(dāng)凝膠溶液已經(jīng)通過(guò)過(guò)填充端口 140到達(dá)過(guò)填充腔室100時(shí)，可停止填充操作，例如通過(guò)在各個(gè)盒10中填充選擇成超過(guò)電泳隔室的容量達(dá)預(yù)先限定的量的固定容量，或者通過(guò)布置成相對(duì)于過(guò)填充腔室在預(yù)先限定的位置處檢測(cè)流前鋒的一個(gè)或多個(gè)流前鋒檢測(cè)器等。根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，當(dāng)填充壓力檢測(cè)器(未顯示)檢測(cè)到凝膠溶液通過(guò)各個(gè)過(guò)填充端口進(jìn)入過(guò)填充腔室而產(chǎn)生的填充壓力提高時(shí)，填充停止。根據(jù)一個(gè)實(shí)施例由橫向壁90形成的凝膠隔室的遠(yuǎn)側(cè)區(qū)段在其整個(gè)寬度上朝一個(gè)過(guò)填充端口 140 (未顯示)漸縮。在其它實(shí)施例中，像例如一些下面的實(shí)施例中顯示的那樣，不存在橫向壁90，并且用備選手段處理凝膠填充期間的空氣移除。
[0073]圖4顯示根據(jù)一個(gè)實(shí)施例的下部端盒10的放大部分，其中，填充端口 120包括膜片區(qū)段122，例如隔片，膜片區(qū)段122布置成允許例如呈注射器針等形式的填充噴嘴穿透，以將凝膠溶液饋送到盒10中，但膜片區(qū)段122有效地防止注射溶液在填充噴嘴已經(jīng)被移除時(shí)泄漏出來(lái)，以及防止空氣進(jìn)入到凝膠隔室中。在公開(kāi)的實(shí)施例中，填充端口 120和膜片區(qū)段由彈性材料制成。根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，可與樣本井蓋50在同一步驟中共同模制填充端口120，主要區(qū)別在于，填充端口 120設(shè)計(jì)成永久附連到盒殼體20上，而樣本井蓋則是可撕開(kāi)的。由于兩個(gè)結(jié)構(gòu)都由相同的材料制成，所以填充端口 120可形成為通過(guò)機(jī)械手段固持在盒殼體20上，諸如通過(guò)在底部切出開(kāi)口，端口 120模制到開(kāi)口中，或者備選地通過(guò)改變盒殼體20的表面，以提高粘合性。在一個(gè)實(shí)施例中，可使用相同的注射端口來(lái)模制填充端口 120和樣本井蓋50，并且結(jié)構(gòu)由樹(shù)脂流道連結(jié)，從而在它們之間留下連接部件121。連接部件例如可形成為在樣本井蓋50移除之后破裂,或者可在樣本井蓋50移除之后切斷。
[0074]圖5顯示與盒殼體20脫開(kāi)的電泳凝膠單元35，它例如由支承框架30形成，其中，凝膠部件36附連到支承框架30的頂面上。因此形成的凝膠部件36是基本平坦的部件，其具有上部面和下部面和前面限定的樣本分離區(qū)。支承框架30布置成保持凝膠部件36的形狀，以及促進(jìn)操作凝膠部件36，同時(shí)形成為允許接近凝膠部件的上部面和下部面的基本對(duì)應(yīng)于分離區(qū)的區(qū)段。如將在下面顯示的那樣，在任一面處的區(qū)段凝膠部件36的可接近區(qū)段可大于分離區(qū)，但為了允許通過(guò)免疫印跡使從凝膠部件36分離的樣本恰當(dāng)?shù)剞D(zhuǎn)移到例如印跡膜片，在任一面處的可接近區(qū)段不應(yīng)更小。
[0075]圖6顯示電泳托盤(pán)300的示意圖，電泳托盤(pán)300與電泳盒10相容，以使用電泳盒10來(lái)進(jìn)行電泳實(shí)驗(yàn)。在圖6中，托盤(pán)300被公開(kāi)為單獨(dú)的結(jié)構(gòu)，但它便利地可為電泳設(shè)備的組成部分，而且它可由幾個(gè)構(gòu)件組成，并且可包括兩個(gè)或更多個(gè)盒位置，以同時(shí)進(jìn)行兩個(gè)或更多個(gè)電泳實(shí)驗(yàn)。托盤(pán)300包括盒支承表面310，以在電泳期間至少支承電泳盒10的分離區(qū)。盒支承表面310在側(cè)邊有相應(yīng)的一對(duì)緩沖劑墊保持器320a和320b，每一個(gè)緩沖劑墊保持器都布置成使緩沖劑墊322 (例如像圖7a和7b中顯示的那樣)相對(duì)于電泳盒10的背面處的緩沖劑連接區(qū)段保持處于匹配位置。根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，托盤(pán)300包括熱傳遞單元(未顯示)，其連接到盒支承表面310上，以在電泳期間，通過(guò)與電泳盒10的背面的區(qū)段進(jìn)行熱傳遞接觸，來(lái)控制電泳盒10的溫度。在公開(kāi)的實(shí)施例中，托盤(pán)300包括:平坦的頂表面，兩個(gè)緩沖劑墊保持器320a和320b在頂表面中形成為兩個(gè)單獨(dú)的凹部；以及對(duì)齊結(jié)構(gòu)330，其形成為與支承框架30的對(duì)齊翼片180互補(bǔ)，以確保盒10在托盤(pán)有恰當(dāng)有定向。在公開(kāi)的實(shí)施例中，對(duì)齊結(jié)構(gòu)330由伸長(zhǎng)銷340a、圓銷340b和可選的壁部件345構(gòu)成。通過(guò)使銷340a和340b具有不同的橫截面形狀，使對(duì)齊結(jié)構(gòu)不對(duì)稱，由此確保對(duì)齊翼片180和盒10有恰當(dāng)?shù)亩ㄏ?。?dāng)盒10恰當(dāng)?shù)囟ㄎ辉谕斜P(pán)300上時(shí)，支承框架30的緩沖劑狹槽150a和150b定位在相應(yīng)的緩沖劑隔室320a和320b處，以使得在通過(guò)緩沖劑狹槽150a和150b暴露的凝膠(背襯膜40的相應(yīng)的可移除區(qū)段210a和210b被移除)和置于相應(yīng)的緩沖劑墊保持器320a和320b中的緩沖劑墊322 (在圖7a和7b中示意性地顯示)之間能夠有匹配接觸，如圖8a、8b和8c中示意性地顯示的那樣。
[0076]根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，在圖7a和7b中示意性地公開(kāi)的緩沖劑墊322包括杯323，其容納緩沖劑條324和電極組件325。圖7b顯示圖7a的橫截面圖。杯進(jìn)一步包括用于將電極組件325連接到電泳設(shè)備的電源上的外部電連接器326。因此，托盤(pán)300設(shè)有互補(bǔ)的電連接器(未顯示)。杯323形成為配合到緩沖劑墊保持器320a和320b中，使得緩沖劑條324的頂部部分可布置成接觸置于托盤(pán)300上的盒中的凝膠。緩沖劑條324可由結(jié)合在凝膠材料中的緩沖劑物質(zhì)構(gòu)成，例如WO 87/04948中公開(kāi)的類型。例如與將凝膠條直接置于緩沖劑凹部中相比，通過(guò)將緩沖劑條324置于杯323中，大大促進(jìn)了在電泳運(yùn)行之間改變緩沖劑介質(zhì)。如圖7b中公開(kāi)的那樣，凝膠條324可形成有隆起區(qū)段，以促進(jìn)接觸盒10中的凝膠。
[0077]根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，緩沖劑墊322形成為可能與盒10包裝在一起的一次性單元，但在另一個(gè)實(shí)施例中，杯323 (包括電極325)意于重復(fù)與在使用之后被更換的一次性緩沖劑條324 —起使用。根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，緩沖劑墊與例如US 6368481中的電泳盒集成，該專利通過(guò)引用而結(jié)合在本文中。
[0078]圖8b和8c顯示托盤(pán)300和緩沖劑墊保持器320a的示意性側(cè)視圖，緩沖劑墊322置于緩沖劑墊保持器320a中，并且電泳盒10升高略微高于托盤(pán)300的盒支承表面310，處于待對(duì)接到托盤(pán)300中的位置。為了確保緩沖劑墊和緩沖劑連接區(qū)段之間有恰當(dāng)有接觸，在電泳的背面處，緩沖劑墊和緩沖劑連接區(qū)段的匹配可有一定程度的偏壓。這對(duì)于一些凝膠/墊成分尤其重要，其中，可使例如水從墊上傳質(zhì)到凝膠中，由此緩沖劑墊322將收縮。通過(guò)使緩沖劑墊322偏壓在凝膠上，可實(shí)現(xiàn)這樣的情形。通過(guò)對(duì)緩沖劑墊322的凝膠組分選擇適當(dāng)?shù)牟牧蠈傩裕鼈兛捎赡軌蛑辽俨糠值靥峁┢珘浩ヅ涞倪m當(dāng)?shù)膹椥圆牧蠘?gòu)成。在一個(gè)實(shí)施例中，可通過(guò)提供特定形狀的、允許它由于其形狀而進(jìn)行一定程度的壓縮的緩沖劑條來(lái)實(shí)現(xiàn)偏壓匹配。在圖Sb和Sc中公開(kāi)的實(shí)施例中，結(jié)合緩沖劑條的材料特性及其形狀(如圖Sc中公開(kāi)的那樣)，將彈簧元件327引入緩沖劑墊保持器320a中，以提供偏壓匹配。
[0079]在備選實(shí)施例中，緩沖劑墊322可由緩沖劑條代替，緩沖劑條直接置于緩沖劑墊保持器320a和320b中，以及其中，電極組件325單獨(dú)布置在墊保持器中。在另外的未顯示的備選實(shí)施例中，緩沖劑墊322例如可由一容器形成，該容器填充有液體緩沖劑，并且包括電極組件和毛細(xì)作用(wicking)部件等，以與凝膠部件36建立接觸。
[0080]圖8至11示意性地顯示使用電泳盒10和相容的電泳設(shè)備350來(lái)執(zhí)行電泳分離實(shí)驗(yàn)所包括的步驟。一些步驟的單獨(dú)順序可改變。
[0081].將緩沖劑墊322置于托盤(pán)300中的緩沖劑墊保持器320a和320b中(圖8);
?通過(guò)相應(yīng)地拉撕片211a和211b，從盒10中移除背襯膜40的可移除區(qū)段210a和210b，由此凝膠部件36通過(guò)支承框架30的相應(yīng)的緩沖劑狹槽150a和150b暴露(圖9);?移除樣本井蓋50，以暴露樣本井110 (圖9)；
?盒10定位在托盤(pán)300上，其中，支承框架30的對(duì)齊翼片180定位在互補(bǔ)對(duì)齊結(jié)構(gòu)330中，使得確保盒10在托盤(pán)300有恰當(dāng)?shù)亩ㄏ?圖10);
?例如通過(guò)吸移管360等將樣本加載到樣本井110中(圖11)；
?使用電泳設(shè)備350來(lái)執(zhí)行電泳過(guò)程(圖11)。
[0082]在圖11中，對(duì)示意性地公開(kāi)的電泳設(shè)備350提供托盤(pán)加載機(jī)構(gòu)370，其承載電泳托盤(pán)300。根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，電泳設(shè)備350包括熒光成像單元(未顯示)，其用于使分離結(jié)果直接在設(shè)備中成像。照這樣，電泳盒10在分離之后不必移動(dòng)到單獨(dú)的成像單元。如上面提到的那樣，公開(kāi)的盒可設(shè)計(jì)成通過(guò)恰當(dāng)材料選擇和設(shè)計(jì)來(lái)進(jìn)行成像，以避免不合乎需要的光學(xué)作用，諸如盒的一部分發(fā)射的熒光、圖像失真等。盒10和具有凹進(jìn)托盤(pán)中的緩沖劑墊322的電泳托盤(pán)300的公開(kāi)的實(shí)施例的一個(gè)好處在于，產(chǎn)生的電泳裝置的輪廓小，由此成像單元可在非常接近凝膠的地方運(yùn)行，以提高靈敏度和分辨率，以及避免不利的光學(xué)作用。在公開(kāi)的實(shí)施例中，顯示了電泳托盤(pán)300處于基本水平的位置，凝膠盒10布置在其頂部上。但應(yīng)注意的是，電泳托盤(pán)300和凝膠盒10可布置成以其它定向使用，諸如豎向或者甚至上下倒置。
[0083]圖12a至12c示意性地顯示從盒殼體20中移除附連到支承框架30上的凝膠部件36的步驟。
[0084].通過(guò)拉撕片211c，從盒10中移除背襯膜40的可移除區(qū)段210c，由此凝膠部件36的分離區(qū)通過(guò)支承框架30的分離區(qū)窗160暴露(圖12a)；
?通過(guò)拉撕片170，使支承框架30以及附連的凝膠部件36脫開(kāi)(圖12b)；
圖12c顯示已經(jīng)與殼體20脫開(kāi)的電泳凝膠單元35，其由支承框架30以及附連的凝膠部件36構(gòu)成。取決于盒10的物理格式和裝備對(duì)于例如免疫印跡等的接下來(lái)的過(guò)程步驟的格式要求，可以可選地去掉在接下來(lái)的步驟中不使用的支承框架30和凝膠部件36的區(qū)段，如圖12c中的虛線指示的那樣，例如留下較小的支承框架30，其中凝膠部件36的分離區(qū)附連到該較小的支承框架30上。為了保留支承框架的好處，應(yīng)當(dāng)注意，支承框架的足夠部分應(yīng)當(dāng)保持在分離區(qū)窗周圍。圖13顯示電泳凝膠單元35的示例，其中，已經(jīng)移除了支承框架30的端部區(qū)段和凝膠部件36，以便適合圖14至17e中示意性地公開(kāi)的免疫印跡格式。
[0085]圖14顯示用于免疫印跡的膜片單元400，其由膜片410構(gòu)成，膜片410附連到剛性印跡框架420上。像凝膠部件一樣，為了大大改進(jìn)在免疫印跡過(guò)程的步驟中對(duì)膜片單元400的操作，剛性印跡框架420設(shè)計(jì)成在過(guò)程步驟中保持附連到膜片410上。剛性印跡框架420由剛性合適的材料形成，以保持膜片410的形狀，以及通過(guò)在轉(zhuǎn)移區(qū)的外部提供可接近的抓持部分來(lái)促進(jìn)膜片410的操作。正如支承框架30那樣，剛性印跡框架420進(jìn)一步包括對(duì)齊翼片440，其具有呈兩個(gè)對(duì)齊孔450a和450b的形式的預(yù)先限定的對(duì)齊結(jié)構(gòu)，對(duì)齊孔450a和450b布置成確保膜片單元400相對(duì)于轉(zhuǎn)移單元、掃描儀等中的互補(bǔ)對(duì)齊結(jié)構(gòu)(例如包括2個(gè)銷)恰當(dāng)?shù)貙?duì)齊。根據(jù)公開(kāi)的實(shí)施例，對(duì)齊結(jié)構(gòu)450a和450b與凝膠支承框架的對(duì)齊結(jié)構(gòu)190a和190b相容或基本相同。借助于適當(dāng)?shù)氖侄危瑢?duì)齊凝膠部件36和膜片單元400可在轉(zhuǎn)移過(guò)程期間對(duì)齊，以在電泳凝膠的帶和轉(zhuǎn)移帶之間產(chǎn)生已知的幾何構(gòu)造關(guān)系。之后已知的幾何構(gòu)造關(guān)系可用來(lái)相互關(guān)聯(lián)對(duì)相應(yīng)的凝膠和膜片單元400的圖像的評(píng)價(jià)，例如以便從膜片單元400的圖像中相對(duì)于電泳凝膠識(shí)別通道。另外，像凝膠支承框架30 —樣，膜片單元400的對(duì)齊結(jié)構(gòu)450a-b可不對(duì)稱，使得它僅可按一種方式配合到儀器等的互補(bǔ)對(duì)齊結(jié)構(gòu)中，由此它不可按錯(cuò)誤的方式、以上下倒置等方式插入。
[0086]另外，適當(dāng)?shù)貙?duì)剛性印跡框架420提供識(shí)別碼460等，識(shí)別碼460將使得讀取膜片單元400的身份可行。識(shí)別碼460例如可為機(jī)器可讀的代碼，例如條形碼、點(diǎn)陣碼等，并且識(shí)別碼460對(duì)提供用戶和/或儀器提供有關(guān)信息。根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，支承框架30和剛性印跡框架420中的至少一個(gè)由透明材料制成，或者設(shè)有窗，窗布置成在以對(duì)齊位置置于另一個(gè)框架的頂部上時(shí)暴露該另一個(gè)框架的識(shí)別碼(200或460)，由此可在同一操作中讀取兩個(gè)識(shí)別碼，在特定的凝膠部件36和膜片單元400之間產(chǎn)生獨(dú)特的聯(lián)系。
[0087]在公開(kāi)的實(shí)施例中，剛性印跡框架420可由剛性膜構(gòu)成，例如聚合物材料。在此語(yǔ)境中，用語(yǔ)剛性表示膜比膜片剛度更高，而且尤其是在避免膜片輪廓變形的平面上。膜片410可按提供足夠的結(jié)合特性的任何適當(dāng)?shù)姆绞礁竭B到剛性印跡框架420上。根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，膜片410可由成兩個(gè)或更多個(gè)層疊的塑料膜層形成，其中，印跡膜片的一個(gè)或多個(gè)區(qū)段在層疊在塑料膜層之間。塑料層中的一個(gè)或多個(gè)可由剛性聚合物膜構(gòu)成，剛性聚合物膜具有施用到一個(gè)面上的粘合劑層，并且剛性聚合物膜例如可由PET構(gòu)成，而粘合劑層例如可為EVA層。
[0088]如圖14中示意性地公開(kāi)的那樣，膜片410可具有輪廓，輪廓由虛線指示，輪廓形成為覆蓋剛性印跡框架420中的較小的窗470，窗470可用于使用筆等作出手動(dòng)記號(hào)。如將在下面更詳細(xì)地公開(kāi)的那樣，在其它實(shí)施例中，剛性印跡框架420可具有較像框架的剛性結(jié)構(gòu)，其可形成為允許將膜片410定位成與互補(bǔ)電泳凝膠單元35的凝膠部件36接觸。
[0089]圖15顯示海綿部件480，其用來(lái)建立用于電印跡的轉(zhuǎn)移夾層，以便在電轉(zhuǎn)移期間，在電泳凝膠單元35的整個(gè)表面和膜片單元400上面實(shí)現(xiàn)均勻的壓力。在公開(kāi)的實(shí)施例中，海綿部件480設(shè)有可選的對(duì)齊孔，以與面板510a的對(duì)齊結(jié)構(gòu)協(xié)作。海綿部件480可由具有合適的材料特性的任何適當(dāng)?shù)牟牧蠘?gòu)成。
[0090]如提到的那樣，在凝膠支承框架30和剛性印跡框架420上提供對(duì)應(yīng)的對(duì)齊結(jié)構(gòu)使得樣本組分能夠根據(jù)已知的幾何構(gòu)造關(guān)系(例如通過(guò)電印跡)，從凝膠部件36轉(zhuǎn)移到印跡膜片410。圖16顯示用于電印跡的夾層保持器500的示例，其包括相應(yīng)的第一支承件面板510a和第二支承件面板510b。兩個(gè)面板510a和510b中的各個(gè)相應(yīng)地包括網(wǎng)格區(qū)段520a和520b，以允許基本與形成于兩個(gè)面板510和510b之間的轉(zhuǎn)移夾層進(jìn)行不受約束的流體接觸和電接觸。第一支承件面板設(shè)有對(duì)齊結(jié)構(gòu)530a和530b，對(duì)齊結(jié)構(gòu)530a和530b形成為與支承框架30的對(duì)齊翼片180和剛性印跡框架420的對(duì)齊翼片440互補(bǔ)，以便如上面論述的那樣，在電泳凝膠單元35和膜片單元400之間建立已知的幾何構(gòu)造關(guān)系。在公開(kāi)的實(shí)施例中，對(duì)齊結(jié)構(gòu)由伸長(zhǎng)銷530a和圓銷530b組成，它們處于與圖6中顯示的電泳托盤(pán)300的對(duì)齊結(jié)構(gòu)330對(duì)應(yīng)的布置，而且電泳凝膠單元35和膜片單元400兩者都形成為使用所述銷來(lái)相互對(duì)齊。照這樣，電泳凝膠單元35的電泳帶的樣本組分相對(duì)于對(duì)齊結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)移到膜片單元400的對(duì)應(yīng)的幾何構(gòu)造位置。因此在使用包括互補(bǔ)對(duì)齊結(jié)構(gòu)的成像器來(lái)對(duì)電泳凝膠單元35和膜片單元400成像的情況下，圖像將基本對(duì)齊。
[0091]圖17a至17e示意性地顯示用于電印跡的、使用夾層保持器500的轉(zhuǎn)移夾層的組裝:
1.將第一海綿部件480置于第一面板510a上，以便在電轉(zhuǎn)移期間，在電泳凝膠單元35的整個(gè)表面和膜片單元400上面實(shí)現(xiàn)均勻的壓力。在公開(kāi)的實(shí)施例中，海綿部件提供可選的對(duì)齊孔，以與面板510a的對(duì)齊結(jié)構(gòu)協(xié)作(圖17a)；
2.將膜片單元400置于海綿部件480的頂部上(圖17b)；
3.將電泳凝膠單元35置于膜片單元400的頂部上，使得凝膠部件36布置成與膜片410恰當(dāng)接觸(圖17c)；
4.將第二海綿部件480置于電泳凝膠單元35上(圖17d);以及
5.將第二面板510b置于夾層的頂部上，以在電印跡轉(zhuǎn)移過(guò)程期間將夾層保持在一起(圖 17e)；
可選地，可在各個(gè)海綿部件480以及膜片單元400和電泳凝膠單元35中的每一個(gè)之間提供一片過(guò)濾紙或類似的微孔材料。
[0092]在公開(kāi)的實(shí)施例中，將兩個(gè)面板510a和510b顯示為沒(méi)有互連結(jié)構(gòu)等的獨(dú)立面板部件。但在許多應(yīng)用中，具有用以將組裝好的夾層保持在一起的夾持結(jié)構(gòu)等(未顯示)可為適當(dāng)?shù)?。這樣的夾持結(jié)構(gòu)可為面板510a_b中的一個(gè)或兩者的集成結(jié)構(gòu)，或者它可形成為一個(gè)或多個(gè)單獨(dú)的結(jié)構(gòu)。通過(guò)對(duì)海綿部件480選擇適當(dāng)?shù)牟牧蠈傩?，以及在面?10a-b之間選擇適當(dāng)?shù)念A(yù)先限定的距離，在電轉(zhuǎn)移過(guò)程期間，在電泳凝膠單元35和膜片單元400之間實(shí)現(xiàn)良好地限定的壓縮是可行的。
[0093]在電轉(zhuǎn)移過(guò)程之后，進(jìn)一步通過(guò)探測(cè)和成像步驟來(lái)處理膜片單元400，其中，由于存在剛性印跡框架420，大大方便了對(duì)膜片的操作，剛性印跡框架420用作用于抓持膜片的把手，也防止薄膜片折疊和扭絞。此外，印跡框架420的對(duì)齊結(jié)構(gòu)450a-b和信息碼區(qū)域460提供關(guān)于膜片的正確定向的獨(dú)特信息，并且基本防止膜片被錯(cuò)誤地上下倒置地處理。為了進(jìn)一步確保膜片單元400在探測(cè)過(guò)程期間有恰當(dāng)?shù)亩ㄏ?，可提供探測(cè)腔室，其具有上面公開(kāi)的對(duì)應(yīng)的對(duì)齊結(jié)構(gòu)。另外，印跡框架420可促進(jìn)探測(cè)過(guò)程的步驟，因?yàn)樗鼘⑹鼓て?10保持基本平坦，使得它可較容易地浸入探測(cè)介質(zhì)等中。另外可行的是通過(guò)以機(jī)械的方式將印跡框架420往下壓來(lái)抵靠著(例如)探測(cè)腔室的底部以機(jī)械的方式壓住膜片單元400，從而不接觸膜片。
[0094]如前面提到的那樣，通過(guò)在電泳凝膠單元35和膜片單元400兩者上提供對(duì)齊結(jié)構(gòu)，對(duì)齊結(jié)構(gòu)可用來(lái)提供電泳凝膠單元35和膜片單元400的對(duì)齊的成像，由此可大大方便接下來(lái)的圖像評(píng)價(jià)步驟。取決于對(duì)齊結(jié)構(gòu)的精度，以及圖像評(píng)價(jià)步驟的要求，機(jī)械對(duì)齊可直接用于評(píng)價(jià)，或者它可是精確的電子對(duì)齊(例如通過(guò)圖像分析軟件)的非常好的起點(diǎn)。圖18示意性地顯示膜片單元400，其置于如前面參照?qǐng)D11論述的聯(lián)合式電泳和成像設(shè)備350的托盤(pán)300上，其中，托盤(pán)的對(duì)齊結(jié)構(gòu)也用來(lái)對(duì)齊膜片單元400。
[0095]根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，提供一種進(jìn)行電泳實(shí)驗(yàn)的方法，其包括以下步驟，
提供電泳盒，其包括在殼體中的凝膠部件，殼體具有正面和背面； 提供電泳托盤(pán)，其布置成支承電泳盒，以進(jìn)行電泳實(shí)驗(yàn)，其中，托盤(pán)包括用于在電泳期間至少支承電泳盒的分離區(qū)的盒支承表面，以及其中，盒支承表面在側(cè)邊有一對(duì)緩沖劑墊保持器，每一個(gè)緩沖劑墊保持器都布置成使緩沖劑墊相對(duì)于電泳盒的背面處的緩沖劑連接區(qū)段保持處于匹配位置；
將緩沖劑墊布置在緩沖劑墊保持器中；
將電泳盒置于托盤(pán)上的位置上；
將樣本加載到電泳盒的一個(gè)或多個(gè)樣本井中；以及在緩沖劑墊之間應(yīng)用電場(chǎng)。
[0096]圖19a和19b顯示盒殼體21和22的兩個(gè)示意性示例，它們分別通過(guò)提供相應(yīng)的縱向壁部件91和92來(lái)提供單獨(dú)的電泳通道。在圖19a的實(shí)施例中，縱向壁91在樣本井110處終止，在殼體21的端部處留下公共隔室。因此，可通過(guò)一個(gè)填充端口 120來(lái)填充包括殼體21的盒10，并且所有通道都將填充有相同的凝膠成分。在圖19b的實(shí)施例中，縱向壁92一直延伸到殼體22的緣邊70，從而對(duì)各個(gè)通道產(chǎn)生單獨(dú)的凝膠隔室，并且各個(gè)通道包括其本身的填充端口 121。盒殼體21和22分別可與根據(jù)以上任一實(shí)施例的可脫開(kāi)的凝膠支承框架30、可分段移除式背襯膜40和可移除式樣本井蓋50結(jié)合。
[0097]圖20a_h顯示另一個(gè)示意性實(shí)施例電泳盒600，其包括剛性凝膠支承框架610、具有樣本加載開(kāi)口 625的可移除式頂層膜620、可移除式樣本開(kāi)口蓋630和可分段移除式背襯膜640。如圖20e和20g中公開(kāi)的那樣，盒600進(jìn)一步包括樣本井形成器650，樣本井形成器650形成為在開(kāi)口蓋630已經(jīng)被移除時(shí)布置在樣本加載開(kāi)口 625的頂部上，使得樣本井形成器650接觸模制在盒中的凝膠的表面，形成用于將樣本加載到盒600中的一個(gè)或多個(gè)樣本井。井形成器650可具有適當(dāng)數(shù)量的井，而且可提供具有不同數(shù)量的井的樣本井加載器，以便提供靈活的解決方案。
[0098]凝膠支承框架610包括具有預(yù)先限定的高度的外部框架660，其進(jìn)一步限定模制在盒610中的凝膠的高度。凝膠支承框架610的頂面由包圍凝膠隔室680的頂部緣邊670構(gòu)成，凝膠隔室680由凝膠支承框架610中的貫通開(kāi)口限定。凝膠支承框架610的底面包括對(duì)應(yīng)的底部緣邊690。頂層膜620可脫開(kāi)地附連到頂部緣邊670上，并且可分段移除式背襯膜640可脫開(kāi)地附連到底部緣邊690上，從而分別在頂部和底部處封閉凝膠隔室680，以允許將電泳凝膠部件700模制在其中。為了在凝膠支承框架610和模制在其中的凝膠部件700之間建立結(jié)實(shí)的互連，凝膠支承框架610設(shè)有凝膠附連緣邊710，凝膠附連緣邊710從外部框架660向內(nèi)延伸到凝膠隔室中。凝膠附連緣邊710比外部框架660更薄，并且因而比凝膠部件700更薄，以便在一側(cè)被覆蓋，或者完全結(jié)合到凝膠部件中。根據(jù)公開(kāi)的實(shí)施例，凝膠附連緣邊710可進(jìn)一步包括互連結(jié)構(gòu)720，互連結(jié)構(gòu)720加強(qiáng)凝膠與附連緣邊710的機(jī)械互連。互連結(jié)構(gòu)720例如可為附連緣邊710中的貫通孔,或者可為附連緣邊710中的切口，或者將在模制之后被凝膠填充以促進(jìn)互連的一系列其它結(jié)構(gòu)。
[0099]凝膠支承框架610設(shè)有呈對(duì)齊孔191a至191c的形式的預(yù)先限定的對(duì)齊結(jié)構(gòu)，它們布置成確保盒600和/或支承框架610相對(duì)于電泳設(shè)備等中的互補(bǔ)對(duì)齊結(jié)構(gòu)(例如包括3個(gè)銷)恰當(dāng)?shù)貙?duì)齊。如圖20a-h中公開(kāi)的那樣，在頂層膜620中提供對(duì)應(yīng)的對(duì)齊孔191a至191c，但不在可分段移除式背襯膜640的緩沖劑區(qū)段641a和641b中提供對(duì)應(yīng)的孔。照這樣，防止用戶在不首先移除可分段移除式背襯膜640的緩沖劑區(qū)段641a和641b以便露出呈對(duì)齊孔191a至191c的形式的對(duì)齊結(jié)構(gòu)的情況下將盒600配合到例如電泳設(shè)備中。因而避免了在有保護(hù)性緩沖劑區(qū)段641a和641b的情況下進(jìn)行電泳過(guò)程的風(fēng)險(xiǎn)，從而防止凝膠部件與緩沖劑墊等進(jìn)行電化學(xué)接觸。
[0100]像在盒10中那樣，背襯膜640可分段移除，并且包括兩個(gè)緩沖劑區(qū)段641a和641b和中心區(qū)段641c，緩沖劑區(qū)段布置成暴露凝膠部件700的端部區(qū)段，以便使凝膠部件接觸相應(yīng)的緩沖劑墊等(未顯示)，并且中心區(qū)段641c布置成允許在電泳分離之后接近分離區(qū)，這與以上內(nèi)容很像。通過(guò)選擇適當(dāng)?shù)牟牧辖M合和粘合技術(shù)，可將背襯膜640附連到底部緣邊690上，使得例如操作者可通過(guò)抓住和拉相應(yīng)的撕片642a-c來(lái)移除相應(yīng)的區(qū)段641a_c。
[0101]圖20f顯示處于啟用狀態(tài)的電泳盒600，其中移除了開(kāi)口蓋630，而圖20g則顯示電泳盒600，其中井形成器650就位，這樣就可加載樣本，以執(zhí)行電泳分離。此外,在圖20f和20g中，兩個(gè)緩沖劑區(qū)段641a和641b被移除，并且在圖20g中，與相應(yīng)的緩沖劑墊的連接由箭頭指示。在分離完成之后，移除頂層膜620和中心區(qū)段641c，以允許從頂部和底部接近分離區(qū)，同時(shí)凝膠部件仍然附連到凝膠支承框架610上。
[0102]圖21a_h顯示電泳盒730的另一個(gè)示意性實(shí)施例，其類似于圖20a_h的實(shí)施例，電泳盒730包括剛性凝膠支承框架610、可分段移除式頂層膜740和可移除式背襯膜750。如圖20a和20b中公開(kāi)的那樣，盒730進(jìn)一步包括聯(lián)合式樣本井形成器和緩沖劑隔室760和緩沖劑隔室770，它們?cè)谝韵聲r(shí)候形成為在可分段移除式頂層膜740的第一區(qū)段741a和第二區(qū)段741b已經(jīng)移除時(shí)布置在電泳盒730的頂部，使得它們接觸模制在盒730中的凝膠的表面，形成一個(gè)或多個(gè)樣本井，以將樣本加載到盒730以及在凝膠部件700的頂部上形成緩沖劑儲(chǔ)槽中，如圖21g中顯示的那樣。井形成器760可具有適當(dāng)數(shù)量的井，而且可提供具有不同數(shù)量的井的樣本井加載器，以便提供靈活的解決方案。
[0103]因而，在圖21a_h的實(shí)施例中，電泳盒730設(shè)計(jì)成使得緩沖劑在凝膠部件700的頂部上，并且可按凝膠墊的形式或者可能以液體的形式提供緩沖劑。在電泳分離之后，移除可分段移除式頂層膜740的區(qū)段741c和背襯膜750，并且凝膠部件700仍然得到支承框架610的支承，如圖2 Ih中顯示的那樣。
[0104]圖22a示意性地顯示剛性凝膠支承框架610，其具有可滲透或半透性背襯780，背襯780布置成與凝膠部件建立結(jié)實(shí)互連，以及實(shí)際上用作凝膠部件的加強(qiáng)件。可滲透背襯780例如可為由適當(dāng)?shù)碾娊^緣材料制成的網(wǎng)、穿孔或多孔片材或膜，它可從任一側(cè)對(duì)凝膠部件提供充分的電化學(xué)接觸。在公開(kāi)的實(shí)施例中，顯示了可滲透背襯780附連到支承框架610上，但如本文公開(kāi)的那樣，可滲透背襯780可附連到任何適當(dāng)?shù)闹С薪Y(jié)構(gòu)上。此外，可滲透背襯780可形成為進(jìn)一步的結(jié)構(gòu)支承，以補(bǔ)充支承框架。圖22b示意性地顯示膜類型的支承框架31，其具有可滲透背襯780，可滲透背襯780附連到膜中的開(kāi)口上面，或者形成為其組成部分，例如通過(guò)提供穿孔的或以別的方式被修改的區(qū)段151和161，以對(duì)凝膠部件提供充分的電化學(xué)接觸。
[0105]圖23a_23g顯示包括具有集成的電泳和免疫印跡功能的“凝膠卡”800、“印跡卡”900和“轉(zhuǎn)移卡”820的示意性蛋白質(zhì)分析概念?？?00、810和820具有與以上實(shí)施例相同的許多特征，并且關(guān)于任一實(shí)施例所顯示的許多特征都同樣可在其它實(shí)施例中實(shí)現(xiàn)。圖23a在俯視圖中顯示凝膠卡800，而圖23b則在適于顯示卡的集成結(jié)構(gòu)的示意性橫截面圖中顯示相同的凝膠卡800。凝膠卡800包括剛性支承件框架830，其具有后壁805，后壁805限定凹部，凹部形成凝膠隔室，以在其中模制凝膠部件850。凝膠隔室850的頂部被可移除地附連到支承框架830的頂面上的覆蓋膜860封閉。凝膠卡800進(jìn)一步包括集成的緩沖劑墊870a和870b和相關(guān)聯(lián)的電極871a和871b，電極871a和871b布置成連接到電源，以驅(qū)動(dòng)電泳過(guò)程，例如通過(guò)凝膠卡800的背面處的連接表面。緩沖劑墊870a和870b例如可為海綿類型，其布置成在使凝膠卡800準(zhǔn)備好進(jìn)行電泳過(guò)程的過(guò)程期間吸收緩沖劑溶液，備選地，緩沖劑墊可“預(yù)填充”有例如呈凝膠形式等的緩沖劑。在公開(kāi)的實(shí)施例中，凝膠部件在分離區(qū)處設(shè)計(jì)有比樣本加載和緩沖劑相互作用節(jié)段更小的厚度。例如通過(guò)提供附連到覆蓋膜860上的模具結(jié)構(gòu)等，樣本加載井880直接在凝膠中形成。
[0106]凝膠卡800的支承框架830進(jìn)一步包括后壁805，后壁805具有可移除區(qū)段865，以允許接近凝膠部件850的背面。像以上實(shí)施例那樣，凝膠卡800包括呈相應(yīng)的3個(gè)對(duì)齊孔870a - 870c的形式的對(duì)齊結(jié)構(gòu)，對(duì)齊結(jié)構(gòu)在邊緣附近，以借助于相互對(duì)齊結(jié)構(gòu)，允許凝膠卡800與印跡卡810和轉(zhuǎn)移卡820恰當(dāng)?shù)貙?duì)齊。為了進(jìn)一步方便電泳系統(tǒng)(包括凝膠卡800)的用戶，在其一個(gè)或多個(gè)面上設(shè)有印刷的操作指令。操作指令進(jìn)一步由在凝膠卡800的面的有關(guān)位置處的數(shù)字指示符實(shí)現(xiàn)。使用凝膠卡800的順序包括以下步驟:
1.移除蓋860；
2.將樣本添加到井880中；
3.將緩沖劑添加到緩沖劑墊870a和870b中；
4.插入處理器設(shè)備中，進(jìn)行電泳分離。
[0107]圖23c在俯視圖中顯示印跡卡900，而圖23d則在適于顯示卡的集成結(jié)構(gòu)的示意性橫截面圖中顯示相同的印跡卡900。印跡卡900包括剛性框架910，其形狀和結(jié)構(gòu)對(duì)應(yīng)于凝膠卡800。印跡膜片920附連到剛性框架910的一側(cè)上，在轉(zhuǎn)移步驟之前移除的薄覆蓋膜850的一側(cè)被覆蓋，并且印跡膜片920的背面被緩沖劑墊930覆蓋。
[0108]圖23e在俯視圖中顯示轉(zhuǎn)移卡960，而圖23f則在適于顯示卡的集成結(jié)構(gòu)的示意性橫截面圖中顯示轉(zhuǎn)移卡960。轉(zhuǎn)移卡960包括剛性框架965，其形狀和結(jié)構(gòu)對(duì)應(yīng)于凝膠卡800和印跡卡900。緩沖劑墊970布置在剛性框架965的正面上，并且被薄的覆蓋膜980覆蓋。如將根據(jù)圖23g明顯的緩沖劑墊930，轉(zhuǎn)移卡960的緩沖劑墊970布置成從剛性框架965的正面延伸一距離，以便布置成通過(guò)凝膠卡后壁805的可移除區(qū)段865與凝膠進(jìn)行電化學(xué)接觸。
[0109]像凝膠卡800—樣，印跡卡900和轉(zhuǎn)移卡960包括呈相應(yīng)的3個(gè)對(duì)齊孔940a - 940c和990a-990c的形式的對(duì)齊結(jié)構(gòu)，其在邊緣附近，以借助于相互對(duì)齊結(jié)構(gòu)，允許在凝膠卡800、印跡卡900和轉(zhuǎn)移卡960之間有恰當(dāng)對(duì)齊。像對(duì)凝膠卡800那樣，印跡卡900在其一個(gè)或多個(gè)面上提供印刷的操作指令。使用印跡卡900的順序包括以下步驟:
1.移除蓋950；
2.使用對(duì)齊結(jié)構(gòu)，將經(jīng)處理的凝膠卡對(duì)接到凝膠卡800的正面；
3.移除凝膠卡后壁805的可移除區(qū)段865，以允許接近凝膠部件850的背面；
4.移除轉(zhuǎn)移卡960的蓋980；
5.使用對(duì)齊結(jié)構(gòu)，將轉(zhuǎn)移卡960對(duì)接到凝膠卡800的背面；
6.插入到印跡器(未顯示)中，以進(jìn)行印跡處理；
7.全部分開(kāi)； 8.移除印跡卡的緩沖劑墊930，以釋放膜片；
9.插入到培養(yǎng)箱中；
10.插入到處理器中，以對(duì)印跡結(jié)果成像。
[0110]在圖25g中示意性地公開(kāi)直到步驟5提供的成疊堆的卡。從這可看出，成疊堆的卡提供使分離的樣本從分離區(qū)對(duì)齊地轉(zhuǎn)移到印跡卡的印跡膜片920中的轉(zhuǎn)移疊堆，像在上面的實(shí)施例中那樣，但區(qū)別在于，公開(kāi)的實(shí)施例布置成進(jìn)行半干性電轉(zhuǎn)移，其中，印跡卡900的緩沖劑墊930和970和轉(zhuǎn)移卡960分別對(duì)電轉(zhuǎn)移過(guò)程提供期望的緩沖劑條件。
[0111]根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，對(duì)成疊堆的卡提供集成的扣鎖型相互對(duì)齊結(jié)構(gòu)，以在電印跡的過(guò)程期間進(jìn)一步促進(jìn)操作。
[0112]像上面的實(shí)施例中那樣，本發(fā)明的電泳盒和膜片單元分別可被稱為電泳凝膠卡和印跡膜片卡。
[0113]根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，提供一種電泳系統(tǒng)，其包括:
至少一類電泳凝膠卡，
至少一類印跡膜片卡，
電泳設(shè)備，其用于使用電泳凝膠卡來(lái)進(jìn)行電泳實(shí)驗(yàn)，
印跡轉(zhuǎn)移單元，其用于使分離的樣本從電泳凝膠卡轉(zhuǎn)移到印跡膜片卡，
成像設(shè)備，其用于記錄電泳凝膠卡和印跡膜片卡中的分離的樣本的圖像，其中；
電泳凝膠卡和印跡膜片卡各自包括剛性支承件，剛性支承件設(shè)有對(duì)齊結(jié)構(gòu)，對(duì)齊結(jié)構(gòu)用于限定位置基準(zhǔn)，以在轉(zhuǎn)移期間實(shí)現(xiàn)相互對(duì)齊，以及相對(duì)于成像設(shè)備中的互補(bǔ)對(duì)齊結(jié)構(gòu)對(duì)齊，以提供電泳凝膠卡和印跡膜片卡中的分離的樣本的以機(jī)械的方式對(duì)齊的圖像。
[0114]為了提供相互對(duì)齊，電泳系統(tǒng)可包括轉(zhuǎn)移保持器，其具有互補(bǔ)對(duì)齊結(jié)構(gòu)，以使電泳凝膠卡和印跡膜片卡在印跡轉(zhuǎn)移單元中保持處于相互對(duì)齊位置。在圖16和17中顯示這種轉(zhuǎn)移保持器500的一個(gè)示意性示例。如上面公開(kāi)，電泳凝膠卡可包括殼體，殼體具有用以暴露凝膠部件的第一面和第二面的可移除部件，以允許在凝膠部件附連到剛性支承件上的同時(shí)，對(duì)分離的樣本進(jìn)行印跡轉(zhuǎn)移。電泳凝膠卡可進(jìn)一步包括至少一個(gè)可移除部件，為了進(jìn)行電泳工作流中的至少一個(gè)步驟，必須移除該可移除部件，以及其中，可移除部件形成為至少部分地阻擋對(duì)齊結(jié)構(gòu)，以防止在未首先移除可移除部件的情況下進(jìn)行所述步驟。例如在圖20a-20h的實(shí)施例中示意性地顯示了這種情況。電泳凝膠卡可設(shè)有預(yù)澆鑄凝膠，或者可選地，提供凝膠卡，使得用戶自己可將凝膠模制在凝膠卡中。根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，如圖25b中示意性地公開(kāi)的那樣，電泳凝膠卡可包括集成的緩沖劑隔室和可選的電極。
[0115]為了提供獨(dú)特的定向和避免不恰當(dāng)定位，電泳凝膠卡和印跡膜片卡的對(duì)齊結(jié)構(gòu)形成為限定相應(yīng)的卡的獨(dú)特的定向。根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，電泳凝膠卡和印跡膜片卡的對(duì)齊結(jié)構(gòu)包括至少一個(gè)對(duì)齊孔，以及其中，互補(bǔ)對(duì)齊結(jié)構(gòu)包括互補(bǔ)的對(duì)齊銷。
[0116]為了提供獨(dú)特的識(shí)別，電泳凝膠卡和印跡膜片卡可各自包括識(shí)別碼，并且識(shí)別碼可布置成在為了轉(zhuǎn)移而相互對(duì)齊時(shí)同時(shí)讀取，以在所述卡之間建立獨(dú)特的聯(lián)系，而且系統(tǒng)可布置成存儲(chǔ)所述聯(lián)系。識(shí)別碼例如可為機(jī)器可讀代碼，例如條形碼、點(diǎn)陣碼等，并且對(duì)用戶和/或儀器提供有關(guān)信息。根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，成像設(shè)備可布置成讀取布置成成像的卡的識(shí)別碼，而且在一個(gè)實(shí)施例中，成像設(shè)備可布置成基于布置成成像的卡的登記識(shí)別碼來(lái)選擇成像協(xié)議。
[0117]根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，電泳凝膠卡可包括識(shí)別碼，識(shí)別碼布置成轉(zhuǎn)移到印跡轉(zhuǎn)移處的印跡膜片卡。識(shí)別碼可按電化學(xué)的方式從電泳凝膠卡轉(zhuǎn)移到印跡膜片卡。
[0118]根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，提供一種分離和識(shí)別方法，其包括以下步驟:
通過(guò)電泳使電泳凝膠卡中的樣本分離，電泳凝膠卡包括剛性支承件，剛性支承件設(shè)有限定位置基準(zhǔn)的對(duì)齊結(jié)構(gòu)；
使用具有互補(bǔ)對(duì)齊結(jié)構(gòu)的成像器來(lái)獲取在電泳凝膠卡中分離的樣本的圖像，以及其中，電泳凝膠卡的對(duì)齊結(jié)構(gòu)布置成與互補(bǔ)對(duì)齊結(jié)構(gòu)對(duì)齊；
使樣本組分從凝膠卡轉(zhuǎn)移到印跡膜片卡，印跡膜片卡包括剛性支承件，剛性支承件設(shè)有限定位置基準(zhǔn)的對(duì)齊結(jié)構(gòu)，其中，電泳凝膠卡和印跡膜片卡布置成借助于對(duì)齊結(jié)構(gòu)來(lái)相互對(duì)齊；
獲取印跡轉(zhuǎn)移卡上的轉(zhuǎn)移的樣本組分的圖像，其中，印跡轉(zhuǎn)移卡的對(duì)齊結(jié)構(gòu)布置成與成像器的互補(bǔ)對(duì)齊結(jié)構(gòu)對(duì)齊；以及
分析圖像，這包括基于相互對(duì)齊而使圖像相互關(guān)聯(lián)的步驟。
[0119]因而對(duì)凝膠部件和/或印跡膜片提供支承框架的概念對(duì)基于電泳和免疫印跡的蛋白質(zhì)分析系統(tǒng)提供全方位的好處。
【權(quán)利要求】
1.一種電泳托盤(pán)，其布置成支承用于進(jìn)行電泳實(shí)驗(yàn)的電泳盒，所述電泳盒包括在殼體中的凝膠部件，所述殼體具有正面和背面， 其中，所述托盤(pán)包括用于在電泳期間至少支承所述電泳盒的所述分離區(qū)的盒支承表面，以及其中，所述盒支承表面在側(cè)邊有一對(duì)緩沖劑墊保持器，每一個(gè)緩沖劑墊保持器都布置成使緩沖劑墊相對(duì)于所述電泳盒的所述背面處的緩沖劑連接區(qū)段保持在匹配位置上。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的電泳托盤(pán)，其特征在于，所述電泳托盤(pán)包括熱傳遞單元，所述熱傳遞單元連接到所述盒支承表面上，以在電泳期間，通過(guò)與所述電泳盒的所述背面的區(qū)段進(jìn)行熱傳遞接觸，來(lái)控制所述電泳盒的溫度。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的電泳托盤(pán)，其特征在于，所述電泳托盤(pán)形成為對(duì)所述緩沖劑墊和所述電泳盒的所述背面處的所述緩沖劑連接區(qū)段提供偏壓匹配。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的電泳托盤(pán)，其特征在于，所述緩沖劑墊沿偏壓方向加載了彈簧。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至4中的任一項(xiàng)所述的電泳托盤(pán)，其特征在于，所述緩沖劑墊由彈性材料構(gòu)成。
6.根據(jù)權(quán)利要求1至5中的任一項(xiàng)所述的電泳托盤(pán)，其特征在于，各個(gè)緩沖劑墊保持器包括緩沖劑杯，所述緩沖劑杯具有用于保持緩沖劑墊的隔室。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的電泳托盤(pán)，其特征在于，所述緩沖劑杯包括用于與置于所述隔室中的緩沖劑墊進(jìn)行電交互的電極組件。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的電泳托盤(pán)，其特征在于，所述緩沖劑杯包括在所述隔室外部的、用于將所述電極組件連接到電源上的至少一個(gè)電連接器。
9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的電泳托盤(pán)，其特征在于，所述緩沖劑杯布置成接收連接到電源上的電極組件。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的電泳托盤(pán)，其特征在于，所述緩沖劑杯包括用于接收所述電極組件的一個(gè)或多個(gè)開(kāi)口。
11.根據(jù)權(quán)利要求6至10中的任一項(xiàng)所述的電泳托盤(pán)，其特征在于，所述緩沖劑杯隔室和所述緩沖劑墊相互楔合，以相對(duì)于彼此以預(yù)定定向配合。
12.根據(jù)前述權(quán)利要求中的任一項(xiàng)所述的電泳托盤(pán)，其特征在于，所述盒支承表面和所述緩沖劑墊保持器的所述匹配位置基本布置在共同的平面上，以支承具有基本平坦的背面的電泳盒。
13.根據(jù)前述權(quán)利要求中的任一項(xiàng)所述的電泳托盤(pán)，其特征在于，所述電泳托盤(pán)形成為扁平托盤(pán)單元，其具有形成為所述托盤(pán)單元中的凹部的緩沖劑墊保持器。
14.根據(jù)權(quán)利要求2至13中的任一項(xiàng)所述的電泳托盤(pán)，其特征在于，所述熱傳遞表面在熱的方面由固態(tài)熱泵單元控制。
15.根據(jù)權(quán)利要求2至14中的任一項(xiàng)所述的電泳托盤(pán)，其特征在于，通過(guò)與冷卻介質(zhì)的熱傳遞來(lái)在熱的方面控制所述熱傳遞表面。
16.根據(jù)前述權(quán)利要求中的任一項(xiàng)所述的電泳托盤(pán)，其特征在于，所述電泳托盤(pán)包括與電泳盒的對(duì)齊結(jié)構(gòu)互補(bǔ)的對(duì)齊結(jié)構(gòu)，以確保所述盒在所述托盤(pán)上有恰當(dāng)定向。
17.根據(jù)前述權(quán)利要求中的任一項(xiàng)所述的電泳托盤(pán)，其特征在于，所述電泳托盤(pán)包括用于將所述電泳盒固定在所述托盤(pán)上的位置上的夾持器件。
18.—種電泳設(shè)備，其包括根據(jù)前述權(quán)利要求中的任一項(xiàng)所述的電泳托盤(pán)。
19.根據(jù)權(quán)利要求18所述的電泳設(shè)備，其特征在于，包括布置成對(duì)布置在所述托盤(pán)上的電泳盒成像的光學(xué)成像單元。
20.一種緩沖劑杯，其用于根據(jù)權(quán)利要求6至11中的任一項(xiàng)所述的電泳托盤(pán)。
21.一種緩沖劑墊，其用于根據(jù)權(quán)利要求1至17中的任一項(xiàng)所述的電泳托盤(pán)。
22.一種電泳盒，其適于與根據(jù)權(quán)利要求1至17中的任一項(xiàng)所述的電泳托盤(pán)一起使用。
23.一種進(jìn)行電泳實(shí)驗(yàn)的方法，包括以下步驟， 提供電泳盒，其包括在殼體中的凝膠部件，所述殼體具有正面和背面， 提供電泳托盤(pán)，其布置成支承所述電泳盒，以進(jìn)行電泳實(shí)驗(yàn)，其中，所述托盤(pán)包括盒支承表面，以在電泳期間，至少支承所述電泳盒的所述分離區(qū)，以及其中，所述盒支承表面在側(cè)邊有一對(duì)緩沖劑墊保持器，每一個(gè)緩沖劑墊保持器都布置成使緩沖劑墊相對(duì)于所述電泳盒的所述背面處的緩沖劑連接區(qū)段保持在匹配位置上， 將緩沖劑墊布置在所述緩沖劑墊保持器中， 將所述電泳盒置于所述托盤(pán)上的位置上， 將樣本裝載到所述電泳盒的一個(gè)或多個(gè)樣本井中，以及 在所述緩沖劑墊之間施加電場(chǎng)。
【文檔編號(hào)】G01N27/26GK104321642SQ201380028135
【公開(kāi)日】2015年1月28日 申請(qǐng)日期:2013年5月31日 優(yōu)先權(quán)日:2012年5月31日
【發(fā)明者】O.薩爾文, C.拉森, H.奧斯特林, S.肖蘭德, K.斯特里斯伯格-弗里登, P.奧利維尤森, T.豪卡拉, K.拉森, A.雅格 申請(qǐng)人:通用電氣健康護(hù)理生物科學(xué)股份公司