甲肝疫苗接種效果快速評(píng)價(jià)試劑盒的制作方法
【專利摘要】本實(shí)用新型屬于生物檢測(cè)領(lǐng)域，具體涉及一種甲肝疫苗接種效果快速評(píng)價(jià)試劑盒。所述試劑盒包括盒體、裝有樣品稀釋液的容器和檢測(cè)試紙，所述檢測(cè)試紙是由底板（1）和相互緊密搭接粘貼在底板上的樣品墊（6）、抗原墊（5）、標(biāo)記物結(jié)合墊（4）、包被膜（3）和吸收墊（2）組成，根據(jù)WHO推薦的甲肝抗體最低保護(hù)滴度水平，將試劑盒的最低檢測(cè)線設(shè)定為20mIU/ml，用于檢測(cè)血清/血漿/全血中的抗甲型肝炎病毒IgG抗體。本實(shí)用新型所述的試劑盒成本低廉，制備工藝簡(jiǎn)單，檢測(cè)血清抗體的結(jié)果與ELISA試劑盒的結(jié)果無顯著差異適，可以用于甲肝疫苗接種后免疫效果的快速評(píng)價(jià)。
【專利說明】甲肝疫苗接種效果快速評(píng)價(jià)試劑盒

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實(shí)用新型屬于生物檢測(cè)領(lǐng)域，具體涉及一種甲肝疫苗接種效果快速評(píng)價(jià)試劑盒。

【背景技術(shù)】
[0002]甲型病毒性肝炎是由甲型肝炎病毒(甲肝病毒，HAV)引起的急性肝臟炎癥，主要表現(xiàn)為食欲減退、惡心嘔吐、乏力、肝大及肝功異常，病初常有發(fā)熱，臨床經(jīng)過常呈自限性，絕大多數(shù)患者在數(shù)周內(nèi)可恢復(fù)正常。在許多發(fā)展中國(guó)家，80%以上的青少年急性病毒性肝炎為甲型肝炎病毒感染，在發(fā)達(dá)國(guó)家，甲型肝炎也是較為常見的急性病毒性肝炎。
[0003]HAV屬于微小核糖核酸病毒科嗜肝病毒屬,人是HAV的唯一宿主,主要通過糞口途徑在人與人之間傳播，尤其是密切接觸者間的傳播更為明顯，年幼的兒童及青少年具有較高的感染率而且通常為無癥狀感染者，因此是潛在的感染源。
[0004]預(yù)防甲肝流行的有效措施主要是接種甲肝疫苗。我國(guó)的擴(kuò)大國(guó)家免疫規(guī)劃已將甲肝疫苗列入常規(guī)免疫程序，每年大約有數(shù)千萬兒童接受免疫接種。這提示我們，有必要對(duì)甲肝疫苗的群體免疫效果進(jìn)行評(píng)價(jià)。評(píng)價(jià)疫苗免疫效果最可靠的方法就是檢測(cè)接種者體內(nèi)血清中的特異抗體的含量。當(dāng)前市場(chǎng)上檢測(cè)風(fēng)疹抗體的商品化試劑盒多采用酶聯(lián)免疫法和化學(xué)發(fā)光法，這些方法雖然靈敏度高、結(jié)果準(zhǔn)確、化學(xué)發(fā)光試劑還可以對(duì)抗體進(jìn)行定量，但在實(shí)際操作上存在諸多不便，如步驟復(fù)雜、耗時(shí)較長(zhǎng)，還需使用特定的儀器設(shè)備；試劑盒需4°C保存；對(duì)樣品要求靜脈采血等，不易在基層普及運(yùn)用。
[0005]免疫膠體金快速診斷技術(shù)是建立在酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、乳膠凝集試驗(yàn)、單克隆抗體技術(shù)和免疫膠體金標(biāo)記技術(shù)基礎(chǔ)上，以膠體金為標(biāo)記物，利用特異的抗原抗體反應(yīng)放大反應(yīng)信號(hào)，通過直接觀察就可以判定結(jié)果的新技術(shù)。該技術(shù)具有簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確和無污染等優(yōu)點(diǎn)，在臨床醫(yī)學(xué)檢測(cè)、動(dòng)物醫(yī)學(xué)檢測(cè)、激素檢測(cè)、食品安全檢測(cè)、藥物殘留和毒品快速檢測(cè)等諸多診斷領(lǐng)域迅速發(fā)展。目前，膠體金標(biāo)記的快速檢測(cè)抗體的檢測(cè)試紙都是由樣品墊、標(biāo)記物結(jié)合墊、包被膜(其上劃有檢測(cè)線、質(zhì)控線)和吸收墊組成，根據(jù)檢測(cè)原理的不同大體分為兩種:一種是將抗原標(biāo)金，在標(biāo)記物結(jié)合墊上包被膠體金標(biāo)記的抗原，在包被膜上用待測(cè)抗體的抗體劃膜得到檢測(cè)T線；另一種是將抗原劃膜，在標(biāo)記物結(jié)合墊上包被膠體金標(biāo)記的待測(cè)抗體的抗體，在包被膜上用抗原劃膜得到檢測(cè)T線?，F(xiàn)有研究表明:因?yàn)榭贵w蛋白性質(zhì)較為穩(wěn)定，所以對(duì)抗體蛋白的膠體金標(biāo)記較為穩(wěn)定，因此上述第一種方法所述的抗原的膠體金標(biāo)記則存在頗多問題，因?yàn)榭乖酁椴《绢?，性質(zhì)多樣，有的大小甚至比膠體金顆粒還大，且穩(wěn)定性較差，因此很難直接將抗原標(biāo)記在膠體金顆粒上；即使勉強(qiáng)能將抗原標(biāo)記上，也需要抗原達(dá)到極高的純度，而對(duì)抗原病毒的純化是一項(xiàng)難度較大、成本較高的工程；也有人尋找抗原的重組抗原來代替這些天然抗原，但是很多抗原很難尋到能替代的重組抗原，而且即使有，成本也是極高的，由此說明，上述第一種方法的局限性比較高。上述的第二種方法使用待測(cè)抗體的抗體進(jìn)行金標(biāo)記，這種方法可以避免抗原金標(biāo)記的問題，但在包被膜上使用抗原劃膜得到檢測(cè)T線，需要抗原具有較高的濃度和純度，這也增加了產(chǎn)品生產(chǎn)的成本和難度；另外將抗原劃到膜上，由于抗原穩(wěn)定性較差，抗原劃膜后很難長(zhǎng)時(shí)間保存，因此試紙條的有效期極短。這些都是限制抗體快速檢測(cè)類試劑盒快速發(fā)展的原因。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本實(shí)用新型針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，目的在于提供一種甲肝疫苗接種效果快速評(píng)價(jià)試劑盒，用該試劑盒對(duì)接種者體內(nèi)血清中的甲肝病毒IgG抗體進(jìn)行膠體金法快速檢測(cè)，可以實(shí)現(xiàn)對(duì)甲肝疫苗接種效果的快速評(píng)價(jià)。
[0007]本實(shí)用新型所采用的技術(shù)方案為:
[0008]甲肝疫苗接種效果快速評(píng)價(jià)試劑盒，包括盒體、裝有樣品稀釋液的容器和檢測(cè)試紙，所述裝有樣品稀釋液的容器和檢測(cè)試紙位于盒體內(nèi)，其特征在于，所述檢測(cè)試紙是由底板和相互緊密搭接粘貼在底板上的樣品墊、抗原墊、標(biāo)記物結(jié)合墊、包被膜和吸收墊組成，所述抗原墊上包被有甲肝抗原，所述標(biāo)記物結(jié)合墊上包被有膠體金標(biāo)記的鼠抗甲肝單克隆抗體，所述包被膜上固定有檢測(cè)T線和質(zhì)控C線，所述檢測(cè)T線上包被有鼠抗人IgG抗體，所述質(zhì)控C線上包被有羊抗鼠IgG抗體；所述檢測(cè)試紙的最低檢測(cè)線為20mIU/ml。
[0009]按上述方案，所述抗原墊為玻璃纖維、無紡布或聚酯膜。
[0010]按上述方案，所述底板為PVC底板，所述PVC底板的一面為雙面膠。
[0011]按上述方案，所述包被膜為硝酸纖維素膜。
[0012]按上述方案，所述標(biāo)記物結(jié)合墊和樣品墊為玻璃纖維，所述吸收墊為吸水紙。
[0013]按上述方案，所述樣品稀釋液為含磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、氯化鈉和疊氮鈉的混合水溶液。
[0014]按上述方案，所述抗原墊的制備方法為:使用抗原保護(hù)液將甲肝抗原進(jìn)行稀釋后均勻鋪在玻璃纖維、無紡布或聚酯膜上，置于37°C，相對(duì)濕度低于40%的環(huán)境中，干燥4小時(shí)，制成抗原墊；所述抗原保護(hù)液的配方為:Na2HP045.72g，NaH2PO40.624g，檸檬酸三鈉8.5g，蔗糖10g，疊氮鈉lg，水定容至1L;所述甲肝抗原為粗抗原，其中抗原的含量為40wt %?50wt % ο
[0015]本實(shí)用新型中，所述試劑盒中檢測(cè)試紙的檢測(cè)原理為:在樣品墊加入血清或血漿或全血樣品，再加入2?3滴樣品稀釋液，若樣品中含有甲肝病毒IgG抗體，其將和抗原墊中的甲肝抗原形成甲肝抗原-甲肝病毒IgG抗體復(fù)合物，該復(fù)合物向前移動(dòng)，復(fù)合物中的甲肝抗原再與標(biāo)記物結(jié)合墊中的膠體金標(biāo)記的鼠抗甲肝單克隆抗體結(jié)合，形成甲肝病毒IgG抗體-甲肝抗原-膠體金標(biāo)記的鼠抗甲肝單克隆抗體免疫復(fù)合物，該復(fù)合物由于層析作用沿紙條向前移動(dòng)，至檢測(cè)T線，復(fù)合物中的甲肝病毒IgG抗體與檢測(cè)T線上包被的鼠抗人IgG抗體反應(yīng)形成鼠抗人IgG抗體-甲肝病毒IgG抗體-甲肝抗原-膠體金標(biāo)記的鼠抗甲肝單克隆抗體免疫復(fù)合物，該復(fù)合物可聚集在檢測(cè)區(qū)，當(dāng)聚集的復(fù)合物達(dá)到一定的數(shù)量時(shí)，則形成一條肉眼可見的條帶(T線)，判斷結(jié)果為陽性；若樣品中不含有或含很少量的甲肝病毒IgG抗體，則不能形成免疫復(fù)合物，即不能形成肉眼可見的條帶，判斷結(jié)果為陰性；C線作為試劑的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)，陽性和陰性檢測(cè)樣品均會(huì)產(chǎn)生條帶。
[0016]同時(shí)，依據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)推薦的血清中甲肝病毒的最低保護(hù)抗體滴度水平為20mIU/ml，即當(dāng)接種者體內(nèi)甲肝病毒抗體的濃度彡20mIU/ml，說明甲肝疫苗接種成功，當(dāng)接種者體內(nèi)甲肝病毒抗體的濃度<20mIU/ml，說明甲肝疫苗接種不成功。本實(shí)用新型中，將試劑盒的靈敏度設(shè)置為20mIU/ml，甲肝病毒IgG抗體的檢測(cè)結(jié)果為陽性即表明甲肝疫苗免疫成功，甲肝病毒IgG抗體的檢測(cè)結(jié)果為陰性即表明甲肝疫苗免疫不成功。因此，本實(shí)用新型所述的試劑盒可以實(shí)現(xiàn)快速評(píng)價(jià)甲肝疫苗的接種效果。
[0017]本實(shí)用新型試劑盒的使用方法:甲肝將檢測(cè)試紙平放，在樣品墊加入5μ I血樣，再加入2?3滴樣品稀釋液，用肉眼直接觀察在20分鐘內(nèi)檢測(cè)T線和質(zhì)控C線的顯色情況:質(zhì)控C線不顯色，說明本試驗(yàn)失??；質(zhì)控C線顯色，檢測(cè)T線不顯色說明甲肝疫苗接種不成功；質(zhì)控C線和檢測(cè)T線均顯色說明甲肝疫苗接種成功。
[0018]本實(shí)用新型的有益效果:
[0019](I)與現(xiàn)有技術(shù)相比，本實(shí)用新型所述的檢測(cè)試紙?jiān)黾恿丝乖瓑|的結(jié)構(gòu)，通過在抗原墊上加入抗原保護(hù)液并包被甲肝抗原，在標(biāo)記物結(jié)合墊上包被鼠抗甲肝單克隆抗體，解決了甲肝病毒抗原由于穩(wěn)定性差而不容易被金標(biāo)記的問題；另一方面，本實(shí)用新型采用鼠抗人IgG抗體劃膜得到檢測(cè)T線，因?yàn)榭贵w相比較為穩(wěn)定，因此試紙條的有效期極長(zhǎng)。
[0020](2)本實(shí)用新型所述甲肝抗原為粗抗原，不需對(duì)粗抗原進(jìn)一步純化就能達(dá)到反應(yīng)效果，這是因?yàn)樵谠嚰垪l反應(yīng)層析過程中，已經(jīng)通過雙抗體夾心法對(duì)粗抗原進(jìn)行了篩選和純化，保證了試劑反應(yīng)的特異性，因此檢測(cè)試紙的制備成本低，利于推廣；實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，利用本實(shí)用新型所述的檢測(cè)試紙檢測(cè)抗體，檢測(cè)的結(jié)果與ELISA檢測(cè)結(jié)果一致。
[0021](3)與現(xiàn)有技術(shù)相比，本實(shí)用新型所述的試劑盒具有快速、簡(jiǎn)便、靈敏、特異的特點(diǎn)，擺脫了試劑對(duì)設(shè)備、儀器、人員及儲(chǔ)存盒運(yùn)輸環(huán)境的特殊要求，將試劑盒的靈敏度設(shè)置為20mIU/ml，可以實(shí)現(xiàn)對(duì)甲肝疫苗接種效果的快速評(píng)估。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0022]圖1為本實(shí)用新型的試劑盒整體結(jié)構(gòu)示意圖，其中A-盒體，B-裝有樣品稀釋液的容器，C-檢測(cè)試紙，D-說明書。
[0023]圖2為本實(shí)用新型的試劑盒中檢測(cè)試紙的結(jié)構(gòu)示意圖，其中，1-底板，2-吸收墊，3-包被膜，4-標(biāo)記物結(jié)合墊，5-抗原墊，6-樣品墊，7-質(zhì)控C線，8-檢測(cè)T線。

【具體實(shí)施方式】
[0024]為了更好地理解本實(shí)用新型，下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步闡明本實(shí)用新型的內(nèi)容，但本實(shí)用新型的內(nèi)容不僅僅局限于下面的實(shí)例。
[0025]如圖1所示，甲肝疫苗接種效果快速評(píng)價(jià)試劑盒，其特征在于，包括盒體A、裝有樣品稀釋液的容器B和檢測(cè)試紙C，所述裝有樣品稀釋液的容器B和檢測(cè)試紙C位于盒體A內(nèi)，所述檢測(cè)試紙是由底板I和相互搭接粘貼在底板上的樣品墊6、抗原墊5、標(biāo)記物結(jié)合墊4、包被膜3和吸收墊2組成，所述抗原墊上包被有甲肝抗原，所述標(biāo)記物結(jié)合墊上包被有膠體金標(biāo)記的鼠抗甲肝單克隆抗體，所述包被膜上固定有檢測(cè)T線8和質(zhì)控C線7，所述檢測(cè)T線上包被有鼠抗人IgG抗體，所述質(zhì)控C線上包被有羊抗鼠IgG抗體；所述檢測(cè)試紙的最低檢測(cè)線為20mIU/ml。
[0026]盒體A內(nèi)放置有說明書D。
[0027]所述樣品稀釋液為含磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、氯化鈉和疊氮鈉的混合水溶液。以下實(shí)施例中，樣本稀釋液的組分為磷酸氫二鈉5.72g，磷酸二氫鈉0.624g，氯化鈉Sg，疊氮鈉0.5g，超純水定容至1L。
[0028]所述底板為PVC底板，所述PVC底板的一面為雙面膠。
[0029]所述包被膜為硝酸纖維素膜；所述抗原墊為玻璃纖維、無紡布或聚酯膜。
[0030]所述標(biāo)記物結(jié)合墊和樣品墊為玻璃纖維，所述吸收墊為吸水紙。
[0031]所述抗原墊通過使用抗原保護(hù)液將甲肝抗原進(jìn)行稀釋后均勻鋪在玻璃纖維、無紡布或聚酯膜上獲得，所述抗原為粗抗原，其中抗原的含量為40wt%? 50wt%。
[0032]實(shí)施例1甲肝疫苗接種效果快速評(píng)價(jià)試劑盒
[0033]主要材料
[0034]抗原:甲肝病毒抗原，購(gòu)自武漢賽欣生物技術(shù)有限公司，用于制備抗原墊。鼠抗人IgG抗體，購(gòu)自廈門波生生物技術(shù)有限公司，用于硝酸纖維素膜T線的包被。
[0035]鼠抗甲肝單克隆抗體，購(gòu)自武漢賽欣生物技術(shù)有限公司，用于標(biāo)記膠體金。
[0036]羊抗鼠IgG抗體，購(gòu)自杭州隆基生物技術(shù)有限公司，用于硝酸纖維素膜質(zhì)控C線的包被。
[0037]氯金酸:sigma公司產(chǎn)品。
[0038]硝酸纖維素膜:miIIipore公司產(chǎn)品。
[0039]牛血清白蛋白(BSA)、酪蛋白:sigma公司產(chǎn)品。
[0040]其余化學(xué)試劑均為分析純?cè)噭?br> [0041]臨床血清由公司在武漢市血液中心獲得，其中甲肝病毒IgG抗體陽性225份，IgG抗體陰性樣本75份。
[0042]甲肝病毒IgG抗體檢測(cè)試劑盒(ELISA法):購(gòu)自濰坊三維生物工程集團(tuán)有限公司。國(guó)內(nèi)已注冊(cè)的商用產(chǎn)品。
[0043]2、標(biāo)記物結(jié)合墊的制備
[0044]氯金酸-檸檬酸三鈉還原法制備直徑為40nm的膠體金溶液，制備完成后，取10ml膠體金溶液置于磁力攪拌器上緩慢攪拌，調(diào)節(jié)PH至8.0，然后按每10ml膠體金溶液0.5mg抗體加入鼠抗甲肝病毒單克隆抗體0.5mg，繼續(xù)攪拌30min，再加入終濃度為1%的BSA進(jìn)行封閉，繼續(xù)攪拌30min。標(biāo)記結(jié)束后，以10000r/min對(duì)標(biāo)記液進(jìn)行離心,棄上清,然后將沉淀用復(fù)溶溶液進(jìn)行復(fù)溶至原體積。所述復(fù)溶溶液的配方為:Trisl.965g，Casein-Na2.5g，檸檬酸三鈉2.5g，吐溫-20 0.50ml，蔗糖10.0g，疊氮鈉1.0g，用超純水定容至1L。將復(fù)溶好的金標(biāo)記溶液按每ml溶液鋪18cm2的比例均勻鋪在玻璃纖維上，置于37°C，相對(duì)濕度低于20%的環(huán)境中，干燥12?18小時(shí)，制成標(biāo)記物結(jié)合墊。
[0045]3、抗原墊的制備
[0046]將獲得的甲肝病毒抗原使用抗原保護(hù)液稀釋到8倍得到抗原液，將稀釋好的抗原液按每ml溶液鋪18cm2的比例均勻鋪在玻璃纖維上，置于37°C，相對(duì)濕度低于40%的環(huán)境中，干燥4小時(shí)，制成抗原墊。所述抗原保護(hù)液的配方為:Na2HP045.72g，NaH2PO40.624g，檸檬酸三鈉8.5g,鹿糖1g,疊氮鈉lg，純化水定容至1L。
[0047]4、包被膜的制備
[0048]使用0.02M，pH為7.2的磷酸鹽緩沖液將鼠抗人IgG抗體(T線溶液)稀釋成1.5mg/ml，羊抗鼠IgG(C線溶液)稀釋至1.0mg/ml。然后使用劃膜儀將T線與C線溶液按1.5ul/cm的出液量均勻地包被于NC膜上，NC膜已事先黏貼于塑料底板上，包被完成后，將NC膜置于37°C，相對(duì)濕度低于40%的環(huán)境中，干燥3?4小時(shí)，制成包被膜。
[0049]5、甲肝病毒IgG抗體檢測(cè)試紙的組裝
[0050]在干燥環(huán)境下(溫度20?25°C，相對(duì)濕度低于30% )，將包被膜置于潔凈環(huán)境中，在NC膜的T線端，標(biāo)記物結(jié)合墊(結(jié)合墊已事先切裁成6mm寬)緊密壓接NC膜2mm，抗原墊(抗原墊已事先切裁成1mm寬)緊密壓接標(biāo)記物結(jié)合墊另一側(cè)2mm，樣品墊緊密壓接抗原墊另一側(cè)4?5mm,最后用切條機(jī)將貼好的底板切成4_寬的試紙條。
[0051]6、甲肝病毒IgG抗體檢測(cè)試紙的使用方法
[0052]將待檢血清或血漿或全血(待檢樣品)平衡至室溫，上述制備好的檢測(cè)試紙平放于試驗(yàn)臺(tái)上，在樣品墊處加入5ul待檢樣品，再加入2?3滴樣品稀釋液，若樣品中含有甲肝病毒IgG抗體，樣品加入后，甲肝IgG抗體先與抗原墊中甲肝抗原形成抗原-甲肝病毒IgG抗體復(fù)合物，復(fù)合物向前移動(dòng)，與標(biāo)記物結(jié)合墊中的金標(biāo)記的鼠抗甲肝單克隆抗體形成甲肝IgG抗體-甲肝抗原-金標(biāo)記的鼠抗甲肝單克隆抗體免疫復(fù)合物，該復(fù)合物由于層析作用沿紙條向前移動(dòng)，至檢測(cè)T線與鼠抗人IgG抗體反應(yīng)形成鼠抗人IgG抗體-人甲肝IgG抗體-甲肝抗原-金標(biāo)記的鼠抗甲肝單克隆抗體免疫復(fù)合物，該復(fù)合物可聚集在檢測(cè)區(qū)，當(dāng)聚集的復(fù)合物達(dá)到一定的數(shù)量時(shí)，則形成一條肉眼可見的條帶(T線)，判斷結(jié)果為陽性；若樣品中不含有或含很少量的甲肝病毒IgG抗體，則不能形成免疫復(fù)合物，則不能形成肉眼可見的條帶，判斷結(jié)果為陰性。C線作為試劑的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)，陽性和陰性檢測(cè)樣品均會(huì)產(chǎn)生條帶。用肉眼直接觀察試紙條在20分鐘內(nèi)的出線情況，并判定檢測(cè)結(jié)果。
[0053]7、根據(jù)世界衛(wèi)生組織規(guī)定的甲肝病毒IgG抗體的最低保護(hù)滴度為20mIU/ml，當(dāng)甲肝病毒IgG抗體濃度> 20mIU/ml說明人體對(duì)甲肝病毒具有抵抗性，當(dāng)甲肝病毒IgG抗體濃度< 20mIU/ml說明人體對(duì)甲肝病毒還沒有產(chǎn)生抵抗性，因此本試紙條將檢測(cè)甲肝病毒IgG抗體的檢測(cè)臨界值設(shè)置為20mIU/ml，T線顯線表明甲肝病毒IgG抗體的濃度彡20mIU/ml,甲肝疫苗接種成功^線不顯線表明甲肝病毒IgG抗體的濃度<20mIU/ml，甲肝疫苗沒有接種成功。
[0054]8、臨床樣品檢測(cè)結(jié)果對(duì)照
[0055]對(duì)公司收集的臨床血清樣本使用本申請(qǐng)所述檢測(cè)試紙及商用檢測(cè)ELISA試劑盒同時(shí)進(jìn)行檢測(cè)，再對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行對(duì)照。
[0056]以ELISA試劑盒為對(duì)照，對(duì)甲肝病毒IgG抗體進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)出225份甲肝IgG陽性樣本，75份甲肝IgG陰性樣本，而本申請(qǐng)?jiān)嚰垪l檢測(cè)出224份甲肝IgG陽性樣本，76份甲肝IgG陰性樣本，總體符合率為99.33%。臨床檢測(cè)結(jié)果表明，本申請(qǐng)檢測(cè)試紙的的性能和ELISA試劑盒相比無顯著差異，說明本實(shí)用新型所述的試劑盒適合用于臨床檢驗(yàn)，具有實(shí)用價(jià)值。
[0057]顯然，上述實(shí)施例僅僅是為清楚地說明所作的實(shí)例，而并非對(duì)實(shí)施方式的限制。對(duì)于所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在上述說明的基礎(chǔ)上還可以做出其它不同形式的變化或變動(dòng)。這里無需也無法對(duì)所有的實(shí)施方式予以窮舉。而因此所引申的顯而易見的變化或變動(dòng)仍處于本實(shí)用新型創(chuàng)造的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.甲肝疫苗接種效果快速評(píng)價(jià)試劑盒，包括盒體、裝有樣品稀釋液的容器和檢測(cè)試紙，所述裝有樣品稀釋液的容器和檢測(cè)試紙位于盒體內(nèi)，其特征在于，所述檢測(cè)試紙是由底板和相互緊密搭接粘貼在底板上的樣品墊、抗原墊、標(biāo)記物結(jié)合墊、包被膜和吸收墊組成，所述抗原墊上包被有甲肝抗原，所述標(biāo)記物結(jié)合墊上包被有膠體金標(biāo)記的鼠抗甲肝單克隆抗體，所述包被膜上固定有檢測(cè)T線和質(zhì)控C線，所述檢測(cè)T線上包被有鼠抗人IgG抗體，所述質(zhì)控C線上包被有羊抗鼠IgG抗體；所述檢測(cè)試紙的最低檢測(cè)線為20mIU/ml。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述抗原墊為玻璃纖維、無紡布或聚酯膜。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述底板為PVC底板，所述PVC底板的一面為雙面膠。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述包被膜為硝酸纖維素膜。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述標(biāo)記物結(jié)合墊和樣品墊為玻璃纖維，所述吸收墊為吸水紙。
【文檔編號(hào)】G01N33/577GK204203233SQ201420633783
【公開日】2015年3月11日 申請(qǐng)日期:2014年10月29日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月29日
【發(fā)明者】吳邊, 張薇, 金玉翠, 倪龍泉, 龔華岳, 王方杰 申請(qǐng)人:武漢生命科技股份有限公司