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      一種糧油中轉(zhuǎn)基因成分的快速檢測裝置的制作方法

      文檔序號:11110040閱讀:665來源:國知局
      一種糧油中轉(zhuǎn)基因成分的快速檢測裝置的制造方法
      本發(fā)明涉及食品轉(zhuǎn)基因成分快速檢測
      技術(shù)領(lǐng)域
      ,具體地,涉及一種糧油中轉(zhuǎn)基因成分的快速檢測裝置。
      背景技術(shù)
      :為了增強作物抗蟲害、抗病毒等的能力;提高農(nóng)產(chǎn)品耐貯性,增加作物產(chǎn)量。轉(zhuǎn)基因作物是現(xiàn)在育種領(lǐng)域的新熱點,通過基因工程技術(shù)將一種或幾種外源性基因轉(zhuǎn)移到某種特定的生物體中,并使其有效地表達(dá)出相應(yīng)的產(chǎn)物(多肽或蛋白質(zhì)),此過程叫轉(zhuǎn)基因。轉(zhuǎn)基因生物的安全評價是轉(zhuǎn)基因生物及其產(chǎn)品市場化和商品化的前提,在安全評價中轉(zhuǎn)基因成分的檢測是一項重要內(nèi)容,建立轉(zhuǎn)基因生物快速、簡便、準(zhǔn)確的檢測方法為安全評價和管理奠定基礎(chǔ)。植物性轉(zhuǎn)基因食品的檢測主要采用以下兩條技術(shù)路線,一是應(yīng)用PCR、Southern等技術(shù)檢測插入的外源基因,二是使用Elisa、Western等檢測轉(zhuǎn)基因表達(dá)的蛋白。蛋白質(zhì)水平的檢測,主要是基于抗原和抗體相互作用的免疫學(xué)方法,針對轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品中外源目的基因表達(dá)的特異性蛋白進(jìn)行定性和定量檢測,其結(jié)果相對更加精準(zhǔn),可靠性也更好。但是目前的檢測手段基本都是分子生物學(xué)方法,通常需要依賴具備良好實驗條件的實驗室進(jìn)行,而且步驟繁瑣,通常需要專業(yè)的實驗人員進(jìn)行操作,獲取實驗結(jié)果過程比較man,不能滿足一些需要快速檢出轉(zhuǎn)基因成分的機構(gòu)。技術(shù)實現(xiàn)要素:針對現(xiàn)有技術(shù)上的不足,本發(fā)明提供一種糧油中轉(zhuǎn)基因成分的快速檢測裝置。為了解決上述技術(shù)問題,本發(fā)明通過以下技術(shù)方案得以實現(xiàn):一種糧油中轉(zhuǎn)基因成分的快速檢測裝置,包括加樣裝置、多根中空纖維素聚丙烯膜和多孔板體,所述中空纖維聚丙烯膜上附著有與總蛋白中的轉(zhuǎn)基因蛋白質(zhì)特異性結(jié)合的一抗,所述加樣裝置包括第2多孔板體,第2多孔板體上設(shè)置有與其形成一空腔的圓錐體,所述圓錐體直徑由下到上逐漸減小,所述多根中空纖維聚丙烯膜的一端固定在所述第2多孔板體且與所述第2多孔板體上的孔洞連通,所述多根中空纖維聚丙烯膜的另一端固定在所述第1多孔板體且與所述第1多孔板體上的孔洞連通,當(dāng)總蛋白通過所述檢測裝置時,封閉所述第1多孔板體上的孔洞,以使總蛋白的流動僅發(fā)生在所述多根中空纖維聚丙烯膜的一端和所述中空纖維聚丙烯膜的膜孔之間,使該轉(zhuǎn)基因蛋白質(zhì)與所述一抗結(jié)合并附著到所述中空纖維聚丙烯膜上。相對于現(xiàn)有技術(shù),本發(fā)明的有益效果:1、本發(fā)明設(shè)計簡單,使用方便,易于操作。2、本發(fā)明創(chuàng)造性地將轉(zhuǎn)基因表達(dá)蛋白的抗體固定在纖維聚丙烯膜,從而通過使待檢測原材料的總蛋白流過該檢測裝置來檢測原材料中是否存在轉(zhuǎn)基因蛋白質(zhì),能夠有效快速地檢測是否存在轉(zhuǎn)基因蛋白。3、本發(fā)明同時設(shè)置兩個加樣孔,兩組中空纖維聚丙烯膜,因而本發(fā)明的裝置可以同時進(jìn)行兩組樣品檢測。4、本發(fā)明的裝置檢測轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品,準(zhǔn)確度較高,達(dá)到96%左右,雖然還沒有達(dá)到熒光定量PCR的準(zhǔn)確度,但是本發(fā)明的檢測裝置檢測快速,檢測步驟簡便,耗時短,對于精度要求不高的現(xiàn)場快速檢測,本發(fā)明的裝置完全可以滿足。本發(fā)明的檢測裝置其10次檢測的偏差率在7%左右,表明使用本發(fā)明的裝置檢測結(jié)果穩(wěn)定性較好,其檢測結(jié)果更具有客觀性。附圖說明此處的附圖被并入說明書中并構(gòu)成本說明書的一部分,示出了符合本發(fā)明的實施例,并與說明書一起用于解釋本發(fā)明的原理。圖1是本發(fā)明的結(jié)構(gòu)示意圖。具體實施方式結(jié)合以下實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步描述。圖1是示例性實施例示出的一種糧油中轉(zhuǎn)基因成分的快速檢測裝置的結(jié)構(gòu)示意圖,如圖1所示:一種糧油中轉(zhuǎn)基因成分的快速檢測裝置,包括加樣裝置、多根中空纖維素聚丙烯膜和多孔板體,所述中空纖維聚丙烯膜上附著有與總蛋白中的轉(zhuǎn)基因蛋白質(zhì)特異性結(jié)合的一抗,所述加樣裝置包括第2多孔板體,第2多孔板體上設(shè)置有與其形成一空腔的圓錐體,所述圓錐體直徑由下到上逐漸減小,所述多根中空纖維聚丙烯膜的一端固定在所述第2多孔板體且與所述第2多孔板體上的孔洞連通,所述多根中空纖維聚丙烯膜的另一端固定在所述第1多孔板體且與所述第1多孔板體上的孔洞連通,當(dāng)總蛋白通過所述檢測裝置時,封閉所述第1多孔板體上的孔洞,以使總蛋白的流動僅發(fā)生在所述多根中空纖維聚丙烯膜的一端和所述中空纖維聚丙烯膜的膜孔之間,使該轉(zhuǎn)基因蛋白質(zhì)與所述一抗結(jié)合并附著到所述中空纖維聚丙烯膜上。優(yōu)選地,所述圓錐體設(shè)置2個,每個圓錐體設(shè)置一組與其對應(yīng)的中空纖維聚丙烯膜,每一組中空纖維聚丙烯膜獨立設(shè)置,一邊同時檢測多個待測樣品。優(yōu)選地,每一組中空纖維聚丙烯膜設(shè)置5-15根,每根長10-20cm;每根中空纖維聚丙烯膜自己形成有一個腔,每根中空纖維聚丙烯膜的直徑為10~20mm。更優(yōu)選地,以上所述糧油中轉(zhuǎn)基因成分的快速檢測裝置,可以用于玉米、水稻、高粱、小麥和大豆的轉(zhuǎn)基因成分快速檢測,也可以用于玉米、水稻、高粱、小麥和大豆的加工品轉(zhuǎn)基因成分快速檢測。本發(fā)明創(chuàng)造性地將轉(zhuǎn)基因表達(dá)蛋白的抗體固定在纖維聚丙烯膜,從而通過使待檢測原材料的總蛋白流過該檢測裝置來檢測原材料中是否存在轉(zhuǎn)基因蛋白質(zhì),能夠有效快速地檢測是否存在轉(zhuǎn)基因蛋白。本發(fā)明同時設(shè)置兩個加樣孔,兩組中空纖維聚丙烯膜,因而本發(fā)明的裝置可以同時進(jìn)行兩組樣品檢測。以下示例性地介紹一種使用本發(fā)明的檢測裝置的糧油中轉(zhuǎn)基因成分的快速檢測方法,包括以下步驟:S1.提取待測樣品的總蛋白質(zhì);S2.將S1得到的總蛋白質(zhì)注射加樣孔,封閉所述第一多孔板體上的孔洞,以使總蛋白的流動僅發(fā)生在所述多根中空纖維聚丙烯膜的一端和所述中空纖維聚丙烯膜的膜孔之間,使該轉(zhuǎn)基因蛋白質(zhì)與所述一抗結(jié)合進(jìn)而附著到所述中空纖維聚丙烯膜上;S3打開所述第一多孔板體上的孔洞,洗滌所述中空纖維聚丙烯膜的腔中的殘渣;S4再次封閉所述第一多孔板體上的孔洞,將與所述轉(zhuǎn)基因蛋白質(zhì)特異性結(jié)合的且?guī)в袠?biāo)記的二抗注射到所述檢測裝置的加樣孔,使二抗通過所述檢測裝置;S5.再次打開所述第一多孔板體上的孔洞,洗滌所述中空纖維聚丙烯膜的腔中的殘渣;S6.利用DAB辣根過氧化物酶顯色試劑盒檢測所述中空纖維聚丙烯膜上是否存在所述二抗的標(biāo)記,若存在所述標(biāo)記,則認(rèn)為該總蛋白中存在該轉(zhuǎn)基因蛋白,并判斷該原材料中存在轉(zhuǎn)基因成分。本發(fā)明糧油中轉(zhuǎn)基因成分的快速檢測裝置,將轉(zhuǎn)基因蛋白質(zhì)的第一抗體附著在中空纖維聚丙烯膜上,從而通過使待檢測原材料的總蛋白流過該檢測裝置來檢測原材料中是否存在轉(zhuǎn)基因蛋白質(zhì),并且通過注射器將蛋白質(zhì)液體加入到本發(fā)明的檢測裝置中,易于操作,本發(fā)明的裝置能夠有效快速地檢測是否存在轉(zhuǎn)基因蛋白,依照本發(fā)明的方法能快速檢測轉(zhuǎn)基因蛋白,本發(fā)明的方法對于轉(zhuǎn)基因蛋白的檢測快速、準(zhǔn)確,效率高。實驗例由于本發(fā)明的原理是使用轉(zhuǎn)基因產(chǎn)物蛋白質(zhì)與其抗體結(jié)合,進(jìn)而檢測是否存在外源基因。為了驗證本發(fā)明的可行性和準(zhǔn)確性及穩(wěn)定性,本實驗例同時使用靈敏度較高的熒光定量PCR進(jìn)行驗證。取同樣的待測樣品,分別使用本發(fā)明的裝置和熒光定量PCR進(jìn)行檢測,本發(fā)明裝置為實驗組,熒光定量PCR為對照組,每個處理重復(fù)3次,結(jié)果取平均值計算,結(jié)果如表1所示:表1樣品實驗組準(zhǔn)確度對照組準(zhǔn)確度10次偏差率面粉95.7%99.3%5.9%稻米96.5%99.1%7.1%玉米97.2%98.9%6.5%綜合表1可以知,使用本發(fā)明的裝置檢測轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品,準(zhǔn)確度較高,達(dá)到96%左右,雖然還沒有達(dá)到熒光定量PCR的準(zhǔn)確度,但是本發(fā)明的檢測裝置檢測快速,檢測步驟簡便,耗時短,對于精度要求不高的現(xiàn)場快速檢測,本發(fā)明的裝置完全可以滿足。本發(fā)明的檢測裝置其10次檢測的偏差率在7%左右,表明使用本發(fā)明的裝置檢測結(jié)果穩(wěn)定性較好,其檢測結(jié)果更具有客觀性。最后應(yīng)當(dāng)說明的是,以上實施例僅用以說明本發(fā)明的技術(shù)方案,而非對本發(fā)明保護(hù)范圍的限制,盡管參照較佳實施例對本發(fā)明作了詳細(xì)地說明,本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解,可以對本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換,而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實質(zhì)和范圍。當(dāng)前第1頁1 2 3 
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