本申請涉及體外診斷領(lǐng)域，特別涉及用檢測膽紅素的干化學(xué)試紙及其制備方法。

背景技術(shù)：

1、尿液檢測的臨床常規(guī)檢測的重要項(xiàng)目之一。尿膽紅素陽性可能提示肝細(xì)胞受損或膽道受阻。

2、目前采用干化學(xué)試紙可以半定量地檢測尿液中的膽紅素。這類檢測通常是通過在試紙上吸附能夠與膽紅素反應(yīng)顯色的反應(yīng)試劑，如重氮鹽，當(dāng)將試紙與尿液接觸時(shí)，重氮鹽與尿液中的膽紅素反應(yīng)呈現(xiàn)紫紅色，并基于膽紅素的濃度顯示不同深淺的顏色，從而對尿液中膽紅素的含量呈現(xiàn)半定量的結(jié)果。膽紅素可分為未經(jīng)肝處理的間接膽紅素(或稱為未結(jié)合的膽紅素)和經(jīng)肝與葡萄糖醛酸結(jié)合形成的直接膽紅素(或稱結(jié)合膽紅素)。直接膽紅素能夠直接與重氮鹽反應(yīng)。而間接膽紅素通過分子間氫鍵相互結(jié)合不溶于水，且與血液中的蛋白質(zhì)結(jié)合，不能與重氮鹽直接反應(yīng)，需斷開分子間的氫鍵，并在不形成分子內(nèi)氫鍵時(shí)反應(yīng)發(fā)生更充分，靈敏度提高。間接膽紅素參與檢測反應(yīng)的程度不足將導(dǎo)致檢測結(jié)果不可靠。

3、因此，干化學(xué)試紙中通常還含有加速劑，作用是破壞膽紅素的氫鍵并維持膽紅素結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性不形成分子內(nèi)氫鍵，使膽紅素能與重氮鹽充分反應(yīng)。常用的加速劑是咖啡因，且用量較大。然而咖啡因是國家管控的精神類藥物，其使用受到限制，獲取資質(zhì)難度較大。此外，也有使用亞硝酸鹽作為加速劑，但是亞硝酸鹽是劇毒物質(zhì)，且加速效果不理想。

4、因此，需要提供一種安全性好、檢測結(jié)果準(zhǔn)確性改進(jìn)的尿膽紅素干化學(xué)試紙。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本申請的目的在于提供一種用于檢測膽紅素，特別是尿膽紅素的干化學(xué)試紙的制備試劑，利用該試劑制備干化學(xué)試紙的方法和由此獲得的干化學(xué)試紙，所述干化學(xué)試紙采用卡拉膠、果膠、明膠、瓊脂中的一種或多種作為加速劑，制備過程安全，而且加速效果好，改進(jìn)了試紙檢測的靈敏度和準(zhǔn)確性。

2、為此，第一方面，本發(fā)明提供一種制備用于檢測膽紅素的干化學(xué)試紙的試劑，所述試劑包括主反應(yīng)物、酸、加速劑、加速劑穩(wěn)定劑和溶劑，其中所述加速劑選自卡拉膠、果膠、明膠、瓊脂中的一種或多種。

3、根據(jù)一些實(shí)施方式，所述加速劑的含量為1-5g/l。

4、根據(jù)一些實(shí)施方式，所述試劑的ph值為1.5-3.0，優(yōu)選為1.5-2.5。

5、所述酸用于調(diào)整所述試劑的ph值在上述范圍內(nèi)。根據(jù)一些實(shí)施方式，所述酸選自5-磺基水楊酸、偏磷酸、順丁烯二酸、檸檬酸中的一種或多種，優(yōu)選地，所述酸包括5-磺基水楊酸，更優(yōu)選地，所述酸包括5-磺基水楊酸和順丁烯二酸。

6、根據(jù)一些實(shí)施方式，所述酸的含量為10-30g/l。

7、根據(jù)一些實(shí)施方式，所述加速劑穩(wěn)定劑為d-(+)海藻糖。優(yōu)選地，所述d(+)海藻糖的含量為10-30g/l。

8、根據(jù)一些實(shí)施方式，所述主反應(yīng)物為重氮鹽。優(yōu)選地，所述主反應(yīng)物為2,4-二氯苯重氮鹽。更優(yōu)選地，所述主反應(yīng)物為2,4-二氯苯重氮四氟硼酸鹽。

9、根據(jù)一些實(shí)施方式，所述主反應(yīng)物的含量為0.2-1.0g/l。

10、根據(jù)一些實(shí)施方式，所述溶劑為水。

11、根據(jù)一些實(shí)施方式，所述試劑進(jìn)一步包括0.05-0.1g/l的黃色染料。

12、根據(jù)一些實(shí)施方式，所述試劑以多個(gè)子試劑的形式提供。優(yōu)選地，所述多個(gè)子試劑包括第一試劑和第二試劑，其中所述第一試劑包括溶于所述溶劑中的所述主反應(yīng)物和所述酸；且所述第二試劑包括溶于所述溶劑中的所述加速劑和所述加速劑穩(wěn)定劑。在一些實(shí)施方式中，所述第二試劑還包括0.05-0.1g/l的黃色染料。根據(jù)較優(yōu)的實(shí)施方式，所述試劑用于檢測尿膽紅素的干化學(xué)試紙的制備。

13、第二方面，本發(fā)明提供一種制備用于檢測膽紅素的干化學(xué)試紙的方法，包括用前述試劑浸漬濾紙并干燥的步驟。

14、根據(jù)一些實(shí)施方式，所述試劑以多個(gè)子試劑的形式提供，所述方法包括依次用各所述子試劑處理所述濾紙并干燥的步驟。

15、優(yōu)選地，在所述實(shí)施方式中，所述方法包括：用第一試劑處理所述濾紙并干燥，所述第一試劑包括溶于溶劑中的主反應(yīng)物和酸；并用第二試劑處理被所述第一試劑處理并干燥所得到的濾紙并干燥，所述第二試劑包括溶于所述溶劑中的加速劑、加速劑穩(wěn)定劑和可選的黃色染料。第三方面，本發(fā)明提供一種用于檢測膽紅素的干化學(xué)試紙通過上述方法制備而成。

16、較優(yōu)地，所述干化學(xué)試紙用于檢查尿膽紅素。

17、本發(fā)明采用水溶性蛋白質(zhì)或多糖作為加速劑，能夠有效與斷開分子間氫鍵的游離膽紅素結(jié)合，阻止游離膽紅素形成分子內(nèi)氫鍵，從而使樣本中的膽紅素能夠充分地與主反應(yīng)物反應(yīng)，從而提高了反應(yīng)效率，提高了試紙的檢測靈敏度和準(zhǔn)確性。而且，由于樣本中的膽紅素充分參與反應(yīng)，所需的主反應(yīng)物，即重氮鹽的用量也可進(jìn)一步減少，從而降低了成本。

18、本發(fā)明進(jìn)一步通過控制制備干化學(xué)試紙的試劑的ph為1.5-2.5的較強(qiáng)酸性，為間接膽紅素?cái)嚅_分子間氫鍵創(chuàng)造了外部環(huán)境，更加有利于加速劑發(fā)揮作用。

19、所述試劑中加速劑穩(wěn)定劑可穩(wěn)定加速劑，進(jìn)一步提高試紙的檢測靈敏度。

20、此外，所述試劑對維生素c等還原性物質(zhì)有很好的抗干擾性，使檢測不受樣本，特別是尿樣中還原性物質(zhì)的干擾。

技術(shù)特征：

1.一種制備用于檢測膽紅素的干化學(xué)試紙的試劑，所述試劑包括主反應(yīng)物、酸、加速劑、加速劑穩(wěn)定劑和溶劑，其中，

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑，其中所述加速劑的含量為1-5g/l。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑，其中所述試劑的ph值為1.5-3.0，優(yōu)選為1.5-2.5。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的試劑，其中所述酸選自5-磺基水楊酸、偏磷酸、順丁烯二酸、檸檬酸中的一種或多種，優(yōu)選地，所述酸包括5-磺基水楊酸，更優(yōu)選地，所述酸包括5-磺基水楊酸和順丁烯二酸。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的試劑，其中所述酸的含量為10-30g/l。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑，其中所述加速劑穩(wěn)定劑為d-(+)海藻糖，優(yōu)選地，所述d(+)海藻糖的含量為10-30g/l。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑，其中所述主反應(yīng)物為重氮鹽，優(yōu)選地，所述主反應(yīng)物為2,4-二氯苯重氮鹽，更優(yōu)選地，所述主反應(yīng)物為2,4-二氯苯重氮四氟硼酸鹽。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的試劑，其中所述主反應(yīng)物的含量為0.2-1.0g/l。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑，其中所述溶劑為水。

10.根據(jù)權(quán)利要求1～9中任一項(xiàng)所述的試劑，其中所述試劑進(jìn)一步包括0.05-0.1g/l的黃色染料。

11.根據(jù)權(quán)利要求1～9中任一項(xiàng)所述的試劑，其中所述試劑以多個(gè)子試劑的形式提供，優(yōu)選地，所述多個(gè)子試劑包括第一試劑和第二試劑，其中所述第一試劑包括溶于所述溶劑中的所述主反應(yīng)物和所述酸；且所述第二試劑包括溶于所述溶劑中的所述加速劑和所述加速劑穩(wěn)定劑，其中優(yōu)選地，所述第二試劑還包括0.05-0.1g/l的黃色染料。

12.一種制備用于檢測膽紅素的干化學(xué)試紙的方法，包括用根據(jù)權(quán)利要求1～11中任意一項(xiàng)所述試劑處理濾紙并干燥的步驟。

13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的方法，其中，所述試劑以多個(gè)子試劑的形式提供，所述方法包括依次用各所述子試劑處理所述濾紙并干燥的步驟，

14.一種用于檢測膽紅素的干化學(xué)試紙，通過根據(jù)權(quán)利要求12或13所述的方法制備而成。

技術(shù)總結(jié)
本申請公開了膽紅素干化學(xué)試紙的制備試劑、試紙及其制備方法。所述試劑包括主反應(yīng)物、酸、加速劑、加速劑穩(wěn)定劑和溶劑，其中所述加速劑為選自卡拉膠、果膠、明膠、瓊脂中的一種或多種。利用該試劑制備干化學(xué)試紙，制備過程安全，加速效果好，改進(jìn)了膽紅素干化學(xué)試紙檢測的靈敏度和準(zhǔn)確性。

技術(shù)研發(fā)人員：李瑩,陳庚文
受保護(hù)的技術(shù)使用者：深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/30