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      光波導(dǎo)型測定系統(tǒng)的制作方法_3

      文檔序號(hào):8402714閱讀:來源:國知局
      圈施加電流即可,能夠通過改變電流值來調(diào)整磁場強(qiáng)度。
      [0047]為了將磁場強(qiáng)度調(diào)整為最佳,本實(shí)施方式的測定系統(tǒng)也可以還具備磁場控制部(圖1中未示出)。通過該磁場控制部來進(jìn)行上述那樣的控制,由此能夠?qū)⒋艌鰪?qiáng)度調(diào)整為使應(yīng)該有助于測定的磁性微粒9不從光波導(dǎo)3的表面剝離、使能夠成為測定的干擾的磁性微粒9從光波導(dǎo)3的表面剝離到對(duì)測定不造成影響的距離所需的適當(dāng)強(qiáng)度。在隨時(shí)調(diào)整磁場強(qiáng)度的情況下,能夠用磁場控制部進(jìn)行調(diào)整,來進(jìn)行動(dòng)態(tài)的控制。
      [0048]通過計(jì)測受光元件8中的檢測信號(hào)強(qiáng)度的差分,能夠測定被測定檢測體溶液中的抗原濃度。具體地說,在圖1中,使來自光源7的LED光從入射側(cè)光柵2a入射至光波導(dǎo)3,在該光波導(dǎo)3中進(jìn)行多重反射的同時(shí)而進(jìn)行傳播,從而在表面(傳感區(qū)域中的露出表面)附近產(chǎn)生瞬逝光。在該狀態(tài)下,當(dāng)將被測定檢測體溶液和磁性微粒9的混合分散液導(dǎo)入傳感區(qū)域上時(shí),在此之后緊接著(從圖3A的狀態(tài)開始)微粒9沉降或者通過磁場而被吸引,如圖3B?3F所示那樣,微粒9到達(dá)光波導(dǎo)3的表面附近、即瞬逝光區(qū)域。微粒9參與瞬逝光的吸收、散射,因此全反射光的強(qiáng)度衰減。其結(jié)果,當(dāng)從出射側(cè)光柵2b出射的LED光被受光元件8受光時(shí),所射出的LED光強(qiáng)度受到所結(jié)合的微粒9的影響而隨著時(shí)間的經(jīng)過而降低。然后,通過第一磁場施加部10使不基于抗原抗體反應(yīng)而吸附于光波導(dǎo)3的磁性微粒剝離,當(dāng)?shù)竭_(dá)瞬逝光區(qū)域外(圖3G)時(shí),受光強(qiáng)度恢復(fù)到規(guī)定值。將此時(shí)的受光強(qiáng)度與圖3A的狀態(tài)、即剛剛導(dǎo)入混合分散液之后的受光強(qiáng)度進(jìn)行比較,能夠例如作為降低率而進(jìn)行數(shù)值化。
      [0049]由受光元件8受光的LED光強(qiáng)度的降低率,依賴于主要通過抗原抗體反應(yīng)等結(jié)合于光波導(dǎo)3的表面的微粒9的量。換句話說,與參與抗原抗體反應(yīng)的被測定檢測體溶液中的抗原濃度成比例。因此,求出在抗原濃度已知的被測定檢測體溶液中伴隨著時(shí)間經(jīng)過的LED光強(qiáng)度的變動(dòng)曲線,并求出在向該曲線的上部方向施加磁場后的規(guī)定時(shí)間處的LED光強(qiáng)度的降低率,來預(yù)先制作表示抗原濃度與LED光強(qiáng)度的降低率之間的關(guān)系的檢量線。求出在抗原濃度未知的被測定檢測體溶液中的通過上述方法測定的時(shí)間處的LED光強(qiáng)度的降低率和根據(jù)LED光強(qiáng)度的變動(dòng)曲線得到的規(guī)定時(shí)間處的LED光強(qiáng)度的降低率,并將該LED光強(qiáng)度的降低率與上述檢量線進(jìn)行比較,由此能夠測定被測定檢測體溶液中的抗原濃度。
      [0050]以下,通過實(shí)驗(yàn)說明實(shí)施基于上述實(shí)施方式的測定的例子。在該例子中,具體的數(shù)值、材料是一個(gè)例子,本發(fā)明并不限定于這些數(shù)值、材料。
      [0051]在實(shí)驗(yàn)中,作為測定對(duì)象物質(zhì)使用了流感抗原。將包含流感病毒的原液由用于使抗原露出的表面活性劑溶液稀釋,制作成6000倍稀釋抗原(6k)和60000倍稀釋抗原(60k)這兩種濃度的被測定檢測體溶液。對(duì)這些溶液與不包含抗原的空白溶液的合計(jì)3種被測定檢測體溶液進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。單獨(dú)調(diào)制了固定有抗體的磁性微粒的分散液。作為第一磁場施加部10和第二磁場施加部11,使用了電磁鐵線圈。
      [0052]在測定時(shí),將上述的光波導(dǎo)型傳感器芯片用遮光兩面膠帶粘貼于黑色ABS樹脂制塊上,設(shè)置于測定機(jī)。在微管內(nèi)混合磁性微粒的分散液和檢測體溶液,在移液20次之后,將其混合液送至塊內(nèi)。將剛剛送液之后設(shè)為O秒,從5秒后到2分之間,對(duì)第二磁場施加部11流動(dòng)電流而施加磁場,將磁性微粒吸引至光波導(dǎo)3的表面。在切斷第二磁場施加部11的電源而靜置5分鐘后,對(duì)第一磁場施加部10流動(dòng)電流而施加磁場,由此從光波導(dǎo)3的表面拉起未結(jié)合的磁性微粒。當(dāng)設(shè)剛剛送液之后的信號(hào)強(qiáng)度為100%時(shí),將由第一磁場施加部10施加磁場30秒后的信號(hào)強(qiáng)度相對(duì)于剛剛送液之后的信號(hào)強(qiáng)度的信號(hào)降低率設(shè)定為測定對(duì)象物質(zhì)的檢測靈敏度的指標(biāo)。
      [0053]在圖4中,不出信號(hào)降低率相對(duì)于溶液的攪拌時(shí)間的一個(gè)例子。在本實(shí)驗(yàn)中,以使磁性微粒與抗原充分反應(yīng)為目的,在將磁性微粒與抗原混合后,以旋渦攪拌10分鐘后使其朝芯片滴下,測定出信號(hào)降低率。如圖4所示那樣,空白溶液與攪拌時(shí)間無關(guān)地為約16%而保持一定,與此相對(duì),60k溶液從20%變?yōu)?7%,6k溶液從36%變?yōu)?5%,分別伴隨著攪拌時(shí)間的增加而信號(hào)降低率增大。根據(jù)這些變化,考慮通過好好攪拌溶液使抗體和抗原充分結(jié)合而使抗原使用效率提高,從而測定對(duì)象物質(zhì)的檢測靈敏度提高??紤]在使磁性微粒和被測定檢測體溶液向光波導(dǎo)型傳感器芯片滴下之后,通過磁場使磁性微粒移動(dòng),由此攪拌溶液,使抗原的使用效率提高。
      [0054]測定將本實(shí)施方式的測定方法以不同磁場施加模式實(shí)施的情況下的檢測信號(hào)強(qiáng)度的降低率。在圖5中,示出使用了這樣的不同測定方法的情況下的信號(hào)降低率。在實(shí)驗(yàn)中使用的測定方法為以下的(I)?(6)這6種?!吧洗艌鼋油ā笔侵竿ㄟ^第一磁場施加部10施加磁場,“上磁場斷開”是指停止通過第一磁場施加部10施加磁場。同樣,“下磁場接通”是指通過第二磁場施加部11施加磁場,“下磁場斷開”是指停止通過第二磁場施加部11施加磁場。
      [0055](I)基準(zhǔn)值(參考值)測定方法:
      [0056]與上述溶液滴下同時(shí)下磁場接通一施加下磁場2分鐘一斷開下磁場而自然沉降—僅將上磁場接通。
      [0057]這是如下方法:不進(jìn)行基于磁場的接通/斷開的溶液攪拌,將磁性微粒9吸引至光波導(dǎo)3而促進(jìn)其結(jié)合,然后使成為干擾成分的磁性微粒9從光波導(dǎo)3分離。
      [0058](2)基于本實(shí)施方式的第一測定方法(攪拌時(shí)間I分鐘):
      [0059]與溶液滴下同時(shí)下磁場接通一在施加下磁場的狀態(tài)下,實(shí)施I分鐘的上磁場接通(2秒鐘)/上磁場斷開(2秒鐘)的循環(huán),來攪拌溶液一使上磁場斷開,僅施加下磁場一使全部磁場斷開而自然沉降一僅使上磁場接通。這是在施加下磁場的狀態(tài)下通過上磁場的接通/斷開來攪拌溶液的測定方法。
      [0060](3)基于本實(shí)施方式的第二測定方法(攪拌時(shí)間2分鐘):
      [0061]與溶液滴下同時(shí)下磁場接通一在施加下磁場的狀態(tài)下,實(shí)施2分鐘的上磁場接通(2秒鐘)/上磁場斷開(2秒鐘)的循環(huán),來攪拌溶液一使上磁場斷開,僅施加下磁場一使全部磁場斷開而自然沉降一僅使上磁場接通。
      [0062]這是在施加下磁場的狀態(tài)下通過上磁場的接通/斷開來攪拌溶液的測定方法。
      [0063](4)基于本實(shí)施方式的第三測定方法(攪拌時(shí)間3分鐘):
      [0064]與溶液滴下同時(shí)下磁場接通一在施加下磁場的狀態(tài)下,實(shí)施3分鐘的上磁場接通(2秒鐘)/上磁場斷開(2秒鐘)的循環(huán),來攪拌溶液一使上磁場斷開,僅施加下磁場一使全部磁場斷開而自然沉降一僅使上磁場接通。
      [0065]這是在施加下磁場的狀態(tài)下通過上磁場的接通/斷開來攪拌溶液的測定方法。
      [0066](5)基于比較例的第一測定方法:
      [0067]使溶液滴下一在2分鐘的期間,以每2秒鐘交互施加下磁場和上磁場一使上磁場斷開,僅施加下磁場一使全部磁場斷開而自然沉降一僅使上磁場接通。
      [0068]這是交互切換施加上磁場和下磁場的方法。
      [0069](6)基于比較例的第二測定方法:
      [0070]使溶液滴下一在2分鐘的期間,在隔著2秒鐘的全磁場斷開的狀態(tài)下以每2秒鐘交互施加下磁場和上磁場一使上磁場斷開,僅施加下磁場一使全部磁場斷開而自然沉降一僅使上磁場接通。
      [0071]這是交互切換施加上磁場和下磁場的方法。
      [0072]從圖5來看,關(guān)于⑴的基準(zhǔn)值(參考值)的測定方法,空白溶液的情況為約3.5%的信號(hào)降低率,60k溶液的情況為約9.3%的信號(hào)降低率。另一方面,關(guān)于(5)或(6)的比較例的測定方法,60k溶液的情況分別為約9.5%和約8.3%的信號(hào)降低率。
      [0073]針對(duì)這些,關(guān)于(2)?(4)的本實(shí)施方式的第一至第三測定方法,60k溶液的情況的信號(hào)降低率增大到12.7%?13.3%。
      [0074]從這些結(jié)果來看,可知與(
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