光度的對應(yīng)關(guān)系，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，獲得線性回歸方程 的相關(guān)系數(shù)r> 0.999,遵循朗伯比爾定律，更為便捷的用于本發(fā)明的相關(guān)計算。雖然該體 系并非平衡體系，且反應(yīng)歷程也較為復(fù)雜，但峰值吸光度Aax可方便、快捷、準(zhǔn)確的測定，Aax 值與參加反應(yīng)的維生素C初始濃度之間能建立很好線性函數(shù)關(guān)系，圓滿的解決了維生素C 的定量分析。
[0017] 實施例儀器與試材：紫外可見分光光度計（A390型，翱藝儀器有限公司），電子天 平（ESJ210-4B，沈陽龍騰電子有限公司），石英亞沸點高純水蒸餾器（1018-C，常州國華電器 有限公司），移液槍（100-1000yL，Thermo)，精密數(shù)值溫度溫差儀（SWC-IID，南京桑力電子 設(shè)備廠）；碘酸鉀（AR，成都科龍化學(xué)試劑廠)，草酸（AR，西隴化工股份有限公司），可溶性淀 粉（AR，科龍化工試劑廠）；L-抗壞血酸（維生素C，AR，純度多99. 7%，西隴化工股份有限公 司），雙重蒸餾水（自制）；市售維生素C樣品（600mg/片，維生素C含量11.8g/100g，湯臣倍 ?。?。
[0018] 實施例1:一種測定維生素C的間接碘量動力學(xué)光度法精密度試驗與標(biāo)準(zhǔn)曲線的 建立，其操作步驟： (1)在室溫下（26. 9°C)，取容積4mL光程Icm的石英比色皿作反應(yīng)容器，反應(yīng)液體總體 積3. 30mL，留0. 5mL空間以便搖勻；加入I.OOmL200yg/mL維生素C標(biāo)準(zhǔn)溶液，向比色皿中 加入2.OOmL0? 5%的淀粉溶液，加入0? 20mL0. 200mg/mL碘酸鉀溶液，加入0?IOmLO. 15mol/L 硫酸溶液，即刻搖勻，快速置于光度計中，用試劑作空白，600nm為測量波長，即刻作動力學(xué) 光度掃描，獲得峰值吸光度Aax;按此法平行6次，用6次測定的值計算(%)< 1%。
[0019] 本發(fā)明的一種測定維生素C的間接碘量動力學(xué)光度法精密度好。
[0020] (2)分別移取 0? 50、0. 60、0. 70、0. 80、0. 90、1. 00、1. 10、1. 20、1. 30、1. 40mL 200yg/mL維生素C標(biāo)準(zhǔn)溶液，用0. 5%的淀粉溶液控制總體積3. 30mL，其余試劑用量不變， 按（1)的方法獲得值，作標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖2,獲得線性回歸方程Y=0. 0086X-0. 7377,線性范 圍 100 ~280yg/3. 30mL，相關(guān)系數(shù) 1-0. 9994。
[0021] 本發(fā)明的一種測定維生素C的間接碘量動力學(xué)光度法線性關(guān)系好，滿足吸光光度 分析方法要求。
[0022] 實施例2 :-種測定維生素C的間接碘量動力學(xué)光度法測定市售維生素C樣品維 生素C含量，其操作步驟： (1)取市售維生素C樣品(片劑)2片，研成粉末，稱取0. 5000g粉樣，用2%草酸超聲輔 助溶解并定容，過濾，取I.OOmL濾液于50mL容量瓶中，蒸餾水定容待測。
[0023] (2)取容積4mL光程Icm的石英比色皿作反應(yīng)容器，移入I.OOmL待測液，2.OOmL 1%的淀粉溶液，其余試劑用量不變，按本發(fā)明方法測得值（26. 9°C)，平行6次，按圖2 的工作曲線計算含量，測定結(jié)果：市售維生素C樣品(片劑)維生素C含量為11. 67g/100g， 1% ( /7=6)〇
【主權(quán)項】
1. 一種測定維生素C的間接碘量動力學(xué)光度法，其顯色體系由碘酸鉀、維生素C、淀粉 和硫酸溶液組成，包括如下步驟： (1) 用0. 04%草酸溶液為溶劑，配制濃度為200 ii g/mL維生素C標(biāo)準(zhǔn)溶液； (2)室溫下，用Icm比色皿為反應(yīng)容器，加入一定體積200 y g/mL維生素C標(biāo)準(zhǔn)溶液，取 維生素C標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積范圍在0. 50~I. 40mL ; (3) 向比色皿中加入一定體積0. 5%的淀粉溶液，淀粉溶液的體積范圍在1. 60~ 2. 50mL ;維生素C標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積與淀粉溶液的體積和為3. OOmL ; (4)向比色皿中加入0. 20mL0. 200mg/mL碘酸鉀溶液； (5) 向比色皿中加入0.1 OmLO. 15mol/L硫酸溶液，即刻搖勻，快速置于光度計中，用試 劑作空白，600nm為測量波長，即刻作動力學(xué)光度掃描，獲得峰值吸光值 (6) 依照（2)~（5)方法，用200 y g/mL維生素C標(biāo)準(zhǔn)溶液制備濃度在100~ 280 y g/3. 3mL -系列有濃度梯度的顯色體系，作動力學(xué)光度掃描，獲得峰值吸光值，用 維生素C濃度c與J (峰）的對應(yīng)關(guān)系，建立校準(zhǔn)曲線，獲得線性回歸方程及相關(guān)系數(shù)； (7) 按上述（2)~（5)方法，測定某未知含維生素C溶液的峰值吸光值^ _，依據(jù)（6) 的線性回歸方程計算出被測體系中維生素C的濃度。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是用碘酸鉀溶液、維生素C溶液、淀粉溶液和硫 酸溶液組成顯色體系為速差動力學(xué)體系。3. 根據(jù)權(quán)利要求1和2所述的方法，其特征是對該顯色體系的動力學(xué)光度掃描，可獲得 峰值吸光值4^。4. 根據(jù)權(quán)利要求1、2和3所述的方法，其特征是體系中維生素C濃度在100~ 280 yg/3.30mL范圍內(nèi)與Jniax建立校準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)0.999,線性關(guān)系良好。
【專利摘要】本發(fā)明屬于分析化學(xué)領(lǐng)域，具體公開了一種測定維生素C的間接碘量動力學(xué)光度法。具體步驟是：室溫下，用1cm比色皿作反應(yīng)容器，加入0.50～1.40mL？200μg/mL維生素C標(biāo)準(zhǔn)溶液，加入1.60～2.50mL？0.5%的淀粉溶液使混合液的體積為3.00mL，加入0.20mL0.200mg/mL碘酸鉀溶液，加入0.10mL0.15mol/L硫酸溶液，搖勻，快速放入光度計用試劑空白在600nm波長作動力學(xué)光度掃描，在短時間內(nèi)可測得峰值吸光度，該峰值吸光度與維生素C的-濃度有良好的線性關(guān)系。本發(fā)明具有簡便、準(zhǔn)確、微量、快速、使用的藥品價廉易得無毒無公害和環(huán)保等優(yōu)點，用于測定生物、藥物等試樣中的維生素C。
【IPC分類】G01N21/31, G01N1/38
【公開號】CN105067538
【申請?zhí)枴緾N201510418060
【發(fā)明人】甄鏵, 張學(xué)毅
【申請人】四川農(nóng)業(yè)大學(xué), 甄鏵
【公開日】2015年11月18日
【申請日】2015年7月16日