一種魚(yú)腥草滴眼液的質(zhì)量控制方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ] 本發(fā)明涉及一種質(zhì)量控制方法，具體涉及一種魚(yú)腥草滴眼液的質(zhì)量控制方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 魚(yú)腥草為三白草科多年生草本植物蕺菜Houttuynia cordata Thunb.的帶根全 草，有名側(cè)耳根、紫蕺、豬鼻孔、九節(jié)蓮等，其新鮮植株破碎后有刺鼻的腥臭味，廣泛分布于 我國(guó)中部、東南及西南各省區(qū)，尤以湖南、湖北、四川、江蘇等省居多。魚(yú)腥草具有清熱解毒、 消癰排膿、利尿通淋的功效，臨床用于肺癰吐膿、痰熱喘咳、熱痢、熱淋、癰腫瘡毒等癥。研究 表明，魚(yú)腥草中含有揮發(fā)性成分、黃酮類(lèi)、有機(jī)酸、留醇類(lèi)、生物堿類(lèi)等成分。魚(yú)腥草主要以 嫩莖葉和地下莖工作蔬菜食用，全株可鮮用或曬干入藥，已經(jīng)被國(guó)家衛(wèi)生部正式確定為"既 是藥品，又是食品"的極具開(kāi)發(fā)潛力的資源之一，日益受到人們的關(guān)注。
[0003] 魚(yú)腥草滴眼液是經(jīng)過(guò)水汽蒸餾制備而得，主要成分為其揮發(fā)性成分?，F(xiàn)有技術(shù)關(guān) 于魚(yú)腥草滴眼液質(zhì)量控制的項(xiàng)目有形狀、pH值、甲基正壬酮的薄層鑒別及甲基正壬酮的含 量測(cè)定。但是由于魚(yú)腥草滴眼液的主要成分為魚(yú)腥草提取液，而提取液中的有效成分復(fù)雜， 只對(duì)甲基正壬酮進(jìn)行鑒別和含量測(cè)定，檢測(cè)手段過(guò)于簡(jiǎn)單，相對(duì)于目前藥品質(zhì)量控制的要 求有較大的差距。故現(xiàn)有質(zhì)量控制方法不能有效控制魚(yú)腥草滴眼液的質(zhì)量，從而影響產(chǎn)品 的生產(chǎn)和保證質(zhì)量。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)，提供一種魚(yú)腥草滴眼液的質(zhì)量控制方 法，該方法操作簡(jiǎn)便、精密度和靈敏度高、穩(wěn)定性好，確保了魚(yú)腥草滴眼液的質(zhì)量的安全、均 一、穩(wěn)定、有效、可控。
[0005] 本發(fā)明的目的通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)：一種魚(yú)腥草滴眼液的質(zhì)量控制方法，它 包括以下步驟：
[0006] SI.甲基正壬酮的薄層鑒別
[0007] 取甲基正壬酮對(duì)照品，加無(wú)水乙醇制成每1ml含0. 5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液； 照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取對(duì)照品溶液10 μ 1及供試品溶液20 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層 板上，點(diǎn)成條斑，以環(huán)己烷-乙酸乙酯為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以二硝基苯肼試液，供 試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；
[0008] S2.甲基正壬酮的含量測(cè)定
[0009] 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：ΗΡ-50+毛細(xì)管柱；程序升溫：初始溫度為70°C，保持 5分鐘；以每分鐘5 °C的速率升至140 °C，保持5分鐘，再以每分鐘20°C的速率升至250 °C ; 進(jìn)樣口溫度：230°C ;檢測(cè)器：FID ;檢測(cè)器溫度：280°C ;載氣：N2;載氣流速：1.0ml/min ;分流 比：5:1 ;理論板數(shù)按甲基正壬酮峰計(jì)算應(yīng)不低于8000 ;
[0010] 對(duì)照品溶液的制備：取甲基正壬酮對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加無(wú)水乙醇制成每1ml 含25 μ g的溶液，即得；
[0011] 供試品溶液的制備：精密量取待測(cè)樣品25ml，通過(guò)已預(yù)處理好的C8固相萃取小 柱，用乙酸乙酯-乙醇的混合溶液洗脫，收集洗脫液約I. 8ml，置2ml量瓶中，加乙酸乙 酯-乙醇的混合溶液稀釋至刻度，搖勻，即得；
[0012] 測(cè)定法：精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各2 μ 1，分別注入氣相色譜儀，測(cè)定， 即得；
[0013] 本品每1ml含鮮魚(yú)腥草以甲基正壬酮計(jì)，不得少于4. 0 μ g ;
[0014] S3.特征圖譜
[0015] A.參照物溶液的制備：取α -松油醇對(duì)照品、4-萜品醇對(duì)照品、甲基正壬酮對(duì)照 品、乙酸龍腦酯對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，分別加無(wú)水乙醇制成每1ml含25 μ g的溶液，即得；
[0016] B.供試品溶液的制備：精密量取待測(cè)樣品25ml，通過(guò)已預(yù)處理好的(：8固相萃取 小柱，用乙酸乙酯-乙醇的混合溶液洗脫，收集洗脫液約I. 8ml，置2ml量瓶中，加乙酸乙 酯-乙醇的混合溶液稀釋至刻度，搖勻，即得；
[0017] C.測(cè)定：分別精密吸取參照物溶液與供試品溶液各2 μ 1，注入氣相色譜儀，測(cè)定；
[0018] 供試品特征圖譜中應(yīng)呈現(xiàn)6個(gè)特征峰，其中4個(gè)峰應(yīng)分別與α-松油醇對(duì)照品、 4-萜品醇對(duì)照品、甲基正壬酮對(duì)照品、乙酸龍腦酯對(duì)照品峰保留時(shí)間相一致；與甲基正壬 酮對(duì)照品相應(yīng)的峰為S峰，計(jì)算各特征峰與S峰的相對(duì)保留時(shí)間，應(yīng)在規(guī)定值的±5%之內(nèi)； 規(guī)定值為：〇. 782 (峰 1)、0. 820 (峰 2)、0. 878 (峰 3)、0. 909 (峰 4)、1. 000 (峰 S)、1. 052 (峰 5) 〇
[0019] 進(jìn)一步地，所述環(huán)己烷-乙酸乙酯中環(huán)己烷和乙酸乙酯的體積比為9:1。
[0020] 進(jìn)一步地，所述乙酸乙酯-乙醇的混合溶液中乙酸乙酯和乙醇的體積比為7:3。
[0021] 進(jìn)一步地，步驟S3中所述氣相色譜儀的色譜條件為：色譜條件與系統(tǒng)適用性試 驗(yàn)：ΗΡ-50+毛細(xì)管柱；程序升溫：初始溫度為70°C，保持5分鐘；以每分鐘5°C的速率升至 140°C，保持5分鐘，再以每分鐘20°C的速率升至250°C。進(jìn)樣口溫度：230°C ;檢測(cè)器：FID ; 檢測(cè)器溫度：280°C ;載氣：N2;載氣流速：1.0ml/min ;分流比：5:1 ;理論板數(shù)按甲基正壬酮 峰計(jì)算應(yīng)不低于8000。
[0022] 本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)：本發(fā)明按中國(guó)藥典2010年版《中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證 指導(dǎo)原則》對(duì)原標(biāo)準(zhǔn)各檢測(cè)項(xiàng)目進(jìn)行方法驗(yàn)證，對(duì)存在問(wèn)題的項(xiàng)目進(jìn)行完善；利用魚(yú)腥草注 射液的研究基礎(chǔ)，增加其他成分的鑒別（萜品醇等成分）；增加采用GC法對(duì)松油醇、乙酸龍 腦酯等的鑒別。按照要求，通過(guò)研究，更改了甲基正壬酮薄層鑒別中供試品溶液的制備方 法；參照魚(yú)腥草注射液的研究?jī)?nèi)容，增加了 GC法對(duì)松油醇、乙酸龍腦酯、萜品醇等成分的鑒 另IJ，并建立該品種的特征圖譜檢查，以保證質(zhì)量的均一穩(wěn)定。因此，本發(fā)明提供一種魚(yú)腥草 滴眼液的質(zhì)量控制方法，該方法操作簡(jiǎn)便、精密度和靈敏度高、穩(wěn)定性好，確保了魚(yú)腥草滴 眼液的質(zhì)量的安全、均一、穩(wěn)定、有效、可控。
【附圖說(shuō)明】：
[0023] 圖1為甲基正壬酮的TLC鑒別圖；
[0024] 圖2為甲基正壬酮的TLC鑒別圖（天津鋁箱板）；
[0025] 圖3為甲基正壬酮的TLC鑒別圖（青島海洋預(yù)制板）；
[0026] 圖4為甲基正壬酮的TLC鑒別圖（Merk板）；
[0027] 圖5為甲基正壬酮的TLC鑒別圖（手鋪板）；
[0028] 圖6為甲基正壬酮的TLC鑒別圖，溫度30°C、濕度55% ;
[0029] 圖7為甲基正壬酮的TLC鑒別圖，溫度18°C、濕度75% ;
[0030] 圖8為對(duì)照特征圖譜，圖中，峰3 :4_萜品醇；峰4 : α -松油醇；峰S :甲基正壬酮； 峰5 :乙酸龍腦酯；
[0031] 圖9為甲基正壬酮標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)圖。
【具體實(shí)施方式】
[0032] 下面結(jié)合附圖及實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的描述，本發(fā)明的保護(hù)范圍不局限于以 下所述：
[0033] 實(shí)施例1 :
[0034] 魚(yú)腥草滴眼液的制法為：取鮮魚(yú)腥草2000g進(jìn)行水蒸氣蒸餾，收集初餾液2000ml， 再進(jìn)行重蒸餾，收集重蒸餾液1000ml，加入等量注射用水，再進(jìn)行重蒸餾，收集精餾液 900ml，加入氯化鈉7g、聚山梨酯805g及羥苯乙酯0. 3g，混勻，加注射用水使成1000ml，濾 過(guò)，灌封，即得。
[0035] 實(shí)施例2 :
[0036] 上述實(shí)施例1的魚(yú)腥草滴眼液的質(zhì)量控制方法，它包括以下步驟：
[0037] SI.甲基正壬酮的薄層鑒別
[0038] 取甲基正壬酮對(duì)照品，加無(wú)水乙醇制成每1ml含0. 5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液； 照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取對(duì)照品溶液10 μ 1及供試品溶液20 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層 板上，點(diǎn)成條斑，以環(huán)己烷-乙酸乙酯為展開(kāi)劑，環(huán)己烷-乙酸乙酯中環(huán)己烷和乙酸乙酯的 體積比為9:1，展開(kāi)，取出，晾干，噴以二硝基苯肼試液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng) 的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；
[0039] S2.甲基正壬酮的含量測(cè)定
[0040] 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：ΗΡ-50+毛細(xì)管柱；程序升溫：初始溫度為70°C，保持 5分鐘；以每分鐘5 °C的速率升至140 °C，保持5分鐘，再以每分鐘20°C的速率升至250 °C ; 進(jìn)樣口溫度：230°C ;檢測(cè)器：FID ;檢測(cè)器溫度：280°C ;載氣：N2;載氣流速：1.0ml/min ;分流 比：5:1 ;理論板數(shù)按甲基正壬酮峰計(jì)算應(yīng)不低于8000 ;
[0041] 對(duì)照品溶液的制備：取甲基正壬酮對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加無(wú)水乙醇制成每1ml 含25 μ g的溶液，即得；
[0042] 供試品溶液的制備：精密量取待測(cè)樣品25ml，通過(guò)已預(yù)處理好的C8固相萃取小 柱，用乙酸乙酯-乙醇的混合溶液洗脫，收集洗脫液約I. 8ml，置2ml量瓶中，加乙酸乙 酯-乙醇的混合溶液稀釋至刻度，乙酸乙酯和乙醇的體積比為7:3,搖勾，即得；
[0043] 測(cè)定法：精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各2 μ 1，分別注入氣相色譜儀，測(cè)定， 即得；
[0044] 本品每1ml含鮮魚(yú)腥草以甲基正壬酮計(jì)，不得少于4. O μ g ;
[0045] S3.特征圖譜
[0046] A.參照物溶液的制備：取α -松油醇對(duì)照品、4-萜品醇對(duì)照品、甲基正壬酮對(duì)照 品、乙酸龍腦酯對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，分別加無(wú)水乙醇制成每1ml含25 μ g的溶液，即得；
[0047] B.供試品溶液的制備：精密量取本品25ml，通過(guò)已預(yù)處理好的C8固相萃取小柱 (IOOmg :1ml)，用乙酸乙酯-乙醇（7:3)的混合溶液洗脫，收集洗脫液約1.8ml，置2ml量瓶 中，加上述混合溶液稀釋至刻度，搖勻，即得。