一種測定氟苯尼考光學(xué)純度的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)藥學(xué)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 氟苯尼考（Florfenicol)，化學(xué)名：[R-(lR，2S)]-2,2-二氯-N-{氟甲 基）-2-羥-2-[4-(甲基磺酰）苯基]乙基}乙酰胺：中文名稱：氟洛芬；氟苯尼考；氟甲砜 霉素。是一種獸醫(yī)專用氯霉素類的廣譜抗菌藥，1990年首次在日本上市，我國目前已通過了 該藥的審批。本品為白色或類白色結(jié)晶性粉末、無臭、味苦；通過抑制肽酰基轉(zhuǎn)移酶活性而 產(chǎn)生廣譜抑菌作用，抗菌譜廣，包括各種革蘭氏陽性、陰性菌和支原體等。敏感菌包括牛、豬 的嗜血桿菌、痢疾志賀氏菌、沙門氏菌、大腸桿菌、肺炎球菌、流感桿菌、鏈球菌、金黃色葡萄 球菌、衣原體、鉤端螺旋體，立克次氏體等。
[0003] 氟苯尼考及其光學(xué)異構(gòu)體的結(jié)構(gòu)式如下：
[0005] 氟苯尼考結(jié)構(gòu)式中有2個手性碳原子，存在4個光學(xué)異構(gòu)體，但是通過控制合成方 法可以避免其中的2個光學(xué)異構(gòu)體的產(chǎn)生。因此在實際生產(chǎn)過程中會有2個光學(xué)異構(gòu)體產(chǎn) 生，如上式所示。其中的氟苯尼考（1R，2S)具有抗菌活性，但其光學(xué)異構(gòu)體（1S，2R)本身無 活性，所以其光學(xué)異構(gòu)體含量的高低直接影響了氟苯尼考的藥品質(zhì)量和療效。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 針對上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種測定氟苯尼考光學(xué)純度的方法：采用高效液 相色譜法進行檢測，其中色譜條件為：
[0007] 色譜柱：以表面鍵合有纖維素-三（3,5_二氯苯基氨基甲酸酯）的硅膠為固定相 色譜柱；
[0008] 流動相：正己烷：異丙醇：二氯甲烷=80~90:5~10:5~10 ;
[0009] 流速：0· 8 ~I. 2ml/min ;
[0010] 柱溫：30 ~45 °C;
[0011] 進樣量：0. 1 ~100 μ 1 ;
[0012] 波長：224nm。
[0013] 所述流動相優(yōu)選為正己烷：異丙醇：二氯甲烷=82~87:7~9:6~9,更優(yōu)選為 正己烷：異丙醇：二氯甲烷=85:8:7。
[0014] 所述進樣量優(yōu)選為10~50 μ ;更優(yōu)選為20 μ 1。
[0015] 所述色譜柱的規(guī)格優(yōu)選為內(nèi)徑4. 6mm、長度250mm、粒徑5 μm。
[0016] 所述柱溫優(yōu)選為35 °C。
[0017] 所述流速優(yōu)選為0· 9ml/min。
[0018] 進一步地，本方法還包括系統(tǒng)適用性溶液的制備，所述系統(tǒng)適用性溶液制備方法 如下：稱取氟苯尼考混旋體9~Ilmg至20ml容量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度。
[0019] 更進一步地，本方法還包括供試品溶液的制備，所述供試品溶液制備方法如下：稱 取氟苯尼考供試品2~22mg至20ml容量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度。
[0020] 以出峰時間作為定性鑒別試驗，在系統(tǒng)適用性保證氟苯尼考峰與光學(xué)異構(gòu)體峰之 間的分離度大于1. 5的前提下，進行樣品測定試驗。本發(fā)明的測定氟苯尼考光學(xué)純度的方 法專屬性強，靈敏度高，重復(fù)性良好，可在短時間內(nèi)判斷出氟苯尼考中光學(xué)異構(gòu)體的含量， 從而保證了氟苯尼考的藥品質(zhì)量。
[0021] 為了更好地理解和實施，下面結(jié)合附圖詳細說明本發(fā)明。
【附圖說明】
[0022]圖1是本發(fā)明的系統(tǒng)適用性圖譜；
[0023] 圖2是本發(fā)明實施例1的圖譜。
【具體實施方式】
[0024] 系統(tǒng)話用件實施例
[0025] 色譜條件：
[0026] 高效液相色譜儀：島津LC-2010 ;
[0027] 色譜柱：以表面鍵合有纖維素-三（3,5_二氯苯基氨基甲酸酯）的硅膠為固定相 色譜柱，內(nèi)徑4. 6mm、長度250mm、粒徑5 μ m ;柱溫：30°C ;
[0028] 流動相：正己燒：異丙醇：二氯甲燒=80:10:10 ;流速：0· 8ml/min ;波長：224nm。
[0029] 稱取氟苯尼考混旋體（批號：269150108) IOmg至20ml容量瓶中，加流動相溶解并 稀釋至刻度；精密量取10 μ 1注入液相色譜儀，觀察色譜圖，如圖2所示，氟苯尼考峰與光學(xué) 異構(gòu)體峰之間的分離度為6. 7,大于1. 5,可滿足分離要求。
[0030] 樣品測宙實施例1
[0031] 色譜條件：
[0032] 高效液相色譜儀：島津LC-2010 ;
[0033] 色譜柱：以表面鍵合有纖維素-三（3,5_二氯苯基氨基甲酸酯）的硅膠為固定相 色譜柱；，內(nèi)徑4. 6mm、長度250mm、粒徑5 μ m ;柱溫：30°C ;
[0034] 流動相：正己燒：異丙醇：二氯甲燒=80:10:10 ;流速：0· 8ml/min ;波長：224nm。
[0035] 稱取氟苯尼考供試品（批號：269150426) 20mg至20ml容量瓶中，加流動相溶解并 稀釋至刻度；精密量取10 μ 1注入液相色譜儀，觀察色譜圖，如圖2所示，以峰面積歸一化法 計算，光學(xué)異構(gòu)體含量為0.3%。
[0036] 樣品測宙實施例2
[0037] 色譜條件：
[0038] 高效液相色譜儀：島津LC-2010 ;
[0039] 色譜柱：以表面鍵合有纖維素-三（3,5_二氯苯基氨基甲酸酯）的硅膠為固定相 色譜柱；內(nèi)徑4. 6mm、長度250mm、粒徑5 μ m ;柱溫：35°C ;
[0040] 流動相：正己燒：異丙醇：二氯甲燒=90:5:5 ;流速：1. 2ml/min ;波長：224nm。
[0041] 稱取氟苯尼考供試品（批號：269150427) IOmg至20ml容量瓶中，加流動相溶解并 稀釋至刻度；精密量取20 μ 1注入液相色譜儀，觀察色譜圖，以峰面積歸一化法計算，光學(xué) 異構(gòu)體含量為0.4%。
[0042] 樣品測宙實施例3
[0043] 色譜條件：
[0044] 高效液相色譜儀：島津LC-2010 ;
[0045] 色譜柱：以表面鍵合有纖維素-三（3,5_二氯苯基氨基甲酸酯）的硅膠為固定相 色譜柱；內(nèi)徑4. 6mm、長度250mm、粒徑5 μ m ;柱溫：45°C ;
[0046] 流動相：正己燒：異丙醇：二氯甲燒=82:9:9 ;流速：0. 9ml/min ;波長：224nm。
[0047] 稱取氟苯尼考供試品（批號：269150428) 5mg至20ml容量瓶中，加流動相溶解并 稀釋至刻度；精密量取50 μ 1注入液相色譜儀，觀察色譜圖，以峰面積歸一化法計算，光學(xué) 異構(gòu)體含量為〇. 2 %。
[0048] 樣品測宙實施例4
[0049] 色譜條件：
[0050] 高效液相色譜儀：島津LC-2010 ;
[0051] 色譜柱：以表面鍵合有纖維素-三（3,5_二氯苯基氨基甲酸酯）的硅膠為固定相 色譜柱；，內(nèi)徑4. 6謹、長度250謹、粒徑5 μπι ;柱溫：30°C ;
[0052] 流動相：正己燒：異丙醇：二氯甲燒=85:8:7 ;流速：0. 8ml/min ;波長：224nm。
[0053] 稱取氟苯尼考供試品（批號：269150429) 2mg至20ml容量瓶中，加流動相溶解并 稀釋至刻度；精密量取100 μ 1注入液相色譜儀，觀察色譜圖，以峰面積歸一化法計算，光學(xué) 異構(gòu)體含量為〇. 2 %。
[0054] 樣品測宙實施例5
[0055] 色譜條件：
[0056] 高效液相色譜儀：島津LC-2010 ;
[0057] 色譜柱：以表面鍵合有纖維素-三（3,5_二氯苯基氨基甲酸酯）的硅膠為固定相 色譜柱；，內(nèi)徑4. 6mm、長度250mm、粒徑5 μ m ;柱溫：30°C ;
[0058] 流動相：正己燒：異丙醇：二氯甲燒=87:7:6 ;流速：0. 8ml/min ;波長：224nm。
[0059] 稱取氟苯尼考供試品（批號：269150430) 22mg至20ml容量瓶中，加流動相溶解并 稀釋至刻度；精密量取10 μ 1注入液相色譜儀，觀察色譜圖，以峰面積歸一化法計算，光學(xué) 異構(gòu)體含量為〇. 3 %。
[0060] 本發(fā)明并不局限于上述實施方式，如果對本發(fā)明的各種改動或變形不脫離本發(fā)明 的精神和范圍，倘若這些改動和變形屬于本發(fā)明的權(quán)利要求和等同技術(shù)范圍之內(nèi)，則本發(fā) 明也意圖包含這些改動和變形。
【主權(quán)項】
1. 一種測定氟苯尼考光學(xué)純度的方法，其特征在于：采用高效液相色譜法進行檢測， 其中色譜條件為： 色譜柱：以表面鍵合有纖維素-三（3, 5-二氯苯基氨基甲酸酯）的硅膠為固定相色譜 柱； 流動相：正己烷：異丙醇：二氯甲烷=80~90:5~10:5~10 ; 流速：〇· 8 ~1. 2ml/min; 柱溫：30~45°C; 進樣量：〇. 1~1〇〇μ1 ; 波長：224nm。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述流動相為正己烷：異丙醇：二氯甲 燒=82~87:7~9:6~9〇3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于：所述流動相為正己烷：異丙醇：二氯甲 燒=85:8:7〇4. 根據(jù)權(quán)利要求1~3任意一項所述的方法，其特征在于：所述色譜柱的規(guī)格為內(nèi)徑 4. 6mm、長度 150 ~250mm、粒徑 3. 5 ~5μπ?ο5. 根據(jù)權(quán)利要求1~3任意一項所述的方法，其特征在于：所述柱溫為35°C。6. 根據(jù)權(quán)利要求1~3任意一項所述的方法，其特征在于：所述流速為0. 9ml/min。7. 根據(jù)權(quán)利要求1~3任意一項所述的方法，其特征在于：所述進樣量為10~50μ1。8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于：所述進樣量為20μ1。9. 根據(jù)權(quán)利要求1~3任意一項所述的方法，其特征在于：所述方法還包括系統(tǒng)適用 性溶液的制備，所述系統(tǒng)適用性溶液制備方法如下：稱取氟苯尼考混旋體9~llmg至20ml 容量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度。10. 根據(jù)權(quán)利要求1~3任意一項所述的方法，其特征在于：所述方法還包括供試品溶 液的制備，所述供試品溶液制備方法如下：稱取氟苯尼考供試品2~22mg至20ml容量瓶 中，加流動相溶解并稀釋至刻度。
【專利摘要】一種測定氟苯尼考光學(xué)純度的方法，采用高效液相色譜法進行檢測，其中色譜條件為：色譜柱：以表面鍵合有纖維素-三(3,5-二氯苯基氨基甲酸酯)的硅膠為固定相色譜柱；流動相：正己烷:異丙醇:二氯甲烷＝80～90:5～10:5～10；流速：0.8～1.2ml/min；柱溫：30～45℃；進樣量：0.1～100μl；波長：224nm。本發(fā)明的測定氟苯尼考光學(xué)純度的方法專屬性強，靈敏度高，重復(fù)性良好，可在短時間內(nèi)判斷出氟苯尼考中光學(xué)異構(gòu)體的含量，從而保證了氟苯尼考的藥品質(zhì)量。
【IPC分類】G01N30/02
【公開號】CN105259272
【申請?zhí)枴緾N201510783063
【發(fā)明人】譚惠娟
【申請人】譚惠娟
【公開日】2016年1月20日
【申請日】2015年11月13日