一種具有養(yǎng)血除煩、寧心安神作用的藥物制劑的檢測(cè)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于中藥制劑檢測(cè)領(lǐng)域，具體涉及一種具有養(yǎng)血除煩、寧心安神作用的藥 物制劑的檢測(cè)方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 心神寧片由東漢醫(yī)圣張仲景所著《金匱要略》中的酸棗仁湯化裁而來。由 炒酸棗仁、遠(yuǎn)志、茯苓、梔子、神曲、甘草等六味中藥組成，收載于國家藥品標(biāo)準(zhǔn) (WS-10410 (ZD-0410) 2002-2012Z)，具有養(yǎng)血除煩，寧心安神的功效，用于心肝血虛，失眠多 夢(mèng)，煩躁而驚，疲倦食少等癥。心神寧片療效顯著，臨床應(yīng)用較為廣泛。其中炒酸棗仁為方 中君藥，起著至關(guān)重要的作用，投料藥材質(zhì)量的優(yōu)劣、成分含量的高低，直接影響著心神寧 片的藥效。
[0003] 酸率仁為鼠李科率屬植物酸率的干燥成熟種子，具有寧心安神、生津、補(bǔ)肝寧心、 益陰斂汗的功效，為傳統(tǒng)的鎮(zhèn)靜安神藥物之一。酸棗仁中主要有效成分是皂苷類和黃酮類 化合物。
[0004] 《HPLC法測(cè)定酸棗仁分散片中斯皮諾素含量》（亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2013,9 (7)，41-42)， 公開了以下內(nèi)容："方法：采用HPLC法，用Diamonsil C18色譜柱（4. 6mmX 250mm，5 μ m);以 乙腈（A)-水（0.1 %乙酸）（B)為流動(dòng)相梯度洗脫；流速1.0 mL/min，柱溫為25°C，檢測(cè)波長(zhǎng) 為335nm。結(jié)果：斯皮諾素在3. 36-32. 36 μ g/g(r = 0.9992)范圍內(nèi)關(guān)系良好，平均加樣回 收率為99. 23% (n = 6) ;RSD為1. 51%"。以《HPLC法測(cè)定酸棗仁分散片中斯皮諾素含量》 的方法對(duì)心神寧片的斯皮諾素的含量進(jìn)行測(cè)定時(shí)，由于心神寧片由炒酸棗仁、遠(yuǎn)志、茯苓、 梔子、神曲、甘草等六味中藥組成，各中藥之間相互聯(lián)系、相互作用、相互影響，斯皮諾素與 心神寧片中的其他化學(xué)成分的分離效果較差，從而導(dǎo)致不能進(jìn)行含量測(cè)定。因此，《HPLC法 測(cè)定酸棗仁分散片中斯皮諾素含量》的方法并不適用于心神寧片中斯皮諾素的含量測(cè)定。
[0005] 因此，建立一種心神寧片中斯皮諾素的含量測(cè)定方法，對(duì)于心神寧片的質(zhì)量進(jìn)行 全面控制具有重要意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 因此，本發(fā)明要解決的技術(shù)問題在于現(xiàn)有技術(shù)中沒有心神寧片中斯皮諾素的含量 測(cè)定方法、不利于從整體上對(duì)心神寧片的質(zhì)量進(jìn)行全面控制的技術(shù)問題，從而提出一種具 有養(yǎng)血除煩、寧心安神作用的藥物制劑的檢測(cè)方法。
[0007] 為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的：
[0008] 本發(fā)明提供一種具有養(yǎng)血除煩、寧心安神作用的藥物制劑的檢測(cè)方法，所述藥物 制劑的原料藥組成為：炒酸棗仁、遠(yuǎn)志、茯苓、梔子、六神曲、甘草；
[0009] 該檢測(cè)方法包括如下對(duì)斯皮諾素的含量測(cè)定步驟：
[0010] (1)供試品溶液的制備：取待測(cè)藥物制劑，精密稱定，研細(xì)，取0. 2重量份~0. 8重 量份，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50%~100%甲醇或50%~100%乙醇15體積 份~35體積份，稱定重量，超聲5~50分鐘或加熱回流5~50分鐘，放冷，稱定重量，用 50%~100%甲醇或50%~100%乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，過濾，取續(xù)濾液，即得；
[0011] (2)對(duì)照品溶液的制備：精密稱取斯皮諾素對(duì)照品適量，加甲醇適量，制成含斯皮 諾素0· 005~0· 015mg/mL的對(duì)照品溶液；
[0012] (3)色譜條件：以4. 6mmX 250mm，5 μ m的C18為色譜柱，以乙腈為流動(dòng)相A， 以水-0. 1 %冰乙酸為流動(dòng)相B，按照如下程序進(jìn)行梯度洗脫：0min，A :B為10% :90% ; 0min-15min，A :B 為 10% :90%- 17% :83% ;15min，A :B 為 17% :83% ;15min-25min，A : B 為 17% :83%- 23% :77% ;25min，A :B 為 23% :77% ;25min-30min，A :B 為 23% :77% -35% :65% ;30min，A :B 為 35% :65% ;30min-33min，A :B 為 35% :65%- 10% :90% ; 33min-37min，A :B 為 10% :90% ;檢測(cè)波長(zhǎng) 335nm ;柱溫 20°C~30°C ;流速 1.0 mL/min ;
[0013] (4)分別精密吸取供試品溶液和對(duì)照品溶液8~12 μ L，注入高效液相色譜儀，測(cè) 定；
[0014] 所述重量份與體積份的關(guān)系為g/mL。
[0015] 優(yōu)選地，本發(fā)明上述具有養(yǎng)血除煩、寧心安神作用的藥物制劑的檢測(cè)方法中，
[0016] 該檢測(cè)方法包括如下對(duì)斯皮諾素的含量測(cè)定步驟：
[0017] (1)供試品溶液的制備：取待測(cè)藥物制劑，精密稱定，研細(xì)，取0. 4重量份~0. 6重 量份，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入65 %~75 %甲醇或65 %~75 %乙醇20體積 份~30體積份，稱定重量，超聲8~12分鐘或加熱回流8~12分鐘，放冷，稱定重量，用 65 %~75 %甲醇或65 %~75 %乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，過濾，取續(xù)濾液，即得；
[0018] (2)對(duì)照品溶液的制備：精密稱取斯皮諾素對(duì)照品適量，加甲醇適量，制成含斯皮 諾素0· 008~0· 012mg/mL的對(duì)照品溶液；
[0019] (3)色譜條件：以4. 6mmX 250mm，5 μ m的C18為色譜柱，以乙腈為流動(dòng)相A， 以水-0. 1 %冰乙酸為流動(dòng)相B，按照如下程序進(jìn)行梯度洗脫：Omin，A :B為10% :90% ; 0min-15min，A :B 為 10% :90%- 17% :83% ;15min，A :B 為 17% :83% ;15min-25min，A : B 為 17% :83%- 23% :77% ;25min，A :B 為 23% :77% ;25min-30min，A :B 為 23% :77% -35% :65% ;30min，A :B 為 35% :65% ;30min-33min，A :B 為 35% :65%- 10% :90% ; 33min-37min，A :B 為 10% :90% ;檢測(cè)波長(zhǎng) 335nm ;柱溫 23°C~27°C ;流速 1.0 mL/min ;
[0020] (4)分別精密吸取供試品溶液和對(duì)照品溶液9~11 μ L，注入高效液相色譜儀，測(cè) 定。
[0021] 進(jìn)一步優(yōu)選地，本發(fā)明上述具有養(yǎng)血除煩、寧心安神作用的藥物制劑的檢測(cè)方法 中，
[0022] 該檢測(cè)方法包括如下對(duì)斯皮諾素的含量測(cè)定步驟：
[0023] (1)供試品溶液的制備：取待測(cè)藥物制劑，精密稱定，研細(xì)，取0. 5重量份，精密稱 定，置具塞錐形瓶中，精密加入70%甲醇或70%乙醇25體積份，稱定重量，超聲10分鐘或 加熱回流10分鐘，放冷，稱定重量，用70 %甲醇或70 %乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，過濾，取 續(xù)濾液，即得；
[0024] (2)對(duì)照品溶液的制備：精密稱取斯皮諾素對(duì)照品適量，加甲醇適量，制成含斯皮 諾素0. 010mg/mL的對(duì)照品溶液；
[0025] (3)色譜條件：以4. 6mmX 250mm，5 μ m的C18為色譜柱，以乙腈為流動(dòng)相A， 以水-0.1 %冰乙酸為流動(dòng)相B，按照如下程序進(jìn)行梯度洗脫：Omin，A :B為10% :90% ; 0min-15min，A :B 為 10% :90%- 17% :83% ;15min，A :B 為 17% :83% ;15min-25min，A : B 為 17% :83%- 23% :77% ;25min，A :B 為 23% :77% ;25min-30min，A :B 為 23% :77% -35% :65% ;30min，A :B 為 35% :65% ;30min-33min，A :B 為 35% :65%- 10% :90% ; 33min-37min，A :B 為 10% :90% ;檢測(cè)波長(zhǎng) 335nm ;柱溫 25°C ;流速 1.0 mL/min ;
[0026] (4)分別精密吸取供試品溶液和對(duì)照品溶液10 μ L，注入高效液相色譜儀，測(cè)定。
[0027] 進(jìn)一步優(yōu)選地，本發(fā)明上述具有養(yǎng)血除煩、寧心安神作用的藥物制劑的檢測(cè)方法 中，所述色譜柱選自 4.6mmX250mm，5ym 的 Perkin Elmer C18 或 4.6X250mm，5ym 的 Agilent C18 或 4.6X250mm，5 μπι 的 Inertsil 0DS-3〇
[0028] 進(jìn)一步優(yōu)選地，本發(fā)明上述具有養(yǎng)血除煩、寧心安神作用的藥物制劑的檢測(cè)方法 中，還包括如下陰性對(duì)照品溶液的制備的步驟：
[0029] 所述陰性對(duì)照品的原料藥組成為：遠(yuǎn)志、茯苓、梔子、六神曲、甘草；
[0030] 取待測(cè)陰性對(duì)照品，精密稱定，研細(xì)，取0. 2重量份~0. 8重量份，精密稱定，置具 塞錐形瓶中，精密加入50%~100%甲醇或50%~100%乙醇15體積份~35體積份，稱定 重量，超聲5~50分鐘或加熱回流5~50分鐘，放冷，稱定重量，用50 %~100%甲醇或 50%~100%乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，過濾，取續(xù)濾液，即得所述陰性對(duì)照品溶液。
[0031] 進(jìn)一步優(yōu)選地，本發(fā)明上述具有養(yǎng)血除煩、寧心安神作用的藥物制劑的檢測(cè)方法 中，
[0032] 取待測(cè)陰性對(duì)照品，精密稱定，研細(xì)，取0. 4重量份~0. 6重量份，精密稱定，置具 塞錐形瓶中，精密加入65 %~75 %甲醇或65 %~75 %乙醇20體積份~30體積份，稱定重 量，超聲8~12分鐘或加熱回流8~12分鐘，放冷，稱定重量，用65%~75%甲醇或65%~ 75%乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，過濾，取續(xù)濾液，即得所述陰性對(duì)照品溶液。
[0033] 進(jìn)一步優(yōu)選地，本發(fā)明上述具有養(yǎng)血除煩、寧心安神作用的藥物制劑的檢測(cè)方法 中，所述陰性對(duì)照品溶液的制備的步驟為：取待測(cè)陰性對(duì)照品，精密稱定，研細(xì)，取〇. 5重量 份，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70 %甲醇或70 %乙醇25體積份，稱定重量，超聲 10分鐘或加熱回流10分鐘，放冷，稱定重量，用70%甲醇或70%乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖 勻，過濾，取續(xù)濾液，即得所述陰性對(duì)照品溶液。
[0034] 進(jìn)一步優(yōu)選地，本發(fā)明上述具有養(yǎng)血除煩、寧心安神作用的藥物制劑的檢測(cè)方法 中，所述高效液相色譜儀選自日本島津、Agilent 1100或Agilent 1260。
[0035] 進(jìn)一步優(yōu)選地，本發(fā)明上述具有養(yǎng)血除煩、寧心安神作用的藥物制劑的檢測(cè)方法 中，所述藥物制劑的原料藥組成為：所述藥物制劑的原料藥組成為：炒酸棗仁220-280重量 份、遠(yuǎn)志140-190重量份、獲等140-190重量份、振子50-110重量份、六神曲50-110重量份、 甘草50-110重量份；
[0036] 所述陰性對(duì)照品的原料藥組成為：遠(yuǎn)志140-190重量份、茯苓140-190重量份、梔 子50-110重量份、六神曲50-110重量份、甘草50-110重量份。
[0037] 進(jìn)一步優(yōu)選地，本發(fā)明上述具有養(yǎng)血除煩、寧心安神作用的藥物制劑的檢測(cè)方法 中，所述藥物制劑的原料藥組成為：炒酸棗仁250重量份、