金納米顆粒的目標(biāo)DNA與探針DNA進(jìn)行雜交得到電極E ;
[0072]S6、向電極E上滴加含1-(3-二甲氨基丙基)-3_乙基碳二亞胺鹽酸鹽和N-羥基琥珀酰亞胺的第二混合溶液進(jìn)行活化,每lcm2電極E的修飾面上滴加0.lmL第二混合溶液,將羅丹明123固定在電極E表面,采用pH = 7.4的磷酸鹽緩沖液清洗后得到光電傳感器的工作電極。
[0073]實(shí)施例3
[0074]本發(fā)明提出的一種光電傳感器的工作電極的制備方法,包括如下步驟:
[0075]S1、將ΙΤ0電極采用丙酮清洗后,再加入第一混合溶液中清洗,第一混合溶液中,氫氧化鈉濃度為lmol/L,乙醇和水的體積比為1:1 ;然后采用水清洗后,ΙΤ0電極清洗時(shí)間為15min,80°C烘干12h得到電極A ;
[0076]S2、將二氧化鈦膠體溶液滴加在電極A表面,其中二氧化鈦膠體溶液的制備方法為將6mg的二氧化鈦粉末超聲分散于6mL的去離子水中,每lcm2電極A的修飾面上滴加0.08mL 二氧化鈦膠體溶液,干燥后進(jìn)行煅燒,煅燒的溫度為450°C,煅燒的時(shí)間為0.5h,然后冷卻至室溫得到電極B;
[0077]S3、將電極B置于濃度為質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1.5wt%的聚二烯基丙二甲基氯化銨水溶液中浸泡lOmin,去離子水清洗,接著置于濃度為8mmol/L的硫化鎘量子點(diǎn)膠體溶液中浸泡lOmin,再用去離子水清洗,然后重復(fù)上述步驟5次得到電極C ;
[0078]S4、向電極C上滴加含1- (3- 二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽和N-羥基琥珀酰亞胺的第二混合溶液進(jìn)行活化,每lcm2電極C的修飾面上滴加0.08mL第二混合溶液,活化時(shí)間為lh ;第二混合溶液中,1-(3- 二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽的濃度為10mmol/L, N-羥基琥珀酰亞胺的濃度為lOmmol/L ;清洗后,再滴加探針DNA進(jìn)行一次孵育,每lcm2活化后的電極C的修飾面上滴加0.08mL探針DNA,一次孵育溫度為4°C,一次孵育時(shí)間為lh ;清洗后,接著滴加2-羥基乙胺進(jìn)行封閉得到電極D,每lcm2孵育后的電極C的修飾面上滴加0.08mL 2-輕基乙胺,封閉時(shí)間為lh ;上述清洗采用pH = 7.4的磷酸鹽緩沖液;
[0079]S5、將目標(biāo)DNA置于三氯乙基磷酸酯中進(jìn)行避光活化,避光活化的時(shí)間為lh,再加入金納米顆粒,接著進(jìn)行室溫振蕩,室溫振蕩的時(shí)間為16h,離心后重新分散得到標(biāo)記金納米顆粒的目標(biāo)DNA ;將標(biāo)記金納米顆粒的目標(biāo)DNA滴加至電極D上進(jìn)行二次孵育,每lcm2電極D的修飾面上滴加0.08mL標(biāo)記金納米顆粒的目標(biāo)DNA,二次孵育時(shí)間為lh,使標(biāo)記金納米顆粒的目標(biāo)DNA與探針DNA進(jìn)行雜交得到電極E ;
[0080]S6、向電極E上滴加含1-(3-二甲氨基丙基)-3_乙基碳二亞胺鹽酸鹽和N-羥基琥珀酰亞胺的第二混合溶液進(jìn)行活化,每lcm2電極E的修飾面上滴加0.08mL第二混合溶液,將羅丹明123固定在電極E表面,采用pH = 7.4的磷酸鹽緩沖液清洗后得到光電傳感器的工作電極。
[0081]實(shí)施例4
[0082]本發(fā)明提出的一種光電傳感器的工作電極的制備方法,包括如下步驟:
[0083]S1、將ΙΤ0電極采用丙酮清洗后,再加入第一混合溶液中清洗,第一混合溶液中,氫氧化鈉濃度為lmol/L,乙醇和水的體積比為1:1 ;然后采用水清洗后,ΙΤ0電極清洗時(shí)間為15min,80°C烘干12h得到電極A ;
[0084]S2、將二氧化鈦膠體溶液滴加在電極A表面,其中二氧化鈦膠體溶液的制備方法為將12mg的二氧化鈦粉末超聲分散于6mL的去離子水中,每lcm2電極A的修飾面上滴加
0.08mL 二氧化鈦膠體溶液,干燥后進(jìn)行煅燒,煅燒的溫度為450°C,煅燒的時(shí)間為lh,然后冷卻至室溫得到電極B;
[0085]S3、將電極B置于濃度為質(zhì)量分?jǐn)?shù)為lwt %的聚二烯基丙二甲基氯化銨水溶液中浸泡lOmin,去離子水清洗,接著置于濃度為8mmol/L的硫化鎘量子點(diǎn)膠體溶液中浸泡lOmin,再用去離子水清洗,然后重復(fù)上述步驟4次得到電極C ;
[0086]S4、向電極C上滴加含1- (3- 二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽和N-羥基琥珀酰亞胺的第二混合溶液進(jìn)行活化,每lcm2電極C的修飾面上滴加0.08mL第二混合溶液,活化時(shí)間為lh ;第二混合溶液中,1-(3- 二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽的濃度為10mmol/L, N-羥基琥珀酰亞胺的濃度為lOmmol/L ;清洗后,再滴加探針DNA進(jìn)行一次孵育,每lcm2活化后的電極C的修飾面上滴加0.08mL探針DNA,一次孵育溫度為4°C,一次孵育時(shí)間為lh ;清洗后,接著滴加2-羥基乙胺進(jìn)行封閉得到電極D,每lcm2孵育后的電極C的修飾面上滴加0.08mL 2-輕基乙胺,封閉時(shí)間為lh ;上述清洗采用pH = 7.4的磷酸鹽緩沖液;
[0087]S5、將目標(biāo)DNA置于三氯乙基磷酸酯中進(jìn)行避光活化,避光活化的時(shí)間為lh,再加入金納米顆粒,接著進(jìn)行室溫振蕩,室溫振蕩的時(shí)間為16h,離心后重新分散得到標(biāo)記金納米顆粒的目標(biāo)DNA ;將標(biāo)記金納米顆粒的目標(biāo)DNA滴加至電極D上進(jìn)行二次孵育,每lcm2電極D的修飾面上滴加0.08mL標(biāo)記金納米顆粒的目標(biāo)DNA,二次孵育時(shí)間為lh,使標(biāo)記金納米顆粒的目標(biāo)DNA與探針DNA進(jìn)行雜交得到電極E ;
[0088]S6、向電極E上滴加含1-(3-二甲氨基丙基)-3_乙基碳二亞胺鹽酸鹽和N-羥基琥珀酰亞胺的第二混合溶液進(jìn)行活化,每lcm2電極E的修飾面上滴加0.08mL第二混合溶液,將羅丹明123固定在電極E表面,采用pH = 7.4的磷酸鹽緩沖液清洗后得到光電傳感器的工作電極。
[0089]實(shí)施例5
[0090]本發(fā)明提出的一種光電傳感器的工作電極的制備方法,包括如下步驟:
[0091]S1、將ΙΤ0電極采用丙酮清洗后,再加入第一混合溶液中清洗,第一混合溶液中,氫氧化鈉濃度為lmol/L,乙醇和水的體積比為1:1 ;然后采用水清洗后,ΙΤ0電極清洗時(shí)間為15min,80°C烘干12h得到電極A ;
[0092]S2、將二氧化鈦膠體溶液滴加在電極A表面,其中二氧化鈦膠體溶液的制備方法為將9mg的二氧化鈦粉末超聲分散于6mL的去離子水中,每lcm2電極A的修飾面上滴加
0.08mL 二氧化鈦膠體溶液,干燥后進(jìn)行煅燒,煅燒的溫度為450°C,煅燒的時(shí)間為0.5h,然后冷卻至室溫得到電極B;
[0093]S3、將電極B置于濃度為質(zhì)量分?jǐn)?shù)為lwt %的聚二烯基丙二甲基氯化銨水溶液中浸泡lOmin,去離子水清洗,接著置于濃度為8mmol/L的硫化鎘量子點(diǎn)膠體溶液中浸泡lOmin,再用去離子水清洗,然后重復(fù)上述步驟6次得到電極C ;
[0094]S4、向電極C上滴加含1- (3- 二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽和N-羥基琥珀酰亞胺的第二混合溶液進(jìn)行活化,每lcm2電極C的修飾面上滴加0.08mL第二混合溶液,活化時(shí)間為lh ;第二混合溶液中,1-(3- 二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽的濃度為20mmol/L, N-羥基琥珀酰亞胺的濃度為lOmmol/L ;清洗后,再滴加探針DNA進(jìn)行一次孵育,每lcm2活化后的電極C的修飾面上滴加0.08mL探針DNA,一次孵育溫度為4°C,一次孵育時(shí)間為2h ;清洗后,接著滴加2-羥基乙胺進(jìn)行封閉得到電極D,每lcm2孵育后的電極C的修飾面上滴加0.08mL 2-輕