一種2-氨基丁醇對(duì)映異構(gòu)體的hplc分離檢測(cè)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ]本發(fā)明屬于藥物分析技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種2-氨基丁醇對(duì)映異構(gòu)體的HPLC分離 檢測(cè)方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 右蘭索拉唑，化學(xué)名為：（R)-2_[ [3-甲基-4-(2,2，2_三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲基 亞磺?；鵠-1H-苯并咪唑，分子式:C16H14F3N30 2S，其化學(xué)結(jié)構(gòu)如下式所示：
右蘭索拉唑?yàn)橘|(zhì)子栗抑制劑，該藥是蘭索拉唑的對(duì)映體，又被稱為右旋蘭索拉唑，用于 非糜爛性胃食管反流病引起的胃灼熱，糜爛性食管炎治療和治愈后糜爛性食管炎的維持治 療。由日本武田制藥公司研發(fā)，于2009年1月30日獲得美國FDA批準(zhǔn)上市。2010年在加拿大上 市。具有不受飲食影響、每日服藥一次且晝夜均可保持較高的抑酸水平、藥物相互作用少、 用藥方便且病人依從性良好等優(yōu)點(diǎn)，使得該藥物在藥品市場(chǎng)銷售快速增長(zhǎng)，目前在中國藥 品市場(chǎng)也算是重碌級(jí)品種。
[0003] 從右蘭索拉唑的結(jié)構(gòu)式中可以看出右蘭索拉唑有一個(gè)手性中心，該手性中心是由 (R)-2_氨基丁醇引入的，如果(R)-2_氨基丁醇的光學(xué)純度較低，則會(huì)存在另一個(gè)異構(gòu)體，這 樣就會(huì)生成蘭索拉唑，而蘭索拉唑的藥效及毒副作用均沒有右蘭索拉唑好，所以（R)-2-氨 基丁醇的光學(xué)純度直接影響著右蘭索拉唑的光學(xué)純度也就影響著右蘭索拉唑治療食管炎 的療效。雖然該藥品上市時(shí)間較短，但由于其用藥方便且病人依從性良好等優(yōu)點(diǎn)引發(fā)了對(duì) 這種新藥的大量需求，從而導(dǎo)致對(duì)右蘭索拉唑手性源(R)-2-氨基丁醇的大量需求。因此制 備高標(biāo)準(zhǔn)、高光學(xué)純度的(R)-2_氨基丁醇，對(duì)于合成新藥右蘭索拉唑具有重要的意義。
[0004] 馮桂春等(CN101024617 A)，葉菲等(CN101863779 A)，臧力等(廣州化工)通過測(cè) 定比旋光度值進(jìn)行手性純度的分析。通過比旋光度值來測(cè)定手性純度，誤差較大。
[0005] 2-氨基丁醇沒有具有紫外吸收的官能團(tuán)，所以不能直接用高效液相色譜與紫外聯(lián) 用來檢測(cè)其含量以及對(duì)映異構(gòu)體的分離，如何準(zhǔn)確控制其手性純度一直困擾業(yè)內(nèi)人員的一 大難題。
[0006] 通過與帶紫外吸收的手性試劑進(jìn)行快速雙衍生化，得到既有紫外吸收又形成三個(gè) 手性基團(tuán)的衍生物，既能在紫外檢測(cè)器下檢測(cè)，又能直接通過反相高效液相進(jìn)行異構(gòu)體的 分離檢測(cè)。
[0007]

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供一種2-氨基丁醇對(duì)映異構(gòu)體的分離 檢測(cè)方法，可以快捷準(zhǔn)確的實(shí)現(xiàn)定性、定量和對(duì)映體過量率分析。
[0009] 為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案如下： 一種2-氨基丁醇對(duì)映異構(gòu)體的分離檢測(cè)方法，具體包含如下步驟： 步驟一、衍生化 將2-氨基丁醇溶于有機(jī)溶劑中，在一定的溫度條件下，以(R)-( + )_l-苯基乙磺酰氯為 衍生化試劑，控制2-氨基丁醇和(R)-( + )-1-苯基乙磺酰氯的摩爾比，進(jìn)行雙衍生化反應(yīng)，得 到衍生化化后的2-氨基丁醇，反應(yīng)式見式I: 式I
步驟二、分離檢測(cè) 采用反相高效液相色譜-紫外檢測(cè)器對(duì)衍生化后的2-氨基丁醇進(jìn)行定性、定量和對(duì)映 體過量率測(cè)定。
[0010]所述的有機(jī)溶劑選自四氫呋喃、四氯化碳、二氯甲烷、1，2_二氯乙烷和石油醚中的 一種或兩種以上的組合。
[0011] 所述的有機(jī)溶劑與2-氨基丁醇的體積比為1~300:1，優(yōu)選的為5~30:1。
[0012] 所述的一定溫度是指從0°C到回流溫度，優(yōu)選為20~35°C。
[0013] 本發(fā)明的回流溫度具體數(shù)值與有機(jī)溶劑的選擇有關(guān)，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以根據(jù)溶 劑的選擇清楚的確定回流溫度的范圍。
[0014] 所述的2-氨基丁醇和(R)-( + )-1-苯基乙磺酰氯的摩爾比為1:2~20。
[0015] 所述的紫外檢測(cè)器的檢測(cè)波長(zhǎng)為210~300nm，優(yōu)選230~270nm。
[0016]所述的反相高效液相色譜使用的色譜柱是普通反相柱。優(yōu)選色譜柱為反相C18柱， 最優(yōu)選的為迪馬反相C18柱(250X4.6mm，5ym，pH范圍2.0~8.0)。
[0017 ]所述的反相高效液相色譜的流動(dòng)相由緩沖鹽的水液和有機(jī)溶劑組成，有機(jī)溶劑選 自甲醇、乙醇、異丙醇和乙腈中的一種或兩種；有機(jī)溶劑占流動(dòng)相的體積比例范圍為50%~ 100%〇
[0018] 所述的流動(dòng)相中緩沖鹽為碳酸氫鈉、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鈉、檸檬酸鉀和醋酸 鈉，優(yōu)選為50mmol/L醋酸鈉和30mmol/L三乙胺水溶液。
[0019] 所述的流動(dòng)相的流速為0.2~3. Oml/min，優(yōu)選流速為1. OmL/min。
[0020] 本發(fā)明中，反相高效液相色譜分析條件優(yōu)選為：紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm，柱溫為30 °C，流動(dòng)相70%甲醇-30%( 50mmol/L醋酸鈉)水溶液，pH值為3.5，流速為1. OmL/min，進(jìn)樣體積 為20yL。
[0021 ]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明所取得的有益效果如下： 本發(fā)明采用衍生化的方法，使2-氨基丁醇和過量的衍生化試劑(R)-( + )_l-苯基乙磺酰 氯反應(yīng)生成2-氨基丁醇的衍生物，通過高效液相色譜-紫外檢測(cè)器聯(lián)用，C18色譜柱能夠有 效的分離測(cè)定2-氨基丁醇及其對(duì)映異構(gòu)體。本發(fā)明解決了 2-氨基丁醇沒有紫外吸收且使用 手性色譜柱較昂貴的問題，從而保證了用高效、高靈敏度的高效液相色譜方法使得2-氨基 丁醇及其對(duì)映異構(gòu)體的分離。
【附圖說明】
[0022]圖l:(R)-( + )-1-苯基乙磺酰氯與(RS)-2_氨基丁醇衍生化后色譜圖； 在附圖中：1為00-( + )-1-苯基乙磺酰氯與00-2-氨基丁醇的衍生物;2為(R)-( + )_l-苯基乙磺酰氯和(S) -2-氨基丁醇的衍生物。
【具體實(shí)施方式】
[0023]以下結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)的敘述。
[0024] 實(shí)施例1: (R)-( + )-1-苯基乙磺酰氯與2-氨基丁醇衍生物的液相色譜分析 l-l:(R)-( + )-1-苯基乙磺酰氯與(RS)-2_氨基丁醇衍生物的液相色譜分析 稱取(RS)-2-氨基丁醇5.15g(0.05mol)，溶于60mL四氯化碳中，在40°C下磁力攪拌，緩 慢滴加(R)-( + )_l-苯基乙磺酰氯40.93g(0.20mol) JLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后用減壓真空 栗蒸干溶劑得(RS)-2-氨基丁醇和(R)-( + )-1-苯基乙磺酰氯的衍生物。
[0025] 將(RS)-2_氨基丁醇和(R)-( + )_l-苯基乙磺酰氯的衍生物用流動(dòng)相溶解后采用高 效液相色譜進(jìn)行檢測(cè)分析。液相色譜條件:迪馬C18色譜柱，流動(dòng)相為甲醇-50mmol/L醋酸鈉 水溶液(體積比為70:30)，pH值為3.5，紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm，流速為1. OmL/min，柱溫為30 °C，進(jìn)樣體積20yL，測(cè)得手性e.e.%值為0.22。保留時(shí)間和峰面積分析見表1，其圖譜見圖1。
[0026] 表 1
不整^^臾哪錄^勻安卩整」酔啊」土似日'巴1首方機(jī) (R)-( + )-1-苯基乙磺酰氯與(S)-2-氨基丁醇衍生物的液相色譜分析 稱取(S)-2-氨基丁醇5.15g(0.05mol)，溶于60mL四氯化碳中，在40°C下磁力攪拌，緩慢 滴加(R)-( + )_l-苯基乙磺酰氯40.93g(0.20mol) JLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后用減壓真空栗 蒸干溶劑得(S)-2-氨基丁醇和(R)-( + )-1-苯基乙磺酰氯的衍生物。
[0027] 將（S) _2_氨基丁醇和(R )-( + )-1-苯基乙橫酰氯的衍生物用流動(dòng)相溶解后米用尚 效液相色譜進(jìn)行檢測(cè)分析。液相色譜條件:迪馬C18色譜柱，流動(dòng)相為甲醇-50mmol/L醋酸鈉 水溶液(體積比為70:30)，pH值為3.5，紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm，流速為1. OmL/min，柱溫為30 °C，進(jìn)樣體積20yL，測(cè)得手性e. e. %值為99.7。
[0028] l-3:(R)-( + )_l-苯基乙磺酰氯與(R)-2_氨基丁醇的衍生物的液相色譜分析 稱取(R)-2-氨基丁醇5.15g(0.05mol)，溶于60mL四氯化碳中，在40°C下磁力攪拌，緩慢 滴加(R)-( + )_l-苯基乙磺酰氯40.93g(0.20mol) JLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后用減壓真空栗 蒸干溶劑得(R)-2-氨基丁醇和(R)-(+)_l-苯基乙磺酰氯的衍生物。
[0029] 將(R)-2_氨基丁醇和(R)-( + )_l-苯基乙磺酰氯的衍生物用流動(dòng)相溶解后采用高 效液相色譜進(jìn)行檢測(cè)分析。液相色譜條件:迪馬C18色譜柱，流動(dòng)相為甲醇-50mmol/L醋酸鈉 水溶液(體積比為70:30)，pH值為3.5，紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm，流速為1. OmL/min，柱溫為30 °C，進(jìn)樣體積20yL，測(cè)得手性e. e. %值為99.6。
[0030] 實(shí)施例2:(RS)-2_氨基丁醇和(R)-( + )_l-苯基乙磺酰氯的衍生化條件考察試驗(yàn) 2-1:取(RS)-2-氨基丁醇5.15g(0.05mol)，溶于50mL乙酸乙酯中，在30°C下磁力攪拌， 緩慢加入(R)-(+)_l-苯基乙磺酰氯30.7(^(0.15111〇1)?？?：監(jiān)測(cè)反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后用減壓真 空栗蒸干溶劑得(R)-2_氨基丁醇和(RS)-(+)-1-苯基乙磺酰氯的衍生物。
[0031] 將(RS)-2_氨基丁醇和(R)-( + )_l-苯基乙磺酰氯的衍生物用流動(dòng)相溶解后采用高 效液相色譜進(jìn)行檢測(cè)分析。液相色譜條件:迪馬C18色譜柱，流動(dòng)相為甲醇-50mmol/L醋酸鈉 水溶液(體積比為70:30)，pH值為3.5，紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm，流速為1. OmL/min，柱溫為30 °C，進(jìn)樣體積20yL，色譜圖同實(shí)施例1 -1。
[0032]:取(RS)-2-氨基丁醇5.15g(0.05mol)，溶于60mL二氯甲燒中，在30°C下磁力攪拌， 緩慢加入(R)-(+)_l-苯基乙磺酰氯20.478(0.1111〇1)。11(：監(jiān)測(cè)反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后用減壓真空 栗蒸干溶劑得(RS)-2-氨基丁醇和(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯的衍生物。
[0033]將(RS)-2_氨基丁醇和(R)-( + )_l-苯基乙磺酰氯的衍生物用流動(dòng)相溶解后采用高 效液相色譜進(jìn)行檢測(cè)分析。液相色譜條件:迪馬C18色譜柱，流動(dòng)相為甲醇-50mmol/L醋酸鈉 水溶液(體積比為70:30)，pH值為3.5，紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm，流速為1. OmL/min，柱溫為30 °C，進(jìn)樣體積20yL，色譜圖同實(shí)施例1 -1。
[0034]:取(RS)-2-氨基丁醇5.15g(0.05mol)，溶于200mL石油醚中，35°C下磁力攪拌，緩 慢加入(R)-( + )_