一種生豬白肌肉(pse肉)快速檢測(cè)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于肉類食品領(lǐng)域，尤指一種基于血液生化特性變化和多元統(tǒng)計(jì)分析的白 肌肉快速檢測(cè)方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 由于養(yǎng)殖集約化和高蛋白飼料的推廣，導(dǎo)致豬只在宰前處理過(guò)程中，受到驅(qū)趕、運(yùn) 輸、熱刺激后，更易引起應(yīng)激反應(yīng)，使得宰后肌肉呈現(xiàn)蒼白（Pale)、質(zhì)地松軟無(wú)彈性(Soft)， 并且肌肉表面肉汁滲出（Exudative)的特點(diǎn)，此即為白肌肉，又稱為PSE肉。相較于正常豬 肉，PSE肉蛋白嚴(yán)重變性，汁液流失嚴(yán)重，其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值、食用風(fēng)味和商品價(jià)值均有不同程度的 下降。PSE肉一旦流入市場(chǎng)，將會(huì)給企業(yè)帶來(lái)嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。目前關(guān)于PSE肉的檢測(cè)方法主 要有感官檢查、質(zhì)構(gòu)檢測(cè)、理化檢測(cè)和相關(guān)基因檢測(cè)(如氟烷基因）等，雖然這些方法可以很 好地將PSE肉檢測(cè)出來(lái)，但是由于PSE肉發(fā)生的延后性，這些檢測(cè)方法都是在豬肉屠宰完成 或者流通進(jìn)入市場(chǎng)之后進(jìn)行的，不能在養(yǎng)殖場(chǎng)或屠宰場(chǎng)內(nèi)將可能發(fā)生PSE情況的豬只預(yù)檢 出來(lái)，具有一定得局限性。PSE肉主要由應(yīng)激導(dǎo)致，而應(yīng)激直接影響豬只血液生理生化指標(biāo) 的變化，因此血液生理生化指標(biāo)可以敏感而準(zhǔn)確地反映豬只的應(yīng)激狀態(tài)，對(duì)PSE肉的發(fā)生也 有一定的指示作用。本發(fā)明以生豬血液為樣本，分析豬只血清生化指標(biāo)變化和PSE肉的關(guān) 聯(lián)，利用主成分分析和因子載荷圖篩選出血液中表征PSE肉的生物標(biāo)志，通過(guò)檢測(cè)相應(yīng)生物 標(biāo)志來(lái)達(dá)到檢測(cè)PSE豬肉的目的。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種用于生豬白肌肉（PSE肉）快速檢 測(cè)的方法。
[0004] 為解決上述問(wèn)題本發(fā)明采用以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)：
[0005] 步驟(1)、樣品前處理
[0006] 對(duì)生豬進(jìn)行采血，將血樣標(biāo)本自發(fā)完全凝集，然后從自發(fā)完全凝集后的血樣標(biāo)本 中取上清液，將上述血清存放于4 °C冰箱保存；
[0007] 步驟(2)、生化指標(biāo)的測(cè)定
[0008] 對(duì)步驟（1)前處理后得到的血清采用全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行以下生化指標(biāo)的測(cè) 定，主要包括:肌酸激酶(CK)、乳酸脫氫酶(LDH)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、血糖(GLU)、 乳酸(LA)。
[0009] 步驟(3)、基于血清生化指標(biāo)的PSE肉標(biāo)準(zhǔn)的建立
[0010] 當(dāng)血清中五個(gè)生化指標(biāo)均在正常水平，即肌酸激酶(CK)酶活力達(dá)到(8340±3712) U/L、乳酸脫氫酶(LDH)酶活力達(dá)到(640±113)U/L、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)酶活力達(dá) 至丨」（117.24±42.48)1]/1、血糖（6〇])濃度達(dá)到（6.55±0.98)111111〇1/1、乳酸（1^)濃度達(dá)到 (10.84±2.27)mm 〇l/L時(shí)，即為正常肉；當(dāng)血清中五個(gè)生化指標(biāo)與正常豬生豬的生化指標(biāo)顯 著升高，即肌酸激酶（CK)酶活力達(dá)到（29386±8113)U/L、乳酸脫氫酶（LDH)酶活力達(dá)到 (2051±1239)1]/1、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(六51')酶活力達(dá)到（252.83±119.69)1]/1、血糖 (GLU)濃度達(dá)到（10.26±2.50)111111〇1/1、乳酸〇^)濃度達(dá)到（17.18±1.87)111111〇1/1時(shí)，即為 PSE肉；當(dāng)血清中五個(gè)生化指標(biāo)有任意三個(gè)或四個(gè)指標(biāo)顯著升高，即為輕度PSE肉；當(dāng)血清中 五個(gè)生化指標(biāo)有任意三個(gè)或四個(gè)指標(biāo)在正常水平，亦為正常肉。
[0011] 步驟(4)、對(duì)待測(cè)樣本進(jìn)行檢測(cè)
[0012] 綜合分析步驟(2)中五個(gè)生化指標(biāo)測(cè)定結(jié)果，根據(jù)步驟(3)建立的判定標(biāo)準(zhǔn)得到樣 本檢測(cè)結(jié)果。
[0013] 本發(fā)明的有益效果是：
[0014] 本發(fā)明將豬只血液樣本與豬肉樣本建立聯(lián)系，針對(duì)血液生化特性變化，利用主成 分分析和因子分析尋找出血液中表征PSE肉的五個(gè)生化指標(biāo)，通過(guò)分析血液中五個(gè)生化指 標(biāo)的測(cè)定結(jié)果來(lái)檢測(cè)PSE豬肉，提供了一種無(wú)損檢測(cè)PSE豬肉的方法，使得養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)可能發(fā) 生PSE情況的豬只被預(yù)檢出來(lái)，為飼料中營(yíng)養(yǎng)添加及預(yù)防PSE肉提供指導(dǎo)，同時(shí)還可將屠宰 場(chǎng)PSE肉在出廠前被檢出，避免PSE肉流入市場(chǎng)，從而避免屠宰場(chǎng)的經(jīng)濟(jì)損失。
【附圖說(shuō)明】
[00?5]圖1是本發(fā)明的流程圖。
【具體實(shí)施方式】
[0016]下面結(jié)合具體實(shí)施例和附圖對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的分析。
[0017] 實(shí)施例！
[0018] 浙江嘉興某屠宰場(chǎng)PSE豬肉快速檢測(cè)：
[0019] 如圖1所示，為本發(fā)明的流程圖，根據(jù)該流程圖實(shí)施步驟如下：
[0020] 1、樣品前處理
[0021] 隨機(jī)選取宰前檢驗(yàn)健康合格的杜X長(zhǎng)X大三元雜交豬40頭，體重100kg左右，依次 編號(hào)1到40,對(duì)每頭豬在屠宰時(shí)進(jìn)行采血，約25mL，采集于50mL離心管中，先于37°C培養(yǎng)箱中 靜置2h，然后取出放在4°C冰箱中靜置過(guò)夜，使標(biāo)本自發(fā)完全凝集，然后吸取上清液，對(duì)個(gè)別 渾濁的管，離心(4°C，3000r/min離心1 Omin)分離血清。將制得的血清存放于4°C冰箱保存， 用于生理生化指標(biāo)測(cè)定。
[0022] 2、血液生化指標(biāo)的測(cè)定
[0023]所有血液生化指標(biāo)均用日立7020全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定(試劑購(gòu)自杭州徳格醫(yī)療 設(shè)備有限公司）。其中檢測(cè)的生化指標(biāo)主要包括:肌酸激酶(CK)、乳酸脫氫酶(LDH)、天門冬 氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、血糖(GLU)、乳酸(LA)。
[0024] 3、依據(jù)判定標(biāo)準(zhǔn)對(duì)待檢測(cè)樣本進(jìn)行判定
[0025] 依據(jù)判定標(biāo)準(zhǔn)對(duì)待測(cè)樣本進(jìn)行判定，判定結(jié)果如表1，結(jié)果顯示編號(hào)為3、18的樣本 血清中五個(gè)生化指標(biāo)均顯著升高，判定其為PSE肉；編號(hào)為9、14的樣本血清中有三個(gè)生化指 標(biāo)顯著升高，判定其為輕度PSE肉；其余樣本血清指標(biāo)均在正常范圍，均為正常肉。
[0026] 4、檢測(cè)結(jié)果驗(yàn)證
[0027]對(duì)屠宰后的胴體抽取背最長(zhǎng)肌(第5-6腰椎），通過(guò)現(xiàn)有的PSE肉判定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行PSE 肉判定。結(jié)果顯示編號(hào)為3、18的樣本確實(shí)為PSE肉；編號(hào)為9、14的樣本也有PSE跡象，確實(shí)為 輕度PSE肉；其余樣本均為正常肉。由此表明該P(yáng)SE快速檢測(cè)方法能夠快速、準(zhǔn)確檢測(cè)PSE肉 的存在，正確率為100 %，能夠?qū)⒉煌焚|(zhì)的肉樣明顯區(qū)分開(kāi)。
[0028]表1樣本判定結(jié)果
[0029]
[0030] 實(shí)施例2
[0031 ]浙江金華某養(yǎng)殖場(chǎng)PSE豬肉快速檢測(cè)：
[0032] 1、樣品前處理
[0033] 在養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)隨機(jī)選取杜X長(zhǎng)X大三元雜交豬100頭，體重100kg左右，依次編號(hào)1到 100。對(duì)每頭豬靜脈采血，約51111^，采集于1〇1]11^離心管中，離心（4°〇，300〇1'/111；[11離心10111；[11)分 離血清。將制得的血清存放于4°C冰箱保存，用于生理生化指標(biāo)測(cè)定。
[0034] 2、血液生化指標(biāo)的測(cè)定
[0035] 所有血液生化指標(biāo)均用日立7020全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定(試劑購(gòu)自杭州徳格醫(yī)療 設(shè)備有限公司）。其中檢測(cè)的生化指標(biāo)主要有:肌酸激酶(CK)、乳酸脫氫酶(LDH)、天門冬氨 酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、血糖(GLU)、乳酸(LA)。
[0036] 3、依據(jù)判定標(biāo)準(zhǔn)對(duì)待檢測(cè)樣本進(jìn)行判定
[0037] 依據(jù)判定標(biāo)準(zhǔn)對(duì)待測(cè)樣本進(jìn)行判定，得到樣本檢測(cè)結(jié)果。測(cè)定結(jié)果顯示編號(hào)為5、 26、53、71、88的樣本血清中五個(gè)生化指標(biāo)均顯著高，判定其為PSE肉 ；編號(hào)為18、32、54、92的 樣本血清中有三個(gè)生化指標(biāo)顯著升