高，判定其為輕度PSE肉；其余樣本血清指標(biāo)均在正常范 圍，均為正常肉。
[0038] 4、檢測結(jié)果驗證
[0039] 對屠宰后的胴體抽取背最長肌(第5-6腰椎），通過現(xiàn)有的PSE肉判定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行PSE 肉判定。結(jié)果編號為5、26、53、71、88的樣本確實為PSE肉；編號為18、32、54、92的樣本也有 PSE跡象，確實為輕度PSE肉；其余樣本均為正常肉。由此表明該PSE快速檢測方法能夠快速、 準(zhǔn)確檢測PSE肉的存在，正確率為100 %，能夠?qū)⒉煌焚|(zhì)的肉樣明顯區(qū)分開。
[0040] 實施例3
[00411浙江蕭山某屠宰場PSE豬肉快速檢測：
[0042] 1、樣品前處理
[0043]隨機(jī)選取宰前檢驗健康合格的杜X長X大三元雜交豬200頭，體重100kg左右，依 次編號1到200。對每頭豬在屠宰時進(jìn)行采血，約25mL，采集于50mL離心管中，先于37°C培養(yǎng) 箱中靜置2h，然后取出放在4°C冰箱中靜置過夜，使標(biāo)本自發(fā)完全凝集，然后吸取上清液，對 個別渾濁的管，離心(4°C，3000r/min離心10min)分離血清。將制得的血清存放于4°C冰箱保 存，用于生理生化指標(biāo)測定。
[0044] 2、血液生化指標(biāo)的測定
[0045]所有血液生化指標(biāo)均用日立7020全自動生化分析儀測定(試劑購自杭州徳格醫(yī)療 設(shè)備有限公司）。其中檢測的生化指標(biāo)主要有:肌酸激酶(CK)、乳酸脫氫酶(LDH)、天門冬氨 酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、血糖(GLU)、乳酸(LA)。
[0046] 3、依據(jù)判定標(biāo)準(zhǔn)對待檢測樣本進(jìn)行判定
[0047] 依據(jù)判定標(biāo)準(zhǔn)對待測樣本進(jìn)行判定，得到樣本檢測結(jié)果。測定結(jié)果顯示編號為2、 28、43、66、89、113、137、158、176、193的樣本血清中五個生化指標(biāo)均顯著高，判定其為PSE 肉；編號為23、41、54、66、92、142、185的樣本血清中有三個生化指標(biāo)顯著升高，判定其為輕 度PSE肉；其余樣本血清指標(biāo)均在正常范圍，均為正常肉。
[0048] 4、檢測結(jié)果驗證
[0049] 對屠宰后的胴體抽取背最長肌(第5-6腰椎），通過現(xiàn)有的PSE肉判定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行PSE 肉判定。結(jié)果編號為2、28、43、66、89、113、137、158、176、193的樣本確實為PSE肉；編號為23、 41、54、66、92、142、185的樣本也有PSE跡象，確實為輕度PSE肉 ；其余樣本均為正常肉。由此 表明該PSE快速檢測方法能夠快速、準(zhǔn)確檢測PSE肉的存在，正確率為100%，能夠?qū)⒉煌?質(zhì)的肉樣明顯區(qū)分開。
[0050] 實施例4
[00511浙江寧波某養(yǎng)殖場PSE豬肉快速檢測：
[0052] 1、樣品前處理
[0053]在養(yǎng)殖場內(nèi)隨機(jī)選取杜X長X大三元雜交豬100頭，體重100kg左右，依次編號1到 100。對每頭豬在屠宰時進(jìn)行采血，約5mL，采集于10mL離心管中，離心(4°C，3000r/min離心 lOmin)分離血清。將制得的血清存放于4°C冰箱保存，用于生理生化指標(biāo)測定。
[0054] 2、血液生化指標(biāo)的測定
[0055]所有血液生化指標(biāo)均用日立7020全自動生化分析儀測定(試劑購自杭州徳格醫(yī)療 設(shè)備有限公司）。其中檢測的生化指標(biāo)主要有:肌酸激酶(CK)、乳酸脫氫酶(LDH)、天門冬氨 酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、血糖(GLU)、乳酸(LA)。
[0056] 3、依據(jù)判定標(biāo)準(zhǔn)對待檢測樣本進(jìn)行判定
[0057] 依據(jù)判定標(biāo)準(zhǔn)對待測樣本進(jìn)行判定，得到樣本檢測結(jié)果。測定結(jié)果顯示編號為3、 45、63、74的樣本血清中五個生化指標(biāo)均顯著高，判定其為PSE肉；編號為2、21、34、76、95的 樣本血清中有三個生化指標(biāo)顯著升高，判定其為輕度PSE肉，其余樣本血清指標(biāo)均在正常范 圍，均為正常肉。
[0058] 4、檢測結(jié)果驗證
[0059]對屠宰后的胴體抽取背最長肌(第5-6腰椎），通過現(xiàn)有的PSE肉判定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行PSE 肉判定。結(jié)果編號為3、45、63、74的樣本確實為PSE肉；編號為2、21、34、76、95的樣本也有PSE 跡象，確實為輕度PSE肉；其余樣本均為正常肉。由此表明該PSE快速檢測方法能夠快速、準(zhǔn) 確檢測PSE肉的存在，正確率為100 %，能夠?qū)⒉煌焚|(zhì)的肉樣明顯區(qū)分開。
【主權(quán)項】
1. 一種生豬白肌肉(PSE肉）快速檢測方法，其特征在于包括以下步驟： 步驟（1)、樣品前處理： 對生豬進(jìn)行采血，將血樣標(biāo)本自發(fā)完全凝集，然后從自發(fā)完全凝集后的血樣標(biāo)本中取 上清液，將上述血清存放于4 °C冰箱保存； 步驟(2 )、血液生化指標(biāo)的測定： 對步驟（1)前處理后得到的血清采用全自動生化分析儀進(jìn)行以下生化指標(biāo)檢測，主要 包括:肌酸激酶(CK)、乳酸脫氫酶(LDH)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、血糖(GLU)、乳酸 (LA)； 步驟(3)、基于血清生化指標(biāo)的PSE肉標(biāo)準(zhǔn)的建立： 當(dāng)血清中五個生化指標(biāo)均在正常水平，為正常肉；當(dāng)血清中五個生化指標(biāo)均與正常豬 生豬的生化指標(biāo)顯著升高，即為PSE肉；當(dāng)血清中五個生化指標(biāo)有任意三個或四個顯著升 高，即為輕度PSE肉；當(dāng)血清中五個生化指標(biāo)有任意三個或四個指標(biāo)在正常水平，亦為正常 肉； 步驟(4 )、對待測樣本進(jìn)行檢測： 綜合分析步驟(2)中五個生化指標(biāo)測定結(jié)果，根據(jù)步驟(3)建立的判定標(biāo)準(zhǔn)得到樣本檢 測結(jié)果。2. 如權(quán)利要求1所述的一種生豬白肌肉（PSE肉）快速檢測方法，其特征在于步驟(3)所 述的血清中五個生化指標(biāo)的正常水平分別如下:肌酸激酶(CK)酶活力達(dá)到(8340 ± 3712) U/ L、乳酸脫氫酶(LDH)酶活力達(dá)到(640±113)U/L、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)酶活力達(dá)到 (117.24±42.48)1]/1、血糖(61^)濃度達(dá)到（6.55±0.98)111111〇1/1、乳酸〇^)濃度達(dá)到（10.84 ±2.27)mmol/L。3. 如權(quán)利要求1所述的一種生豬白肌肉（PSE肉）快速檢測方法，其特征在于步驟(3)所 述的血清中五個生化指標(biāo)與正常豬生豬的生化指標(biāo)相比顯著升高的判斷標(biāo)準(zhǔn)如下:肌酸激 酶(CK)酶活力達(dá)到（29386±8113)U/L、乳酸脫氫酶(LDH)酶活力達(dá)到（2051±1239)U/L、天 門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)酶活力達(dá)到（252.83±119.69)1]/1、血糖(6〇])濃度達(dá)到（10.26 ±2.50)mmol/L、乳酸(LA)濃度達(dá)到（17.18±1.87)mmol/L。
【專利摘要】本發(fā)明公開一種生豬白肌肉(PSE肉)快速檢測方法。本發(fā)明以豬只血液為樣本，將血液生化特性的變化與豬肉品質(zhì)聯(lián)系起來，通過測定相關(guān)血液生理生化指標(biāo)，利用主成分分析和因子載荷尋找出血液中可以表征PSE豬肉的五個生化指標(biāo)，即肌酸激酶、乳酸脫氫酶、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、血糖、乳酸。然后基于血液生化特性的變化建立相應(yīng)的PSE肉判定標(biāo)準(zhǔn)，通過測定五個生化指標(biāo)，依據(jù)建立的PSE肉判定標(biāo)準(zhǔn)對待測樣本進(jìn)行判定，使得PSE肉在養(yǎng)殖場或屠宰場內(nèi)被檢出，避免PSE肉流入市場，從而避免企業(yè)的經(jīng)濟(jì)損失。本發(fā)明通過測定血液生化指標(biāo)來檢測PSE豬肉，為生鮮豬肉的檢測提供一種新思路。
【IPC分類】G01N33/12, G01N33/49
【公開號】CN105606778
【申請?zhí)枴緾N201610128217
【發(fā)明人】韓劍眾, 曲道峰, 張曉軍, 楊鋒, 周旭
【申請人】浙江工商大學(xué)
【公開日】2016年5月25日
【申請日】2016年3月7日