一種廣譜農(nóng)藥檢測金標(biāo)試紙及方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種農(nóng)藥殘留檢測試紙及方法，特別涉及一種廣譜農(nóng)藥檢測金標(biāo)試紙 及方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 現(xiàn)有常用的農(nóng)藥有有機(jī)磷和氨基甲酸酯兩大類，具體的各類多達(dá)40種，常用的也 有近20種。使用農(nóng)藥是有效減少作物病蟲害的一種方法，但是不合理的使用農(nóng)藥會導(dǎo)致農(nóng) 藥殘留，威脅人們的食品安全。
[0003] 隨著人們對食品安全的日益重視，越來越多的人開始關(guān)注農(nóng)藥殘留。傳統(tǒng)的農(nóng)藥 殘留檢測方法有色譜法，這種方法的檢測準(zhǔn)確性高，但是耗時長，對操作和儀器的要求高， 無法滿足現(xiàn)場快速檢測的需要。
[0004] 基于抗體-抗原的免疫檢測方法主要是利用抗體對抗原的特異性識別，并與之結(jié) 合，具有高度精確、靈敏、特異的特點。同時對操作的要求低，可以較為快速的給出定性檢測 結(jié)果?；谶@一原理開發(fā)的農(nóng)藥快速檢測試劑有很多種。但是農(nóng)藥的種類繁多，而免疫檢測 方法的高特異性導(dǎo)致其只能檢測出某一種特定的農(nóng)藥。如果要實現(xiàn)全面檢測，則需要使用 20種以上的農(nóng)藥免疫檢測試劑，這將極大地增加農(nóng)藥快速檢測的成本，導(dǎo)致農(nóng)藥的全面檢 測實際上不可能實現(xiàn)。大量的農(nóng)藥無法檢測出來，存在潛在的風(fēng)險。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于提供一種廣譜的農(nóng)藥檢測金標(biāo)試紙，該試紙可以快速檢測出幾 乎全部有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥。
[0006] 本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是： 一種廣譜農(nóng)藥檢測試紙，試紙具有檢測線、對照線和指示劑， 試紙的檢測線上設(shè)有膽堿酯酶，對照線上設(shè)有捕獲因子； 指示劑上連接有捕獲標(biāo)志A和B，其中捕獲標(biāo)志A可被膽堿酯酶捕獲，捕獲標(biāo)志B可被對 照線上的捕獲因子捕獲。
[0007] 優(yōu)選的，指示劑為物理指示劑。
[0008] 優(yōu)選的，捕獲標(biāo)志A和有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥競爭性與膽堿酯酶結(jié)合。
[0009] 優(yōu)選的，捕獲標(biāo)志A為有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥，有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的 特征性殘基，或有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的偶聯(lián)物。
[0010]優(yōu)選的，捕獲標(biāo)志B為蛋白類高分子、多肽聚合物、易降解的高分子聚合物，對應(yīng)的 捕獲因子為其抗體； 或捕獲標(biāo)志B為寡核苷酸序列，對應(yīng)的捕獲因子為其互補序列； 或捕獲標(biāo)志B和其捕獲因子構(gòu)成親和體系對。
[0011]優(yōu)選的，有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥選自對硫磷、殺螟硫磷、甲基對硫磷、樂果、水 胺硫磷、馬拉硫磷、毒死蜱及其偶聯(lián)物。有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥特征性殘基選自雙硫 基。
[0012] 優(yōu)選的，捕獲標(biāo)志B和其捕獲因子構(gòu)成親和體系對為生物素-親和素體系。
[0013] 優(yōu)選的，指示劑為膠體金。
[0014] 一種農(nóng)藥快速檢測方法，包括對樣品進(jìn)行處理，之后取樣滴加在廣譜農(nóng)藥檢測試 紙上，根據(jù)指示的指示情況下，確定檢測結(jié)果，其中，廣譜農(nóng)藥檢測試紙如上所述。
[0015] 本發(fā)明的有益效果是： 本發(fā)明的農(nóng)藥檢測試紙，對各種有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥均具有較好的檢測能力， 檢測結(jié)果快，非常適用于蔬果的現(xiàn)場快速農(nóng)藥殘留檢測。
[0016] 本發(fā)明的農(nóng)藥檢測試紙，制備工藝簡單，檢測結(jié)果可靠，可以實現(xiàn)低成本的農(nóng)藥殘 留檢測。
【具體實施方式】
[0017] -種廣譜農(nóng)藥檢測試紙，試紙具有檢測線、對照線和指示劑， 試紙的檢測線上設(shè)有膽堿酯酶，對照線上設(shè)有捕獲因子； 指示劑上連接有捕獲標(biāo)志A和B，其中捕獲標(biāo)志A可被膽堿酯酶捕獲，捕獲標(biāo)志B可被對 照線上的捕獲因子捕獲。
[0018] 捕獲標(biāo)志A和B可以分別直接或間接連接在指示劑上?；蛘卟东@標(biāo)志A連接在捕獲 標(biāo)志B上，然后再與指不劑連接。一般而言，當(dāng)捕獲標(biāo)志A和B均為小分子時，捕獲標(biāo)志A和B均 獨立連接在指示劑上可以避免相互干擾，獲得更好的檢測結(jié)果。而當(dāng)捕獲標(biāo)志B為大分子 時，捕獲標(biāo)志A可以先連接在捕獲標(biāo)志B上，然后捕獲標(biāo)志B再與指示劑相連接。
[0019]本發(fā)明試紙的檢測原理如下： 有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥均可與膽堿酯酶結(jié)合并抑制其活性，有機(jī)磷和氨基甲酸酯 類農(nóng)藥、指示劑上的捕獲標(biāo)志A競爭性與膽堿酯酶結(jié)合。因此，當(dāng)樣品中含有較多量的有機(jī) 磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥時，捕獲標(biāo)志A就較少的與膽堿酯酶結(jié)合，在檢測線(T線）上聚集的 指示劑就相對較少，檢測信號，如顏色就相對較弱；當(dāng)指示劑擴(kuò)散到對照線(C線)時，指示劑 上的捕獲標(biāo)志B被C線上的捕獲因子捕捉，指示劑在C線上聚集，給出相應(yīng)的檢測信號。反之， 當(dāng)樣品中的有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥含量較少，甚至是無時，則T線和C線上均會具有可 觀的能被檢測到的信號。這樣僅使用一種試紙條就實現(xiàn)了有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥的廣 譜檢測。
[0020] 優(yōu)選的，指示劑為物理指示劑。這種指示劑可以給出可視的信號，如顏色改變。這 樣就可以直觀的判斷出檢測結(jié)果。
[0021] 優(yōu)選的，捕獲標(biāo)志A和有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥競爭性與膽堿酯酶結(jié)合。
[0022] 優(yōu)選的，捕獲標(biāo)志A為有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥，有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的 特征性殘基，或有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的偶聯(lián)物。有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥偶聯(lián)物， 包括有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的特征性殘基偶聯(lián)其他生物大分子或有機(jī)化合物形成的 大分子化合物，這些生物大分子可以是為蛋白類高分子、多肽聚合物、易降解的高分子聚合 物，其作用在于使有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥易于與指示劑或另一個捕獲標(biāo)志偶聯(lián);此外， 有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的偶聯(lián)物還包括有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的衍生物，該衍生 物同樣可以與膽堿酯酶結(jié)合。
[0023]優(yōu)選的，捕獲標(biāo)志B為蛋白類高分子、多肽聚合物、易降解的高分子聚合物，對應(yīng)的 捕獲因子為其抗體;蛋白類高分子優(yōu)選為白蛋白，更佳的，白蛋白為人血清白蛋白、牛血清 白蛋白、兔血清白蛋白、卵清白蛋白。易降解的高分子聚合物選自羧甲基纖維素、聚乙烯比 咯烷酮等為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的載體。
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