一種酶標(biāo)板的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及免疫檢測(cè)裝置領(lǐng)域，尤其涉及一種酶標(biāo)板。
【背景技術(shù)】
[0002] 免疫檢測(cè)是生命科學(xué)領(lǐng)域最常見(jiàn)的檢測(cè)目標(biāo)分子的方法，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) (ELISA)是免疫檢測(cè)的重要組成部分。ELISA主要分為兩種反應(yīng):一種是抗原與抗體之間的 免疫反應(yīng)，另一種是生物分子與所吸附的固相表面。在酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)中，參與 免疫學(xué)反應(yīng)的抗原、抗體、標(biāo)記抗體或抗原的純度、濃度和比例;緩沖液種類(lèi)、濃度和離子強(qiáng) 度、pH值和反應(yīng)溫度、時(shí)間等條件起著關(guān)鍵作用。此外，作為載體的酶標(biāo)板表面對(duì)抗原、抗體 或抗原抗體復(fù)合物的吸附也起著非常重要的作用。
[0003] 現(xiàn)有技術(shù)中，ELISA酶標(biāo)板最常用的材質(zhì)是聚苯乙烯。近年來(lái)，為了增加生物分子 與固相表面的親和力、提高反應(yīng)的靈敏度，增強(qiáng)檢測(cè)的穩(wěn)定性等，酶標(biāo)板固相材料的選擇和 處理引起了本領(lǐng)域研究人員的極大關(guān)注。目前，本領(lǐng)域研究人員多致力于研究通過(guò)共價(jià)交 聯(lián)化學(xué)基團(tuán)活化官能基、化學(xué)反應(yīng)修飾聚苯乙烯表面以及紫外輻照等方法改變聚苯乙烯表 面的化學(xué)性質(zhì)，進(jìn)而提高酶標(biāo)板孔表面對(duì)生物分子的親和力，且已經(jīng)取得了長(zhǎng)足的進(jìn)步。
[0004] 然而，聚苯乙烯酶標(biāo)板仍存在另一問(wèn)題即酶標(biāo)板孔與生物分子反應(yīng)的表面積問(wèn) 題?，F(xiàn)有技術(shù)中的酶標(biāo)板多數(shù)為平底(結(jié)構(gòu)如說(shuō)明書(shū)附圖1)、U型底或V型底，平底的折射率 低，適于酶標(biāo)儀檢測(cè)，U型底的酶標(biāo)板折射率較高，方便加樣、吸樣、混勻等操作，V底的酶標(biāo) 板可以精確的吸取樣品。但是上述的幾種酶標(biāo)板的酶標(biāo)板孔與生物分子反應(yīng)的表面積較 小，不利于反應(yīng)的充分快速進(jìn)行。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種表面積大、上樣量小的酶標(biāo)板。為了實(shí)現(xiàn)上 述發(fā)明目的，本發(fā)明提供以下技術(shù)方案：
[0006] 本發(fā)明提供了一種酶標(biāo)板，其特征在于，包括若干酶標(biāo)板孔，每個(gè)酶標(biāo)板孔包括半 球狀底部、與所述半球狀底部上邊緣相接的漏斗形結(jié)構(gòu)和與所述漏斗形結(jié)構(gòu)上邊緣相接的 凸出壁。
[0007] 優(yōu)選的，所述的半球狀底部包括初級(jí)半球體結(jié)構(gòu)和位于初級(jí)半球體結(jié)構(gòu)內(nèi)部向內(nèi) 凸起的次級(jí)半球體結(jié)構(gòu)。
[0008] 優(yōu)選的，所述的初級(jí)半球體結(jié)構(gòu)的直徑為0.2~10mm，壁厚為0.1~1.0mm。
[0009] 優(yōu)選的，每個(gè)初級(jí)半球體結(jié)構(gòu)內(nèi)部的次級(jí)半球體的個(gè)數(shù)為3~50個(gè)，所述次級(jí)半球 體結(jié)構(gòu)平均分布于初級(jí)半球體結(jié)構(gòu)的內(nèi)表面。
[00?0] 優(yōu)選的，所述的次級(jí)半球體結(jié)構(gòu)的直徑為0 · 1~5mm，，壁厚為0 · 1~1 · 0mm，相鄰次 級(jí)半球體結(jié)構(gòu)間的孔隙為0.1~1.0mm。
[0011]優(yōu)選的，所述漏斗形結(jié)構(gòu)由位于下部的空心球缺和與所述空心球缺上邊緣相接的 空心圓臺(tái)兩部分組成，所述的空心球缺狀的下邊緣與所述半球狀底部的上邊緣相接;所述 的空心圓臺(tái)的上邊緣與所述凸出壁的下邊緣連接。
[0012] 優(yōu)選的，所述的空心球缺的直徑為0.2~10mm，高度為0.1~5.0mm，壁厚為0.1~ 1.0mm〇
[0013] 優(yōu)選的，所述的空心圓臺(tái)的高度為0.2~6.0mm，壁厚為0· 1~1.0mm，上口半徑為 0 · 1~5 · 0mm，下口半徑為0 · 1~5 · 0mm〇 〇
[0014]優(yōu)選的，所述凸出壁為空心的柱狀結(jié)構(gòu)，所述凸出壁的高度為0.1~20mm，壁厚為 0.1~1.0_，半徑為0.1~5.0mm。
[0015]優(yōu)選的，酶標(biāo)板的面積為10~200X5~200mm酶標(biāo)板，每個(gè)酶標(biāo)板上優(yōu)選的包括1 ~500個(gè)酶標(biāo)板孔。
[0016] 本發(fā)明的有益效果：
[0017] 本發(fā)明提供的酶標(biāo)板包括若干酶標(biāo)板孔，每個(gè)酶標(biāo)板孔包括半球狀底部、與所述 半球狀底部上邊緣相接的漏斗形結(jié)構(gòu)和與所述漏斗形結(jié)構(gòu)上邊緣相接的凸出壁。在本發(fā)明 提供的酶標(biāo)板中，所述半球狀底部結(jié)構(gòu)可以增大酶標(biāo)板的表面積，從而增加目標(biāo)物質(zhì)與固 相表面靶分子接觸的機(jī)會(huì)，同時(shí)可以用較少的樣本量檢測(cè)目標(biāo)物質(zhì)的含量;所述的漏斗形 結(jié)構(gòu)的設(shè)置連接酶標(biāo)板孔的底部和上部，進(jìn)一步增大酶標(biāo)板孔的表面積;所述的凸出壁的 設(shè)置可防止酶標(biāo)板孔與酶標(biāo)板孔之間交叉污染。
【附圖說(shuō)明】
[0018] 圖1為現(xiàn)有技術(shù)公開(kāi)的酶標(biāo)板孔的立體圖；
[0019]圖2為本發(fā)明實(shí)施例1中的酶標(biāo)板孔結(jié)構(gòu)的俯視圖（2A)和主視圖（2B);
[0020]圖3為實(shí)施例1中的酶標(biāo)板孔結(jié)構(gòu)的剖視圖；
[0021 ]圖4為實(shí)施例1中的酶標(biāo)板孔結(jié)構(gòu)的立體圖；
[0022]圖5為實(shí)施例1中20孔及28孔酶標(biāo)板的俯視圖（5A-1、5B-1)和側(cè)視圖（5A-2、5B-2); [0023]圖6為實(shí)施例1和2中20孔及28孔酶標(biāo)板的剖視圖（6A、6B);
[0024]圖7為實(shí)施例1和2中酶標(biāo)板的立體圖（7A、7B);
【具體實(shí)施方式】
[0025]本發(fā)明提供了一種酶標(biāo)板，包括若干酶標(biāo)板孔，所述的酶標(biāo)板孔包括三個(gè)組成部 分:每個(gè)酶標(biāo)板孔包括半球狀底部、與所述半球狀底部相接設(shè)置于中部的漏斗形結(jié)構(gòu)和與 所述漏斗形結(jié)構(gòu)相接設(shè)置于上部的凸出壁。
[0026]本發(fā)明中，對(duì)所述的酶標(biāo)板的面積為10~200X5~200mm酶標(biāo)板，每個(gè)酶標(biāo)板上優(yōu) 選的包括1~500個(gè)酶標(biāo)板孔，更優(yōu)選的包括10~400個(gè)酶標(biāo)板孔，最優(yōu)選的為包括16或40個(gè) 酶標(biāo)板孔。所述酶標(biāo)板上酶標(biāo)板孔的密度優(yōu)選的為〇. 2~8.0個(gè)/cm2，更優(yōu)選的為0.5~4個(gè)/ cm2。本發(fā)明對(duì)所述酶標(biāo)板孔的排列方式?jīng)]有特殊的限定，采用本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的酶標(biāo) 板中酶標(biāo)板孔排列的方式即可;在本發(fā)明的實(shí)施例中，所述酶標(biāo)板孔優(yōu)選的采用矩形陣列 排列，更優(yōu)選采用4 X 5矩形陣列排列的20孔酶標(biāo)板或4 X 7矩形陣列排列的28孔酶標(biāo)板。
[0027]本發(fā)明中，酶標(biāo)板孔的結(jié)構(gòu)如圖3所示，每個(gè)酶標(biāo)板孔包括半球狀底部，底部設(shè)置 為半球狀結(jié)構(gòu)增加了酶標(biāo)板的表面積，從而增加目標(biāo)物質(zhì)與固相表面靶分子接觸的機(jī)會(huì)， 同時(shí)可以用較少的樣本量檢測(cè)目標(biāo)物質(zhì)的含量。在本發(fā)明中，所述的半球狀底部?jī)?yōu)選包括 初級(jí)半球體結(jié)構(gòu)(2)和位于初級(jí)半球體結(jié)構(gòu)內(nèi)部向內(nèi)凸起的次級(jí)半球體結(jié)構(gòu)(3)。本發(fā)明中 所述的初級(jí)半球體結(jié)構(gòu)的直徑優(yōu)選的為0.2~10_，更優(yōu)選的為2~8mm，最優(yōu)選的為6-7_。
[0028] 本發(fā)明優(yōu)選的在每個(gè)初級(jí)半球體結(jié)構(gòu)內(nèi)部設(shè)置向內(nèi)凸起的次級(jí)半球體結(jié)構(gòu)，每個(gè) 初級(jí)半球體結(jié)構(gòu)中次級(jí)半球體的個(gè)數(shù)優(yōu)選的為3~50個(gè)，更優(yōu)選的為5~15個(gè)，最優(yōu)選的為7 ~9個(gè);在本發(fā)明中所述次級(jí)半球體結(jié)構(gòu)平均分布于初級(jí)半球體結(jié)構(gòu)的內(nèi)表面。
[0029] 本發(fā)明中所述的次級(jí)半球體結(jié)構(gòu)的直徑優(yōu)選的為0.1~5mm，更優(yōu)選的為0.5~ 3mm，最優(yōu)選的為1~2mm。在本發(fā)明中所述相鄰次級(jí)半球體結(jié)構(gòu)間的弧長(zhǎng)優(yōu)選的為0.1~ 2 · 0mm，本發(fā)明中相鄰次級(jí)半球體結(jié)構(gòu)間的孔隙優(yōu)選的為0 · 1~1 · 0mm，更優(yōu)選的為0 · 4~ 0 · 6mm，最優(yōu)選的為0 · 5mm。在本發(fā)明中，所述相鄰次級(jí)半球體結(jié)構(gòu)間的孔隙為酶標(biāo)板孔的液 體流動(dòng)通道，從而允許液體在酶標(biāo)板孔內(nèi)部自由流動(dòng)，增加目標(biāo)物質(zhì)與固相表面靶分子接 觸的機(jī)會(huì)。
[0030] 在本發(fā)明中，每個(gè)酶標(biāo)板孔包括與所述半球狀底部上邊緣相接的漏斗形結(jié)構(gòu)(4)， 所述的漏斗形狀結(jié)構(gòu)設(shè)置于酶標(biāo)板孔的中部，向上與所述凸出壁(7)的下邊緣相連接。在本 發(fā)明中，所述漏斗形結(jié)構(gòu)由漏斗形結(jié)構(gòu)下部的空心球缺結(jié)構(gòu)(5)和漏斗形結(jié)構(gòu)上部的空心 圓臺(tái)（6)兩部分組成;所述的空心球缺狀結(jié)構(gòu)的下邊緣與酶標(biāo)板孔底部的半球狀底部的上 邊緣連接;所述的空心圓臺(tái)的上邊緣與所述凸出壁的下邊緣連接。
[0031] 在本發(fā)明中，所述的空心球缺的直徑優(yōu)選的為0.2~10mm，更優(yōu)選的為3~8mm，最 優(yōu)選的為4.8mm;所述的空心球缺的高度優(yōu)選的為0.1~5.0mm，更優(yōu)選的為0.5~3mm，最優(yōu) 選的為〇 · 8mm;所述的空心球缺的壁厚優(yōu)選的為0 · 1~1 · 0mm，更優(yōu)選的為0 · 3~0 · 8mm，最優(yōu) 選的為〇.7mm
[0032] 在本發(fā)明中，漏斗形結(jié)構(gòu)上部的空心圓臺(tái)的高度優(yōu)選的為0.2~mm，更優(yōu)選的0.3 ~3mm，最優(yōu)選的為0 · 4mm;所述空心圓臺(tái)的壁厚優(yōu)選的為0 · 1~1 · 0mm，更優(yōu)選的為0 · 2~ 0 · 8mm，最優(yōu)選的為0 · 7mm;所述空心圓臺(tái)的上口半徑優(yōu)選的為0 · 1~5 · 0mm，更優(yōu)選的為1~ 4mm;下口半徑優(yōu)選的為0.1~5mm，更優(yōu)選的為1~4mm。
[0033] 在本發(fā)明中，與漏斗形結(jié)構(gòu)上邊緣相接且設(shè)置于上部的凸出壁優(yōu)選的為空心的柱 狀結(jié)構(gòu)，所述凸出壁的高度優(yōu)選的為〇. 1~20mm，更優(yōu)選的為0.5~5.0,最優(yōu)選的為1.0mm; 所述凸出壁的壁厚優(yōu)選的為0 · 1~1 · 〇mm，更優(yōu)的為0 · 3~0 · 8mm，最優(yōu)選的為0 · 7mm;所述凸 出壁空心的柱狀結(jié)構(gòu)的半徑優(yōu)選的為0.1~5.0mm，更優(yōu)選的為1.0~4.0;本發(fā)明中凸出壁 的作用是防止實(shí)驗(yàn)過(guò)程中酶標(biāo)板孔之間的交叉污染。
[0034] 在本發(fā)明中，每個(gè)酶標(biāo)板孔中半球狀底部?jī)?nèi)壁與所述漏斗形結(jié)構(gòu)的內(nèi)壁平滑相 連，所述漏斗形結(jié)構(gòu)上邊緣內(nèi)壁與所述的凸出壁的內(nèi)壁平滑相連。
[0035] 下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明提供的酶標(biāo)板進(jìn)行詳細(xì)的說(shuō)明，但是不能把它們理解為 對(duì)本發(fā)明保護(hù)范圍的限定。
[0036] 實(shí)